Vyvinutí standardizované metodiky odběru a analýzy kondenzátu vydechovaného vzduchu a moče s důrazem na studium řady parametrů, které mohou ovlivnit validitu markerů ze skupiny metabolitů arachidonové kyseliny (8-isoprostan, leukotrien LTB4, cysteinylovéleukotrieny LTC4, LTD4, LTE4). V rámci studie budou neinvazivní metodou při stanovení markerů v různých denních i ročních obdobích, za různých klimatických podmínek i kontaminace venkovního ovzduší u zdravých dobrovolníků a osob s alergickými nemocemi (astma bronchiale, alergická rýma) zjišťovány optimální technické i analytické podmínky, zaručující standardizaci získaných výsledků. Analytická část bude využívat kombinace izolace biomarkeru z komplexní biologické matrice, případně jeho zkoncentrování,s následnou vysoce selektivní a citlivou detekční metodou na principu hmotnostní spektrometrie, která dovoluje identifikovat a kvantifikovat biomarkery v koncentracích na úrovni pikogramů v mililitru biologické matrice.; Development of a standardized methodology for the collection and exact analysis of exhaled breath condensate with the emphasis on the reliable recording of a number of parameters potentially affecting the validity of the acquired concentration levels ofarachidonic acid derivatives (leukotriene ? LTB4, cysteinyl LTC4, LTD4, LTE4, 8-isoprostane). Within the framework of the project, optimal technical and analytical conditions will be assessed during the determinations of LT in different day and year periods, different climatic conditions and environmental air pollution. Markers will be studied both in healthy volunteers and subjects with allergic diseases (bronchial asthma, allergic rhinitis). Analytic methodology will consist of biomarker isolation from a complex biological matrix, followed by a highly selective and sensitive detection method based on mass spectrometry, enabling to identify and quantify biomarkers at the concentration levels in picograms in a milliliter of the biological matrix.

• MeSH
• biologické markery MeSH
• bronchiální astma diagnóza   MeSH
• celoroční alergická rýma diagnóza   MeSH
• dechové testy MeSH
• hmotnostní spektrometrie MeSH
• isoprostany analýza   krev   moč   MeSH
• klimatické změny MeSH
• klinické laboratorní techniky MeSH
• leukotrieny analýza   krev   moč   MeSH
• referenční standardy MeSH
• sezónní alergická rýma diagnóza   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• pneumologie a ftizeologie
• biochemie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Nalezení optimální metody pro analýzu markerů oxidačního stresu v biologickém materiálu - v kondenzátu vydechovaného vzduchu, v krvi a moči (8-izoprostan, malondialdehyd, 4-hydroxy-trans-2-nonenal) u osob s předpokládanou zvýšenou přítomností aktivních forem kyslíku v plicích a dýchacích cestách, tj. u osob se silikózou plic a onemocněními z azbestu. U těchto skupin osob jsme nedávno zjistili zvýšenou koncentraci 8-izoprostanu v kondenzátu vydechovaného vzduchu, pro diferenciální diagnostiku a predikcidalšího vývoje je třeba odlišit vliv oxidačního stresu v důsledku jiných faktorů, popřípadě onemocnění. Budou vyvinuty citlivé metody detekce těchto markerů pomocí hmotnostní spektrometrie s vysokou selektivitou a citlivostí.; Finding optimum methods for analysis of markers of oxidative stress in biological material - exhaled breath condensate, in blood and urine: 8-isoprostane, 4-hydroxy-trans-2-nonenal (HNE) and malondialdehyde (MDA) in subjects with supposed increase of active oxygen species in the lungs and airways, i.e. in patients with silicosis and diseases due to asbestos. We have shown recently for the first time, that 8-isoprostane in exhaled breath condensate of these persons was significantly increased. For differential diagnosis and prediction of further development it is necessary to distinguish the influence of oxidative stress due to other factors or diseases. Sensitive methods to detect these markers will be developed by means of mass spectrometry with highselectivity and sensitivity.

• MeSH
• azbestóza MeSH
• biologické markery analýza   MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• hmotnostní spektrometrie metody   využití   MeSH
• isoprostany MeSH
• malondialdehyd MeSH
• oxidační stres MeSH
• silikóza MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• toxikologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Nalezení optimální metody pro analýzu 8-izoprostanu a leukotrienu B4 v kondenzátu vydechovaného vzduchu pomocí kombinace vysoce citlivých metod -kapalinové chromatografie, ionizace elektrosprejem a tandemové hmotnostní spektrometrie (LC-ESI-MS-MS). Stanovování 8-izoprostanu jako markeru oxidativního stresu v kondenzátu vydechovaného vzduchu u pacientů se silikózou, azbestózou a zdravých dobrovolníků. Stanovování leukotrienu B4 jako markeru zánětu v kondenzátu vydechovaného vzduchu u pacientů se silikózou, azbestózou a zdravých dobrovolníků. Zhodnocení možnosti využití markerů v diferenciální diagnostice plicních onemocnění a k časné diagnostice oxidativního stresu a zánětu v oblasti respiračního systému.; Finding optimal method for the analysis of 8-isoprostane and leukotriene B4 in exhaled breath condensate using combination of highly sensitive methods - liquid chromatography, ionisation electrospraying and tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS-MS). Determination of 8-isoprostane as a marker of oxidant stress in exhaled breath condensate in patients with silicosis, diseases due to asbestos and healthy volunteers. Determination of leukotriene B4 as a marker of inflammation in exhaled breath condensate in patients with silicosis, diseases due to asbestos and healthy volunteers. Evaluation of the use of the markers in the differential diagnostics of lung diseases and in the early diagnostics of oxidant stress and inflammation in the respiratory system.

• MeSH
• azbestóza diagnóza   MeSH
• biologické markery MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• isoprostany analýza   MeSH
• klinické laboratorní techniky metody   využití   MeSH
• leukotrien B4 analýza   MeSH
• oxidační stres MeSH
• pneumokonióza MeSH
• silikóza diagnóza   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• pneumologie a ftizeologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Nalezení optimální metody pro analýzu leukotrienů v kondenzátu vydechovaného vzduchu pomocí hmotnostní spektroskopie v kombinácích GC-MS a LC-MS. Sledování korelace mezi ventilačními parametry a koncentrací leukotrienů v kondenzátu vydechovaného vzduchuu pacientů se suspektním profesionálním bronchiálním astmatem v průběhu nespecifických a specifických bronchoprovokačních testů. Zhodnocení možnosti využití stanovení leukotrienů v kondenzátu vydechovaného vzduchu jako markerů obstrukce v diferenciální diagnostice profesionálního bronchiálního astmatu.; To find the optimal analytical procedure for the detection of leukotrienes in the exhaled breath condensate using GC-MS and LC-MS. To find the possible correlation between ventilatory parameters and the levels of leukotrienes in the breath condensate inpatients with suspected occupational asthma during non-specific and specific challenge tests. Evaluation of possibility to use analysis of leukotrienes in the breath condensate as markers of obstruction in the diagnosis of occupational asthma.

• MeSH
• bronchiální astma MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• hmotnostní spektrometrie využití   MeSH
• leukotrieny analýza   MeSH
• nemoci z povolání MeSH
• pracovní expozice MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• pneumologie a ftizeologie
• pracovní lékařství
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• MeSH
• albuminurie diagnóza   etiologie   MeSH
• diabetické nefropatie * diagnóza   etiologie   metabolismus   MeSH
• experimenty na zvířatech * MeSH
• glutathion izolace a purifikace   metabolismus   MeSH
• metabolomika metody   MeSH
• oxidační stres imunologie   účinky léků   MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí metody   využití   MeSH
• potkani inbrední SHR MeSH
• produkty pokročilé glykace izolace a purifikace   metabolismus   MeSH
• proteomika metody   MeSH
• pyruvaldehyd * metabolismus   škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• stanovení celkové genové exprese metody   využití   MeSH
• vysokoúčinná kapalinová chromatografie metody   využití   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

The perinatal period of life is a critical moment for a proper development of CNS, however it is a risky period, which is associated with many pathologies. Hence, it is important to acquire knowledge and combine new methodologies for understanding the developmental aspects of physiology/pathophysiology of the brain. We have successfully developed and applied the method of monitoring a tissue metabolism in the immature brain. Using a combination of microdialysis technique and HPLC-MS basal levels of amino acids and other low molecular weight molecules in the hippocampus of immature rats (12-days-old) were mapped. Our results demonstrate the suitability of chosen parameters of sampling and analysis for the monitoring of tissue biochemistry and metabolomic mapping in immature brain. Moreover, a potential of the proposed method can found a place in clinical practice and for biomarkers monitoring of various CNS diseases.

• MeSH
• aminokyseliny MeSH
• mikrodialýza * využití   MeSH
• mozek * metabolismus   MeSH
• potkani Wistar MeSH
• vysokoúčinná kapalinová chromatografie využití   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

This work was engaged to enhancing the diagnostics of bronchial asthma, with the main emphasis on noninvasive approaches, effective differentiation and phenotypic background. In particular, a methodology is described, based on monitoring of a highly specific matrix - exhaled breath condensate (EBC), applied to asthma patients. The previous method, based on the biomarkers of cysteinyl leukotrienes, was extended with anti-asthmatic lipoxines, yielding a novel correlation to different asthma phenotypes. Moreover, inverse relationship between the pro-inflammatory and anti-inflammatory biomarkers was found and herein depicted. The developed methodology was used in a clinical study, which confirmed its applicability for asthma phenotyping. The method also enables differentiating a severe form of refractory asthma, i.e. asthma irresponsive to any kind of currently available pharmacotherapy. It was also proved that the method can be used for monitoring of the disease genesis and the efficiency of an administered pharmacotherapy. Finally, the method allows a reliable differentiation of asthma and chronical obstructive pulmonary disease.

• MeSH
• bronchiální astma * diagnóza   MeSH
• dechové testy metody   MeSH
• diagnostické techniky dýchacího ústrojí MeSH
• diagnostické techniky molekulární * metody   MeSH
• hmotnostní spektrometrie MeSH
• lidé MeSH
• lipoxiny MeSH
• odběr biologického vzorku metody   MeSH
• vysokoúčinná kapalinová chromatografie využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH