• MeSH
• elektroforéza kapilární metody   přístrojové vybavení   využití   MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu metody   přístrojové vybavení   využití   MeSH
• elektroforéza metody   využití   MeSH
• imunoglobulinové izotypy MeSH
• imunoglobuliny - kappa-řetězce MeSH
• kryoglobuliny MeSH
• lehké řetězce imunoglobulinů * analýza   krev   moč   MeSH
• lidé MeSH
• těžké řetězce imunoglobulinů * analýza   krev   moč   MeSH
• Waldenströmova makroglobulinemie * diagnóza   klasifikace   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

Gastric mucins are high molecular weight extracellular glycoproteins that play a major role in the protection of the gastrointestinal tract and besides that they are also involved in many disease processes. In the present study, size exclusion chromatography under non-degrading conditions was used to study the fragmentation pattern of native gastric mucins. The samples of gastric mucins of different origin obtained by an extraction of gastric mucosa with Tris-HCl buffer, pH 7.3 were separated using size exclusion chromatography on Sephadex G-100. While samples of rat gastric mucins are characterized by the presence of only high-molecular weight fraction of glycoproteins, fragmented mucin components in non-denaturated samples were observed in canine and human gastric mucins. Differences in the fragmentation pattern were observed in patients with ulcer diseases and gastric cancer. Degradation products of mucins were also detected using polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of SDS.

• MeSH
• chromatografie metody   přístrojové vybavení   využití   MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu metody   využití   MeSH
• experimenty na lidech MeSH
• experimenty na zvířatech MeSH
• financování organizované MeSH
• glykoproteiny chemie   izolace a purifikace   metabolismus   MeSH
• glykosylace MeSH
• klinické laboratorní techniky využití   MeSH
• krysa rodu rattus MeSH
• lidé MeSH
• nádory žaludku MeSH
• psi MeSH
• žaludeční muciny chemie   izolace a purifikace   metabolismus   MeSH
• žaludeční vředy MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• krysa rodu rattus MeSH
• lidé MeSH
• psi MeSH
• zvířata MeSH

Řada pacientů alergických na pyl břízy v oblastech střední a severní Evropy trpí po požití čerstvých jablek projevy orálního alergického syndromu. Tento typ alergické reakce na jablka způsobuje zkřížená reaktivita IgE protilátek mezi hlavním alergenem břízy Bet v 1 a hlavním alergenem jablka Mal d 1. Je známo, že závažnost alergické reakce na jablka závisí nejen na specifické senzibilizaci pacienta, ale je závislá i na jablečné odrůdě. Výběr jablečných odrůd se sníženým obsahem Mal d1 může přispět ke snížení rizika vzniku klinických potíží u polinotiků s alergickou reakcí na jablka a může pomoci se zařazením některých jablek do stravy. U pacientů s prokázanou alergií na jablka byla hodnocena alergenicita vybraných 17 odrůd jablek kožními testy metodou prick to prick. Pro laboratorní vyšetření, test aktivace bazofilů, byla použita vylisovaná jablečná šťáva. Intenzita alergické reakce na jednotlivé odrůdy byla potvrzena SDS-PAGE elektroforézou a imunitní reakcí krevního séra metodou Western blot. V naší práci jsme potvrdili, že různé odrůdy jablek obsahují odlišné množství alergenu Mal d1. U odrůd Boskoopské, Florina, Topaz a Angold byla prokázána nejnižší reaktivita, lze je zařadit mezi kultivary s nízkou alergenicitou. Nejvyšší alergenicita byla zjištěna u odrůd Hetlina a Resista.

Many birch pollen sensitized patients in Central and Northern Europe suffer from oral allergy symptoms after eating fresh apples. This type of apple allergy is caused by cross reactivity of IgE antibodies against the major birch pollen allergen Bet v 1 with Mal d 1. It is known, that severity of allergic reaction to apples was not only related to the specific sensitivity of the individual, but also largely depended on the apple cultivar. Selection of apple cultivars could help for reduction of symptoms in patient with birch pollen-apple allergy and might offer Mal d1 reactive patients a safe way to reintroduce apples to their diets. Using 17 selected apple cultivars, the allergenicity was studied by prick to prick tests in patients. Pressed apple juice was used for laboratory evaluation, basophil activation test. Intensity of patient’s allergic reaction to particular cultivars was confirmed by SDS-PAGE electrophoresis and immunity reaction of blood serum by Western blot method. We demonstrated, that different cultivars of apples have different amount of Mal d 1. Cultivars Boskoop, Florina, Topaz and Angold were classified as cultivars with low allergenicity. Hetlina and Resista apples showed the highest allergenicity.

• Klíčová slova
• jablečné odrůdy, Mal d 1, prick to prick, BAT, immunoblotting,
• MeSH
• antigeny rostlinné izolace a purifikace   škodlivé účinky   MeSH
• bazofily imunologie   účinky léků   MeSH
• bříza imunologie   škodlivé účinky   MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu metody   využití   MeSH
• financování organizované MeSH
• hodnotící studie jako téma MeSH
• kožní testy metody   využití   MeSH
• lidé MeSH
• ovoce škodlivé účinky   účinky léků   MeSH
• potravinová alergie diagnóza   MeSH
• pyl imunologie   škodlivé účinky   MeSH
• statistika jako téma MeSH
• western blotting metody   využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Capillary gel electrophoresis (CGE) is a promising proteomic technique. It involves many parameters which can be manipulated to optimize the CGE method for particular application, first of all the type of separation gel. Physical gels possess certain advantages over the chemical ones. Not being covalently crosslinked, physical gels exhibit lower viscosity; they are not chemically bonded to the inner capillary wall. Physical gels can readily be replaced after each analysis, which eliminates the problem of gel contamination and degradation during analysis. This fact leads to higher reproducibility of measurements and prolongs the capillary lifetime. In this review, applications of some common physical gels, both synthetic and natural, are described and their advantages and drawbacks are critically evaluated. Attention is paid especially to absorption of physical gels in the UV region, which may limit spectrophotometric detection of analytes to a great extent. The methods for suppression of protein adsorption on the inner capillary wall like static and dynamic coatings as well as separations under acid conditions are also discussed.

• MeSH
• ektroforéza na škrobovém gelu využití   MeSH
• elektroforéza kapilární metody   využití   MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu využití   MeSH
• proteiny analýza   MeSH

Východisko. Familiární adenomatózní polypóza je autozomálně dominantně dědičné onemocnění charakterizované predispozicí ke vzniku polypů v tlustém střevě a v rektu a ke kolorektálnímu karcinomu. Příčinou onemocnění jsou zárodečné mutace v genu APC. Cílem studie bylo stanovit frekvenci jednonukleotidové substituce c.645+32C>T v intronu 5 genu APC u pacientů s mnohočetnou střevní polypózou a v obecné populaci a pokusit se objasnit, zda je tato substituce nepatogenním polymorfismem (tj. populační variantou) nebo onemocnění způsobující mutací. Metody a výsledky. Frekvence substituce c.645+32C>T v genu APC byla studována v souboru 170 pacientů s fenotypem familiární adenomatózní polypózy nebo její atenuované formy metodou denaturační gradientové gelové elektroforézy a přímou sekvenací. Dále byla frekvence této substituce vyšetřena u souboru 200 neonkologických pacientů pomocí metody alelické specifické polymerázové řetězové reakce. Substituce c.645+32C>T byla zjištěna u 27 ze 170 pacientů s mnohočetnou střevní polypózou (tj. 15,9 %) a dále u 32 z 200 pacientů v kontrolní skupině (tj. 16 %). Rozdíl ve výskytu substituce mezi pacienty s polypózou a kontrolní skupinou nebyl statisticky významný (p = 0,979; test chí-kvadrát). Závěry. Jednonukleotidová substituce c.645+32C>T v intronu 5 genu APC je nepatogenním polymorfismem, tedy populační variantou, která se vyskytuje přibližně u 16 % české populace

Background. Familial adenomatous polyposis is an autosomal dominant disease characterised by predisposition to colon polyposis and colorectal cancer and caused by germline mutations in the APC gene. The aim of the study was to establish the frequency of c.645+32C>T substitution in intron 5 of the APC gene in patients with multiple colon polyposis and in the general population and to determine if this substitution is a nonpathogenic polymorphism or a pathogenic mutation associated with multiple polyposis coli. Methods and Results. The frequency of c.645+32C>T substitution in the APC gene was established in 170 patients with the clinical phenotype of familial adenomatous polyposis or its attenuated form using denaturating gradient gel electrophoresis and direct sequencing. We tested a population of 200 noncancer persons using allelic specific polymerase chain reaction. The c.645+32C>T substitution was detected in 27 of 170 patients with multiple colon polyposis (i.e. 15.9%). The substitution was found in 32 of 200 control persons, i.e. in 16%. The difference between patients with polyposis and the control group was not statistically significant (p = 0.979; chí-square test). Conclusions. Our results suggest that the c.645+32C>T substitution is a non-pathogenic single nucleotide polymorphism appearing in about 16% of the Czech population.

• MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu metody   využití   MeSH
• familiární adenomatózní polypóza etiologie   genetika   patologie   MeSH
• financování organizované MeSH
• geny APC MeSH
• jednonukleotidový polymorfismus genetika   imunologie   MeSH
• mutace genetika   imunologie   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   využití   MeSH

• MeSH
• aminokyseliny sírové metabolismus   MeSH
• Caenorhabditis elegans enzymologie   metabolismus   MeSH
• cysteinsynthasa biosyntéza   izolace a purifikace   MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu metody   využití   MeSH
• hmotnostní spektrometrie metody   využití   MeSH
• vztahy mezi strukturou a aktivitou MeSH

Lastovičník väčší podobne ako iné rastliny z čeľade Papaveraceae produkuje benzylizochinolínové alkaloidy, predovšetkým benzofenantridíny. Polyfenoloxidáza (PPO) je pravdepodobne zapojená do tvorby dopamínu, ktorý je jedným z prekurzorov norkoklaurínu, prvého intermediátu s benzylizochinolínovou štruktúrou. V rámci práce bolo zistené, že PPO prítomná v latexe lastovičníka je lokalizovaná v organelách, ktoré slúžia k uskladneniu alkaloidov (tzv. 1000 g organely). Enzým bol purifikovaný afinitnou chromatografiou do elektroforetickej homogenity, má relatívnu molekulovú hmotnosť približne 65 kDa a vykazuje dve aktivity – monofenolázovú a difenolázovú. Použitím polymerázovej reťazovej reakcie sa podarilo amplifikovať časť génu PPO z oblasti aktívneho miesta.

Greater celandine, similarly as other plants of the family Papaveraceae, produces benzylisoquinoline alkaloids, primarily benzophenanthridines. Polyphenoloxidase (PPO) is most probably involved in the formation of dopamine, which is one of the precursors of norcoclaurine, the first intermediate with the benzylisoquinoline structure. This study has revealed that PPO present in the latex of greater celandine is localized in the organelles, which serve to store alkaloids (the so-called 1000 g organelles). The enzyme was purified by means of affinity chromatography into electrophoretic homogeneity. It possesses a relative molecular mass of approximately 65 kDa and exerts two activities, the monophenolase and diphenolase ones. With the use of a polymerase chain reaction, it was possible to amplify a part of the PPO gene from the region of the active site.

• MeSH
• alkaloidy chemie   izolace a purifikace   MeSH
• Chelidonium chemie   MeSH
• chromatografie afinitní metody   využití   MeSH
• dopamin chemie   MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu metody   využití   MeSH
• fenoly chemie   MeSH
• financování organizované MeSH
• latex chemie   MeSH
• lidé MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

We have analyzed the influence of altered thyroid hormone levels on changes of MyHC protein isoforms and their mRNA transcripts in the soleus muscle of 2-, 4- and 7-month-old euthyroid (EU), hypothyroid (HY) and hyperthyroid (TH) female inbred Lewis strain rats (methimazole and T3 treatment started 3 to 4 weeks after birth). We have found that the content of the dominant MyHC 1 isoform gradually increased in the EU rats and that this increase was more progressive in the HY rats at all three stages. On the other hand, in the TH rats the content of MyHC 1 isoform was the highest in the 2-month-old rats and it decreased with an increasing length of T3 treatment. The content of the minor 2a MyHC isoform followed the opposite pattern. In contrast to the protein isoforms, the MyHC mRNA transcripts remained at similar levels. Nevertheless, in general, the MyHC 1 mRNA level was decreased and MyHC 2a transcript increased in the TH rats, while the opposite changes occurred in the HY rats. Our results thus suggest that in the rat soleus muscle, both increased and decreased levels of thyroid hormones speed up the formation of an adult slow phenotype which is demonstrated by the precocious appearance of the slow MyHC 1 isoform, but opposite to the hypothyroid status, a longer T3 application promotes the expression of the faster MyHC 2a isoform.

• MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu metody   využití   MeSH
• financování organizované využití   MeSH
• hormony štítné žlázy fyziologie   metabolismus   MeSH
• kosterní svaly enzymologie   růst a vývoj   MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí metody   využití   MeSH
• potkani inbrední LEW růst a vývoj   MeSH
• protein - isoformy účinky léků   MeSH
• těžké řetězce myosinu účinky léků   MeSH

MMP-2 and MMP-9 play a significant role in the development of numerous diseases mainly with the inflammatory pathogenesis. One of the drugs exerting an effect on metalloproteinases is IFN-beta. Previous studies showed that IFN beta-1b can decrease MMP synthesis and moreover inhibit their proteolytic activity. The aim of our study was to analyse the influence of recombinant IFN beta-1a (identical with natural IFN-beta) on MMP-2 and MMP-9 activities. The gelatinolytic activity was evaluated with zymography in sera obtained from 10 healthy donors. After electrophoresis gels were incubated with or without IFN beta-1a (2000 U/ml) for 18 h. We noticed a significant decrease of MMP-2/72 kDa (P = 0.0283) and the augmentation of MMP-9/92 kDa (P = 0.0042) activities after incubation with interferon. The elevation of MMP-9/92 kDa activity suggests that IFN beta-1a can exhibit proinflammatory features besides well-known anti-inflammatory properties.

• MeSH
• centrální nervový systém fyziologie   imunologie   MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu metody   využití   MeSH
• interferon beta chemie   imunologie   MeSH
• interpretace statistických dat MeSH
• magnetická rezonanční tomografie metody   využití   MeSH
• matrixová metaloproteinasa 2 chemie   imunologie   MeSH
• matrixová metaloproteinasa 9 chemie   imunologie   MeSH
• roztroušená skleróza farmakoterapie   MeSH

The prtP-prtM intergenic region of Lactobacillus paracasei subsp. paracasei BGHN 14 was cloned and sequenced. The nucleotide sequence of the prtP-prtM intergenic region in BGHN 14, containing divergently orientated P(prtP) and P(prtP) promoters, was shorter by 35 bp in comparison with that in lactococci. The nucleotide sequence involved in casitone-dependent transcriptional regulation of the lactococcal prt genes was not found in the BGHN14. The activity of P(prtM) in L. lactis NZ9000 was very low and insignificantly changed in the presence of casitone, whereas P(prtP) was completely inactive. When L. casei ATCC393(T) was used as host, both P(prtP) and P(prtM) were active and strongly regulated by casitone. The results strongly indicate that the mechanisms of the casitone-dependent regulation of the prt genes in BGHN14 and lactococci are different.

• MeSH
• elektroforéza v polyakrylamidovém gelu využití   MeSH
• financování organizované využití   MeSH
• kaseiny genetika   MeSH
• Lactobacillus genetika   růst a vývoj   MeSH
• plazmidy genetika   MeSH
• polymerázová řetězová reakce využití   MeSH
• promotorové oblasti (genetika) imunologie   účinky záření   MeSH
• regulace genové exprese imunologie   účinky záření   MeSH
• sekvenční analýza metody   využití   MeSH