x

• MeSH
• imunohistochemie MeSH
• kmenové buňky embryonálního karcinomu * MeSH
• mozeček MeSH
• myši - mutanty neurologické MeSH
• myši inbrední CBA MeSH
• nádorové buňky kultivované MeSH
• nervové kmenové buňky * MeSH
• přežívání štěpu * MeSH
• Purkyňovy buňky cytologie   MeSH
• transplantace kmenových buněk * MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• srovnávací studie MeSH

Sox3/SOX3 gene is considered to be one of the earliest neural markers in vertebrates. Despite the mounting evidence that Sox3/SOX3 is one of the key players in the development of the nervous system, limited data are available regarding the transcriptional regulation of its expression. This review is focused on the retinoic acid induced regulation of SOX3 gene expression, with particular emphasis on the involvement of retinoid receptors. Experiments with human embryonal carcinoma cells identified two response elements involved in retinoic acid/retinoid X receptor-dependent activation of the SOX3 gene expression: distal atypical retinoic acid-response element, consisting of two unique G-rich boxes separated by 49 bp, and proximal element comprising DR-3-like motif, composed of two imperfect hexameric half-sites. Importantly, the retinoic acid-induced SOX3 gene expression could be significantly down-regulated by a synthetic antagonist of retinoid receptors. This cell model provides a solid base for further studies on mechanism(s) underlying regulation of expression of SOX3 gene, which could improve the understanding of molecular signals that induce neurogenesis in the stem/progenitor cells both during development and in adulthood.

• MeSH
• buněčná diferenciace genetika   účinky léků   MeSH
• financování organizované MeSH
• genetické techniky využití   MeSH
• kmenové buňky embryonálního karcinomu MeSH
• lidé MeSH
• metaanalýza jako téma MeSH
• modely genetické MeSH
• myši MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• neurogeneze genetika   účinky léků   MeSH
• receptory kyseliny retinové genetika   MeSH
• regulace genové exprese fyziologie   genetika   účinky léků   MeSH
• transkripční faktory SOXB1 genetika   MeSH
• tretinoin MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• myši MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

Project is aimed at analysis of molecular cytogenetic markers with prognostic value in selected childhood tumors of embryonal origin (medulloblastoma/PNET, neuroblastoma, retinoblastoma, and other extracranial solid tumors). Bioptic material will be examined using CGH, HR-CGH and FISH techniques; tumor tissue will be also cultivated for metaphase analysis using SKY technique and G-banding. Histological type of the cell culture will be assessed by immunocytochemical methods. Relevance of molecular cytogenetic techniques (CGH, HR-CGH, SKY) for detection of specific aberrations and correlation between detected cytogenetic markers and clinical course of the disease will be evaluated. The final outcome of the project will be the assessment of the importanceof cumulative cytogenetic changes for both subclasification of patients and prediction of the course of disease.

Projekt je zaměřen na analýzu molekulárně cytogenetických markerů s prognostickým významem u vybraných embryonálních nádorů dětského věku (medulloblastom/PNET, neuroblastom, retinoblastom a další extrakraniální solidní nádory). Materiál z biopsií bude přímo vyšetřován metodami CGH, HR-CGH a FISH; nádorová tkáň bude rovněž kultivována v podmínkách in vitro za účelem vyšetření metafází metodami G-banding a SKY. Ověření typu kultivovaných buněk bude prováděno imunocytochemicky. Dalším cílem projektu je posoudit přínos zvolených technik (CGH, HR-CGH, SKY) pro zvýšení záchytu specifických aberací a zhodnotit korelaci mezi detekovanými molekulárně cytogenetickými markery a klinickým průběhem onemocnění. Finálním výstupem projektu bude zhodnocení významu kumulovaných cytogenetických změn pro subklasifikaci nemocných a predikci průběhu onemocnění.

• MeSH
• chromozomální aberace MeSH
• cytogenetické vyšetření metody   MeSH
• dítě MeSH
• embryonální karcinom MeSH
• hybridizace genetická MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční MeSH
• kmenové buňky embryonálního karcinomu cytologie   MeSH
• prognóza MeSH
• spektrální karyotypizace MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH

• Konspekt
• Pediatrie
• NLK Obory
• pediatrie
• onkologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• MeSH
• buněčná diferenciace účinky léků   MeSH
• buněčné linie cytologie   MeSH
• embryonální kmenové buňky cytologie   metabolismus   účinky léků   MeSH
• imunohistochemie metody   MeSH
• kmenové buňky embryonálního karcinomu cytologie   metabolismus   účinky léků   MeSH
• MAP kinasa-kinasa 2 analýza   MeSH
• myši MeSH
• neurony cytologie   metabolismus   MeSH
• pilotní projekty MeSH
• tretinoin farmakokinetika   farmakologie   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• techniky in vitro MeSH

The aim of our study was to characterize mouse embryonal carcinoma (EC) cells P19 in different stages of retinoic acid induced neurodifferentiation by two methods, immunocytochemistry and RT qPCR. The characterization of the cells is crucial before any transplantation into any model, e.g. in our case into the mouse brain with the aim to treat a neurodegenerative disease. Specific protein markers (MAP-2, OCT-4, FORSE-1) were detected by immunocytochemistry in the cell cultures. The mRNA expression levels of PAX-6, MASH-1, Brachyury, GATA-4 and AFP were determined by RT qPCR method. HPRT was used as a housekeeping gene. The degree of differentiation can be characterized by expression of analyzed genes. The presence of OCT-4 and FORSE-1 proteins in undifferentiated pluripotent cells and the presence of dendrite specific MAP-2 in neuroprogenitors was detected. The expression levels of PAX-6 and MASH-1 increased and expression of Brachyury decreased during the neurodifferentiation process. The expression levels of GATA-4 and AFP were the highest after induction of differentiation with retinoic acid. Detailed characterization of cells before transplantation experiments can contribute to better understanding of their effect.

• MeSH
• antigeny povrchové genetika   metabolismus   MeSH
• buněčná diferenciace genetika   účinky léků   MeSH
• exprese genu MeSH
• financování organizované MeSH
• homeodoménové proteiny genetika   metabolismus   MeSH
• imunohistochemie MeSH
• kmenové buňky embryonálního karcinomu fyziologie   MeSH
• myši MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• nádorové buňky kultivované MeSH
• oční proteiny genetika   metabolismus   MeSH
• oktamerní transkripční faktor 3 genetika   metabolismus   MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
• proteiny asociované s mikrotubuly genetika   metabolismus   MeSH
• represorové proteiny genetika   metabolismus   MeSH
• transkripční faktory bHLH metabolismus   MeSH
• transkripční faktory paired box genetika   metabolismus   MeSH
• tretinoin farmakologie   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• zvířata MeSH

OBJECTIVES: Intracellularly generated reactive oxygen species (ROS) are thought to modulate redox sensitive signaling pathways and thus regulate cell physiology including proliferation and differentiation. However, the role of ROS in neuronal differentiation of embryonic pluripotent cells is unknown. For this reason, the modification of retinoic acid (RA) induced neuronal differentiation of mouse embryonal carcinoma cells P19 by selected ROS scavengers and flavoprotein inhibitor was evaluated. METHODS: Intracellular ROS was evaluated by flowcytometry. Cellular redox status was evaluated based on total levels of reduced thiol groups in cells. The activity of the RA responsive element (RARE) was evaluated by luciferase reporter assay. The RA-induced neuronal differentiation was determined based on changes in the expression of protein markers characteristic for undifferentiated (Oct-4) and neuron-like cell differentiated cells (N-cadherin and III-beta tubulin). RESULTS: RA increased the intracellular ROS production that was accompanied by a decrease in thiol groups in cells. The ROS scavengers and flavoprotein inhibitor reduced RA-induced ROS production, RA-induced activity of RARE, and it decreased the RA-induced expression of N-cadherin and III-beta tubulin. CONCLUSIONS: Our data outline a role of ROS as important molecules in the transduction of an intracellular signal during the neuronal differentiation of ES cells

• MeSH
• acetofenony farmakologie   MeSH
• acetylcystein farmakologie   MeSH
• buněčná diferenciace účinky léků   MeSH
• glutathion farmakologie   MeSH
• kmenové buňky embryonálního karcinomu účinky léků   MeSH
• kyselina askorbová farmakologie   MeSH
• lidé MeSH
• neurony účinky léků   MeSH
• oniové sloučeniny farmakologie   MeSH
• oxidace-redukce MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• reaktivní formy kyslíku metabolismus   MeSH
• reportérové geny účinky léků   MeSH
• scavengery volných radikálů farmakologie   MeSH
• sulfhydrylové sloučeniny chemie   MeSH
• tretinoin farmakologie   MeSH
• vitaminy farmakologie   MeSH
• western blotting MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH