INTRODUCTION: Rat mesenchymal stem cells (rMSCs) labeled with 1) poly-l-lysine-coated superparamagnetic iron oxide nanoparticles or 2) silica-coated cobalt-zinc-iron nanoparticles were implanted into the left brain hemisphere of rats, to assess their effects on the levels of oxidative damage to biological macromolecules in brain tissue. METHODS: Controls were implanted with unlabeled rMSCs. Animals were sacrificed 24 hours or 4 weeks after the treatment, and the implantation site along with the surrounding tissue was isolated from the brain. At the same intervals, parallel groups of animals were scanned in vivo by magnetic resonance imaging (MRI). The comet assay with enzymes of excision DNA repair (endonuclease III and formamidopyrimidine-DNA glycosylase) was used to analyze breaks and oxidative damage to DNA in the brain tissue. Oxidative damage to proteins and lipids was determined by measuring the levels of carbonyl groups and 15-F2t-isoprostane (enzyme-linked immunosorbent assay). MRI displayed implants of labeled cells as extensive hypointense areas in the brain tissue. In histological sections, the expression of glial fibrillary acidic protein and CD68 was analyzed to detect astrogliosis and inflammatory response. RESULTS: Both contrast labels caused a similar response in the T2-weighted magnetic resonance (MR) image and the signal was clearly visible within 4 weeks after implantation of rMSCs. No increase of oxidative damage to DNA, lipids, or proteins over the control values was detected in any sample of brain tissue from the treated animals. Also, immunohistochemistry did not indicate any serious tissue impairment around the graft. CONCLUSION: Both tested types of nanoparticles appear to be prospective and safe labels for tracking the transplanted cells by MR.

• MeSH
• ELISA MeSH
• isoprostany analýza   metabolismus   MeSH
• kobalt chemie   MeSH
• kovové nanočástice aplikace a dávkování   chemie   toxicita   MeSH
• magnetická rezonanční tomografie metody   MeSH
• mezenchymální kmenové buňky chemie   MeSH
• mozek diagnostické zobrazování   účinky léků   metabolismus   MeSH
• oxid křemičitý chemie   MeSH
• potkani inbrední LEW MeSH
• prospektivní studie MeSH
• tkáňové extrakty MeSH
• transplantace mezenchymálních kmenových buněk * MeSH
• železité sloučeniny chemie   MeSH
• železo chemie   MeSH
• zinek chemie   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• mužské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Development of a standardized methodology for the collection and exact analysis of exhaled breath condensate with the emphasis on the reliable recording of a number of parameters potentially affecting the validity of the acquired concentration levels ofarachidonic acid derivatives (leukotriene ? LTB4, cysteinyl LTC4, LTD4, LTE4, 8-isoprostane). Within the framework of the project, optimal technical and analytical conditions will be assessed during the determinations of LT in different day and year periods, different climatic conditions and environmental air pollution. Markers will be studied both in healthy volunteers and subjects with allergic diseases (bronchial asthma, allergic rhinitis). Analytic methodology will consist of biomarker isolation from a complex biological matrix, followed by a highly selective and sensitive detection method based on mass spectrometry, enabling to identify and quantify biomarkers at the concentration levels in picograms in a milliliter of the biological matrix.

Vyvinutí standardizované metodiky odběru a analýzy kondenzátu vydechovaného vzduchu a moče s důrazem na studium řady parametrů, které mohou ovlivnit validitu markerů ze skupiny metabolitů arachidonové kyseliny (8-isoprostan, leukotrien LTB4, cysteinylovéleukotrieny LTC4, LTD4, LTE4). V rámci studie budou neinvazivní metodou při stanovení markerů v různých denních i ročních obdobích, za různých klimatických podmínek i kontaminace venkovního ovzduší u zdravých dobrovolníků a osob s alergickými nemocemi (astma bronchiale, alergická rýma) zjišťovány optimální technické i analytické podmínky, zaručující standardizaci získaných výsledků. Analytická část bude využívat kombinace izolace biomarkeru z komplexní biologické matrice, případně jeho zkoncentrování,s následnou vysoce selektivní a citlivou detekční metodou na principu hmotnostní spektrometrie, která dovoluje identifikovat a kvantifikovat biomarkery v koncentracích na úrovni pikogramů v mililitru biologické matrice.

• MeSH
• biologické markery MeSH
• bronchiální astma diagnóza   MeSH
• celoroční alergická rýma diagnóza   MeSH
• dechové testy MeSH
• hmotnostní spektrometrie MeSH
• isoprostany analýza   krev   moč   MeSH
• klimatické změny MeSH
• klinické laboratorní techniky MeSH
• leukotrieny analýza   krev   moč   MeSH
• referenční standardy MeSH
• sezónní alergická rýma diagnóza   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• pneumologie a ftizeologie
• biochemie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Finding optimal method for the analysis of 8-isoprostane and leukotriene B4 in exhaled breath condensate using combination of highly sensitive methods - liquid chromatography, ionisation electrospraying and tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS-MS). Determination of 8-isoprostane as a marker of oxidant stress in exhaled breath condensate in patients with silicosis, diseases due to asbestos and healthy volunteers. Determination of leukotriene B4 as a marker of inflammation in exhaled breath condensate in patients with silicosis, diseases due to asbestos and healthy volunteers. Evaluation of the use of the markers in the differential diagnostics of lung diseases and in the early diagnostics of oxidant stress and inflammation in the respiratory system.

Nalezení optimální metody pro analýzu 8-izoprostanu a leukotrienu B4 v kondenzátu vydechovaného vzduchu pomocí kombinace vysoce citlivých metod -kapalinové chromatografie, ionizace elektrosprejem a tandemové hmotnostní spektrometrie (LC-ESI-MS-MS). Stanovování 8-izoprostanu jako markeru oxidativního stresu v kondenzátu vydechovaného vzduchu u pacientů se silikózou, azbestózou a zdravých dobrovolníků. Stanovování leukotrienu B4 jako markeru zánětu v kondenzátu vydechovaného vzduchu u pacientů se silikózou, azbestózou a zdravých dobrovolníků. Zhodnocení možnosti využití markerů v diferenciální diagnostice plicních onemocnění a k časné diagnostice oxidativního stresu a zánětu v oblasti respiračního systému.

• MeSH
• azbestóza diagnóza   MeSH
• biologické markery MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• isoprostany analýza   MeSH
• klinické laboratorní techniky metody   využití   MeSH
• leukotrien B4 analýza   MeSH
• oxidační stres MeSH
• pneumokonióza MeSH
• silikóza diagnóza   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• pneumologie a ftizeologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR