Diabetic retinopathy (DR) is a feared and frequent complication that is related to the duration and severity of hyperglycemia. Reestablishment of glucose control with pancreas transplantation has been shown to slow down its progression. Experimental data suggests that inhibition of the mammalian target of rapamycin (mTOR) might beneficially affect proliferation of retinal vessels and pathogenesis of macular edema. The aim of the project is to test hypothesis that systemic treatment with everolimus, an mTOR inhibitor registered as an immunosuppressive drug, improves the course of advanced DR. In a prospective clinical study 60 type-1 diabetic recipients with end-stage kidney disease undergoing combined pancreas and kidney transplantation will be randomized for treatment with either everolimus or mycophenoclic acid. A composite ophthalmological end-point and several secondary end-points will be followed for 2 years. Results published in impacted transplant and diabetes journals would be of concern not only for transplant medicine but also for management of diabetes in general.

Diabetická retinopatie (DR) je obávanou a častou komplikací, jež závisí na tíži a délce trvání hyperglykémie. Obnovení glukózové tolerance pomocí transplantace pankreatu může zpomalit její progresi. Experimentální data ukazují, že inhibice mammalian target of rapamycin (mTOR) tlumí proliferaci retinálních cév a rozvoj makulárního edému. Cílem projektu je testovat hypotézu, že systémová léčba mTOR inhibitorem everolimem, jenž je registrován jako imunosupresivní lék, zlepší průběh pokročilé DR po transplantaci. V prospektivní kontrolované nekomerční klinické studii bude 60 pacientů v konečném stádiu diabetické nefropatie na podkladě diabetu 1. typu, kteří podstupují kombinovanou transplantaci pankreatu a ledviny, randomizováno pro léčbu everolimem nebo mykofenolovou kyselinou jako doplňkem k léčbě tacrolimem. Po dobu 2 let budeme sledovat kompozitní oční ukazatel a řadu dílčích očních a metabolických parametrů. Výsledky publikované v impaktovaných transplantačních a diabetologických časopisech budou významné nejen pro transplantační medicínu ale také pro léčbu diabetu obecně.

• MeSH
• diabetická retinopatie terapie   MeSH
• everolimus terapeutické užití   MeSH
• imunosupresivní léčba metody   MeSH
• krevní glukóza MeSH
• lidé MeSH
• mTOR inhibitory terapeutické užití   MeSH
• transplantace ledvin MeSH
• transplantace slinivky břišní MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• hodnotící studie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• transplantologie
• diabetologie
• oftalmologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Publikace je srozumitelnou příručkou pro pacienty s pokročilými komplikacemi diabetu, kteří budou léčeni některou z transplantačních metod. Nakladatelská anotace. Kráceno

• MeSH
• diabetes mellitus * MeSH
• komplikace diabetu MeSH
• transplantace Langerhansových ostrůvků MeSH
• transplantace ledvin MeSH
• transplantace slinivky břišní MeSH
• Publikační typ
• populární práce MeSH
• příručky MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie

Pancreatic islet transplantation today represents a real treatment option for selected subjects with type 1 diabetes suffering from hypoglycemia unawareness syndrome or those who are listed for simultaneous kidney transplantation. Compared with organ pancreas transplantation, the procedure is much safer but long-term results have not been confirmed adequately yet. The aim or this project is to test, if it is possible using islet transplantation to achieve a composite end-point consisting of presence of all of the following criteria: HbA1c < 5.3 % (IFCC), C-peptide > 0.2 pmol/ml, insulin reduction by at least 30 % and complete absence of serious hypoglycemic episodes. The results will be assessed at 6 and 12 month and will be compared with the status before transplantation. In addition, quality of life, blood glucose variability measured by a continuous sensor, electromyography and retinophoto will be evaluated. The results will be used to support the rationales and funding of islet transplantation.

Transplantace izolovaných Langerhansových ostrůvků dnes představuje reálnou možnost léčby vybraných pacientů s diabetem 1. typu se syndromem porušeného vnímání hypoglykémie nebo těch, kteří současně podstupují transplantaci ledviny. Oproti orgánové transplantaci pankreatu se jedná o metodu mnohem bezpečnější, ale dlouhodobý efekt této metody není dostatečně znám. Cílem projektu je posoudit, zda ve srovnání se stavem před transplantací dojde ke splnění kompozitního ukazatele, který zahrnuje nepřítomnost závažných hypoglykémií, hodnotu glykovaného hemoglobinu < 5,3 % a C-peptidu > 0,2 pmol/ml a redukci dávek inzulínu alespoň o 30% či jejich eliminaci a to za 6 a 12 měs. po poslední transplantaci. Dále budeme hotnotit změnu kvality života a variabilitu glykémií měřených kontinuálním sensorem. Vývoj diabetické polyneuropatie a retinopatie bude sledován pomocí EMG a retinofotografie. Výsledky se stanou objektivním podkladem pro indikaci ostrůvkové transplantace a její zdůvodnění.

• MeSH
• deformace percepce MeSH
• diabetes mellitus 1. typu MeSH
• glykovaný hemoglobin analýza   MeSH
• hypoglykemie MeSH
• komplikace diabetu MeSH
• kvalita života MeSH
• monitorování fyziologických funkcí MeSH
• transplantace Langerhansových ostrůvků MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

We will test new methods of protection and cultivation of isolated pancreatic islets designed for transplant therapy of diabetes using the following modifications: supplementation with blood serum in order to improve the cell vitality and to stop collagenase activity, prevention of apoptosis and undesirable cell dedifferantiation by specific inhibitors and the use of mesenchymal stem cells conditioned medium for islet culture. The results will be used as a basis for improvement of the current islet transplant protocol

Budeme testovat nové metody ochrany a kultivace izolovaných Langerhansových ostrůvků určených pro transplantační léčbu diabetu. Tyto metody jsou založené na použití stávajícího kultivačního média doplněného o kompatibilní krevní sérum, inhibitory apoptózy,stimulátory replikace beta buněk a blokátory nežádoucí dediferenciace a dále na použití nového kultivačního média a média kondiciovaného mesenchymálnymi kmenovými buňkami. Výsledky budou sloužit jako základ pro změnu klinického protokolu izolace a kultivace Langerhansových ostrůvků určených k transplantaci.

• MeSH
• diabetes mellitus 1. typu MeSH
• kultivační techniky MeSH
• transplantace Langerhansových ostrůvků MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The pathogenesis of diabetic peripheral neuropathy (DPN) involves hyperglycemia-linked mechanisms which may include changes in the expression of growth factors. In the course of the project epidermal nerve fibre densities and expression of vascular and neural growth factors will be assessed in lower limb skin biopsies of healthy controls, patients with type 1 diabetes mellitus without complications and type 1 diabetic patients at the time of and 1 and 5-10 years after a successful pancreas (and kidney) transplantation with long-term normoglycemia. The epidermal nerve fibre densities will be assessed by indirect immunofluorescence and growth factor skin levels by quantitative RT-PCR. The grant project should evaluate the effect of reestablishment of normoglycemia on epidermal innervation and expression of growth factors in advanced DPN.

Hlavní příčinou vzniku diabetické periferní neuropatie (DPN) je dlouhodobá hyperglykémie s navazujícími mechanismy včetně možných změn úrovně vaskulárních a nervových růstových faktorů. V rámci projektu bude u zdravých dobrovolníků, nemocných s diabetem 1. typu bez komplikací a nemocných s diabetem 1. typu před , 1 rok a 5-10 let po úspěšné transplantaci pankreatu (a ledviny) s dlouhodobou normoglykémií vyšetřena hustota epidermálních nervových vláken a exprese vaskulárních a dalších růstových faktorů v kožních biopsiích z oblasti stehna. Vyšetření hustoty epidermálních nervových vláken bude provedeno pomocí nepřímé imunofluorescence a vyšetření exprese růstových faktorů metodou qRT-PCR. Projekt by měl zhodnotit vliv navození dlouhodobé normoglykémie po transplantaci pankreatu na epidermální inervaci a expresi růstových faktorů u pokročilých forem DPN.

• MeSH
• diabetes mellitus 1. typu MeSH
• pankreas MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Transplantation of insulin-producing tissue is the only curative method for treatment of insulin-dependent diabetes mellitus. Currently, the sole source of transplantable insulin-producing tissue is the cadaveric pancreas, whose availability is three orders of magnitude bellow the clinical need. Published works in principle confirmed that readily available autologous and allogeneic tissues can be differentiated into insulin-producing cell grafts, which can cure diabetes in rodents. The fundamental problem is the lack of an effective and safe differentiation procedure. The key transcription factors controlling the natural beta-cell differentiation were characterized. Bioengineering methods allow for preparation of modified recombinant proteins, which can penetrate into target cells. This innovative project will create a set of modified transcription factors in order to effectively differentiate beta cells. We will evaluate in vitro and in vivo function of the obtained insulin-producing cell grafts.

Transplantace inzulín-produkující tkáně je jediným kurativním způsobem léčby diabetu závislého na inzulínu. Jedinou transplantabilní tkání produkující inzulín jsou dnes kadaverosní slinivky, jejichž dostupnost je řádově nižší než klinická potřeba. Zveřejněné práce v principu potvrdily, že ze snadno dostupných autologních a allogenních tkání lze diferencovat inzulín-produkující buňky, které jsou po transplantaci schopny vyléčit diabetes u hlodavců. Zásadním problémem dosavadních postupů je nízká efektivita diferenciace inzulín-produkujících buněk. Jsou známy klíčové transkripční faktory, které řídí přirozenou diferenciaci beta-buněk. Jsou dostupné bioinženýrské postupy, které umožňují přípravu rekombinatních bílkovin modifikovaných tak, aby pronikly do cílových buněk. V našem předkládaném projektu vytvoříme sadu modifikovaných transkripčních faktorů klíčových pro diferenciaci beta-buněk, využijeme je k optimalizaci diferenciačních podmínek a funkci takto zísaných buněk otestujeme in vitro a in vivo.

• MeSH
• inzulin MeSH
• messenger RNA MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

To improve prognosis of Langerhans islet (LI) transplantation we'll study cell biology and in situ bioenergetics of their beta cells during glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) and conditions of the oxidative stress and apoptosis induction. We'llcom-pare bioenergetics, insulin secretion, and mitochondrial network morphology at athmospheric O2, at normoxia (for pancreas ~8% O2) and at hypoxia (< 8% O2). We'll test agents and suggest procedures preventing hypoxic damage. The results will serve foroptimization of incubation medium, for design of three vitality tests, respiratory test, test of the oxidative stress and test based upon screening of mitochondrial morphology (either electron microscopic cristae survey or screening of patterns of mitochondrial network morphology). We shall design procedure to prevent hypoxia of liver resident LI after transplantation.

Pro zlepšení prognózy transplantace Langerhansových ostrůvků (LO) prozkoumáme buněčnou biologii a bioenergetiku jejich beta buněk při glukosou-stimulované sekreci insulinu (GSIS) a podmínky vzniku oxidačního stresu či apoptózy při manipulacích s LO. Porovnáme bioenergetiku, insulinovou sekreci a morfologii mitochondriální sítě za atmosferického tlaku kyslíku, normo-xického tlaku kyslíku (pro pankreas ~8%) a při hypoxii (< 8% O2). Otestujeme agens a navrhneme postupy zabraňující hypoxic-kým změnám. Poznatky zúročíme optimalizací inkubační média, třemi diagnostickými testy, respiračním, testem oxidačního stresu a testem mikroskopickým (morfologie mitochondriální sítě) a zajistíme prevenci hypoxie LO residentních v játrech.

• MeSH
• hypoxie MeSH
• mitochondriální DNA MeSH
• mitochondrie MeSH
• oxidační stres MeSH
• reaktivní formy kyslíku MeSH
• transplantace Langerhansových ostrůvků MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• endokrinologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The aim of the project is a stem or progenitor cells isolation from adult pancreas tissue and the characterization of these cells, which are able to create an insulin producing tissue. Their features will be tested in vitro as well as after experimentaltransplantation into diabetic animals.

Cílem projektu bude izolace a charakterizace kmenových resp. progenitorových buněk z tkáně dospělého pankreatu schopných vytvořit insulin produkující tkáň, jejíž vlastnosti budou testovány in vitro a po experimentální transplantaci diabetickým zvířatům.

• MeSH
• beta-buňky MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• diabetes mellitus MeSH
• dospělé kmenové buňky MeSH
• inzulin MeSH
• modely u zvířat MeSH
• transplantace Langerhansových ostrůvků MeSH
• transplantační imunologie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

We will use the knowledge of morphological changes of mitochondria of pancreatic beta cells, skeletal muscle, and heart in rat diabetic models and corresponding cell lines to develop a future diagnostics of early type 2 diabetes. We shall evaluate possibilities of similar diagnostics for Langerhans islets for a possible future tests of their quality prior to transplantation. Morphology will be studied by confocal and electron microscopy. Exp. models will involve skeletal muscle biopsies of patients skeduled for operations, rat insulinoma INS-E cells; rat cardiomyoblasts, isolated rat Langerhans islets, Zucker diabetic fatty and Goto-Kakizaki rats.

Budeme aplikovat nálezy změn morfologie mitochondrií u beta buňek pankreatu, kosterních svalů a srdce u diabetických potkanních modelů a buň. linií za účelem vývoje budoucí diagnostiky časných stadií diabetu 2. typu. Prověříme obdobnou diagnostiku Langerhansových ostrůvků pro budoucí test jejich kvality před transplantací. Morfologie bude studována konfokální a elektronovou mikroskopií Exp. modely zahrnou: bioptické vzorky chirurgických pacientů; potkaní kardiomyoblasty, a insulinomovu linii INS1E; izolované potkanní Langerhansovy ostrůvky a Zuckerovy diabetické obézní potkany a potkany kmene Goto-Kakizaki.

• MeSH
• časná diagnóza MeSH
• diabetes mellitus 2. typu diagnóza   MeSH
• elektronová mikroskopie MeSH
• fosforylace MeSH
• konfokální mikroskopie MeSH
• krysa rodu rattus MeSH
• Langerhansovy buňky MeSH
• mitochondrie MeSH
• modely nemocí na zvířatech MeSH
• oxidační stres MeSH
• Check Tag
• krysa rodu rattus MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• cytologie, klinická cytologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The aim of this project is to improve the function of transplanted ischemically impaired organs (kidney, pancreas, islets) by storage in oxygenated perfluorocarbon in a rat model using so called two-layer method for cold storage.

Cílem projektu je zlepšení efektu transplantace ischemicky poškozených orgánů (pankreatu, ledviny, Langerhansových ostrůvků) použitím perfluorocarbonu. Perfluorocarbon bude používán při konzervaci odebraného orgánu jako součást tzv. two-layer method k jeho extrakorporálnímu okysličení. Experimenty budou prováděny na laboratorních potkanech.

• MeSH
• 2D gelová elektroforéza MeSH
• fluorokarbony MeSH
• potkani inbrední BN MeSH
• studená ischemie MeSH
• transplantace Langerhansových ostrůvků MeSH
• transplantace ledvin MeSH
• transplantace slinivky břišní MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR