The proposed project is primarily aimed at studying of the mechanism of neoadjuvant chemotherapy-induced cell death and studying of the biomarkers in predicting pathologic response to the treatment in patient with breast carcinoma. The presumption of effectivity of targeted therapy is exact identification of target structure on the molecular level. Await results of the proposed project will have a contribution in field of discovery of new molecular prognostic markers of breast carcinoma in correlation with findings of routine histopathology and with clinical outcome. Moreover, understanding of the mechanism of neoadjuvant chemotherapy-induced cell death might have impact on identification of tumor specific genes which might be used as new pharmacological targets or their detection might be used as significant fast diagnostic routine test. Breast cancer is a clinically heterogeneous disease, and existing histological classifications do not fully capture the varied clinical course of this disease.

Navrhovaný projekt se primárně zaměřuje na studium mechanismu neoadjuvantní chemoterapií indukované buněčné smrti či rezistence na chemoterapii u karcinomu prsu, s předpokladem účinnosti cílené molekulárně-biologické léčby ?targeted therapy?, na základěpřesné identifikace terčové struktury na molekulární úrovni. Druhotně se pak projekt zaměřuje na studium biomárkerů využitelných pro predikci odpovědi na terapii, jež bude v budoucnu podkladem pro odhad biologického chování onemocnění a cílený výběr léčby. Cílem navrhovaného projektu je též nalezení nových poznatků v oblasti molekulární diagnostiky a na jejich základě formulovat nové, efektivnější postupy v diagnostice nádorů prsu. Klasifikace nádorů založená na histopatologickém obraze není pro potřebymoderní léčebné koncepce dostačujcí neboť jen částečně odráží klinickou diverzitu tohoto onemocnění. Charakteristika každéhoho nádoru na molekulární úrovni se postupně stává základem diagnosticko-terapeutického procesu.

• MeSH
• diagnostické techniky molekulární MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• nádory prsu farmakoterapie   MeSH
• neoadjuvantní terapie MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
• prognóza MeSH
• sekvenční analýza hybridizací s uspořádaným souborem oligonukleotidů MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• gynekologie a porodnictví
• farmakoterapie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

BACKGROUND: Neoadjuvant chemotherapy is used in the treatment of breast carcinoma because it substantially reduces the size of the primary tumor and lymph node metastases. The present study investigated biomarkers that can predict a pathologic response to the therapy. MATERIAL/METHODS: The role of apoptosis in regression of the tumors after neoadjuvant chemotherapy was determined by TUNEL and anti-active caspase 3 assay. The transcriptional profile of 84 key apoptosis genes was evaluated in both pre-therapeutically obtained tumor tissue by core needle biopsy and in specimens removed by final surgery, using a pathway-specific real-time PCR assay. Obtained data were analyzed by hierarchical cluster analysis and correlation analysis. The immunohistochemical profile of each tumor was determined using the standard ABC method. RESULTS: On the basis of a hierarchical cluster analysis of 13 significantly changed genes, we divided patients into good and poor prognosis groups, which correlate well with progression-free survival. In the good prognosis group, we found a statistically significant down-regulation of the expression of MCL1 and IGF1R genes after neoadjuvant treatment. We also found a statistically significant overexpression of BCL2L10, BCL2AF1, CASP8, CASP10, CASP14, CIDEB, FADD, HRK, TNFRSF25, TNFSF8 and CD70 genes. In contrast, we found up-regulation of IGF1R after the treatment in the group with poor prognosis. CONCLUSIONS: Gene expression profiling using real-time PCR assay is a valuable research tool for the investigation of molecular markers, which reflect tumor biology and treatment response.

• MeSH
• adjuvantní chemoterapie MeSH
• apoptóza účinky léků   MeSH
• imunohistochemie MeSH
• koncové značení zlomů DNA in situ MeSH
• kvantitativní polymerázová řetězová reakce metody   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• nádory prsu diagnóza   farmakoterapie   MeSH
• neoadjuvantní terapie MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• proteiny regulující apoptózu diagnostické užití   genetika   metabolismus   MeSH
• protinádorové látky farmakologie   MeSH
• shluková analýza MeSH
• stanovení celkové genové exprese metody   MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

Normal human B lymphocytes are sensitive to the growth-inhibitory action of TGF-beta1 whereas malignant B lymphoma cells are mostly resistant to TGF-beta1 effects. We have shown in our previous work that, TGF-beta1 treatment resulted in significant growth inhibition of the DoHH2 cell line. In the present study we showed that TGF-beta1-induced growth arrest was associated with notable downregulation of the myc-binding protein-1 (MBP-1). Moreover, our results indicated that c-Myc overexpression in TGF-beta1-arrested malignant B cells is mediated by binding of MBP-1, as a transcription repressor, to the (+118/+153) element of the promoter region of the myc gene.

• MeSH
• 2D gelová elektroforéza metody   využití   MeSH
• financování organizované využití   MeSH
• folikulární lymfom genetika   imunologie   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   využití   MeSH
• promotorové oblasti (genetika) MeSH
• protoonkogenní proteiny c-myc genetika   imunologie   MeSH
• spektrometrie hmotnostní - ionizace laserem za účasti matrice metody   využití   MeSH
• TATA box genetika   imunologie   MeSH
• transformující růstový faktor beta1 genetika   imunologie   MeSH
• western blotting metody   využití   MeSH

BACKGROUND: TGFbeta1 has a profound effect on the growth of various mammalian cell types, including B lymphocytes. The inhibitory action of TGFbeta1 is mediated by deactivation of the cell cycle machinery. Several feedback-sensitive pathways determine whether the cells are stopped in G1 phase or allowed to leave G1 phase and enter S phase. Cell cycle-associated molecules, e.g. cyclin-dependent kinase inhibitors (CKIs), may become targets for the inhibitory signaling pathways induced by TGFbeta1. MATERIAL/METHODS: Our experimental DoHH2 cell line model was derived from a patient with malignant non-Hodgkin's lymphoma of follicular origin. The effect of TGFbeta1 on cell cycle progression was studied by flow cytometry. We examined the effect of TGFbeta1 on the expression of p21WAF1 by immunoblotting and RT-PCR. The binding activity of transcription factors to the p21 gene promoter was determined by gel mobility shift assay (GMSA). RESULTS: Our results showed that TGFbeta1 treatment increased the number of cells arrested in G0/G1 phase compared with untreated control cells. Moreover, we found that p21WAF1 expression was significantly up-regulated on the protein level after TGFbeta1 treatment. Similarly to the protein level, the expression of p21 mRNA was increased in TGFbeta1-treated cells. We further examined the binding activity of the Sp family of transcription factors to examine their role in p21WAF1 up-regulation. CONCLUSIONS: The results indicated that p21WAF1 over-expression in TGFbeta1-arrested malignant B cells is mediated by binding of Sp1/Sp3 transcription factors to the (-92/-71), (-77/-58), and (-65/-45) elements of the promoter region of the p21 gene.

• MeSH
• B-buněčný lymfom metabolismus   patologie   MeSH
• B-lymfocyty metabolismus   MeSH
• buněčné linie MeSH
• buněčný cyklus účinky léků   MeSH
• DNA primery MeSH
• financování organizované MeSH
• inhibitor p21 cyklin-dependentní kinasy fyziologie   MeSH
• lidé MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
• retardační test MeSH
• sekvence nukleotidů MeSH
• transformující růstový faktor beta farmakologie   MeSH
• transkripční faktor Sp1 fyziologie   MeSH
• transkripční faktor Sp3 fyziologie   MeSH
• upregulace MeSH
• western blotting MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• MeSH
• dospělí MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• fúzní onkogenní proteiny genetika   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• nádorové biomarkery genetika   MeSH
• nádorové proteiny genetika   MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• senioři MeSH
• synoviom diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• senioři MeSH
• Publikační typ
• srovnávací studie MeSH
• Geografické názvy
• Česká republika MeSH

• MeSH
• B-buněčný lymfom metabolismus   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• folikulární lymfom metabolismus   MeSH
• lidé MeSH
• proteiny buněčného cyklu metabolismus   MeSH
• transformující růstový faktor beta farmakologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH