Extracellular Matrix Proteins
Dotaz
Zobrazit nápovědu
Practical approach series
XXVII, 404 s. : obr., tab., grafy ; 23 cm
Byly publikovány poznatky, že chronické užívání drog vede ke změnám ve složení extracelulámí matrix myokardu (ECM). V procesu remodelace a změn ECM hrají významnou roli enzymy matrixové metaloproteinázy (MMP), které štěpením extracelulárních komponent matrix přispívají k progresi srdečního poškození. V této práci byla vyšetřena extracelulámí matrix myokardu (ECM) u zemřelých užívajících návykové a psychotropní látky a kontrol. U 5 pozitivních případů a 4 kontrolních vzorků byly v srdečním svalu metodou zymografie prokazovány MMP, elektroforesou kolagen a provedeno mikroskopické vyšetření. Aktivita enzymů želatinázy (MMP-2, 9) a kolegenázy (MMP-1) byla vyšší u osob užívajících návykové látky ve srovnání s kontrolami. Ve srovnání s pozitivními případy nebyl u kontrol prokazován α řetězec kolagenu typu I po dlouhodobé 160hodinové extrakci. Aktivace proenzymů metaloproteináz je jedním z kroků vedoucích ve svém důsledku k poškození ECM. Poznatky této práce svědčí pro těžší poškození kolagenní matrix myokardu u osob užívajících návykové a psychotropní látky.
It have been reported that chronic drug abuse induces changes in extracellular matrix (ECM) composition of myocardium. Matrix metaloproteinases (MMP) play important role in ECM remodelling and alteration in the ECM of myocardium. They are able to cleave ECM components and may contribute to progression of heart damage. Remodelling implies an alteration in the ECM and in the spatial orientation of cells and intercellular components. In this report we evaluated the extracellular matrix of myocardium of deceased drug abusers and controls. The myocardium of 5 toxicologically positive cases and 4 control cases were analysed by zymography of MMP, electrophoresis of collagens and histologicaly. Gelatinases (MMP-2 and MMP-9) and collagenase (MMP-1) activities were increased in drug abusers compare to the controls. In contrast, α chain of coUagen type I after 160 hours collagen extraction, were not observed in control specimens. The activation of MMP proenzymes is one of the critical steps that lead to ECM breakdown. Our findings suggest that the myocardial collagen matrix is damaged in drug abusers.
- MeSH
- ameloblasty MeSH
- extracelulární matrix - proteiny MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- klonování DNA MeSH
- lidé MeSH
- sekvenční analýza MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- srovnávací studie MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
1st ed. xi, 176 p. : il.
- Klíčová slova
- Buňky, Proteiny,
- MeSH
- buněčná adheze MeSH
- extracelulární matrix - proteiny MeSH
- proteiny MeSH
- Publikační typ
- monografie MeSH
Methods in enzymology ; vol. 82
913 s. : il., tab.
Methods in enzymology ; vol. 144
561 s. : il., tab.
Sambrook & Tooze publications
2nd ed. xix, 568 s., barev. obr.
Protein profile
1st ed. xiii, 223 s.
Extracellular matrix (ECM) is an essential component of the tissue microenvironment, actively shaping cellular behavior. In vitro culture systems are often poor in ECM constituents, thus not allowing for naturally occurring cell-ECM interactions. This study reports on a straightforward and efficient method for the generation of ECM scaffolds from lung tissue and its subsequent in vitro application using primary lung cells. Mouse lung tissue was subjected to decellularization with 0.2% sodium dodecyl sulfate, hypotonic solutions, and DNase. Resultant ECM scaffolds were devoid of cells and DNA, whereas lung ECM architecture of alveolar region and blood and airway networks were preserved. Scaffolds were predominantly composed of core ECM and ECM-associated proteins such as collagens I-IV, nephronectin, heparan sulfate proteoglycan core protein, and lysyl oxidase homolog 1, among others. When homogenized and applied as coating substrate, ECM supported the attachment of lung fibroblasts (LFs) in a dose-dependent manner. After ECM characterization and biocompatibility tests, a novel in vitro platform for three-dimensional (3D) matrix repopulation that permits live imaging of cell-ECM interactions was established. Using this system, LFs colonized the ECM scaffolds, displaying a close-to-native morphology in intimate interaction with the ECM fibers, and showed nuclear translocation of the mechanosensor yes-associated protein (YAP), when compared with cells cultured in two dimensions. In conclusion, we developed a 3D-like culture system, by combining an efficient decellularization method with a live-imaging culture platform, to replicate in vitro native lung cell-ECM crosstalk. This is a valuable system that can be easily applied to other organs for ECM-related drug screening, disease modeling, and basic mechanistic studies.
- MeSH
- extracelulární matrix - proteiny metabolismus MeSH
- extracelulární matrix fyziologie MeSH
- fibroblasty cytologie metabolismus MeSH
- kultivované buňky MeSH
- myši inbrední C57BL MeSH
- myši inbrední ICR MeSH
- myši MeSH
- plíce cytologie metabolismus MeSH
- proteomika MeSH
- techniky in vitro MeSH
- tkáňové inženýrství metody MeSH
- tkáňové podpůrné struktury MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Methods in molecular biology ; vol. 151
1st ed. xv, 545 s.
