Východiská: AML je agresívne, fenotypovo a geneticky heterogénne klonálne ochorenie krvotvorných progenitorových buniek s veľkou molekulárnou variabilitou. Nová klasifikácia WHO 2008 delí de novo AML podľa cytogenetických a molekulárnych prognostických a prediktívnych markerov. V poslednej dobe je stále väčšia možnosť určiť podskupinu rizikových pacientov so zlou prognózou medzi tými s normálnym karyotypom. Cieľom našej štúdie bolo zistiť prognosticky významné molekulárne markery u detí s AML na stratifikáciu pacientov s normálnym karyotypom a na sledovanie ochorenia podľa genetického nálezu. Súbor pacientov a metódy: V rokoch 2008–2010 sme analyzovali vzorky kostnej drene a periférnej krvi u 20 detí s de novo AML konvenčnou cytogenetickou analýzou, fluorescenčnou in situ hybridizáciou a molekulovou analýzou. Molekulárna analýza bola vykonaná na úrovni cDNA restrikčnou analýzou PCR produktov (FLT3-TKD), konvenčnou PCR (MLL-PTD, NPM1mut, FLT3-ITD) a kvantifikačnou RT-PCR (expresia fúznych génov, génov BAALC a WT1). Výsledky: Vzorky 20 detí s AML boli analyzované využitím konvenčnej cytogenetiky, FISH a molekulovo-genetickými metódami. Abnormálny karyotyp bol zistený u 13 pacientov (65 %). Ďalšia analýza ukázala FLT3-ITD v 5/20 (25 %), FLT3-TKD v 3/20 (15 %), NPM1mut 2/20 (10 %) a MLL-PTD v 1/20 (5 %), nadmernej expresie WT1 génu v 15/20 (75 %) a nadmernej expresie BAALC v 13/20 (65 %) pacientov. Záver: Široký cytogenetický a molekulárny skríning pomohol nájsť aspoň jeden genetický marker u všetkých 20 pacientov pre ďalšie sledovanie a stratifikáciu rizika detí s AML. Na progresiu ochorenia umreli 4/20 (20 %) detí.
Backgrounds: AML is an aggressive, phenotypically and genetically heterogenous clonal disease of hematopoietic progenitor cells with a great molecular variability. New WHO classification 2008 divides de novo AML according to cytogenetic and molecular prognostic and predictive markers. Recently, it is increasingly possible to identify a subgroup of poorer prognosis patients among those with normal karyotype AML. The aim of our study was to identify prognostically important molecular markers in children with AML, to stratify patients with normal karyotype and to monitor the disease according the genetic findings. Material and Methods: In 2008–2010, we analyzed bone marrow and peripheral blood samples of 20 children with de novo AML by conventional cytogenetic analysis, fluorescence in situ hybridisation and molecular diagnostics. The molecular analysis was performed on the cDNA level, with the restriction analysis of PCR products (FLT3-TKD), conventional PCR (MLL-PTD, NPM1mut, FLT3- ITD) and quantification RT-PCR method (expression of fusion transcripts, BAALC, WT1). Results: Samples from 20 children with AML were analyzed using the conventional cytogenetics, FISH and molecular methods. Abnormal karyotype was identified in 13 patients (65%). Further analysis revealed FLT3-ITD in 5/20 (25%), FLT3-TKD in 3/20 (15%), NPM1mut in 2/20 (10%) and MLL-PTD in 1/20 (5%), overexpression of WT1 gene in 15/20 (75%) and overexpression of BAALC in 13/20 (65%) patients. Conclusion: Wide cytogenetic and molecular screening helped to find at least one genetic marker in all 20 patients for later follow-up and risk stratification. 4/20 (20%) patients died of the disease progression.
- MeSH
- akutní myeloidní leukemie diagnóza genetika krev MeSH
- cytogenetické vyšetření metody využití MeSH
- dítě MeSH
- exprese genu genetika MeSH
- genetické markery genetika MeSH
- hybridizace in situ fluorescenční metody využití MeSH
- jaderné proteiny genetika izolace a purifikace MeSH
- lidé MeSH
- mutace genetika MeSH
- nádorové proteiny genetika izolace a purifikace MeSH
- polymerázová řetězová reakce metody využití MeSH
- proteiny WT1 genetika izolace a purifikace MeSH
- protoonkogenní protein MLL genetika izolace a purifikace MeSH
- statistika jako téma MeSH
- tyrosinkinasa 3 podobná fms genetika izolace a purifikace MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- lidé MeSH
- Publikační typ
- abstrakt z konference MeSH
U akútnej myeloblastovej leukémie je chromozómový prúžok 11q23 jedným z najčastejších zlomových regiónov. Analýza tejto oblasti viedla k objavu mimoriadne promiskuitného génu MLL, u ktorého bolo dodnes popísaných viac ako 60 MLL translokačných partnerov. Medzi najčastejšie patria t(9;11)(p21– 22;q23)/MLL-AF9, t(10;11)(p13;q23)/MLL-AF10, t(11;19)(q23;p13)/MLL-ELL, ENL a t(6;11)(q27;q23)/MLL-AF6. Predložená práca poskytuje prehľad o molekulárnych mechanizmoch, pri ktorých sa MLL proto-onkogén môže zmeniť na onkogén. Genetické zmeny MLL protoonkogénu predstavujú okrem translokácií aj komplexné chromozómové prestavby, delécie, inzercie, parciálne tandemové duplikácie, amplifikácie a zisky. V práci sú opísané z hľadiska diagnostického a prognostického. Abnormality MLL protoonkogénu sa obvykle spájajú so zlou prognózou. Z tohto dôvodu sa v onkologickej praxi venuje mimoriadna pozornosť zavádzaniu genetických metód na ich identifikáciu. Uvedená práca prehľadne informuje o rozličných typoch a výsledkoch genetických testov, ktoré môžu pomôcť onkológom predikovať prognózu, monitorovať minimálnu reziduálnu chorobu a modifikovať liečbu onkologického pacienta.
One of the most common chromosomal breakpoint regions in acute myeloid leukaemia is the chromosome band 11q23. The analysis of this region led to the discovery of the extremely promiscuous MLL gene, in which more than 60 MLL translocation partner genes have been described. Among the most frequent are t(9;11)(p21– 22;q23)/ MLL- AF9, t(10;11)(p13;q23)/ MLL- AF10, t(11;19)(q23;p13)/ MLL- ELL, ENL and t(6;11)(q27;q23)/ MLL- AF6. The presented work provides an overview of the molecular mechanisms by means of which MLL proto- oncogene can be converted into oncogene. Genetic alternations of the MLL Proto-Oncogene Protein besides translocation are also represented by complex chromosomal rearrangements, deletions, insertions, partial tandem duplications, amplifi cations and gains. These genetic alterations are described in the work from the diagnostic and prognostic point of view. Abnormalities of the MLL Proto- Oncogene Protein are usually connected with bad prognosis. For that reason, in oncological practice, particular attention is paid to introducing new genetic methods for their identifi cation. The above work gives well arranged information about diff erent types of genetic tests and their outcomes, which can help oncologists in predicting the prognosis, in minimal residual disease monitoring and in modifying oncological patient treatment.
- MeSH
- akutní myeloidní leukemie genetika MeSH
- lidé MeSH
- lidské chromozomy, pár 11 genetika MeSH
- mutace MeSH
- protoonkogenní protein MLL genetika MeSH
- translokace genetická MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
