Úvod a cíl: Předkládaná kazuistika dokumentuje průběh diagnostiky a léčby neoplazie plazmatických buněk dolní čelisti 79leté pacientky. Cílem je upozornit na možnost manifestace plazmocytomů v diferenciální diagnostice lézí čelistních kostí a zároveň zdůraznit důležitost mezioborové spolupráce, v tomto případě dentoalveolárního/maxilofaciálního chirurga a hematoonkologa. Popis případu: Pacientka byla na našem pracovišti poprvé vyšetřena v listopadu 2023 na žádost praktického zubního lékaře z důvodu opakujících se obtíží po extrakci stálého dolního druhého moláru vpravo (zub č. 47), která byla provedena o dva měsíce dříve. Pacientka byla v roce 2021 operována pro karcinom vaječníků, netrpěla diabetem, krvácivými projevy, dušností ani jinými chorobami. Neužívala léky ovlivňující kostní metabolismus. Na základě klinického obrazu, délky trvání příznaků, OPG zobrazujícího neostře ohraničené projasnění těla mandibuly v oblasti chybějících zubů a laboratorního vyšetření byla stanovena pracovní diagnóza osteomyelitida těla dolní čelisti vpravo. Neprodleně byla zahájena empirická léčba perorálními širokospektrými antibiotiky penicilinové řady, která přinesla klinické zlepšení. CBCT zhotovené dva dny po prvním vyšetření odhalilo nejasně ohraničené osteolytické ložisko způsobující resorpci lingvální stěny těla mandibuly dosahující spodní hrany dolní čelisti v oblasti molárů vpravo dole. Tento rentgenologický nález vedl k podezření na zhoubný novotvar dolní čelisti. Následné vyšetření pomocí CT s kontrastní látkou potvrdilo infiltraci měkkých tkání a výše popsaný charakter osteolytické léze. Na základě těchto nálezů byla indikována a provedena diagnostická biopsie části patologické tkáně, která odhalila plazmocytární neoplazii. V diferenciální diagnostice bylo nutné rozlišit, zda se jedná o solitární kostní plazmocytom s extraoseální propagací, nebo infiltraci mnohočetným myelomem. Pacientka byla odeslána na hematologické vyšetření na specializované pracoviště, kde byla definitivně stanovena diagnóza mnohočetného myelomu. Zde byla pacientka léčena trojkombinací bortezomidu, lenalidomidu a dexametazonu. Již první cyklus této léčby vedl k úplné regresi intraorální léze a zhojení extrakční rány v místě zubu 47. Závěr: Tato kazuistika upozorňuje na méně častý, avšak možný výskyt plazmocytomů v dutině ústní a zdůrazňuje důležitost mezioborové spolupráce.
Introduction and aim: The presented case study documents the course of diagnosis and treatment of plasma cell neoplasia of the lower jaw in a 79-years-old female patient. The aim is to highlight the possibility of plasmacytoma manifestation in the differential diagnosis of jawbone lesions and to emphasize the importance of interdisciplinary cooperation, in this case between the dentoalveolar/maxillofacial surgeon and the haematooncologist. Case description: The patient was first examined at our facility in November 2023 upon the request of a general dental practitioner due to recurrent difficulties following extraction of the right permanent lower second molar (tooth #47), which had been performed two months earlier. In 2021, the patient underwent surgery for ovarian carcinoma and had no history of diabetes, bleeding disorders, shortness of breath, or other illnesses. She was not using any medications affecting bone metabolism. Based on the clinical findings, duration of symptoms, OPG image showing noticeable poorly defined radiolucency of the mandibular body in the area of missing teeth, and laboratory tests, a working diagnosis of osteomyelitis of the mandibular body on the right side was established. Empirical treatment with oral broad-spectrum antibiotics of the penicillin class was initiated promptly and resulted in clinical improvement. Cone-beam computed tomography (CBCT) performed two days after the initial examination revealed osteolytic indistinctly demarcated changes causing lingual wall resorption of the mandibular body reaching to the lower edge of the mandible in the region of the molars on the lower right side. This radiological finding raised suspicion of malignant neoplasm of the lower jaw. Subsequent CT scan with contrast confirmed soft tissue infiltration and the osteolytic nature of the lesion described above. Based on these findings, a diagnostic biopsy of the pathological tissue was indicated and performed, revealing plasma cell neoplasia. In the differential diagnosis, it was necessary to distinguish whether it was a solitary bone plasmacytoma with extraosseous propagation or multiple myeloma infiltration. The patient was referred for haematological examination to a specialized clinic where a definitive diagnosis of multiple myeloma was established. There the patient was treated with a triple combination of bortezomide, lenalidomide, and dexamethasone. The first cycle of this treatment resulted in complete regression of the intraoral lesion and healing of the extraction socket at the site of tooth #47. Conclusion: This case study highlights the rare but possible occurrence of oral plasmacytomas and emphasizes the importance of interdisciplinary collaboration.
- MeSH
- bortezomib terapeutické užití MeSH
- dexamethason terapeutické užití MeSH
- diferenciální diagnóza MeSH
- extrakce zubů MeSH
- imunologické faktory MeSH
- lenalidomid terapeutické užití MeSH
- lidé MeSH
- mezioborová komunikace MeSH
- mnohočetný myelom diagnóza farmakoterapie MeSH
- nádory mandibuly * diagnóza farmakoterapie MeSH
- plazmocytom diagnóza farmakoterapie MeSH
- poextrakční zánět zubního lůžka diagnostické zobrazování farmakoterapie MeSH
- protinádorové látky MeSH
- protokoly protinádorové kombinované chemoterapie MeSH
- senioři MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Despite several scientific or ethical issues, fetal bovine serum (FBS) remains the standard nutrient supplement in the mesenchymal stem cell cultivation medium. Cell amplification plays an important role in human stem cell therapies. Increasing interest in this field has supported attempts to find suitable human alternatives to FBS for in vitro cell propagation. Human platelet lysate (hPL) has recently been determined as one of them. Our study aimed to evaluate the influence of 2% hPL in the growth medium for in vitro expansion of human natal dental pulp stem cells (hNDP-SCs). The effect was determined on proliferation rate, viability, phenotype profile, expression of several markers, relative telomere length change, and differentiation potential of four lineages of hNDP-SCs. As a control, hNDP-SCs were simultaneously cultivated in 2% FBS. hNDP-SCs cultivated in hPL showed a statistically significantly higher proliferation rate in initial passages. We did not observe a statistically significant effect on mesenchymal stem cell marker (CD29, CD44, CD73, CD90) or stromal-associated marker (CD13, CD166) expression. The cell viability, relative telomere length, or multipotency remained unaffected in hNDP-SCs cultivated in hPL-medium. In conclusion, hPL produced under controlled and standardized conditions is an efficient serum supplement for in vitro expansion of hNDP-SCs.
- MeSH
- buněčná diferenciace MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- mezenchymální kmenové buňky * MeSH
- proliferace buněk MeSH
- živiny MeSH
- zubní dřeň * MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Telomeres are repetitive nucleoprotein DNA sequences that shorten with each cell division. The stem cells activate telomerase to compensate for the telomere loss. This study aimed to evaluate the effect of cultivation passaging on the relative telomere length and proliferation capacity of dental pulp stem cells. We used ten dental pulp stem cell (DPSC) lineages stored for 12 months using uncontrolled-rate freezing to reach the study's goal. We analyzed their proliferation rate, phenotype using flow cytometry, multipotency, and relative telomere length using a qPCR analysis. We determined the relative telomere length in the added study by performing analysis after one, two, and three weeks of cultivation with no passaging. We documented the telomere attrition with increasing passaging. The shorter the relative telomere length, the lower reached population doublings, and longer population doubling time were observed at the end of the cultivation. We observed the telomere prolongation in DPSCs cultivated for two weeks with no passaging in the added subsequent study. We concluded that excessive proliferation demands on DPSCs during in vitro cultivation result in telomere attrition. We opened the theory that the telomerase might be more efficient during cell cultivation with no passaging. This observation could help in preserving the telomere length during ex vivo DPSC expansion.
- MeSH
- fenotyp MeSH
- imunohistochemie MeSH
- kmenové buňky cytologie metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- polymerázová řetězová reakce MeSH
- proliferace buněk genetika fyziologie MeSH
- průtoková cytometrie MeSH
- telomerasa metabolismus MeSH
- telomery genetika MeSH
- zubní dřeň cytologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Alveolar Osteitis (AO) is a complication following the extraction of a tooth. AO manifests through localized pain in, and around, the extraction site, where the post-operative blood clot has been disintegrated. The aim of this single cohort study was to evaluate the outcome of a treatment of AO, using a pharmacological device composed of hyaluronic acid and octenidine dihydrochloride. The tested device is a sponge-like material, composed solely of a fully dissoluble medicaments (hyaluronic acid, calcium chloride, and octenidine dihydrochloride). It was designed to serve as a non-toxic, slow-dissolving antiseptic, that adheres to mucosa and obturates the wound. This study includes 58 subjects who were diagnosed with AO. The tested device was administered once daily until local pain subsided to < 20 mm of the Visual Analog Scale (VAS). The treatment was considered effective when the pain subsided to < 20 mm VAS in < 8 days of treatment; as per comparative studies. Our findings provide a statistically significant success rate of 96.0% (95.0% confidence interval of 75.75% to 97.8%) after pharmacological device administrations. No adverse medical effects were detected. Acquired data confirmed that lyophilized hyaluronic acid, combined with octenidine, is effective for the treatment of AO. The results are clinically important as AO is a common complication after third molar extractions.
- MeSH
- antiinfekční látky lokální aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- dospělí MeSH
- extrakce zubů škodlivé účinky MeSH
- kohortové studie MeSH
- kyselina hyaluronová aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- poextrakční zánět zubního lůžka farmakoterapie MeSH
- pyridiny aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- vstřebatelné implantáty MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- klinické zkoušky MeSH
- multicentrická studie MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
The dental pulp represents an easily accessible source of adult dental pulp stem cells (DPSCs). The preferred approach to DPSC isolation is enzymatic digestion. However, the duration of the enzymatic activity is crucial. The purpose of this study was to isolate the DPSC populations using this method, characterize their biological properties and proliferation capacity, and to determine their ability to differentiate into mature cells. Before enzymatic digestion using 0.05% trypsin, we used the homogenization method in order to obtain a fine homogenate from the solid pulp tissue. The stem cells were cultivated in modified cultivation medium for mesenchymal adult progenitor cells containing 2% foetal bovine serum, growth factors and insulin-transferrin-selenium supplement. We were successfully able to isolate 10 populations of DPSCs. The vitality of DPSCs did not drop below 90 %. However, the DPSCs showed a significant decrease in the relative telomere length number with increasing passaging (P < 0.05). Isolated DPSCs highly expressed the CD markers: CD29, CD44, CD90, CD13, CD73 and CD166. In contrast, CD markers CD31, CD106, CD34 and CD45 were negative or low positive. We confirmed the high osteogenic and chondrogenic potential of the isolated stem cells. Isolated DPSCs did not show signs of cell degeneration or spontaneous differentiation during the entire cultivation. In addition, we were able to shorten the enzyme activity duration, and we were the first to demonstrate trypsin as the enzyme used for the enzymatic digestion method with the viability over 90 % of isolated DPSCs using this method.
- MeSH
- buněčná diferenciace MeSH
- buněčný rodokmen MeSH
- CD antigeny metabolismus MeSH
- chondrogeneze MeSH
- dospělé kmenové buňky cytologie MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- osteogeneze MeSH
- proliferace buněk MeSH
- separace buněk metody MeSH
- telomery metabolismus MeSH
- trypsin metabolismus MeSH
- zubní dřeň cytologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Recently, human natal dental pulp stem cells (hNDP-SCs) have been characterized in vitro and it has been shown that they satisfy criteria defining human mesenchymal stromal cells (MSCs), as proposed by the International Society for Cellular Therapy. However, these results were reached in the presence of xenogeneic expansion medium, which has the potential to alter the cells' functional capacity. To determine the validity of the previously reported hNDP-SCs characteristics for human cell therapy, we have cultured hNDP-SCs in allogeneic expansion medium. Two hNDP-SC lineages were isolated from vital natal teeth, donated by a healthy newborn female and cultured in 2% platelet rich plasma (PRP). Analysis of the phenotypic expressions, proliferation rates, viability, telomerase length and in vitro adipogenic, osteogenic and chondrogenic differentiation potentials of two hNDP-SCs lineages (Zn001 and Zn002) were performed. Both lineages displayed similar morphology, proliferation rates, adipogenic, chondrogenic and osteogenic differentiation potential. Telomere shortening by 41.0% and 13.49% occurred from 3rd till 14th passage for lineages Zn001 and Zn002 respectively. Viability of both lineages was higher than 90%. Flow cytometry demonstrated that both lineages were positive to the majority of tested markers, including markers, which were negatively, expressed when hNDP-SCs were cultured previously in xenogeneic medium. Using immune-cytochemistry the cells were shown to express beta III-tubulin, nestin, neurofilaments and Nanog. PRP used as allogeneic medium is suitable for cultivation of hNDP-SCs.
- MeSH
- buněčná diferenciace MeSH
- buněčné kultury metody MeSH
- fenotyp MeSH
- kmenové buňky cytologie MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- plazma bohatá na destičky MeSH
- předmléčné zuby cytologie MeSH
- proliferace buněk MeSH
- viabilita buněk MeSH
- zkracování telomer MeSH
- zubní dřeň cytologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Úvod a cíl: Na základě odklonu lidské regenerativní medicíny od xenogenních materiálů jsme zkoumali, zda je možné efektivně expandovat kmenové buňky zubní pulpy dočasných zubů (SHED) v médiu, které obsahuje minimální množství fetálního telecího séra; čímž je snížena pravděpodobnost přenosu zoonóz a vzniku prionové infekce. Již v roce 2011 jsme dokázali, že takový protokol je použitelný pro kmenové buňky stálých zubů (DPSCs). Naše hypotéza, že SHED by měly na stejné médium reagovat podobně, vychází z faktu, že ač se od sebe tyto dvě populace buněk odlišují expresí povrchových znaků, sdílejí místo vzniku a mají podobné niche. Metoda: Tři odlišné linie SHED, izolované pomocí enzymatické disociace, jsme kultivovali v médiu obsahujícím 2 % fetálního telecího séra (FCS) až do překročení Hayflickova limitu, čímž jsme prokázali jejich kmenovost. Následná fenotypová analýza kultivovaných SHED ukázala vysokou pozitivitu znaků mezenchymálních kmenových buněk, a tedy hodnoty charakteristické pro SHED. Poté, co jsme ověřili, že testovaná metoda izolace ani médium zásadně neovlivnilo fenotyp naší buněčné populace, jsme tyto buňky úspěšně diferencovali v následující unipotentní buněčné typy: osteoblasty, adipocyty, chondrocyty, neurální, endoteliální buňky a buňky kosterní svaloviny. Výsledky: Naše data prokazují, že v porovnání s SHED kultivovanými v médiích s ≥ 10 % fetálního telecího séra si i SHED izolované a kultivované za výše uvedených podmínek udržují vysoký proliferační potenciál. Exprimují stabilní, ač o něco slabší pozitivitu povrchových znaků (v řádu 20 %) a diferencují ve všechny doposud s nimi asociované buněčné typy. Závěr: Z našich výsledků vyplývá, že SHED jsou slibnou a výjimečně dosažitelnou buněčnou populací, a to především pro neuroregenerativní medicínu. Klíčová slova: kmenové buňky zubní pulpy dočasných zubů – SHED – xenogenní sérum – fetální telecí sérum – 2% FCS – enzymatické natrávení – diferenciační potenciál
Introduction and aims: Recently, the human regenerative medicine has been departing from the use of xenogeneic materials for the possibility of zoonosis transfer and development of prion infection. We have focused our research on cultivation of Dental Pulp Stem Cells from Human Exfoliated Deciduous Teeth (SHED) in a medium with lowered concentration of Fetal Calf Serum (FCS), which decreases the chances of the above mentioned negative impacts on the cultivated cell population. In 2011, Karbanova et al. have shown that the Dental Pulp Stem Cells (DPSCs) from Impacted Third Molars can be viably cultured in a xenogeneic medium containing as little as 2% FCS. Our hypothesis, that SHED should react similarly to isolation and cultivation methods as DPSCs, follows from their similarities in the place of origin and their niches. Method: We have tested this hypothesis on three lineages of SHED from varying donours. The SHED were isolated from the exfoliated deciduous teeth dental pulp using enzymatic dissociation and seeded onto cultivation dishes containing the test medium of 2% of FCS. The cells were then continuously expanded over the Hayflick Limit, the proof of “stemness”. Following the proliferation potential test, we have examined the phenotype of the cultured undifferentiated cells which expressed high positivity of the Mesenchymal Stem Cell (MSC) surface markers, which agrees with the characteristic SHED phenotype. After we have audited the impact of the isolation and cultivation methods, we have proceeded to test their differentiation potential by seeding the cultured SHED into various differentiation media. The SHED have successfully differentiated into all the targeted unipotent tissue and cell types, namely: osteoblasts, chondrocytes, endothelocytes, myofibroblasts and neural cells. Results: Overall, our data shows that the SHED cultured in low-xenogeneic-serum medium, unlike the SHED cultured in high-xenogeneic-serum media, express lowered positivity of the same surface markers. Conclusion: Our results suggest that SHED are exceptionally promising and available mesenchymal stem cell population, especially applicable for neuroregenerative medicine. Keywords: stem cells from human exfoliated deciduous teeth – SHED – xenogeneic serum – fetal calf serum, 2% FCS – enzymatic digestion – differentiation potential
- MeSH
- buněčná diferenciace MeSH
- buněčné kultury * MeSH
- buněčné linie MeSH
- dítě MeSH
- extrakce zubů MeSH
- fenotyp MeSH
- imunochemie MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- předškolní dítě MeSH
- průtoková cytometrie MeSH
- separace buněk * metody MeSH
- transplantace kmenových buněk MeSH
- zubní dřeň * cytologie MeSH
- zuby mléčné * cytologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- lidé MeSH
- předškolní dítě MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
Foetal calf serum (FCS) is a standard supplement used in media for in vitro stem cell cultivation. This xenogeneic supplement remains widely used for its favourable growth-promoting properties and ease of accessibility; however, it is inherently not fit for human medicine due to its capacity to temper with the cultured cell quality. For this reason, the international community encourages research and development of allogeneic sera, which would expunge this issue. This study aims to investigate the differences in proliferative capacity, phenotype, and differentiation capacity of ecto-mesenchymal stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED) cultured in vitro in media supplemented with allogeneic and xenogeneic sera. To address these aims, we cultured three lineages of stem cells in media supplemented with FCS in a concentration of 2% + growth factors; human blood plasma and platelet-rich plasma in concentrations of 2% + growth factors, and 10%. Here, the xenogeneic cultivation was considered as a basis for comparison because this serum is commonly used in studies concerning ecto-mesenchymal stem cells. The study shows that multipotent ecto-mesenchymal SHED can be feasibly cultivated in media where the xenogeneic FCS is substituted by allogeneic platelet-rich plasma, considering the cultured cell proliferative and differentiation capacities. We have also proved that different sera impact the cultured cells' phenotype differently, which has major implications for previous and future stem cell research and regenerative therapy.
- MeSH
- buněčná diferenciace účinky léků MeSH
- chondrogeneze účinky léků MeSH
- dítě MeSH
- fenotyp MeSH
- kultivační média farmakologie MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- mezenchymální kmenové buňky cytologie MeSH
- neurogeneze účinky léků MeSH
- osteogeneze účinky léků MeSH
- předškolní dítě MeSH
- proliferace buněk účinky léků MeSH
- tvar buňky účinky léků MeSH
- viabilita buněk účinky léků MeSH
- vývoj svalů účinky léků MeSH
- zuby mléčné cytologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- předškolní dítě MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
The aim of this study was to compare the isolation systems OptraDam® Plus and OptiDam™ with the conventional rubber dam in terms of objective and subjective parameters. The isolation systems were applied during the dental treatment of the patients. The time of preparation, placement, presence and removal were measured and the quality of isolation was evaluated. The median time of rubber dam placement was 76 s (Q1=62 s; Q3=111.25 s). The application time of OptraDam® Plus was significantly longer compared to the other systems (P ® plus. The results presented in this study could guide clinicians for choosing the most appropriate isolation system.
- MeSH
- design vybavení MeSH
- dospělí MeSH
- gumové blány * MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mladý dospělý MeSH
- senioři MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mladý dospělý MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- srovnávací studie MeSH