Dendritic cells (DC), regulatory T cells (Treg) and cytokines play a key role in setting of responses of adaptive immunity including allergic reaction. Their changes in early development (perinatal period) could signalize later allergy development. We could elucidate allergy development by studying of DC, Treg and cytokines in cord blood and possibly unravel immunologic parameters with prognostic value for predicting the extent of risk of allergy development. Isolation of Tregs and CD4CD25- from cord blood will be performed using magnetic microbeads. DC will be generated from precursors. Immune parameters of DC and Tregs will be followed by flow cytometry, qPCR and ELISA after in vitro specific and polyclonal stimulation. In the effort to elucidate the beneficial effect of probiotic vaccine Colinfant New Born in allergy prevention in colonized children, proportion and functional characteristics of Treg and DC in peripheral blood of 10-12 year old children will be followed by flow cytometry. The effect of early colonization on the microbiota composition will be analyse.

Dendritické buňky (DC), regulační T lymfocyty (Treg) a cytokiny jsou hlavními regulátory adaptivní imunitní odpovědi, tedy i alergické reakce. Jejich změny v časných vývojových stádiích mohou signalizovat pozdější rozvoj alergie. Studiem vlastností a funkce DC, Treg a cytokinů v pupečníkové krvi chceme přispět k hlubšímu poznání patogeneze alergie a identifikování charakteristických imunologických ukazatelů s prognostickým významem při posuzování velikosti rizika vzniku alergie. Treg a CD4CD25- budou izolovány z pupečníkové krve pomocí magnetických kuliček, DC budou generovány z prekursorů kultivací s růstovými faktory. Vlastnosti buněk a jejich reaktivita po specifické i polyklonální stimulaci in vitro budou testovány průtokovou cytometrií, qPCR a ELISA. Při objasňování prospěšného vlivu probiotické vakcíny Colinfant New Born na snižování výskytu alergie u osídlených dětí budeme sledovat proporční zastoupení a funkční vlastnosti Treg a DC v periferní krvi 10-12ti letých dětí. Budeme analyzovat vliv osídlení dětí probiotickou vakcínou Colinfant New Born na složeni střevni mikrobio...

• MeSH
• alergie MeSH
• cytokiny imunologie   MeSH
• dendritické buňky imunologie   MeSH
• dítě MeSH
• fetální krev imunologie   MeSH
• imunologické faktory MeSH
• novorozenec MeSH
• probiotika terapeutické užití   MeSH
• regulační T-lymfocyty imunologie   MeSH
• rizikové faktory MeSH
• vakcíny MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• novorozenec MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• perinatologie a neonatologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Current proposal covers systematic and prospective immunological investigation of a cohort of children with syndrome diGeorge. As a part of their genetic defect these patient have impaired development of thymus that substantially affects their immune functions. We plan to investigate in a prospective study not only T cells that were in past studied in detail, but also B cells potentially affected by impaired T cells help. We also plan to investigate T regulatory cells and T regulatory cells expressing Helios as a marker of thymus derived Tregs. We finally plan to correlate all these finding with age and clinical status of diGeorge children.

Předkládaný projekt se zabývá systematickým a prospektivním sledováním dětí se syndromem diGeorge. Součástí tohoto geneticky podmíněného syndromu je porucha funkce thymu, která následně ovlivňuje vývoj imunitního sysstému. V plánu tohto projektu je studium nejenom T lymfocytů, které byly již v minulosti opakovaně vyšetřovány a výsledky publikovány, ale také B lymfocytů a protilátkové odpovědi, s předpokladem jejich ovlivnění abnormální pomocí T lymfocytů. Tato vyšetření doplníme vyšetřováním T regulačních buněk, včetně T regs exprimujících Helios, který umožní odlišení Tregs pocházejících z thymu. Všechna data budou korelována s klinikou a věkem dětí. Souhrnná analýza umožní detailní zmapování vývoje imunity u dětí se syndromem diGeorge.

• MeSH
• B-lymfocyty cytologie   MeSH
• DiGeorgeův syndrom MeSH
• fenotyp MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH
• syndrom delece 22q11 MeSH
• T-lymfocyty cytologie   MeSH
• thymus imunologie   MeSH
• transkripční faktor Ikaros MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• genetika, lékařská genetika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The following markers will be examined in the blood of adult patients with chronic hepatitis C (HC), genotype 1b in Prague and Hradec Králove: 1) Expression of activation markers CD38 a HLA-DR on the cytotoxic T lymphocytes (CTLs) presents the information about activation of immune system. 2) Determination of FoxP3 (Treg) that suppress CTLs and viral elimination is inhibited. 3) Next cytokines will be analysed in laboratory in Prague using FlowCytomix methodology: IL-1b, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, IFNg, TGF-b and TNF? and 4) Next imunological markers will be assessed in Albany (NY,USA) by GCSPCE (grating-coupled surface plasmon coupled emission) technology with the aim to assess what markers have diagnostic and prognostic relevance. Markers will be monitored in these patients: 1) Group of 40 patients (pts) treated with PegIFN alfa with RBV. 2) 20 pts that eliminated HCV infection without antiviral treatment and 3) 30 healthy persons as control group.

U dospělých pacientů s chronickou hepatitidou C (HC), genotypem 1b budou z periferní krve v Praze a Hradci Králové vyšetřovány tyto markery: 1) Exprese aktivačních znaků CD38 a HLA-DR na cytotoxických T lymfocytech (CTL) k získání informace o aktivaci imunitního systému. 2) Stanovení FoxP3 (Treg), tlumící cytotoxické lymfocyty (CTLs), potlačující eliminaci viru HC. 3) Další cytokiny budou vyšetřovány v laboratoři v Praze metodikou FlowCytomix: IL-1b, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, IFNg, TGF-b a TNF? a 4) Imunologické markery v laboratoři v Albany (NY, USA) pomocí technologie GCSPCE (grating-coupled surface plasmon coupled emission) s cílem určení těch, které mají diagnostický a prognostický význam. Markery budou sledovány u těchto pacientů:1. Soubor 40 pacientů léčených pegylovaným interferonem alfa s ribavirinem. 2. Soubor 20 pacientů, kteří eliminovali HCV infekci bez antivirové léčby a 3. Kontrolní soubor 30 zdravých osob

• MeSH
• antigeny CD38 MeSH
• biologické markery MeSH
• chronická hepatitida C imunologie   MeSH
• cytotoxické T-lymfocyty MeSH
• genotypizační techniky MeSH
• hepatitida C - protilátky MeSH
• hepatitida C MeSH
• HLA-DR antigeny MeSH
• interferon alfa MeSH
• interleukiny analýza   MeSH
• molekulární biologie MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• infekční lékařství
• virologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Tumor infiltrating cells of the immune system, including tumor associated macrophages (TAM) and regulatory T lymphocytes (Treg) interact not only with tumor cells but also with fibroblasts, endothelia, extracellular matrix etd. Analysis of interactions of tumor cells, including tumor cells expressing phenotypic markers corresponding to stem cells, with the surrounding tissues and especially with the cells of the immune system – correlation of TAM numbers with density of neoangiogenesis (in several malignancies correlation with negative prognosis was proved), dominant M2 phenotypic polarization of TAM population, infiltration of CD4+ Treg and CD8+ suppressor cells, and analysis of cytokine profile in HNSCC are the main goals of the proposed project. Expected results would allow us to improve diagnostic methods and would be the next step to speculate about modulation of immune reaction as an integral part of anti-tumor therapy.

Buňky imunitního systému infiltrující nádory, včetně tumor asociovaných makrofágů (TAM) a regulačních T lymfocytů (Treg), interagují jak se samotnými nádorovými buňkami, tak i s fibroblasty, endoteliemi, extracelulární matrix apod. Analýza vzájemných vztahů nádorových buněk spinocelulárních karcinomů hlavy a krku (HNSCC), včetně podskupiny vykazující shodné fenotypové znaky jako buňky kmenové, s okolními tkáněmi a zejména s buňkami imunitního systému - korelace počtu TAM s mírou neoangiogeneze (u řady malignit korelující s negativní prognózou), převažující polarizace TAM populace na M2 fenotyp, infiltrace CD4+ Tregy i CD8+ supresory a analýza cytokinového profilu v prostředí HNSCC jsou hlavními cíly navrhovaného projektu. Předpokládané výsledky by mohly pomoci upřesnit diagnostické prostředky a mohly by být dalším krokem v úvahách o ovlivnění imunitní odpovědi jako součásti protinádorové léčby.

• MeSH
• makrofágy MeSH
• nádorové kmenové buňky MeSH
• nádorové mikroprostředí MeSH
• nádory hlavy a krku MeSH
• prognóza MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH
• spinocelulární karcinom MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Dipeptidyl peptidase 4 (DPP-4, identical to CD26) is multifunctional enzyme, participating on a number of immunoregulatory processes. In patients with the diabetes mellitus type 2 treated by DPP-4 inhibitors, changes DPP-4 activity and concentration, concentration of eosinophyllic cationic protein and selected cytokines in blood plasma will be followed. In parallel, proportion of CD26 expressing cells within the CD4 and CD8 cells, together with the relevant enzymatic activity, Treg (CD4+CD25+CD127-/FoxP3+) and CD86+ monocytic cells and alternatively NK cells (presence and activation) and intracellular cytokines in CD4+ IFNgamma/ IL4/ IL17 (Th1/Th2/Th17) supplemented with IL2 and eventually TGFbeta and IL10 will be investigated. The results might help to assess causality of DPP-4 inhibitors' induced immunosupression observed in animals. The results also should help to better define indications of the treatment, namely respective to the autoimmune and oncological comorbidities.

Dipeptidylpeptidáza 4 (DPP-4, identická s CD26) je multifunkční enzym, významný pro řadu imunoregulačních pochodů. U pacientů s diabetem mellitem 2. typu léčených inhibitory DPP-4 budou sledovány důsledky inhibice tohoto enzymu na aktivitu a koncentraci DPP-4, koncentraci eosinofilního katonického proteinu a vybraných cytokinů v krevní plasmě. Dále budou zjištěny poměry populací a exprese CD26 na CD4 a CD8 lymfocytech a jejich DPP-4 aktivita, stanovení Treg (CD4+CD25+CD127-/FoxP3+) a CD86+ monocytů, případně NK (zastoupení a aktivace) a kvantifikace intracelulárních cytokinů v CD4+ IFNgamma/ IL4/ IL17 (Th1/Th2/Th17) doplněné o IL2 a event. TGFbeta a IL10. Vyšetření budou provedena před a po 4 týdnech a 12 měsících léčby DPP-4 inhibitory. Výsledky umožní posoudit vliv inhibice DPP-4 na navození imunosuprese pozorované u experimentálních zvířat a posoudit její mechanismus. To může přispět k racionalizaci indikace s přihlédnutím k případným komorbiditám, zejména autoimunitním a neoplastickým.

• MeSH
• amylasy analýza   MeSH
• autoimunitní nemoci MeSH
• diabetes mellitus 2. typu farmakoterapie   imunologie   MeSH
• eozinofilní kationtový protein analýza   MeSH
• imunosupresivní léčba MeSH
• inhibitory dipeptidylpeptidasy 4 imunologie   terapeutické užití   MeSH
• nežádoucí účinky léčiv MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH
• Th1 buňky MeSH

• Konspekt
• Farmacie. Farmakologie
• NLK Obory
• farmakoterapie
• diabetologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

IL-35 is a novel cytokine of IL-12 family with unknown functions in human diseases. Since our discovery of increased IL-35 in synovial fluid, its association with disease activity and potential pro-inflammatory role in rheumatoid arthritis (RA) is a newfinding; our aims are to analyze serum levels of IL-35 in patients with RA and other systemic rheumatic diseases, and to test correlation between IL-35, disease activity and autoimmune-related manifestations. Special attention is focused on the role of IL-35 in the pathogenesis of chronic inflammation and tissue damage, on the expression of IL-35 in RA synovial tissue samples, and muscle and skin biopsies from patients with idiopathic inflammatory myopathies and systemic sclerosis, respectively. This research should lead to identification of the role of IL-35 in pathogenesis of inflammation in RA and determination whether this pathway is specific for the disease or whether the role for IL-35 is more general in driving chronic inflammatory mechanisms.

IL-35 je nedávno objevený cytokin z rodiny IL-12 s doposud neznámou funkcí u člověka. Naše zjištění zvýšené koncentrace IL-35 v synoviální tekutině, korelace IL-35 s aktivitou nemoci u pacientů s RA a prozánětlivý mechanismus působení tohoto cytokinu jsou celkem nové. Proto je naším cílem analyzovat hladiny IL-35 v séru na větším souboru pacientů s RA a u dalších systémových revmatických onemocněních, zkoumat vztah IL-35 k aktivitě nemoci a ostatním příznakům, které jsou asociované s autoimunitními nemocemi. Zvláštní pozornost bude věnována studiu role IL-35 v patogenezi chronického zánětu a následného poškození tkáně, jako i expresi IL-35 v revmatoidní synoviální výstelce, ve svalových a kožních biopsiích u pacientů s idiopatickou zánětlivou myopatiía se systémovou sklerodermií. Tento projekt by měl určit roli IL-35 v patogenezi zánětu u RA a objasnit, jestli se jedná o funkci specifickou pro RA nebo obecnou, která řídí mechanismus chronického zánětu.

• MeSH
• autoimunita MeSH
• cytotoxické T-lymfocyty MeSH
• ELISA MeSH
• fluorescenční protilátková technika MeSH
• imunohistochemie MeSH
• interleukin 27 analýza   MeSH
• interleukin-12 - podjednotka p35 analýza   MeSH
• interpretace statistických dat MeSH
• leukocyty mononukleární MeSH
• myozitida patofyziologie   MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH
• revmatoidní artritida patofyziologie   MeSH
• skleróza patofyziologie   MeSH
• synoviální tekutina cytologie   MeSH
• western blotting MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• revmatologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Under this project, 75 renal graft recipients at risk of developing rejection will be monitored prospectively (at predefined intervals) for the presence of naturally occurring (CD4+CD25+FoxP3+) as well as the degree of expression of mRNA of the gene FoxP3, TOAG and alpha2 mannosidase genes in peripheral blood. Graft biopsy specimens will be analyzed for the expression of the same biomarker genes and proteins. As the above biomarkers are associated with a reduced immune recipient-versus-graft reaction, the expression of these biomarkers will be correlated with renal function, incidence of acute rejection episodes and, finally, with graft survival over the first year post-transplant. The study population will include patients treated using 2 defined immunosuppressive protocols (a triple combination with ATG induction in patients with panel reactive antibody (PRA) >50% (n=25) and in those treated using a triple combination of immunosuppressives (n=50) with PRA <50%.

V tomto projektu bude u 75 nemocných po transplantaci ledviny v riziku rejekce prospektivně sledována (v definovaných intervalech) přítomnost přirozeně se vyskytujících regulačních T lymfocytů (CD4+CD25+FoxP3+) stejně tak jako míra exprese mRNA genu proFoxP3, TOAG a alfa2 manosidázu v periferní krvi. Budou studováni nemocní léčení 2 definovanými imunosupresivními režimy (3-kombinace imunosupresiv (TAC, MMF, steroidy) s indukcí ATG u nemocných s panelreaktivními protilátkami (PRA) >50% (n=25) a nemocníléčení stejnou trojkombinací imunosupresiv (n=50) s PRA<50%, kteří nebudou léčeni indukční imunosupresí. V biopsiích štěpů bude analyzována exprese genů stejných biomarkerů a také jejich proteinů. Uvedené biomarkery jsou spojeny se sníženou imunitní reakcí příjemce proti štěpu a proto bude provedena korelace expresí těchto biomarkerů s renální funkcí, výskytem akutních rejekcí a konečně i s přežitím štěpů v průběhu prvního roku po transplantaci ledviny.

• MeSH
• biologické markery analýza   krev   MeSH
• biopsie MeSH
• diagnostické techniky molekulární metody   využití   MeSH
• exprese genu MeSH
• forkhead transkripční faktory MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH
• separace buněk MeSH
• transplantace ledvin MeSH
• transplantační tolerance MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• transplantologie
• nefrologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• MeSH
• cytogenetické vyšetření MeSH
• diagnostické techniky molekulární MeSH
• genotypizační techniky MeSH
• jednonukleotidový polymorfismus MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   patofyziologie   terapie   MeSH
• monoklonální gamapatie nejasného významu diagnóza   terapie   MeSH
• paraproteiny analýza   MeSH
• prekancerózy MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• regulační T-lymfocyty cytologie   MeSH
• srovnávací genomová hybridizace MeSH
• Publikační typ
• sborníky MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie

Defining new molecular and immunological markers is essential for our making well-informed decisions on proper therapeutic strategies and for improvement of currently unfavourable prognosis of HNSCC patients. Increased numbers of Tregs in peripheral blood and/or tumour tissue were reported in patients suffering from diverse types of cancer. Studies on patients bearing breast, ovarian, gastrointestinal and small-cell lung carcinoma have been published so far. If there exists a relationship between numbers of Tregs, stage of disease and relaps risk, revealing such a relationship would be of an outstanding importance in our understanding of malignant transformation and progression of head and neck tumours.

Nové molekulárně biologické a imunobiologické markery jsou nezbytné pro zkvalitnění našeho rozhodování o volbě léčebné strategie a pro zlepšení stávající nepříznivé prognózy pacientů se spinocelulárním karcinomem hlavy a krku. Zvýšené zastoupení Treg v periferní krvi nebo v tkáni nádoru bylo pozorováno u mnoha typů nádorů. Publikovány byly studie u pacientů s nádory prsu, vaječníku, gastrointestinálního traktu a malobuněčným nádorem plic. Odhalení existující korelace mezi zastoupením Treg, stádiem onemocnění a rizikem recidivy, by bylo cenným příspěvkem pro porozumění procesu maligní transformace a progrese nádorů v ORL oblasti.

• MeSH
• lokální recidiva nádoru diagnóza   MeSH
• nádorové biomarkery analýza   MeSH
• nádory hlavy a krku MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• otorinolaryngologie
• onkologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The aim of the project is to gain better unterstanding of the immunological pathogenesis of organ-specific autoimmune disorders, especially autoimmune endocrinopathies and celiac disease, and thus achieve a better therapeutical approach. In the 1., 2. and 3. year 140 outpatients with autoimmune endocrinopathies and celiac disease and 20 control persons will be repeatedly examined. Parameters of the immune system (anti-C1q antibodies, CRIT on thyrocytes, regulatory T-lymphocytes, co-stimulatory and adhesive molecules, intracellular cytokines) will be examined in blood and in case of thyroid disease, also in thyroid aspirates. We want do determine the differences between each autoimmune disorder (thyroiditis, diabetes type 1, polyglandular disorders, celiac disease), compare the data in peripheral blood and thyroid aspirates, and study their relation to the course of disease.

Cílem projektu je přispět k objasnění role vybraných humorálních a buněčných regulačních mechanismů v etiopatogenezi orgánově specifických autoimunit: autoimunitních endokrinopatií a celiakie. Třikrát v odstupu 9 měsíců projektu bude vyšetřeno 140 pacientů s různými autoimunitními endokrinopatiemi a celiakií a kontrolní skupina 20 osob. U každé osoby budou vyšetřeny vybrané parametry imunitního systému (anti-C1q protilátky, nový komplementový inhibitor CRIT, regulační T lymfocyty, exprese kostimulačníchmolekul, intracelulární cytokiny) v krvi a v punktátech štítné žlázy. Předmětem výzkumu bude zjistit, liší-li se tyto parametry u jednotlivých typů autoimunit a kontrolní skupiny, liší-li se v periferní krvi a lokálně v punktátech získaných FNAB a mají-li vztah k průběhu onemocnění.

• MeSH
• autoimunitní nemoci MeSH
• autoimunitní polyglandulární syndromy patofyziologie   MeSH
• autoimunitní tyreoiditida imunologie   MeSH
• cytokiny MeSH
• Gravesova nemoc imunologie   MeSH
• Hashimotova nemoc imunologie   MeSH
• komplement C1q MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• endokrinologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR