Průtoková cytometrie našla uplatnění jako analytická i diagnostická metoda v mnoha oblastech praktické medicíny i v základním a aplikovaném biomedicínském výzkumu. S postupujícím technickým pokrokem se její možnosti stále rozšiřují a jednoduché dvojbarevné a trojbarevné průtokové cytometry jsou stále častěji nahrazovány vysoce citlivými polychromatickými analyzátory či vysokorychlostními průtokovými třídiči buněk, které se používají při multiparametrické charakterizaci a třídění dobře definovaných buněčných subpopulací, včetně prekurzorů a progenitorů s minimálním zastoupením, a buněk kmenových. Polychromatická FCM se stala nenahraditelnou v klinické medicíně a v současné době se zvažuje její využití i v oblasti polního zdravotnického systému. Zde se tato metoda jeví jako velmi perspektivní zejména z biodozimetrického hlediska, a to např. pro stanovení zpětného odečtu obdržené dávky ionizujícího záření. Článek podává přehled nejběžnějších aplikací používaných v klinickém výzkumu i praxi, s možným rozšířením do oblasti vojenské medicíny.

Flow cytometry has proved a useful analytical and therapeutic technique in many fields of practical medicine as well as in basic and applied biomedical research. With ongoing technological development its potential permanently increases and simple, two- and three-color flow cytometers are being replaced by highly sensitive polychromatic analyzers and high speed sorters that are used for multiparametric characterization and sorting of well-defined cell subpopulations including precursors, progenitors and stem cells. Polychromatic flow cytometry has thus become an essential tool in clinical medicine and its use in the battlefield medical system is under consideration. In military healthcare this technique appears quite promising namely for biodosimetric purposes, e.g. for retrospective determination of the received dose of ionizing radiation. The paper brings an overview of most frequent applications used in clinical research and practice with possible ramifications to military medicine.

• MeSH
• chromozomální aberace účinky záření   MeSH
• financování organizované MeSH
• hematologie metody   trendy   MeSH
• imunofenotypizace metody   využití   MeSH
• lékařská onkologie metody   trendy   MeSH
• lidé MeSH
• průtoková cytometrie metody   přístrojové vybavení   trendy   MeSH
• radiobiologie metody   trendy   MeSH
• radiometrie metody   trendy   využití   MeSH
• transplantace metody   využití   MeSH
• vojenské lékařství metody   přístrojové vybavení   trendy   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

V současné době dochází k rychlému nárůstu nových poznatků v biomedicíně, který je mimo jiné umožněn neustálým vývojem kvantitativních a kvalitativních analytických metod. Tyto nové přístupy umožňují podrobné sledování dějů na buněčné a molekulární úrovni, a tak nacházejí své uplatnění v široké škále vědních oborů i klinické praxi. Závěry jimi získané jsou přínosem pro civilní i vojenskou medicínu. Jednou z progresivních metod, která dosáhla v posledních letech výrazného technologického rozvoje, je metoda průtokové cytometrie (flow cytometry, FCM). Ve své podstatě FCM představuje dnes již standardní přístup pro vysokorychlostní rozměrovou a typovou analýzu suspenzí částic, nejčastěji savčích buněk. Článek se zabývá principem a nejběžnějšími aplikacemi FCM.

Permanent development of qualitative and quantitative analytical methods has currently resulted in a fast increase of knowledge in biomedicine. Such new approaches have enabled very detailed observations of processes on the cellular and molecular level and thus become useful in both, research and clinical practice including military medicine. Flow cytometry (FCM) is one of the highly progressive techniques with considerable technological development. Nowadays FCM represents a standard approach for a high speed analysis of particle (mostly mammalian cells) suspensions in terms of size, internal complexity and subset composition. The article deals with principle and the most common FCM applications.

• MeSH
• biomedicínské technologie metody   trendy   MeSH
• financování organizované MeSH
• fluorescenční protilátková technika metody   přístrojové vybavení   využití   MeSH
• imunofenotypizace metody   přístrojové vybavení   trendy   MeSH
• leukocyty imunologie   klasifikace   MeSH
• lymfocyty imunologie   klasifikace   MeSH
• monoklonální protilátky klasifikace   terapeutické užití   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   trendy   využití   MeSH
• průtoková cytometrie metody   přístrojové vybavení   využití   MeSH

The ventricular septal defect (VSD) is a congenital lesion characterized by the presence of an opening between cardiac chambers. The treatment might involve medical therapy to control symptoms or in certain cases, surgical resuscitation might be required.Objectives: The study was conducted to establish a database about the prevalence and pattern of VSD and their prognosis in children referred to by echocardiography in Ibn-Sena Teaching Hospital over the period of March 2019 to January 2020. Method: The present study is a prospective descriptive study conducted on all patients diagnosed with cardiac lesions revealed by echocardiography. The sample included in the study involves newborns (day 1) to 14-years-old children.Result: Out of 500 children included in the study; most of these cases were cyanotic congenital heart lesions and out of which two-third were perimembranous defects.Conclusion: The study concluded a higher prevalence of non-cyanotic lesions and peri-membranous type is the commonest VSD lesion.

• MeSH
• defekty komorového septa * diagnóza   epidemiologie   MeSH
• dítě MeSH
• echokardiografie MeSH
• lidé MeSH
• prevalence MeSH
• prognóza MeSH
• prospektivní studie MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• lidé MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

A case of food-borne botulism occurred in Slovakia in 2015. Clostridium botulinum type A was isolated from three nearly empty commercial hummus tubes. The product, which was sold in Slovakia and the Czech Republic, was withdrawn from the market and a warning was issued immediately through the European Commission's Rapid Alert System for Food and Feed (RASFF). Further investigation revealed the presence of botulinum neurotoxin (BoNT) subtype BoNT/A3, a very rare subtype implicated in only one previous outbreak (Loch Maree in Scotland, 1922). It is the most divergent subtype of BoNT/A with 15.4% difference at the amino acid level compared with the prototype BoNT/A1. This makes it more prone to evading immunological and PCR-based detection. It is recommended that testing laboratories are advised that this subtype has been associated with food-borne botulism for the second time since the first outbreak almost 100 years ago, and to validate their immunological or PCR-based methods against this divergent subtype.

• MeSH
• botulismus diagnóza   epidemiologie   mikrobiologie   MeSH
• botulotoxiny typu A genetika   metabolismus   MeSH
• Clostridium botulinum typ A genetika   izolace a purifikace   MeSH
• epidemický výskyt choroby * MeSH
• lidé MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• Geografické názvy
• Česká republika MeSH
• Slovenská republika MeSH

Four mouse bone marrow or thymus cell populations, namely granulopoietic/monocytopoietic, erythropoietic, B-lymphopoietic, and T-lymphopoietic precursor cells have been assayed by RT-PCR technique for the presence and relative amounts of adenosine A(1), A(2a), A(2b), and A(3) receptor mRNA. It has been found that (i) all four populations studied express all four adenosine receptor subtypes, (ii) the A(1), receptor is the least expressed in all populations studied, (iii) the A(3) receptor is markedly expressed in the populations of granulopoietic/monocytopoietic and erythropoietic cells, (iv) the A(2a) receptor is markedly expressed in the populations of B-lymphopoietic and T-lymphopoietic cells, and v) the A(2b) receptor does not predominate in any of the precursor cells studied. Our data offer a new possibility for the assessment of the readiness of these cells to respond, by receptor-mediated mechanisms, to adenosine or its analogs present in the tissues as a result of endogenous processes and/or following their administration.

• MeSH
• financování organizované MeSH
• hematopoetické kmenové buňky metabolismus   MeSH
• hematopoéza genetika   MeSH
• messenger RNA metabolismus   MeSH
• myši inbrední C57BL MeSH
• myši MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• purinergní receptory P1 genetika   MeSH
• receptor adenosinový A1 genetika   MeSH
• receptor adenosinový A2A genetika   MeSH
• receptor adenosinový A2B genetika   MeSH
• receptor adenosinový A3 genetika   MeSH
• regulace genové exprese MeSH
• separace buněk MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH

Expression of mRNA for adenosine receptor subtypes A(1), A(2a), A(2b), and A(3) in normal and lipopolysaccharide (LPS)-activated murine RAW 264.7 macrophages has been investigated using the method of quantitative real-time polymerase chain reaction. The results have shown a very low, unquantifiable expression of adenosine A(1) receptor mRNA in both normal and LPS-activated macrophages. The other three adenosine receptor mRNAs have been found to be expressed at various but always quantifiable levels. Activation of the macrophages by LPS induced upregulation of the expression of adenosine receptor A(2a) and A(2b) mRNA, whereas the expression of adenosine receptor A(3) mRNA was downregulated. Unstimulated macrophages exhibited a high expression of the A(2b) adenosine receptor mRNA. The findings are discussed from the point of view of the antiinflammatory and hematopoiesis-stimulating roles of the adenosine receptor signaling.

• MeSH
• aktivace makrofágů genetika   účinky léků   MeSH
• buněčné linie MeSH
• časové faktory MeSH
• financování organizované MeSH
• hematopoéza genetika   účinky léků   MeSH
• lipopolysacharidy farmakologie   MeSH
• makrofágy metabolismus   účinky léků   MeSH
• messenger RNA metabolismus   MeSH
• myši MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• purinergní receptory P1 genetika   účinky léků   MeSH
• receptor adenosinový A1 genetika   MeSH
• receptor adenosinový A2A genetika   MeSH
• receptor adenosinový A2B genetika   MeSH
• receptor adenosinový A3 genetika   MeSH
• regulace genové exprese MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• zvířata MeSH

Allogeneic cancer cell lines serve as universal source of tumor-associated antigens in cancer vaccines. Immunogenic high hydrostatic pressure-killed cancer cells derived from cell lines can be used for the generation of dendritic cell (DC)-based active cellular immunotherapy of non-small cell lung cancer (NSCLC). We investigated the expression of 12 known NSCLC tumor-associated antigens (TAA) (CEA, MAGE-A1, MAGE-A3, MAGE-A4, PRAME, hTERT, HER2, MUC1, Survivin, STEAP1, SOX2 and NY-ESO-1) in 6 NSCLC cell lines as candidates for the generation of DC-based lung cancer vaccine. We showed that the selected antigenic profile of these cell lines overlaps to various degrees with that of primary NSCLC tumors (n = 52), indicating that 4 out of 6 NSCLC cell lines would be suitable for DC-based vaccine generation. We further investigated the presence of TAA-specific T cells in blood of NSCLC patients (n = 32) using commercially available peptide mixes in an in vitro stimulation assay. IFN-γ+CD8+ and IFN-γ+CD4+ T cell responses to all antigens were detected in NSCLC patients. Interestingly, despite higher TAA expression in squamous cell carcinoma (SCC) the responsiveness of patients' T cells to stimulation was significantly lower in SCC patients than in adenocarcinoma (AC) patients. This suggests qualitative differences in T cell functionality between NSCLC subtypes. Based on this study, and in order to maximize the amount of treatable patients, we selected a mix of H520 and H522 NSCLC cell lines for DC-based vaccine preparation. We also established a minimal panel of antigenic peptide mixes (CEA, hTERT, PRAME, HER2) for immunomonitoring of T cell responses during the DC-based lung cancer immunotherapy in Phase I lung cancer clinical trial (NCT02470468).

• MeSH
• antigenní specifita receptorů T-buněk * MeSH
• antigeny nádorové imunologie   MeSH
• cytotoxické T-lymfocyty imunologie   metabolismus   MeSH
• dendritické buňky imunologie   metabolismus   MeSH
• imunoterapie MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• nádory plic imunologie   metabolismus   patologie   terapie   MeSH
• nemalobuněčný karcinom plic imunologie   metabolismus   patologie   terapie   MeSH
• protinádorové vakcíny MeSH
• senioři MeSH
• staging nádorů MeSH
• T-lymfocyty imunologie   metabolismus   MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH