Persteril 36 is a disinfectant with a broad spectrum of antimicrobial activity. Because of its bactericidal, virucidal, fungicidal, and sporicidal effectiveness, it is used as a disinfectant against biological warfare agents in the emergency and army services. In case of an attack with potentially harmful biological agents, a person's gear or afflicted skin is sprayed with a diluted solution of Persteril 36 as a precaution. Subsequently, the remains of the biological agents are analyzed. However, the question remains concerning whether DNA can be successfully analyzed from Persteril 36-treated dead bacterial cells. Spore-forming Bacillus subtilis and Gram-negative Pseudomonas aeruginosa and Xanthomonas campestris were splattered on a camouflage suit and treated with 2 or 0.2 % Persteril 36. After the disinfectant vaporized, the bacterial DNA was extracted and quantified by real-time PCR. A sufficient amount of DNA was recovered for downstream analysis only in the case of spore-forming B. subtilis treated with a 0.2 % solution of Persteril 36. The bacterial DNA was almost completely destroyed in Gram-negative bacteria or after treatment with the more concentrated solution in B. subtilis. This phenomenon can lead to false-negative results during the identification of harmful microorganisms.
- MeSH
- Bacillus subtilis genetika izolace a purifikace MeSH
- biologické bojové látky * MeSH
- dekontaminace metody MeSH
- dezinficiencia metabolismus MeSH
- diagnostické techniky molekulární metody MeSH
- DNA bakterií analýza izolace a purifikace MeSH
- fixní kombinace léků MeSH
- kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
- kyselina peroctová metabolismus MeSH
- kyseliny sírové metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- peroxid vodíku metabolismus MeSH
- Pseudomonas aeruginosa genetika izolace a purifikace MeSH
- senzitivita a specificita MeSH
- teoretické modely MeSH
- Xanthomonas campestris genetika izolace a purifikace MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Similar to lipopolysaccharide (LPS), a product of Gram-negative bacteria, the signal macromolecules of Gram-positive bacteria lipoteichoic acid (LTA) and peptidoglycan (PGN) possess multiple biological activities. They may be a source of misinterpretation of experimental findings. We have found that not only LPS but also LTA and PGN can be detected by the Limulus amebocyte lysate (LAL) assay. All of them stimulate the high output in vitro nitric oxide (NO) production of in rat peritoneal cells. The onset of the NO enhancement was observed with 25-100pg/ml of LPS and 25-100ng/ml of PGN and LTA. Polymyxin B (PMX), if applied at concentration 10,000-fold higher than that of LPS, can completely inhibit the NO and LAL binding responses of LPS. The NO-stimulatory and LAL-binding properties of LTA and PGN are not eliminated by PMX. Handling of LPS contamination with PMX may be associated with serious problems because it possesses intrinsic biological activity and becomes cytotoxic at concentration >25μg/ml. The present findings suggest a convenient alternative avoiding these issues. As monitored by the NO and LAL assays, even high amounts of LPS as well as PGN and LTA can be removed by molecular mass cutoff microfiltration. All types of the filters (3kDa to 100kDa) are equally effective. It is suggested that the microfiltration procedure may be considered as a preferable, general and easy method of sample decontamination.
- MeSH
- Bacillus subtilis chemie izolace a purifikace MeSH
- buněčné linie MeSH
- centrifugace MeSH
- Escherichia coli chemie izolace a purifikace MeSH
- filtrace * MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kyseliny teichoové analýza MeSH
- Limulus test * MeSH
- lipopolysacharidy analýza MeSH
- myši inbrední C57BL MeSH
- myši MeSH
- oxid dusnatý biosyntéza metabolismus MeSH
- peptidoglykan analýza MeSH
- potkani Wistar MeSH
- viabilita buněk MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- myši MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Po dobu jednoho roku (červenec 2010 až srpen 2011) bylo prováděno 1krát měsíčně monitorování mikrobiální kontaminace vnitřního vzduchu v prostorech transplantační jednotky – oddělení 5C, Hemato-onkologické kliniky FN Olomouc. Cílem studie bylo zjištění bakteriální kontaminace ve vnitřním vzduchu. Bylo vytipováno 20 odběrových míst a celkem bylo provedeno 240 odběrů vnitřního vzduchu. Jednalo se o aktivní nasávání 100 litrů vnitřního vzduchu aeroskopem MAS-100. Naměřené hodnoty teploty vnitřního vzduchu byly stabilní. Hodnoty relativní vlhkosti se pohybovaly v rozmezí od minimální hodnoty cca 17 % po maximální hodnotu cca 68 %. Nejvyšší průměrná hodnota mikrobiální kontaminace vnitřního vzduchu byla zjištěna v místnosti „vstupní filtr personálu“ (1170 CFU/m3). Nejnižší mikrobiální kontaminace vnitřního vzduchu (150–250 CFU/m3) byla naměřena na izolačních boxech pacientů. Nejčastěji izolovanými bakteriálními kmeny byly koaguláza-negativní stafylokoky, které tvořili 94,3 % všech zachycených bakteriálních kmenů. Druhým nejčastěji izolovaným kmenem byl Micrococcus spp., který tvořil 67 % všech izolovaných kmenů a Bacillus subtilis (11 %). Je možné předpokládat, že zdrojem izolovaných bakteriálních kmenů ve vnitřním ovzduší jsou pacienti a personál. Jedná se o bakteriální kmeny řazené mezi podmíněně patogenní, přesto se mohou u hemato-onkologických pacientů stát původci nemocničních infekcí.
For one year (August 2010 to July 2011), microbial contamination of the indoor air in the Transplant Unit of the Haemato-Oncology Clinic, Olomouc University Hospital was monitored monthly. Twenty sampling sites were singled out and a total of 240 indoor air samples were collected. An MAS-100 air sampler (Merck, GER) was used, air flow rate of 100 liters per minute, 1 minute. The measured values of indoor air temperature were stable. The relative air humidity ranged from 17% to 68%. The highest average value of microbial air contamination was found in the "staff entry room" (1170 CFU/m3). The lowest microbial air contamination (150–250 CFU/m3) was measured in the patient isolation units. The most frequently isolated bacterial strains were coagulase-negative staphylococci (94.3%), followed by Micrococcus spp. (67%) and Bacillus subtilis (11%). It can be assumed that the source of these airborne bacterial strains are both patients and medical staff. They are classified as opportunistic pathogens and as such can cause hospital infections among haemato-oncology patients.
- Klíčová slova
- nemocniční prostředí, riziko infekce, koaguláza-negativní stafylokoky, hemato-onkologičtí pacienti, čisté prostory,
- MeSH
- Bacillus subtilis izolace a purifikace MeSH
- epidemiologické monitorování MeSH
- infekce spojené se zdravotní péčí prevence a kontrola MeSH
- izolace pacientů MeSH
- jednotky intenzivní péče MeSH
- Micrococcus izolace a purifikace MeSH
- mikrobiologie vzduchu * MeSH
- prostředí kontrolované * MeSH
- Staphylococcus izolace a purifikace MeSH
- teplota MeSH
- transplantace * MeSH
- vlhkost MeSH
- znečištění vzduchu ve vnitřním prostředí statistika a číselné údaje MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
Bacillus subtilis, a Gram-positive bacterium commonly found in soil, is an excellent model organism for the study of basic cell processes, such as cell division and cell differentiation, called sporulation. In B. subtilis the essential genetic information is carried on a single circular chromosome, the correct segregation of which is crucial for both vegetative growth and sporulation. The proper completion of life cycle requires each daughter cell to obtain identical genetic information. The consequences of inaccurate chromosome segregation can lead to formation of anucleate cells, cells with two chromosomes, or cells with incomplete chromosomes. Although bacteria miss the classical eukaryotic mitotic apparatus, the chromosome segregation is undeniably an active process tightly connected to other cell processes as DNA replication and compaction. To fully understand the chromosome segregation, it is necessary to study this process in a wider context and to examine the role of different proteins at various cell life cycle stages. The life cycle of B. subtilis is characteristic by its specific cell differentiation process where, two slightly different segregation mechanisms exist, specialized in vegetative growth and in sporulation.
- MeSH
- Bacillus subtilis genetika izolace a purifikace MeSH
- chromozomální proteiny, nehistonové genetika izolace a purifikace MeSH
- financování organizované využití MeSH
- grampozitivní sporulující bakterie genetika izolace a purifikace růst a vývoj MeSH
- histony genetika izolace a purifikace MeSH
- rac proteiny vázající GTP genetika izolace a purifikace MeSH
- segregace chromozomů genetika MeSH
- translokace genetická genetika MeSH
Lateral heterogeneity in the cytoplasmic membrane of Bacillus subtilis was found by using density gradient centrifugation. Crude membranes (CM) present in the whole cell lysate were separated into three fractions of increasing density (F, CI, CII). Substantial difference exists in the amount of protein recovered from these fractions, the relative ratio being 15 : 35 : 50. The qualitative protein composition (by SDS-PAGE) of the fractions varies markedly as well. The lipid components extracted from the fractions are also distributed in different proportions, viz. 40 : 40 : 20. The spectrum of fatty acids (FA), detected in lipids of F fraction and analyzed by GC-MS exhibits the same profile as that found in CM; in contrast, fractions CI and CII undergo extensive FA reconstruction. Thermotropic behavior of fractions measured by the steady-state fluorescence anisotropy of 1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene indicates significant variations of microviscosity (r(s)) within the F, CI and CII fractions. The protein-to-lipid ratio plays evidently a key role in affecting the physical state of the cytoplasmic membrane. Microdomains of different density coexist in the membrane and exhibit heterogeneity in both chemical composition and "physical state"; the increased de novo synthesis of FA induced by the cold exclusively in fractions CI and CII indicates correlation with an altered physiological state of bacterial metabolism.
- MeSH
- Bacillus subtilis izolace a purifikace růst a vývoj MeSH
- chromatografie plynová metody využití MeSH
- cytoplazmatické struktury chemie mikrobiologie MeSH
- elektroforéza v polyakrylamidovém gelu metody využití MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- fluorescenční polarizace metody využití MeSH
- membránové lipidy chemie izolace a purifikace MeSH
- membránové mikrodomény chemie mikrobiologie MeSH
- membránové proteiny chemie izolace a purifikace MeSH
- MeSH
- antibakteriální látky farmakologie MeSH
- Bacillus subtilis izolace a purifikace MeSH
- biotest MeSH
- Entamoeba histolytica účinky léků MeSH
- Mycobacterium tuberculosis účinky léků MeSH
- Streptomyces izolace a purifikace MeSH
- techniky in vitro MeSH
- Trichomonas účinky léků MeSH
- Vibrio účinky léků MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
