nepřímá imunofluorescence (IFA) Dotaz Zobrazit nápovědu
Předmětem této práce bylo sérologické vyšetření vzorků krve a mozkomíšních moků na přítomnost antiborreliových a ehrlichiových protilátek. Testováno bylo 165 pacientů, u nichž se předpokládalo zvýšené riziko onemocnění lymeskou borreliózou. Jako diagnostické metody byly použity nepřímá imunofluorescence a enzymová imunoanalýza. Ehrlichiové protilátky byly prokázány u 36 vyšetřovaných (21,8 %). U 70 vzorků byly detekovány protilátky antiborreliové, což odpovídá 42,4 %. Narůstající počet nemocí vzniklých v návaznosti na kontakt s klíšťaty zdůrazňuje význam těchto zoonóz.
The subject of this study is serological screening of blood and CSF (cerebrospinal fluid) samples for the presence of borrelial and ehrlichial antibodies. A total of 165 patients suspected to be at risk of Lyme disease were tested. Indirect immunofluorescence and enzyme immunoassay were used as diagnostic methods. Ehrlichial antibodies were detected in 36 (21.8%) patients. Borrelial antibodies were found in 70 samples (42.4%). The widening range of tick-borne diseases brings about the need for more data on these zoonoses.
- Klíčová slova
- lymeská borrelióza, humánní granulocytární ehrlichióza, Anaplasma phagocytophilum, nepřímá imunofluorescence (IFA), enzyme-linked-immunosorbent assay (ELISA),
- MeSH
- Anaplasma phagocytophilum imunologie MeSH
- Borrelia imunologie MeSH
- Ehrlichia imunologie MeSH
- ehrlichióza diagnóza MeSH
- lidé MeSH
- lymeská nemoc diagnóza MeSH
- protilátky bakteriální analýza MeSH
- sérologické testy MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
Erwinia amylovora [(BURRILL) WINSLOW et al.] (Ea), the causal agent of fire blight, was detected in plant samples and pure bacterial cultures by means of PCR, IFAS and ELISA. Polyclonal antibodies of Neogen Europe Ltd. were used for IFAS and PTA-ELISA and laboratory-generated primers EaF72 and EaR560 for PCR. Using the BIOLOG system and an immature pear fruit assay, identities of all Ea strains were confirmed as the fire blight bacterium. In assays of pure Ea cultures, PTA-ELISA, and both IFAS and PCR were sensitive to concentrations 10(6)-10(5) and 10(5)-10(4) CFU/mL, respectively. When saprophytic bacteria associated with Ea in plant samples were tested as potentially cross-reacting bacteria, PTA-ELISA and IFAS gave 20 and 14 % cross-reactions, respectively. In plant samples, the presence of Ea was more reliably detected by IFAS (at a dilution of 1 : 1000) than by PTA-ELISA (to dilution 1 : 100). The capacity to detect Ea might be increased using an optimized PCR, but for PCR prepared from infected plant samples it was necessary to use the bacterial DNA isolated with a DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen). In this case the PCR was sensitive to a concentration of 10(5) CFU/mL. PCR was much more specific than either immunochemical technique, because no false positives were observed when primers EaF72 and EaR560 were used.
- MeSH
- diagnostické techniky molekulární normy využití MeSH
- ELISA metody využití MeSH
- Erwinia amylovora chemie izolace a purifikace MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- fluorescenční protilátková technika nepřímá metody využití MeSH
- nemoci rostlin etiologie genetika mikrobiologie MeSH
- polymerázová řetězová reakce metody využití MeSH
- senzitivita a specificita MeSH
BACKGROUND: Microsporidia (Fungi) have been repeatedly identified as the cause of opportunistic infections predominantly in immunodeficient individuals such as AIDS patients. However, the global epidemiology of human microsporidiosis is poorly understood and the ability of microsporidia to survive and multiply in immunocompetent hosts remains unsolved. AIMS: To determine the presence of latent microsporidia infections in apparently healthy humans in the Czech Republic, the authors tested sera, urine and stool originating from fifteen persons within a three month period examined on a weekly basis. METHODS: Sera, stool and urine samples originating from fifteen HIV-negative people at risk with occupational exposure to animals, aged 22-56 years, living in the Czech Republic were tested by indirect immunofluorescence assay (IFA) for the presence of specific anti-microsporidial antibodies, standard Calcofluor M2R staining for the detection of microsporidian spores in all urine sediments and stool smears and molecular methods for the microsporidial species determination. RESULTS: Specific anti-microsporidial antibodies were detected in fourteen individuals, asymptomatic Encephalitozoon spp. infection was found in thirteen and E. bieneusi infection was detected in seven of those examined. While E. hellem 1A and E. cuniculi II were the major causative agents identified, seven different genotypes of E. bieneusi were recorded. CONCLUSIONS: These findings clearly show that exposure to microsporidia is common and chronic microsporidiosis is not linked to any clinical manifestation in healthy population. Moreover, our results indicate much higher incidence of microsporidial infections among an apparently healthy population than previously reported. These results open the question about the potential risk of reactivation of latent microsporidiosis in cases of immunosupression causing life-threatening disease.
- MeSH
- asymptomatické nemoci epidemiologie MeSH
- barvení a značení metody MeSH
- dospělí MeSH
- Encephalitozoon cytologie imunologie izolace a purifikace MeSH
- feces mikrobiologie MeSH
- fluorescenční protilátková technika nepřímá MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- longitudinální studie MeSH
- mikroskopie MeSH
- mikrosporidióza diagnóza epidemiologie mikrobiologie MeSH
- moč mikrobiologie MeSH
- mykologie metody MeSH
- protilátky fungální krev MeSH
- sérum mikrobiologie MeSH
- spory hub cytologie izolace a purifikace MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
DNA hybridizace 27 -- 2.1.5 Polymerázová řetězová reakce (PCR) 27 -- 2.2 Metody nepřímé 27 -- 2.2.1 Nepřímá imunofluorescence (IFA) .27 -- 2.2.2 ELISA (enzymová imunoesej) 27 -- 2.2.3 Western blot (WB) - imunoblot
95 s. : il. ; 23 cm
Lidská ehrlichióza je nová, klíšťaty přenášená zoonóza, způsobená zástupci rodu Ehrlichia. Jedná se o velmi malé, obligátně intracelulámí, gramnegalivní bakterie. Lidskou monocylámí ehrlichiózu způsobuje E. chaffeensis, příčinou granulocylámí formy je HGE agens. Tato málo častá onemocnění se vyskytují ve Spojených státech, v Evropě byly popsány zatím dva klinické případy monocylámí ehriichiózy a pouze jedna granulocylámí ehrlichióza. Mezi hlavní klinické příznaky patří horečka, únava, faryngitida, bolesti svalů, kloubů a hlavy. V určitém procentu případů dochází k postižení jednoho nebo více orgánů. Tylo symptomy doprovázejí laboratorní odchylky, zejména leukopenie, anémie, trombocytopenie a elevace jatemích enzymů. Průběh kolísá od asymplomatického po fatální, těžší je u predisponovaných jedinců (starší osoby, imunologicky oslabené osoby, jedinci oslabení jiným onemocněním). Laboratorní diagnostika infekce se opírá o průkaz protilátek nepřímou imunofluorescencí (IPA) a průkaz specifické nukleové kyseliny polymerázovou řetězovou reakcí (PCR reakce). Pro terapii je dopomčován doxycyklin, u alergických pacientů se podává rifampicin.
Human ehrlichiosis is a new lick-borne zoonosis caused by members of the genus Ehrlichia. They are very small gram-negative obligate intracellular bacteria. Human monocytic ehrlichiosis is caused by E. chajfeensis, the cause of the granulocytic form is the HGE agent. These diseases are infrequenl and occur in the United Slates. In Europe, so far, two clinical cases of monocytic ehriichiosis and only one case of the granulocytic form were described. The chief clinical signs of ihe disease are: fever, fatigue, sore throat, pains in muscles and joints, headache. In a certain number of cases one or more systemic organs can be affected. The symptoms are accompanied by changes in laboratory test values, namely leukopenia, anemia, thrombocytopenia, higher levels of liver enzyme activities. The course of the disease varies from asymptomatic forms to that with a fatal outcome. In predisposed persons, i.e., in the elderly, in the immunocompromised or otherwise debilated individuals, the course of the disease is grave. Laboratory diagnostics of the disease is based on the detection of antibodies by indirect immunofluorescence (IFA) and the detection of specific nucleic acid by the polymerase chain reaction (PCR). Doxycycline is recommended for treatment; rifampicin is administered to allergic patients.
- MeSH
- Anaplasmataceae klasifikace účinky léků MeSH
- chloramfenikol terapeutické užití MeSH
- ehrlichióza etiologie farmakoterapie patologie MeSH
- granulocyty mikrobiologie MeSH
- klíšťata mikrobiologie MeSH
- lidé MeSH
- monocyty mikrobiologie MeSH
- tetracyklin terapeutické užití MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH