Pojednává se o aktuálním stavu názorů na výpočet chyb a použití nejistot měření. Diskutuje se rozdíl mezi celkovou chybou a nejistotou měření ve světle současných názorů, souvislost nejistot s akceptovatelnými limity programů EHK a s hodnotami referenčních změn následných měření (RCV), s hodnotami referenčních intervalů a s hodnotami biologických variabilit. Dále jsou obsahem sdělení souvislosti nejistot měření s hodnotami bias, se stavem metrologické návaznosti a kalibrační hierarchie. Některé názory na problémy stanovení nejistot měření zaznamenaly v poslední době změny. Máme na mysli zejména v jakém vztahu jsou nejistoty k akreditacím laboratoří, jak použít nejistoty k posuzování shody, a zda a nakolik jsou rozdíly mezi celkovou chybou a nejistotami, časté předměty kontroverzí, vůbec významné. Velmi zajímavou otázkou je problém nejistot i celkových chyb u metod bez metrologické návaznosti a harmonizace. Konečně je zmiňován způsob, jak snadno a bez závažných problémů vypočítat nejistoty v rutinních laboratořích z dat analytické kontroly a hodnocení výsledků vnitřní kontroly a externího hodnocení kvality.
In our presentation we deal with some recent points of view on the problems of uncertainty measurement in clinical laboratories. Our presentation discusses questions about the differences between uncertainties and total error of measurements. We introduce crucial links among uncertainty and, analytical performance specification of EQAS, biological variation, reference change values and reference intervals. We also introduce relations of uncertainty to metrological traceability and harmonization processes and problems uncertainty calculation in methods with the lack of standardization and harmonization. Also, performance of calculation measurement uncertainty from internal quality and external assessment data are presented.
OBJECTIVES: Protein concentration measurement in the urine can be problematic in the presence of Bence Jones protein. We have carried out an external quality control assessment with the participation of 79 clinical biochemistry laboratories from the Czech Republic and Slovakia. DESIGN AND METHODS: The laboratories received a reference urine sample obtained from a patient with multiple myeloma and lambda free light chain proteinuria and were asked to type the paraprotein using immunofixation and to measure total urinary protein using their established method, most commonly turbidimetry, pyrogallol red assay, and biuret assay. RESULTS: There was a very wide inter-laboratory variability in the protein concentration readouts with up to three-fold difference in some cases. High-resolution two-dimensional electrophoresis and linear mass spectrometry showed that a high proportion of the urinary paraprotein was composed of lambda light chain fragments with molecular weight of 12kDa. CONCLUSIONS: Our results highlight the challenges of reliable and reproducible measurement of urinary protein concentration in the presence of Bence Jones protein.
- Publikační typ
- abstrakt z konference MeSH
- MeSH
- kalibrace MeSH
- klinické laboratorní techniky MeSH
- lidé MeSH
- řízení kvality MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- MeSH
- alkoholismus diagnóza MeSH
- biologické markery MeSH
- chronická nemoc MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- gama-glutamyltransferasa aplikace a dávkování diagnostické užití MeSH
- lidé MeSH
- objem erytrocytu MeSH
- transferin aplikace a dávkování diagnostické užití MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
Rutinní využití molekulárně biologických technik v mikrobiologické diagnostice vyžaduje zvýšenou pozornost kontroly kvality prováděných metod. Kontrola kvality molekulárně biologických metod se skládá z vnitřní kontroly kvality – VKK (pozitivní, negativní a inhibiční kontrola) a externí hodnocení kvality – EHK. Pro externí kontrolu patogenů lze využít program QCMD – Quality Control for Molecular Diagnostics, nebo mezilaboratorní kontrolní cykly organizované anglickou společností UK NEQAS.
Routine applications of molecular biological techniques in microbiological diagnostics require an increased attention to the quality control of carried out these methods. The quality control of these methods consists of the internal control (positive and negative controls and control of inhibition of PCR) and external control. Program QCMD (Quality Control for Molecular Diagnostics) or interlaboratory control cycles organized by UK NEQAS can be used for the external control of pathogens.
- MeSH
- imunoanalýza metody MeSH
- lidé MeSH
- mucin 1 krev MeSH
- senzitivita a specificita MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- srovnávací studie MeSH
- MeSH
- laboratoře organizace a řízení MeSH
- lidé MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Cíl: Zavedení, charakterizace a porovnaní dvou metod kvantitativního stanovení viru hepatitidy B-HBV DNA. Obě metody používají totožného principu měření na bázi reál time PCR. První z nich je prováděna pomocí analytického systému LightCycler Roche Diagnostics a druhá na přístroji Rotorgene Corbett Research. Předmětem porovnávání metod byla linearita a pracovní rozsah stanovení, mez detekce, klinická senzitivita a specifičnost obou metod a jejich diagnostická správnost. Materiál: Oběma metodami bylo simultánně analyzováno 68 sér pacientů s diagnostikovanou chronickou hepatitidou B v různých fázích choroby. Výsledky: Regresní analýzou jsme stanovili hodnotu korelačního koeficientu r= 0,995 (p < 0,0001), potvrzující velmi úzký vztah mezi souborem výsledků získaných oběma metodami. Přesnost měření obou metod nepřekračuje hodnotu CV = 15 %. Obě metody disponují vysokým rozsahem linearity měření v intervalu lO 3-lO 8 kopií HBV DNA/ml. Diagnostická správnost srovnávaných metod byla vyhodnocena ROC analýzou. Pro obě metody byla zjištěna hodnota klinické sensitivity 100 %, klinická specifičnost metody LightCycler činila 96 % ve srovnání s 95 % u metody Rotorgene. Klinická efektivita, vyjádřená hodnotou AUC (plochy pod krivkou) byla 0,995 (LightCycler) respektive 0,994 (Rotorgene). Metoda LightCycler vykázala vyšší hodnotu pozitivního pravděpodobnostního poměru + LR = 26 oproti hodnotě 19,5 u Rotorgenu. Závěr: Uvedené údaje vypovídají o velmi vysoké hodnotě klinické užitečnosti obou metod.
Objective: Introduce, characterize and compare two methods of hepatitis virus B DNA quantification in serum. Both methods are based on real time PCR principle. Two measurement systems, LightCycler Roche and Rotorgene Corbett Research were used. We evaluated and compared their precision, linearity, limit of detection, clinical sensitivity, clinical specificity and diagnostic accuracy. Materials: By use of mentioned methods we analysed 68 sera from patients with diagnosed chronic hepatitis B in different stages of disease. Results: Correlation coefficient 0,995 (p < 0,0001) obtained by linear regression analysis shows excellent relationship between results of evaluated methods. The coefficients of variation for repeatability and reproducibility indicate very good measurement precision and are in all cases lower than 15 %. Linearity of both methods has very broad range lO 3 -lO 8copies of HBV DNA/ml. It means that majority of samples may be analysed without repeating after sample dilution. By use of ROC analysis we determined AUC value 0,995, clinical sensitivity 100 %, specificity 96 % and positive likelihood ratio (+LR) 26,0 for LightCycler, resp. AUC = 0,994, specificity 95 %, +LR = 19,5 for Rotorgene. Conclusion: All analytical and clinical characteristics of introduced methods show their usefulness for diagnosis and treatment of chronic hepatitis B.
