The aim of this project is to identify, separate and characterize individual T cell clones responsible for graft-versus-host and graft-versus-tumor effects. Further aim is to minimize alloreactivity and potentiate anti-cancer reactivity.

Náplní projektu je identifikace, rozlišení a molekulární analýza individuálních klonů T lymfocytů zodpovědných za rozvoj reakce štěpu proti hostiteli a reakce štěpu proti nádoru s cílem potlačení aloreaktivity a potenciace protinádorové reaktivity.

• MeSH
• buněčná imunita MeSH
• cytotoxické T-lymfocyty MeSH
• diagnostické techniky molekulární MeSH
• dítě MeSH
• homologní transplantace MeSH
• leukemie terapie   MeSH
• myelodysplastické syndromy MeSH
• nádorová transformace buněk MeSH
• reakce příjemce proti štěpu MeSH
• spolupráce lymfocytů MeSH
• T-lymfocyty MeSH
• transplantace hematopoetických kmenových buněk MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH

• Konspekt
• Pediatrie
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• MeSH
• financování organizované využití   MeSH
• homologní transplantace metody   škodlivé účinky   využití   MeSH
• imunoterapie metody   škodlivé účinky   využití   MeSH
• imunotoxiny MeSH
• interpretace statistických dat MeSH
• leukemie krev   terapie   MeSH
• lymfocytární deplece metody   využití   MeSH
• reakce štěpu proti hostiteli účinky léků   účinky záření   MeSH
• transplantace hematopoetických kmenových buněk metody   škodlivé účinky   využití   MeSH

• MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• genetická transkripce MeSH
• imunoterapie adoptivní MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom terapie   MeSH
• receptory antigenů T-buněk genetika   klasifikace   MeSH
• sekvence aminokyselin MeSH
• sekvence nukleotidů MeSH
• T-lymfocyty imunologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Publikační typ
• abstrakty MeSH

Despite novel treatment strategies, multiple myeloma (MM) remains an incurable disease with low immunogenicity and multiple immune defects. We developed an ex vivo strategy for inducing myeloma-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs) and demonstrate the possibility of identification and long-term in vivo monitoring of individual myeloma-specific T-cell clones using the most sensitive clonotypic assay that is able to detect low frequencies of T-cell clones (1 clonotypic cell in 10(6) cells). Ten patients with MM were examined for the presence of tumour-reactive T cells using dendritic cells loaded with autologous tumour cells. All patients had detectable myeloma-reactive T cells in vitro. Expanded myeloma-reactive T cells demonstrated specific cytotoxic effects against autologous tumour cells in vitro (median 39.6% at an effector:target ratio of 40:1). The clonality of myeloma-specific T cells was studied with a clonotypic assay, which demonstrated both oligoclonal and monoclonal populations of myeloma-specific T cells. CD8(+) CTLs were the most immunodominant myeloma-specific T-cell clones and clinical responses were closely associated with the in vivo expansion and long-term persistence of individual CD8(+) T-cell clones, usually at very low frequencies (10(-3)-10(-6)). We conclude that the clonotypic assay is the most sensitive tool for immunomonitoring of low-frequency T cells.

• MeSH
• aktivace lymfocytů imunologie   MeSH
• antigeny nádorové imunologie   MeSH
• buněčná diferenciace imunologie   MeSH
• buněčné klony imunologie   MeSH
• cytotoxicita imunologická imunologie   MeSH
• cytotoxické T-lymfocyty imunologie   MeSH
• dendritické buňky imunologie   MeSH
• hypervariabilní oblasti genetika   imunologie   MeSH
• imunodominantní epitopy imunologie   MeSH
• imunomagnetická separace metody   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom imunologie   terapie   MeSH
• molekulární sekvence - údaje MeSH
• monitorování imunologické metody   MeSH
• nádorové buňky kultivované MeSH
• následné studie MeSH
• prezentace antigenu imunologie   MeSH
• sekvence aminokyselin MeSH
• senioři MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Multiple myeloma has been considered a weakly immunogenic malignancy that can cause profound defects in the immune system. An important issue for the immunotherapy of myeloma is the identification of appropriate tumor-associated antigens (TAAs). Recently, hTERT (human telomerase reverse transcriptase) was detected on a majority of human malignancies. In the studies reported here, we studied antigen-specific and HLA-A2-restricted cytotoxic activity against an ARH77 myeloma cell line in vitro. An HLA-A2-specific hTERT-derived nonapeptide ((540)ILAKFLHWL(548)) was used as a TAA. Myeloma-specific cytotoxic activity of hTERT-reactive cytotoxic lymphocytes (CTLs) was established by repeated stimulation of the CTLs via dendritic cells loaded with hTERT-derived nonapeptide. These studies were able to demonstrate that hTERT-reactive T-lymphocytes can be identified and expanded using relatively simple in vitro techniques consisting of antigen-specific stimulation, immunomagnetic sorting, and then induction of rapid expansion.

• MeSH
• aktivace lymfocytů MeSH
• antigeny nádorové imunologie   MeSH
• cytotoxické T-lymfocyty imunologie   MeSH
• dendritické buňky imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom imunologie   MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• peptidové fragmenty genetika   imunologie   MeSH
• telomerasa genetika   imunologie   metabolismus   MeSH
• transdukce genetická MeSH
• transfekce MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

Identifi kace individuálních myelom-specifi ckých klonů T lymfocytů pomocí molekulárně biologické analýzy T lymfocytárního receptoru beta (TCRB) je dosud nejcitlivější metodou pro sledování protinádorové imunitní odpovědi u mnohočetného myelomu. Tento postup (tzv. klonotypový esej), využívá skutečnosti, že sekvence TCRB je pro jednotlivé klony T lymfocytů vždy zcela jedinečná a je tudíž ideálním znakem pro jejich charakterizaci. Na příkladu pacientů s myelomem jsme ukázali, že imunitní odpověď na nádorový antigen byla oligoklonální, tj. došlo k aktivaci pouze několika imunodominatních klonů T lymfocytů. To potvrzuje přepoklad výskytu omezeného množství antigenů na povrchu myelomových buněk, které jsou schopny stimulovat myelom-specifické T lymfocyty. Detailní studium protinádorové imunitní odpovědi založené na přesné identifi kaci individuálních myelom-specifi ckých T lymfocytů a jejich případném sledování in vivo nachází využití především v adoptivní imunoterapii jako součásti léčebného postupu u mnohočetného myelomu.

Identifi cation of individual myeloma-specifi c T cell clones by molecular analysis of the T cell receptor beta (TCRB) is the most sensitive method for the anti-tumor immune response monitoring not only in multiple myeloma. This novel approach called clonotypic assay is based on the fact, that the TCRB sequence is unique for every T lymphocyte clone and thus can serve as an ideal candidate for the individual T cell clone monitoring. As an example, the immune response against myeloma antigens was tested and demonstrated an oligoclonal myeloma-specifi c response, ie. only a few immunodominant myeloma-specifi c T cell clones were activated. This fi nding corresponds with the assumption of limited antigenicity of myeloma cells. A detailed study of anti-tumor immune response based on exact myeloma-specifi c T lymphocytes idenfi cation and their in vivo monitoring can be useful tool for precise and highly sensitive immunomonitoring in adoptive immunotherapy protocols recently used in multiple myeloma.

• MeSH
• buněčné klony * imunologie   metabolismus   MeSH
• komplementární DNA MeSH
• laboratoře MeSH
• lidé MeSH
• messenger RNA MeSH
• mnohočetný myelom * patologie   MeSH
• molekulární biologie * metody   MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• reverzní transkripce MeSH
• T-lymfocyty * cytologie   imunologie   MeSH
• výzkumný projekt MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH