Buněčné terapie umožní léčbu nemocí jen tehdy, bude-li k dispozici odpovídající množství buněk terapeutické kvality. Splnění tohoto předpokladu nabízí, díky své neomezené proliferační a diferenciační kapacitě, pluripotentní embryonální kmenové buňky (SC) a jejich člověkem vytvořené analogie – indukované pluripotentní SC (iPSC). Zejména atraktivní jsou lidské iPSC, které umožňují přípravu autologních buněk pro konkrétního pacienta. Experimenty obsažené v tomto projektu povedou k návrhu a ověření technik pro produkci klinicky relevantních množství lidských progenitorových buněk cévního endotelu, plicního epitelu a hladkosvalových buněk, které budou mít jasnou schopnost vyvinout se do zralých funkčních buněk s terapeutickým potenciálem. Tohoto cíle bude dosaženo vytvořením iPSC buněk z různých typů lidských somatických buněk a výběrem těch nejlepších na základě jejich diferenciační kapacity a jejich bezpečnosti z pohledu genetické stability. Tyto buňky a související protokoly vytvoří zdroj pro léčbu onemocnění, jejichž podstatou je abnormální vaskularizace či funkce plicního epitelu.; Vast number of diseases may be curable by cell-based therapies if therapeutic quality cells are available in relevant quantities. Such prerequisite may be reached by using pluripotent embryonic stem cells (SCs) or their “man-made” counterpart – induced pluripotent SCs (iPSCs) due to their unprecedented properties: unlimited self-renewing and differentiation capacity. Human iPSCs are particularly attractive since they offer generation of patient-matched cells. The experiments proposed here will devise and evaluate strategies for production of clinically relevant quantities of human progenitors of endothelial, airway epithelial, and smooth muscle lineage, with capacity to produce mature functional phenotypes with therapeutic potential. This will be achieved by generating iPSCs from various types of human somatic cells, selecting the premier ones based on their differentiation propensity, and assaying their safety as regards to their genetic and epigenetic stability. These cells and protocols will provide resource for treating diseases involving vascular and lung epithelia deficiency.

• MeSH
• buněčná a tkáňová terapie metody   MeSH
• cévní endotel MeSH
• endoteliální progenitorové buňky MeSH
• indukované pluripotentní kmenové buňky MeSH
• klinické protokoly MeSH
• lidé MeSH
• lidské embryonální kmenové buňky MeSH
• myocyty hladké svaloviny MeSH
• plíce MeSH
• tkáňové inženýrství metody   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• biomedicínské inženýrství
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Postižení oka je jeden z nejčastějších klinických projevů mitochondriálních onemocnění a zahrnuje celou řadu neurooftalmologických příznaků. Leberova hereditární neuropatie optiku (LHON) a dominantní optická atrofie (DOA) typu 1 patří mezi nejčastější nesyndromické dědičné neuropatie optiku, které vedou k závažné poruše zraku. Mnoho patogenetických aspektů LHON a DOA typu 1 není známo, což významně ztěžuje klinickou praxi, a zejména pak predikci průběhu onemocnění a volbu optimálních diagnosticko-terapeutických postupů. V naší studii se za použití moderních biochemických a molekulárně genetických metod budeme snažit určit jednotlivé rizikové faktory a časné příznaky rozvoje onemocnění LHON a DOA typu 1. Výzkum bude přínosem nejen pro hodnocení molekulárních mechanismů rozvoje onemocnění, ale také pro poskytování komplexního klinického přístupu včetně včasného zahájení terapie a genetického poradenství. Objasnění interakce mezi molekulárními mechanismy a genetickým pozadím by mohlo v budoucnu sloužit jako podklad pro časnou diagnózu onemocnění a rozvoj nových terapeutických přístup...; Ocular involvement figures prominently in the phenotypic spectrum of mitochondrial disorders. Leber’s hereditary optic neuropathy (LHON) and dominant optic atrophy (DOA) type 1 represent the two most common non-syndromic hereditary optic neuropathies that usually result in registrable blindness. To date, many aspects of the pathomechanism of LHON and DOA type 1 remain unclear, presenting considerable challenges in the clinical practice, namely predicting disease course and establishing disease management. We will use modern biochemical and molecular biology techniques to determine risk factors for developing full phenotypic spectrum of LHON and DOA type 1. The research will not only be relevant for the evaluating molecular mechanisms associated with disease development, but also for providing better care with complex clinical approach including well-timed therapy and genetic counselling. Elucidating the interaction between the molecular factors and backgrounds may open exciting new possibilities for early diagnosis, potential therapies and prevention of visual deterioration.

• MeSH
• algoritmy MeSH
• dědičné atrofie optického nervu diagnóza   genetika   MeSH
• diagnostické techniky molekulární MeSH
• genetické testování MeSH
• indukované pluripotentní kmenové buňky MeSH
• Leberova atrofie zrakového nervu diagnóza   genetika   MeSH
• lidé MeSH
• mitochondriální DNA MeSH
• mitochondriální nemoci diagnóza   komplikace   MeSH
• mitofagie MeSH
• retinální gangliové buňky MeSH
• rizikové faktory MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• vnitřní lékařství
• oftalmologie
• molekulární biologie, molekulární medicína
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

V oblasti farmakologické léčby schizofrenie byl učiněn velký pokrok. Nicméně, moderní antipsychotická medikace je stále spojena s nežádoucími účinky, nízkou flexibilitou, přerušením léčby a nízkou efektivitou na negativní a kognitivní symptomy. V tomto ohledu je problematické zhodnotit účinek léků na mozkové buňky, které kontrolují naše myšlení a chování. Objev indukovaných pluripotentních kmenových buňek (iPSC) je průlomová technologie, která umožňuje změnit kožní nebo jiné buňky v buňky mozku (neurony, astrocyty a ligodendrocyty). Následně mohou být kultury pacientových buněk expandovány a vyšetřeny na Petriho misce. Tento projekt je zaměřen na využití technologie iPSC k vytvoření terapeutické platformy, která spojuje in-vivo a in-vitro postupy k testování účinků antipsychotik na buněčných kulturách individuálních pacientů. Výsledek zhodnocení efektu léků bude využit k doporučení budoucí léčby.; Substantial progress has been made in the pharmacological treatment of schizophrenia. However, modern antipsychotic medication is still a ssociated with side effects, poor compliance, drug discontinuation, and low efficacy on negative and cognitive symptoms. This field mainly lacks a sensitive means to assess the effects of drugs on the brain cells, which control our thinking and behaviour. The advent of induced pluripotent stem cell (iPSC) technology renders a breakthrough to convert skin cells, or other cell types, into brain cells (e.g., neurons, astrocytes, and oligodentrocyts), whereby patient-specific brain cells can be expanded and examined in a petri dish. This project is to employ iPSC technology to establish a therapeutic platform for individual patients, which conjoins in-vivo and in-vitro approaches to test the effects of antipsychotic drugs. The outcome of drug assessments will be used to recommend a patient’s future drug therapy.

• MeSH
• astrocyty MeSH
• biologické markery MeSH
• dendritické trny MeSH
• glutamátové receptory MeSH
• hodnocení léčiv MeSH
• indukované pluripotentní kmenové buňky MeSH
• klozapin analýza   MeSH
• magnetická rezonanční tomografie MeSH
• nervový přenos MeSH
• neurony MeSH
• přeprogramování buněk MeSH
• schizofrenie farmakoterapie   MeSH
• techniky in vitro MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• neurologie
• psychofarmakologie
• cytologie, klinická cytologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Jediná tři lysosomální střádavé onemocnění s dědičností vázanou na X chromosom a provázená významným srdečním postižením jsou mukopolysacharidóza typu II (MPSII, deficit iduronát-2-sulfatázy), Danonova (DD, deficit LAMP2) a Fabryho nemoc (FD, deficit ?-galaktosidázy A). V projektu navrhujeme založení a charakterizaci kolekce buněčných modelů na bázi indukovaných pluripotentních buněk od dříve diagnostikovaných pacientů a pacientek. Modely plánujeme následně využít pro testování nových terapeutických a diagnostických postupů stejně jako pro další studium patogeneze zmíněných onemocnění. Jedním z našich hlavních cílů je, v liniích DD a FD pacientek, vývoj průtokově cytometrické metody pro separaci diferencovaných buněk (především kardiomyocytů) dle parentálního stavu jejich X-inaktivace. Separované buňky s příznivou X-inaktivací mutované alely lze, bez dalších genetických manipulací, považovat za vhodné pro další testování autologní buněčné terapie. V případě DD hodláme testovat terapeutický vliv kandidátních malých molekul interferujících s autofagií nebo lysosomální exocytózou.; The only lysosomal storage disorders with X-linked inheritance are mucopolysaccharidosis type II (MPSII, iduronate-2-sulfatase deficit), Danon (DD, LAMP2 deficit) and Fabry (FD, ?-galactosidase deficit) diseases. All express cardiac pathology of either primary cardiomyocytic (DD, FD) or secondary (due valvular dysfunction - MPSII) origin. In the project, we propose to establish and characterize induced pluripotent stem (iPS) cell based models from previously diagnosed male and female patients. The models will be used for testing novel diagnostic and therapeutic approaches as well as for further pathogenesis studies. One of our main goals, in cultures collected from DD and FD female patients, is to develop a protocol for flow cytometric sorting of the differentiated cells (mainly cardiomyocytes) based on their parental X-chromosome inactivation status. Supposedly, the favorably inactivated clones can be consequently utilized for autologous cell therapy testing. In DD, cellular impacts of candidate small molecules interfering with autophagy and/or lysosomal exocytosis will be tested.

• MeSH
• biologické modely MeSH
• Fabryho nemoc diagnóza   terapie   MeSH
• glykogenóza typu IIb diagnóza   terapie   MeSH
• inaktivace chromozomu X MeSH
• indukované pluripotentní kmenové buňky MeSH
• kardiomyopatie MeSH
• lyzozomální nemoci z ukládání diagnóza   terapie   MeSH
• mukopolysacharidóza II diagnóza   terapie   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• genetika, lékařská genetika
• vnitřní lékařství
• cytologie, klinická cytologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Lysosomální střádavé choroby (LSD) jsou závažná dědičná onemocnění způsobená poruchou funkcí enzymových nebo nekatalytických proteinů v důsledku mutace v odpovídajícím genu. Většina z nich je spojena s progresivní neurodegenerací. Časná diagnostika zde má zásadní důležitost z hlediska genetického poradenství a prevence v rodinách a z hlediska současných i budoucích terapeutických možností. Projekt je zaměřen především na rozvoj screeningových vyšetření v enzymologii (analýza v suché krevní kapce), metabolomice/lipidomice (MS analýza v suchém vzorku moče), a na molekulárně genetické vyšetření GM1 a GM2 gangliosidos a deficitu chitotriosidasy. Pro screeningové vyšetření 51 genů u neurodegenerativních onemocnění s nejasnou etiologií bude využita moderní sekvenační technika New Generation Sequencing (NGS). Příprava indukovaných pluripotentních (iPS) buněčných modelů LSD poskytne další možnosti pro výzkum biologické podstaty těchto chorob i pro testování různých způsobů terapie.; Lysosomal storage disorders (LSD) are severe hereditary diseases caused by defect in the function of enzyme or noncatalytic protein due to mutation of the corresponding gene. Most of them are associated with a progressive neurodegeneration. Early diagnosis is of crucial importance for genetic counseling and prevention in families and in view of current and future therapeutic options. The project focuses primarily on the development of screening examinations in enzymology (dry blood spot analysis), in metabolomics/lipidomics (dry urine sample analysis) and on the molecular genetic analysis of GM1 and GM2 gangliosidoses and chitotriosidase deficiency. Advanced technology New Generation Sequencing (NGS) will be used for examination of 51 genes in screening study for neurodegenerative disorders with unclear etiology. Preparation of induced pluripotent cell lines (iPS) of LSD will provide a platform for research of the biology of these diseases and for testing therapeutic approaches.

• MeSH
• analýza moči metody   MeSH
• časná diagnóza MeSH
• diagnostické techniky molekulární MeSH
• G(M1) gangliosid analýza   MeSH
• G(M2) gangliosid analýza   MeSH
• genetické poradenství MeSH
• genetické testování MeSH
• hexosaminidasy analýza   MeSH
• hmotnostní spektrometrie MeSH
• indukované pluripotentní kmenové buňky MeSH
• lyzozomální střádavé nemoci v nervovém systému diagnóza   MeSH
• metabolomika MeSH
• test suché kapky krve MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• neurologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Etické a právní aspekty výzkumu kmenových buněk.

• MeSH
• dospělé kmenové buňky MeSH
• embryonální kmenové buňky MeSH
• výzkum kmenových buněk etika   zákonodárství a právo   MeSH
• Publikační typ
• monografie MeSH

• Konspekt
• Biotechnologie. Genetické inženýrství
• NLK Obory
• biomedicínské inženýrství

Tento projekt se zabývá reprogramováním somatických buněk na buňky pluripotentní pomocí indukce microRNA. Celkem budou miRNA transfekovány 3 buněčné linie. Úspěšnost indukce bude hodnocena pomocí reportérového genu spojeného s pluripotentním promotorem.Pluripotence bude hodnocena také pomocí microarrays. Čistá populace pluripotentích buněk bude izolována pomací FACS. Nervová diferenciace bude prováděna pomocí standardizovaného protokolu.; This project concerns reprogramming somatic cells into pluripotent cells by micro RNA induction. Three cell lines will be transfected with miRNA. The success in reprogramming will be validated by reporter gene driven by pluripotent marker and by next validation of pluripotency will be done by microarrays. Neural differentiation will be performed according to standardized protocol.

• MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• embryonální kmenové buňky MeSH
• fibroblasty MeSH
• indukované pluripotentní kmenové buňky MeSH
• mikro RNA MeSH
• neurony MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• zubní dřeň MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• neurologie
• biologie
• cytologie, klinická cytologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Cílem projektu bude izolace a charakterizace kmenových resp. progenitorových buněk z tkáně dospělého pankreatu schopných vytvořit insulin produkující tkáň, jejíž vlastnosti budou testovány in vitro a po experimentální transplantaci diabetickým zvířatům.; The aim of the project is a stem or progenitor cells isolation from adult pancreas tissue and the characterization of these cells, which are able to create an insulin producing tissue. Their features will be tested in vitro as well as after experimentaltransplantation into diabetic animals.

• MeSH
• beta-buňky MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• diabetes mellitus MeSH
• dospělé kmenové buňky MeSH
• inzulin MeSH
• modely u zvířat MeSH
• transplantace Langerhansových ostrůvků MeSH
• transplantační imunologie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• MeSH
• dospělé kmenové buňky imunologie   MeSH
• hematopoetické kmenové buňky MeSH
• inhibitory angiogeneze farmakologie   MeSH
• lidský růstový hormon MeSH
• molekulární biologie MeSH
• nádory patofyziologie   MeSH
• poškození DNA MeSH
• senioři fyziologie   MeSH
• Check Tag
• senioři fyziologie   MeSH
• Publikační typ
• periodika MeSH

• Konspekt
• Geriatrie
• NLK Obory
• geriatrie
• biologie