• MeSH
• B-buněčný lymfom MeSH
• Burkittův lymfom MeSH
• lymfom spojovaný s AIDS MeSH
• lymfom T-buněčný MeSH
• lymfom MeSH
• Publikační typ
• sborníky MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• hematologie a transfuzní lékařství

Chronická lymfocytární leukémie (CLL) se vyznačuje vysokou heterogenitou klinického průběhu a molekulárních vlastností maligních B lymfocytů. CLL má klonální charakter a díky tomu je možné popsat každý případ CLL jedinečnou přestavbou imunoglobulinových genů (IG), kódující B buněčný receptor. Publikované molekulárně-biologické analýzy dokládají význam antigenní stimulace u CLL, což je podpořeno také výsledky epidemiologických studií. Vysokokapacitní sekvenační technologie dosud nebyly široce využívány ve výzkumu IG kvůli řadě metodických nedostatků. Navrhovaný projekt si klade za cíl zavést moderní technologii vysokokapacitního sekvenování IG a provést národní screening nově diagnostikovaných CLL pacientů. Data generovaná pomocí sekvenování budou podrobně studována ve vztahu ke klinickému průběhu CLL, laboratorním parametrům a epidemiologickým nálezům. Abychom dosáhli vytyčených cílů, hodláme provést epidemiologickou studii nově diagnostikovaných CLL na národní úrovni. Jako prostředek plnění cílů také využijeme a dále rozšíříme národní databázi CLL pacientů CLLEAR.; Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is characterized by extraordinary heterogeneity concerning clinical presentation and molecular features. As the clonal disease of B lymphocytes, each case can be described by a specific immunoglobulin gene (IG) encoding for the B cell receptor. Extensive molecular evidence was provided on antigen stimulation operation in CLL, which is also supported by epidemiological studies. High-throughput sequence analysis has not been applied extensively in research focused on IG due to several limitations. The proposed project aims to expertly implement advanced methodology for the high-throughput IG sequence analysis to produce, manage and delve into extensive immunogenetic sequence datasets in CLL. Furthermore the obtained data will be associated with clinical, molecular and epidemiological features of CLL cases as these will be collected through the purpose-specific survey among Czech CLL patients. An extensive national-wide CLL database CLLEAR containing data on clinical course and molecular biomarkers will be used and extended during the project.

• MeSH
• B-buněčný lymfom MeSH
• chronická lymfatická leukemie MeSH
• genetická heterogenita MeSH
• klonální evoluce MeSH
• plošný screening MeSH
• receptory antigenů B-buněk MeSH
• vysoce účinné nukleotidové sekvenování MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• genetika, lékařská genetika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Cílem tohoto projektu je analýza V?1, V?2 a V?3 gamma-delta (??) populací T-lymfocytů u pacientů s chronickou lymfocytární leukémií (CLL). Lidské ?? T buňky jsou účinnými efektorovými buňkami přirozené imunity podílící se na protinádorovému imunitnímu dozoru. Náše pilotní data ukazují významnou reaktivitu ?? T buněk proti primárním CLL buňkám. Naším cílem je detailní analýza populací ?? T buněk včetně stanovení expanzí, klonality, celogenomového profilování, protinádorové cytotoxicity a interakcí s CLL buňkami. Dále bude provedena analýza unikátní kohorty dárců s monoklonální B-buněčnou lymfocytózou (MBL), která přispěje k objasnění příčin a mechanismů patogeneze CLL onemocnění. MBL je biologicky podobné s CLL a je přijímáno jako její prekurzor. Je velmi důležité, abychom dosáhli lepšího porozumění nejen o ?? cytotoxicitě proti maligním CLL buňkám, ale také o reaktivitě ?? T-buněk proti CLL i přes signalizaci od stromatu kostní dřeně. Tato analýza přinese nové výsledky důležité pro budoucí imunoterapeutické aplikace určené k odstranění residuálních CLL buněk.; This project aims to investigate the V?1, V?2 and V?3 subsets of gamma-delta (??) T cells in patients with chronic lymphocytic leukemia (CLL). Human ?? T cells are potent effector cells of innate immunity involved in anti-tumour immune surveillance. Our pilot in vitro data support the observations of prominent reactivity of ?? T cells against primary CLL cells but the detailed analysis of ?? expansions, clonality and anti-CLL reactivity are currently missing. In addition, a unique cohort of monoclonal B-cell lymphocytosis (MBL) donors will be investigated and will lead to important insights into mechanisms of CLL disease pathogenesis. MBL has been shown to display biological similarities to CLL and is accepted as its precursor state. It is crucial that we achieve a better understanding of not only ?? cytotoxicity against malignant CLL cells, but also the efficacy of ?? T cells on CLL cells despite of signaling from bone marrow stroma that will generate novel results highly relevant for future immunotherapeutic applications designed to eliminate the residual CLL cells.

• MeSH
• biologická terapie MeSH
• chronická lymfatická leukemie terapie   MeSH
• imunoterapie MeSH
• intraepiteliální lymfocyty MeSH
• mezibuněčná komunikace MeSH
• protinádorové látky imunologicky aktivní MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• cytologie, klinická cytologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

V současnosti jsme svědky zapojení imunoterapie využívající anti-CD3 konstrukty (blinatumomab) nebo CAR-T buňky do léčby relabované nebo rezistentní B prekurzorové akutní lymfoblastické leukémie (BCP ALL), ale zatím ne T ALL. Naše laboratoř provádí diagnostiku minimální reziduální nemoci (MRN) pro země EU, Švýcarsko a Izrael. Součástí nového protokolu AIEOP BFM 2017 pro léčbu nově diagnostikovanou BCP ALL bude terapie blinatumomabem pro pacienty s pomalou odpovědí na léčbu. Pro efekt jsou důležité komponenty imunitního systému, zejména T lymfocytů. Rezistence na tento typ cílené léčby může být způsobená různou kombinací dysfunkce T lymfocytů (případně i dalších složek imunitního systému), exprese inhibičních molekul na blastech a změny imunofenotypu blastů, zejména ztráty antigenu CD19 nebo liniového přesmyku (obvykle do monocytární linie, jak jsme nedávno popsali). Ztráta antigenu CD19 představuje výzvu pro detekci MRN, která je důležitá pro stanovení intenzity léčby. Plánujeme detailně popsat mechanismy rezistence na imunoterapii a navrhnout cesty, jak rezistenci obejít.; Immunotherapeutic approaches using anti-CD3 antibody constructs (blinatumomab) or CAR-T cells newly became part of the treatment of the relapsed or resistant B precursor acute lymphoblastic leukemia (ALL) but so far not in T ALL. Our lab serves as a reference center for minimal residual disease (MRD) diagnostics in a blinatumomab trial for the EU, Switzerland and Israel. The next frontline protocol AIEOP BFM 2017 will use blinatumomab for patients with slow response to chemotherapy. Resistance to the blinatumomab therapy is caused by a variable combination of a T cell dysfunction, an expression of inhibitory molecules on blasts and a shift of the immunophenotype of the blasts (a loss of CD19 expression or a lineage switch to the monocytic lineage as we recently described). Loss of CD19 antigen is a challenge for the flow cytometric MRD assessment, which is important for setting the treatment intensity. We plan to describe the detailed mechanisms of immunotherapy resistance and to design ways to circumvent them.

• Klíčová slova
• blinatumomab,
• MeSH
• antigeny CD3 MeSH
• chemorezistence MeSH
• cílená molekulární terapie MeSH
• imunoterapie MeSH
• monitorování fyziologických funkcí MeSH
• pre-B-buněčná leukemie imunologie   terapie   MeSH
• protinádorové látky imunologicky aktivní MeSH
• reziduální nádor diagnóza   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• alergologie a imunologie
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Použití inhibitorů signalizace přes B-buněčný receptor (BCR) má slibné terapeutické výsledky u B-buněčných malignit, ale nejsou dobře známy mechanismy jejich působení a molekulární dráhy důležité pro vznik rezistence a volbu vhodné kombinační léčby. V projektu navrhujeme studovat expresi miRNA a protein-kódujících genů po aplikaci BCR-inhibitorů (ibrutinib a idelalisib) v maligních buňkách pacientů s chronickou lymfatickou leukémií (CLL) s využitím technologie masivního paralelního sekvenování (Illumina). Cílem projektu je i) popsání molekulárních drah miRNA-mRNA, které jsou ovlivněny BCR-inhibicí, ii) nalezení miRNA, které mohou být prognostickými a prediktivními biomarkery a iii) definovat na základě analýzy molekulárních drah potenciální nové terapeutické přístupy, které napodobují efekt BCR-inhibitorů a/nebo s nimi mohou být kombinovány. V předběžných analýzách jsme identifikovali mRNA/miRNA ovlivněné BCR-inhibicí a popsali, že BCR-asociované miRNA mohou být využity jako biomarkery, což bude dále testováno na velkých souborech pacientů s CLL a folikulárním lymfomem.; The clinical use of BCR-inhibitors in B cell malignancies has promising clinical effects; however, better understanding is needed to design combinatorial treatments, and to understand their mechanisms of action and molecular pathways of resistance. In this project we propose to study the expression of miRNAs and protein-coding genes after therapeutic targeting of BCR (ibrutinib and idelalisib) in malignant B cells of patients with chronic lymphocytic leukemia (CLL) using massive parallel sequencing technology (Illumina). The aims are to i) describe the molecular pathways of miRNAs-mRNA affected by BCR inhibition, ii) describe miRNAs that can be used a prognostic and predictive biomarkers, and iii) based on the pathway analysis define potential novel therapeutic approaches that mimic BCR-inhibitors or could be used in combinational therapy. Our preliminary data identified mRNA/miRNAs that are affected by BCR inhibition, and we have shown that BCR-associated miRNAs can be used as biomarkers, which will be further validated on large cohorts of CLL and follicular lymphoma patients.

• MeSH
• chronická lymfatická leukemie genetika   terapie   MeSH
• exprese genu MeSH
• folikulární lymfom genetika   terapie   MeSH
• inhibitory proteinkinas terapeutické užití   MeSH
• lidé MeSH
• mikro RNA MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• prognóza MeSH
• protoonkogenní proteiny c-bcr genetika   MeSH
• signální transdukce genetika   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• genetika, lékařská genetika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

• MeSH
• chronická lymfatická leukemie diagnóza   terapie   MeSH
• imunoterapie MeSH
• lymfom diagnóza   klasifikace   terapie   MeSH
• Publikační typ
• abstrakty MeSH
• kongresy MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• hematologie a transfuzní lékařství

Leukemie postihuje 2% populace v západní Evropě. Nejčastějším typem je B-CLL, která zahrnuje asi 30% všech případů. I přes značný metodický pokrok ve výzkumu nebyl zjištěný žádný jednoznačný chromozomální nebo protoonkogenový defekt. Vznik nádorů je výsledkem hromadění různých genetických poruch, které regulují specifické buněčné dráhy. Mutace v genu Dok1 a GNB3, které budou analyzovány, spolu s dalšími anomáliemi mohou hrát důležitou roli v iniciaci, progresi nebo léčbě CLL. STAT proteiny mají klíčovouroli v cytokinové signalizaci a následně v proliferaci a apoptóze lymfocytů. Identifikace poruch fosforylace STAT proteinů analyzovaná Western blotem může objasnit úlohu těchto změn ve vývoji CLL. Lymfom plášťové zóny (MCL) je agresivní B-buněčný non-Hodkinský lymfom vznikající z nezralých lymfocytů s translokací t(11;14)(q13;q32). Rozdílná exprese genu c-myc a p16 bude kvantifikována a dána do souvislosti s klinickým obrazem.; In Western countries leukemias affects 2% of the population. CLL is the most common form accounting for about 30% of all cases. Although considerably progress has been made in research no consistent chromosomal or protooncogene defect has been found. Since tumorogenicity is assumed to be a multistep process in which various genetic changes lead to tumor formation,the mutations in Dok1 or GNB3 gene in conjunction with other identified alterations may be important in CLL progression and chemoresistance STATs play central role in cytokine signaling and influence proliferation and apoptosis of lymphocytes. Identification of the defects in STAT phosphorylation by Western blot can clarify relevance of this modification in CLL development. Mantle cell lymphom(MCL) is aggressive B-cell non-Hodkins lymphom arrising from immature lymphocytes with distinctive translocation t(11;14)(q13;q32). C-myc and p16 genes are integrated to the disease development and their expression will be specified.

• MeSH
• chronická lymfatická leukemie diagnóza   MeSH
• diagnostické techniky molekulární MeSH
• mutační analýza DNA MeSH
• nehodgkinský lymfom diagnóza   MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• RNA analýza   MeSH
• transkripční faktory STAT MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• onkologie
• hematologie a transfuzní lékařství
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Publikace obsahuje kazuistiky související s terapeutickým užitím Idelalisibu.

• Klíčová slova
• idelalisib,
• MeSH
• chronická lymfatická leukemie farmakoterapie   MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie

• MeSH
• chronická lymfatická leukemie MeSH
• Publikační typ
• sborníky MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství

Na variabilním průběhu chronické lymfocytární leukémie (CLL) se podílí řada faktorů. K významným patří signalizace B buněčnými receptory (BCR), jejíž intenzita závisí na molekulárních vlastnostech BCR. Výsledkem je variabilní proliferační potenciál maligních buněk ovlivňující heterogenní akumulaci genetických změn. V rámci projektu se zaměříme na stanovení výskytu stereotypních BCR a jejich podrobnou molekulární charakterizaci v definovaném souboru CLL. Využijeme nové genomické technologie a cytogenetické metody ke studiu genetických změn v CLL vzorcích a společně s klinickými údaji je budeme analyzovat s ohledem na zastoupení specifických BCR. Pro analýzu problematických případů s vícečetnými přestavbami IG zavedeme „single cell“ multiplexní PCR analýzu pro kompletní stanovení přestaveb těžkých i lehkých řetězců IG v kombinaci s vyšetřením mutací v dalších genech. U biklonálních CLL navrhneme klonálně specifické real-time PCR pro sledování koexistence maligních klonů v čase.; Variable course of chronic lymphocytic leukemia (CLL) is influenced by many factors. The signalization via B-cell receptor (BCR) belongs among them; its intensity depends on the molecular properties of BCR. This results in variable proliferative potential of malignant cells which influence heterogeneous accumulation of genetic changes. Within the project we will focus on stereotyped BCR incidence and their detailed molecular characterization in defined CLL set. We will use novel genomic technologies and cytogenetic methods to study genetic changes in CLL samples and we will analyze them in parallel with clinical data with respect to specific BCR prevalence. For analysis of trouble-making cases with multiple IG rearrangements we will introduce single-cell multiplex PCR for complete assessment of heavy and light IG chain rearrangements in combination with the mutational analysis of other genes. In biclonal CLL we will design clone-specific qPCR for monitoring of coexistence of malignant clones in time.

• MeSH
• chromozomální aberace MeSH
• chronická lymfatická leukemie MeSH
• cytogenetika MeSH
• kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• receptory antigenů B-buněk MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• molekulární biologie, molekulární medicína
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• genetika, lékařská genetika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR