Peritoneal dialysis (PD) is one of the methods of renal replacement therapy. The continuous exposure of peritoneal membrane to bio-incompatible PD solutions leads to the development of morphological and functional abnormalities of the peritoneum. Permanent stimulation of peritoneum results in increased expression of genes encoding proteins involved in inflammation and tissue remodeling. This leads in release of cytokines, pro-inflammatory, pro-fibrotic and growth factors, which are present in peritoneal effluent of PD patients and contribute to peritoneal fibrosis and neoangiogenesis. In addition, this process leads to alterations of peritoneal membrane and is one of the main causes of membrane failure. The aim of the study is to demonstrate a difference in peritoneal expression of genes involved in activation of pro-inflammatory and pro-fibrotic pathways between short- and longterm PD patients. Furthermore, to analyse the relationship between gene expression, effluent cytokines, growth factors level on one hand and solute and fluid transport parameters changes on the other.

Peritoneální dialýza (PD) je významnou metodou chronické náhrady funkce ledvin. V důsledku dlouhodobé expozice peritoneální membrány bio-inkompatibilním dialyzačním roztokům dochází k morfologickým a funkčním změnám peritonea ovlivňujícím úspěch léčby. Odpovědí na neustálou stimulaci peritonea je zvýšená exprese některých genů kódujících proteiny účastnící se zánětu a remodelace tkáně vedoucí k uvolňování cytokinů, růstových faktorů a dalších zánětlivých působků, nacházejících se v dialyzátu peritoneálně dialyzovaných pacientů a podílejících se na peritoneální fibroze a angiogenezi. To vše přispívá k alteraci peritoneální membrány a je jednou z hlavních příčin jejího selhání. Cílem projektu je sledovat rozdíl mezi peritoneální expresí genů aktivujících alteraci cytokinů, růstových faktorů mezi krátkodobě a dlouhodobě léčenými PD pacienty. Dále analyzovat vztah mezi mezi peritoneální expresí genů, hladinou cytokinů, růstových faktorů, zánětlivých působků a časovým vývojem změn transportu solutů a tekutin přes peritoneální membránu v závislosti na délce trvání PD léčby.

• MeSH
• cytokiny genetika   MeSH
• dialyzační roztoky škodlivé účinky   MeSH
• exprese genu MeSH
• mezibuněčné signální peptidy a proteiny genetika   MeSH
• peritoneální dialýza škodlivé účinky   MeSH
• permeabilita buněčné membrány genetika   účinky léků   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• genetika, lékařská genetika
• nefrologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Long-term peritoneal dialysis (PD) is associated with functional and structural alterations of the peritoneal membrane. Inflammation may be the key moment, and, consequently, fibrosis may be the end result of chronic inflammatory reaction. The objective of the present study was to identify genes involved in peritoneal alterations during PD by comparing the transcriptome of peritoneal cells in patients with short- and long-term PD. Peritoneal effluent of the long dwell of patients with stable PD was centrifuged to obtain peritoneal cells. The gene expression profiles of peritoneal cells using microarray between patients with short- and long-term PD were compared. Based on microarray analysis, 31 genes for quantitative RT-PCR validation were chosen. A 4-h peritoneal equilibration test was performed on the day after the long dwell. Transport parameters and protein appearance rates were assessed. Genes involved in the immune system process, immune response, cell activation, and leukocyte and lymphocyte activation were found to be substantially upregulated in the long-term group. Quantitative RT-PCR validation showed higher expression of CD24, lymphocyte antigen 9 (LY9), TNF factor receptor superfamily member 4 (TNFRSF4), Ig associated-alpha (CD79A), chemokine (C-C motif) receptor 7 (CCR7), carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1 (CEACAM1), and IL-2 receptor-alpha (IL2RA) in patients with long-term PD, with CD24 having the best discrimination ability between short- and long-term treatment. A relationship between CD24 expression and genes for collagen and matrix formation was shown. Activation of CD24 provoked by pseudohypoxia due to extremely high glucose concentrations in dialysis solutions might play the key role in the development of peritoneal membrane alterations.

• MeSH
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• nemoci ledvin genetika   metabolismus   terapie   MeSH
• peritoneální dialýza * MeSH
• peritoneum * metabolismus   MeSH
• průřezové studie MeSH
• regulace genové exprese MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• transkriptom * MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Permanent irritation of the peritoneum during peritoneal dialysis (PD) treatment leads to local chronic inflammation and subsequently activation of processes driving fibrogenesis in the long-term. The aim of the study was to compare the peritoneal effluent transcriptome of 20 patients treated less and 13 patients treated more than 2 years using microarray analysis. An increased expression of genes associated with an immune response was observed in long-term treated patients with well preserved peritoneal function, when compared to patients treated less than 2 years. From 100 genes highly expressed in long-term patients, a significant up-regulation of six was found by RT-qPCR: LY9 (lymphocyte antigen 9), TNSFR4 (tumor necrosis factor receptor superfamily, member 4), CD 79A (CD79a molecule), CCR7 (chemokine C-C receptor 7), CEACAM1 (carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1) and IL2RA (interleukin 2 receptor alpha chain). Furthermore, the effluent cell population was analysed. A positive relationship between the number of granulocytes and NK cells on one hand, and duration of PD treatment on the other, was shown. We conclude, that the mechanisms of adaptive immunity promoting T helper 2 cells response are activated in the long-term before functional alterations develop. It consequently might trigger the fibrosis promoting processes.

• MeSH
• adaptivní imunita genetika   MeSH
• ascitická tekutina imunologie   metabolismus   MeSH
• časové faktory MeSH
• fibróza MeSH
• kontinuální ambulantní peritoneální dialýza škodlivé účinky   MeSH
• lidé MeSH
• nádory ledvin terapie   MeSH
• peritoneální dialýza škodlivé účinky   MeSH
• peritoneum imunologie   metabolismus   patologie   MeSH
• regulace genové exprese MeSH
• stanovení celkové genové exprese MeSH
• transkriptom MeSH
• výsledek terapie MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• srovnávací studie MeSH

• Klíčová slova
• cancer antigen 125,
• MeSH
• biologické markery * MeSH
• inhibitor aktivátoru plazminogenu 1 MeSH
• interleukin-6 MeSH
• lidé MeSH
• matrixové metaloproteinasy MeSH
• nemoci peritonea * diagnóza   MeSH
• peritoneální dialýza * škodlivé účinky   MeSH
• peritoneální fibróza diagnóza   etiologie   MeSH
• renální insuficience komplikace   terapie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

♦ BACKGROUND: Permanent stimulation of the peritoneum during peritoneal dialysis (PD) is likely to result in increased expression of genes encoding proteins involved in inflammation and tissue remodeling. Peritoneal fibrosis and neoangiogenesis may develop. ♦ OBJECTIVE: To assess highly expressed genes potentially in volved in peritoneal alterations during PD treatment using an animal model. ♦ METHODS: A PD catheter was implanted in 36 male Wistar rats after 70% nephrectomy. The rats were divided into 3 groups, exposed to dialysis solution for 8 weeks, and sacrificed 2 weeks later. Group B was exposed to a buffer, group D was exposed to a 3.86% glucose-based dialysis solution, and in group D+H, a second hit of intraperitoneal blood on top of the dialysis solution was given to induce the development of peritoneal sclerosis. Before sacrifice, peritoneal function was assessed. Omental tissue was obtained for analysis of gene expression using RT-qPCR. ♦ RESULTS: Fibrosis scores, vessel counts, and peritoneal function parameters were not different between the groups. Genes involved in the transforming growth factor beta signaling pathway, cell proliferation, angiogenesis, and inflammation were more expressed (p < 0.05) in the D+H group. Almost no differences were found between the control groups. We identified 4 genes that were related to peritoneal transport. ♦ CONCLUSION: Already a mid-term peritoneal exposure, when no microscopical and functional alterations are present, provokes activation of gene pathways of cell proliferation, fibrosis, neoangiogenesis, and inflammation.

• MeSH
• chronické selhání ledvin terapie   MeSH
• dialyzační roztoky farmakologie   MeSH
• genetická transkripce * MeSH
• imunohistochemie MeSH
• interval spolehlivosti MeSH
• jehlová biopsie MeSH
• krysa rodu rattus MeSH
• kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
• modely nemocí na zvířatech MeSH
• náhodné rozdělení MeSH
• nefrektomie metody   MeSH
• patologická angiogeneze genetika   MeSH
• peritoneální dialýza škodlivé účinky   metody   MeSH
• peritoneální fibróza genetika   patologie   MeSH
• potkani Wistar MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• krysa rodu rattus MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH