Cíl práce: Etiologická objasněnost aseptických neuroinfekcí kolísá většinou v intervalu 50-70 %. Cílem práce bylo zvýšit objasněnost aseptických neuroinfekcí pomocí elektronové mikroskopie (EM) a izolace viru na tkáňových kulturách. Materiál a metody: Prospektivní studie zahrnovala 34 pacientů s aseptickou neuroinfekcí, kteří byli hospitalizováni na Klinice infekčního lékařství v Ostravě od července do listopadu 2012. U všech pacientů byl likvor vyšetřen EM a byl proveden izolační pokus na tkáňových kulturách. Polymerázovou řetězovou reakcí byl likvor vyšetřen u 30 pacientů na enteroviry, u 29 pacientů na virus herpes simplex 1 a 2. Vyšetření protilátek proti Borrelia burgdorferí a klíšťové encefalitidě bylo provedeno u všech 34 pacientů. Výsledky: Možné etiologické agens bylo zjištěno u 31 z 34 pacientů (91 %), u 23 pacientů (68 %) byl zjištěn jeden původce, ale u 8 pacientů (24 %) současně dvě agens. Pomocí EM byl zjištěn původce u 26 pacientů, izolace viru byla úspěšná u 10 pacientů. EM jako jediná určila 10 původců. Skupina 23 pacientů s průkazem jednoho agens zahrnovala 14 pacientů s enterovirovou meningitidou, 4 pacienty s lymeskou borreliózou, 4 pacienty s klíšťovou encefalitidou, u posledního pacienta byl EM zjištěn blíže nespecifikovaný virus. Neobvyklá skupina 8 pacientů, ve které byli zjištěni dva původci, zahrnovala 5 pacientů se současným průkazem enterovirů a spirochét, 2 pacienty s klíšťovou encefalitidou a blíže neurčeným virem, u posledního pacienta byla prokázána spirochéta rovněž s neurčenym virem. Závěr: EM může zvýšit objasněnost aseptických neuroinfekcí. Přesto dosud není vyřešena klinická interpretace výsledků, zejména záchytu dosud neurčených virů a dvou možných původců u 8 z 34 pacientů.
Objective: In aseptic neuroinfections, the etiology is usually known in 50-70 % of cases. The aim was to increase the rates using electron microscopy (EM) and virus isolation in cell cultures. Material and methods: The prospective study included 34 patients with aseptic neuroinfections hospitalized at the Department of Infectious Diseases in Ostrava from July to November 2012. EM examined cerebrospinal fluid of all patients and virus isolation in tissue cultures was performed in all cerebrospinal fluid samples. Cerebrospinal fluid was examined by polymerase chain reaction for enteroviruses in 30 patients and for herpes simplex virus 1 and 2 in 29 patients. Detection of antibodies against Borreiia burgdorferi and tick-borne encephalitis was performed in all 34 patients. Results: Possible etiological agents were discovered in 31 out of 34 patients (91 %), with one agent being found in 23 patients (68 %) and two agents being detected in 8 patients (24 %). EM revealed the agents in 26 patients and virus isolation was successful in 10 patients. EM was the only method to identify 10 agents. A group of 23 patients with a single agent detected included 14 patients with enteroviral meningitis, 4 patients with Lyme borreliosis and 4 patients with tick-borne encephalitis; EM detected an undefined virus in the last patient. An unusual group of 8 patients with two agents detected comprised 5 patients with enteroviruses and spirochetes, 2 patients with tick-borne encephalitis and undefined viruses and 1 patient with a spirochete and an undetermined virus. Conclusion: EM can aid in explaining the etiology of aseptic neuroinfections. However, the clinical interpretation of results remains problematic, such as detection of unknown viruses or two possible agents in 8 out of 34 patients.
- MeSH
- elektronová mikroskopie * metody trendy využití MeSH
- kultivační techniky metody trendy využití MeSH
- lidé MeSH
- mozkomíšní mok mikrobiologie MeSH
- nemoci nervového systému * diagnóza etiologie mikrobiologie MeSH
- prospektivní studie MeSH
- statistika jako téma MeSH
- virové nemoci * diagnóza etiologie komplikace mikrobiologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
Cerebrospinal fluid (CSF) samples (n=50) from patients with neurological disease (bacterial infection, viral infection, neuroborreliosis and multiple sclerosis) were analysed to characterize cell populations by fluorescent immunocytometry with the CD-Sapphire haematology analyser. Reagent combinations applied to all CSF samples comprised CD3/CD19/HLA-DR and CD4/CD8, with some being further analysed using CD3/CD4, CD3/CD16 and CD3/CD25 protocols. Of the 50 samples, 11 were excluded because of high proportions of nonviable cells (n=2) or insufficient cell numbers (n=9). Apart from bacterial infection with granulocytosis, all diagnostic groups showed high proportions (51.4-77.0%) of CD3+ T cells. There was a modest association between T-cell and B-cell counts, but absolute B-cell numbers exceeded 5 cells/microl in only 7/39 cases (neuroborreliosis, n=6; bacterial meningitis, n=1). CD3/Ia antigen (activation) co-expression was low and only exceeded 5% in 7/39 samples with no diagnostic correlation. Primary CD4+ and CD8+ T-cell subsets showed similar quantitative trends and CD4/CD8 co-analysis revealed the presence in all diagnostic groups (neuroborreliosis and multiple sclerosis in particular) of a CD4+CD8int fraction that was predominantly CD3+ and CD16- and had a morphological profile consistent with small lymphoid cells. Supplementary CD-Sapphire cellular immunological analysis of most CSF samples is feasible using the procedure detailed in this communication.
Serózní meningitidy jsou poměrně častá onemopnžní Vf^vá mohou být vyvolána jak viry - v České republice je nejčastějším prokazovanvm mívodnem virus klíšťové meningoencefalitidy - tak i některými bakteriemi (Borrelia burgdorferi, Leptospira grippotyphosa apod.). V pilotní studii jsme provedli fenotypickou analýzu lymfocytú v likvoru a periferní krvi průtokovou cytometrií. Byly určeny lymfocytární subpopulace a aktivované T lymfocyty v likvoioi u 24 nemocných s klíšťovou meningoencefalitidou (MEK), 15 nemocných se serózní menin£ritidou neziištěné etiologie (většinou vyvolanou viry) a 12 pacientů se spirochetovou neuroinfekcí. U 13 nemocných s MEK a 10 pacientu se spirochetovou neuroinfekcí byly rovněž stanoveny subpopulace v periferní Isrvi. Při statistickém srovnání pomocí Studentova i-testu nebyly zjištěny žádné rozdíly v lymfocytárních subpopulacích u virových neuroinfekcí likvoru. Při srovnání subpopulací v likvoini a krvi u MEK bylo zaznamenáno v likvoru velmi signifikantní zvýšení (p < 0,01) relativních n^řfň celkových T lymfocytů a CD4* T lymfocytů a významné snížení relativních počtů CD8* T lymfocytů a B lymfocytů; u spirochetových neuroinfekcí bylo toto srovnání obdobné. Při porovnání lymfocytárních subpopulací v likvoioi u MEK a spirochetových neuroinfekcí jsme zaznamenali u spirochetových neuroinfekcí signifikantně vyšší relativní počet B lymfocytů (p = 0,0042). Imunofenotypická analýza lymfocytů u serózních meningitid napomáhá při studiu imunitních mechanismů v CNS.
Serous meningitis is a relatively frequent disease which can be caused by vinises - in the Czech Republic the most frequent causal agent is the virus of tick-bonie meningoencephalitis - and some bacteria (Borrelia burgdorferi, Leptospira grippotyphosa etc.). The authors made a pilot study involving phenot3T)ic analysis of lymphocytes in cerebrospinal fluid and peripheral blood using flow cytometry. They assessed lymphocytic sub-populations and activated T lymphocytes in cerebrospinal fluid of 24 patients with tick-borne meningoencephalitis, in 15 patients with serous meningitis of unknown etiology (mostly caused by viinises) and in 12 patients with spirochetal neuroinfection. In 13 patients with tick-borne meningoencephalitis and in 10 patients with meningoencephalitis and in 10 patients with the spirochetal neuroinfection sub-populations in the peripheral blood stream were also assessed. On comparison by the Student ř-test no differences were found in the lymphocytic sub-populations in viral neuroinfections of the cerebrospinal fluid. On comparison of sub-populations in cerebrospinal fluid and blood in tick-bonie meningoencephalitis in CSF a very significant increase was observed (p < 0.01), as well as an increase of the relative number of total T lymphocytes and CDF4* T lymphocytes and a significant reduction of the relative number of CD8* T lymphocytes and B lymphocytes; in spirochetal neuroinfections the comparison was similar. On comparison of lymphocytic subpopulations in CSF in tick-borne meningoencephalitis and in spirochetal neuroinfections the authors recorded in spirochetal neuroinfections a significantly higher relative number of B lymphocytes (p = 0.0042). Immunophenotypic analysis of lymphocytes in serous meningitis helps in investigations of immune mechanisms in the CNS.
- MeSH
- bakteriální infekce MeSH
- nemoci nervového systému diagnóza mikrobiologie terapie MeSH
- virové nemoci MeSH
- Publikační typ
- recenze MeSH
- MeSH
- Borrelia burgdorferi imunologie izolace a purifikace ultrastruktura MeSH
- ceftriaxon aplikace a dávkování farmakologie terapeutické užití MeSH
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- klíšťata MeSH
- lidé MeSH
- lymeská nemoc farmakoterapie mikrobiologie patologie MeSH
- nemoci nervového systému farmakoterapie imunologie mikrobiologie MeSH
- protilátky bakteriální MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- MeSH
- DNA virů genetika MeSH
- glykoproteiny genetika MeSH
- myši MeSH
- nemoci nervového systému etiologie mikrobiologie patologie MeSH
- proteiny virového obalu genetika MeSH
- rekombinace genetická MeSH
- replikace viru MeSH
- Simplexvirus genetika imunologie patogenita MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- MeSH
- infekční nemoci epidemiologie etiologie MeSH
- nemoci nervového systému epidemiologie etiologie mikrobiologie MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
