Většina v současné době rutinně prováděných koagulačních a molekulárně biologických vyšetření je zaměřena vždy jen na část koagulačního systému nebo jeho jednotlivý parametr. I přes pokroky v diagnostice poruch krevního srážení stále zůstává část pacientek, u kterých závažný klinický průběh těhotenských komplikací nekoreluje s výsledky dostupných vyšetření. Exprese tkáňového faktoru a jeho inhibitoru (TFPI), na základě posledních znalostí jeho patofyziologického působení, je možným markerem vzniku těhotenských komplikací. Tkáňový faktor (TF), hlavní buněčný iniciátor aktivace koagulační proteázové kaskády, hraje důležitou roli jak u trombózy tak u zánětu. Komplexy TF přispívají k iniciaci zánětu štěpením proteázami aktivovaných receptorů (PAR), a tím zvyšují expresi TNF- , interleukinů a adhezivních molekul. V souladu s touto hypotézou předpokládáme, že TF by mohl být zapojen do pronikání mezi zánětem a trombózou, které jsou zodpovědné za komplikace v těhotenství.; Most of the currently routine coagulation tests and molecular biology is focused only on the part of the coagulation system or a single parameter. Despite advances in the diagnosis of disorders of blood clotting is still part of the patients in whom the clinical course of severe pregnancy complications does not correlate with the results of available tests. Expression of tissue factor and its inhibitor (TFPI), based on recent knowledge of its patofyziologického effect, a possible marker of pregnancy complications. Tissue factor (TF), plays an important role both in inflammation and thrombosis. Complexes of TF contribute to the initiation of inflammation cleavage protease activated receptors (PAR) and thereby increase the expression of TNF-, interleukins and adhesion molecules. in line with this hypothesis we assume that the TF might be involved in penetration between inflammation and thrombosis, which are responsible for complications in pregnancy.

• MeSH
• faktor VIIa MeSH
• hematologické komplikace těhotenství MeSH
• koagulační faktory MeSH
• preeklampsie prevence a kontrola   MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• tkáňový faktor analýza   MeSH
• ženy MeSH

• Konspekt
• Gynekologie. Porodnictví
• NLK Obory
• gynekologie a porodnictví
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Předkládaný projekt se zabývá extramedulárním relapsem (EM) u pacientů s mnohočetným myelomem. V současnosti jsou používány nové efektivní léky, které ovlivňují výskyt tohoto agresivního relapsu. Naše studie se zaměří na charakterizaci plasmocytů jak z dřeně, tak z měkkotkáňových ložisek cytogenetickými a molekulárně biologickými metodami. Bude provedena prospektivní analýza výskytu EM u různých skupin pacientů a bude navržena změna léčebného protokolu.; This proposed project focuses on extramedullary relapse (EM) in patients with multiple myeloma. Currently, new effective drugs are used that seem to influence the occurence of this aggressive relapse. Our study will aim at characterization of plasmocytesfrom marrow as well as soft tissue lesions by cytogenetic and molecular biological methods. Retrospective analysis of EM occurence will be performed in various groups of patents and a change in the treatment protocol will be proposed.

• MeSH
• analýza přežití MeSH
• chromozomální aberace MeSH
• exprese genu MeSH
• fenotyp MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční MeSH
• incidence MeSH
• kostní dřeň MeSH
• kvalita života MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   etiologie   farmakoterapie   patofyziologie   terapie   MeSH
• plazmatické buňky cytologie   MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• prospektivní studie MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• recidiva MeSH
• výsledek terapie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Projekt je zaměřen na poznání nových mechanismů účinků vybraných platinových (Pt) cytostatik, ligandů PPAR? a jejich kombinací na molekulární a buněčné úrovni. U buněčných linií odvozených z nádorů kolonu a prostaty (senzitivních i rezistentních včetně specifických transfektantů a ?knock-out? linií) budou analyzovány specifické geny a proteiny regulující buněčný cyklus a apoptózu. Očekáváme odlišnou expresi u buněčných populací odvozených z normálních a nádorových tkání. Zjištěné rozdíly budou srovnávány s výsledky klinických vzorků z pacientů s analogickými nádory, což přispěje k lepšímu pochopení a nové interpretaci výsledků. Cílem je postihnout podstatné rozdíly z hlediska cytokinetiky a pokusit se odvodit jejich význam pro predikci účinnosti léčbyPt cytostatiky (včetně nových vysoce účinných komplexů) a posoudit úlohu ligandů PPAR? (potenciální kooperativní efekt) v těchto procesech s využitím nejmodernějších metod molekulární biologie a analytické cytometrie.; The project aims to improve our understanding of novel mechanisms of the effects of platinum (Pt) cytostatics, PPAR? ligands and their combinations at both molecular and cellular level. We will analyze specific genes and proteins regulating cell cycle and apoptosis in cell lines derived from colon and prostate carcinoma (incl. both sensitive and resistant cells, specific transfectants and knock-outs). We expect a distinct expression in cells derived from tumour and normal tissues. The identified differences will be compared with clinical samples derived from patients with analogous tumours, in order to improve the interpretation of results. The goal is understanding of significant differences from the point of view of cytokinetics, interpretation of their importance for prediction of therapy with Pt cytostatics (incl. novel complexes) and analysis of the role of PPAR? ligands in these potential cooperative effect using up-to-date methods of molecular biology and analytical cytometry.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• buněčný cyklus MeSH
• cytostatické látky terapeutické užití   MeSH
• lidé MeSH
• molekulární biologie MeSH
• nádory prostaty farmakoterapie   MeSH
• nádory tračníku farmakoterapie   MeSH
• nádory farmakoterapie   MeSH
• platina terapeutické užití   MeSH
• PPAR gama terapeutické užití   MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Farmacie. Farmakologie
• NLK Obory
• farmacie a farmakologie
• onkologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Diamondova-Blackfanova anémie (DBA) je vzácná vrozená aplazie erytropoézy. Etiologie byla částečně objasněna teprve v posledních letech. U 40-50% pacientů byly nalezeny mutace genů pro ribosomální proteiny (RP). Etiologie nemoci u ostatních pacientů neníjasná. Nejnověji je intenzivně zkoumán možný vliv změn exprese proteinu p53. Prognóza pacientů s těžkou anémií je nejistá, léčebné možnosti omezené. Bude vytvořena databáze pacientů s DBA v České republice, vyšetřeny základní charakteristiky anémie. Budou zkoumány SNP genů pro NQO1 a MDM2 pomocí PCR technik a sekvenování, exprese genů pro proteiny p53, p21, hTERT pomocí mnohobarevné průtokové cytometrie. U pacientů bez dosud známé mutace bude analyzována přítomnost mutací genů pro RP a jiné proteiny proteosyntetického aparátu metodou vysokokapacitního sekvenování. Smyslem projektu je identifikace patogenetických mechanizmů nemoci, upřesnění diagnostiky, hledání nových léčebných možností s cílem zlepšení kvality života pacientů a prognózy onemocnění.; Diamond-Blackfan anaemia (DBA) is a rare inherited erythroid aplasia. The etiology was only partly elucidated in 1999 with the discovery of mutated ribosomal protein (RP) S19. DBA is the first known hematological disease caused by ribosomal protein mutations. Recent studies have found a relation between mutations in ribosomal protein genes and the tumor suppressor p53 stability that may be important in DBA pathogenesis. In the cohort of 30 paediatric DBA patients haematological and biochemical indiciesof anaemia will be assessed. Mutations of RP genes and proteins involved in ribosomal biogenesis, single nucleotide polymorphisms of NQO1 and MDM2 protein by sequencing and PCR method and expression of p53, p51 and hTERT using the method of flow cytometry wiill be examined with the aim to determine their influence on the disease etiology and phenotype. The aim of the project is identification of pathogenetic mechanism and creation of new diagnostic and treatment algorithms for DBA.

• MeSH
• časná diagnóza MeSH
• diagnostické techniky molekulární metody   využití   MeSH
• Diamondova-Blackfanova anemie diagnóza   terapie   MeSH
• exprese genu MeSH
• geny p53 MeSH
• iniciace translace peptidového řetězce MeSH
• jednonukleotidový polymorfismus MeSH
• kvalita života MeSH
• mutace MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   využití   MeSH
• prognóza MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• registrace MeSH
• ribozomální proteiny MeSH
• vrozené, dědičné a novorozenecké nemoci a abnormality prevence a kontrola   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• genetika, lékařská genetika
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Vytvoření moderního prognostického panelu u pacientů s monoklonální gamapatií nejasného významu za použití konvenčních rizikových faktorů maligní transformace i nových genomických a flowcytometrických parametrů. Včasné odhalení rizika maligní transformace MGUS jako prekancerózy do plně rozvinutého nádorového onemocnění. Vytvoření citlivého prediktivního nástroje maligního zvratu MGUS jako prvního kroku pro preventivní experimentální léčbu.; Development of a prognostic panel for patients with monoclonal gammopathy of unknown significance using conventional risk factors for malignant transformation as well as novel parameters based on genomic and flowcytometric analysis. Early identificationof patients at a high risk of malignant transformation into established cancer. Creation of a sensitive prediction tool for malignant transformation of MGUS as a first step towards prophylactic experimental treatment.

• MeSH
• lehké řetězce imunoglobulinů analýza   MeSH
• monoklonální gamapatie nejasného významu MeSH
• nádorová transformace buněk MeSH
• prekancerózy diagnóza   prevence a kontrola   terapie   MeSH
• prognóza MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• radiologie, nukleární medicína a zobrazovací metody
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Tento projekt se zabývá reprogramováním somatických buněk na buňky pluripotentní pomocí indukce microRNA. Celkem budou miRNA transfekovány 3 buněčné linie. Úspěšnost indukce bude hodnocena pomocí reportérového genu spojeného s pluripotentním promotorem.Pluripotence bude hodnocena také pomocí microarrays. Čistá populace pluripotentích buněk bude izolována pomací FACS. Nervová diferenciace bude prováděna pomocí standardizovaného protokolu.; This project concerns reprogramming somatic cells into pluripotent cells by micro RNA induction. Three cell lines will be transfected with miRNA. The success in reprogramming will be validated by reporter gene driven by pluripotent marker and by next validation of pluripotency will be done by microarrays. Neural differentiation will be performed according to standardized protocol.

• MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• embryonální kmenové buňky MeSH
• fibroblasty MeSH
• indukované pluripotentní kmenové buňky MeSH
• mikro RNA MeSH
• neurony MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• zubní dřeň MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• neurologie
• biologie
• cytologie, klinická cytologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Znalosti o původu a vlastnostech prionů v krvi jsou velmi omezené. Detekce patologického prionového proteinu (PrPtse) v krvi je komplikována přítomností normálního buněčného prionového proteinu (PrPc). Detekce PrPtse na krevních buňkách je omezena nedostupností protilátek schopných rozlišit mezi PrPc a PrPtse. Až v posledni době se podařilo připravit unikátní protilátky schopné specificky rozeznat PrPtse. Dvě z nich, V5B2 a 4C2, nám byly poskytnuty zahraničními spolupracovníky pro realizaci tohoto projektu. Předpokládáme, že PrPtse se v krvi koncentruje v malé specifické subpopulaci buněk. Použití konformačních protilátek by pak mělo umožnit jeho detekci. Pro ověření naší hypotézy plánujeme provést kvantitativní studii exprese PrPc / PrPtse na subpopulacích krevních buněk pacientů s CJN pomocí multibarevné průtokové cytometrie. Kromě toho budeme sledovat hladinu PrPc / PrPtse v plazmě a likvoru pomocí vysoce citlivé ELISA a vyšetříme krevní hladiny mRNA pro vybrané potenciální markery CJN.; Very little is known about the nature of prions in blood. Detection of pathological prion protein (PrPtse) in blood is complicated by the presence of substantial amount of cellular prion protein (PrPc) and by unavailability of PrPtse specific antibodies.Recently, a small number of antibodies that can discriminate between PrPc and PrPtse was developed. Two of these, V5B2 and 4C2, were made available to us by collaborating laboratories. We hypothesize that PrPtse may be preferentially present and concentrated on a minor population of blood cells and that the use of conformation specific antibodies may allow its detection. To test our hypothesis we plan to utilize quantitative multi-color flow cytometry to study PrPc / PrPtse expression on blood cells ofsymptomatic CJD patients. In addition we will evaluate the level of PrPc / PrPtse in plasma and cerebral spinal fluid by sandwich ELISA and blood levels of mRNA for selected potential markers of CJD using quantitative PCR.

• MeSH
• Creutzfeldtova-Jakobova nemoc krev   přenos   MeSH
• ELISA metody   využití   MeSH
• messenger RNA analýza   krev   MeSH
• monoklonální protilátky MeSH
• prionové nemoci diagnóza   prevence a kontrola   přenos   MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• neurologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Monoklonální protilátky se významně podílejí na léčbě řady nádorů. V hematoonkologii mají nejširší uplatnění protilátky rituximab (anti-CD20) a alemtuzumab (anti-CD52) v léčbě non-hodgkinských lymfomů a chronických lymfoidních leukémií. Cílem projektu jestanovit kvantitativně expresi antigenů CD20 a CD52 v jednotkách MESF na nádorových buňkách lymfomů a leukémií pomocí kvantitativní multiparametrické flow cytometrie. Exprese antigenů CD20 a CD52 na nádorech bude srovnána s expresí na fyziologických lymfocytech. U pacientů léčených protilátkou bude sledována odpověď na léčbu, minimální reziduální nemoc a densita exprese antigenů po ukončené léčbě. Výsledky projektu budou mít význam pro správné stanovení indikací léčby u dané diagnózy, optimalizaci dávkovacích schémat a účinnosti léčby a indikaci retreatmentu monoklonálními protilátkami anti-CD20 a anti-CD52 v případě relapsu nemoci.; Monoclonal antibodies became a significant and standard part of treatment of various types of cancer. In hematooncology, rituximab (anti-CD20] and alemtuzumab (anti-CD52) are widespread used in treatment of non-Hodgkin's lymphomas and chronic leukemias.The aim of thid project is to determine quantitatively the expression of CD20 and CD52 in MESF units on the tumor cells of lymphomas and leukemias with quantitative multiparametric flow cytometry. CD20 and CD52 expression on tumor cells and normal lymphocytes will be compared. In patients treated with antibody, the response to the treatment, minimal residual disease and antigen density after the treatment will be evaluated. The results will have an impact to the correct indication of monoclonal antibodytreatment in particular diagnosis, optimization of dosage and effectiveness of treatment, and indication of retreatment with antibodies in the case or relapsing disease.

• MeSH
• antigeny CD20 MeSH
• CD antigeny MeSH
• exprese genu MeSH
• lymfoidní leukemie farmakoterapie   MeSH
• monoklonální protilátky farmakokinetika   MeSH
• nehodgkinský lymfom farmakoterapie   MeSH
• průtoková cytometrie využití   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• hematologie a transfuzní lékařství
• farmacie a farmakologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Na základě výsledků studií u pacientů s hepatitidami C a malignitami chceme prokázat zvýšení počtu, produkce IFN-gamma a Perforinu HIV-specifickými CD8+ T lymfocyty po inkubaci s Histaminem a IL-2 in vitro. Předpokládáme jejich synergický efekt. Histaminaktivuje cytotoxické CD8+ T lymfocyty (CTL) a zlepšuje jejich funkci, IL-2 je nezbytný pro jejich vyzrávání. Funkce CTL vyšetříme s využitím systému ELISPOT (IFN-gamma)a cytometricky (Perforin). Předpokládaný synergický efekt Histaminu a IL-2 na zlepšení cytotoxických funkcí CD8+ HIV-specifických T lymfocytů vytvoří podmínky pro další studium a může zlepšit prognózu HIV+ pacientů. Jedná se o originální, zatím nepublikovaný návrh na zlepšení cytotoxických funkcí HIV-specifických CD8+ T lymfocytů.; Based on the results of the study with patients with hepatitis C and some oncologic diseases we will study in vitro activation of HIV-specific CD8+ T lymphocytes after incubation with the Histamine, IL-2: their count, production of Perforin and IFN-gammaHistamine induces activation of cytotoxic CD8+ T Lymphocytes and improves their functional activation. IL-2 induces maturation of HIV-specific CD8+ T lymphocytes. We will investigate the production of IFN-gamma by ELISPOT and production of Perforine. Weexpect a synergistic effects of Histamine and IL-2. Enhancement of cytotoxic CD8+ HIV-specific functions should improve the conditions for other experiments and for prognosis of HIV+ patients. It is an original, unpublished project.

• MeSH
• aktivace lymfocytů MeSH
• CD8-pozitivní T-lymfocyty MeSH
• cytotoxické T-lymfocyty MeSH
• hepatitida C imunologie   terapie   MeSH
• histamin terapeutické užití   MeSH
• HIV infekce imunologie   terapie   MeSH
• interleukin-2 MeSH
• perforin MeSH
• průtoková cytometrie využití   MeSH
• vysoce aktivní antiretrovirová terapie metody   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• infekční lékařství
• biochemie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Cílem projektu je přispět k objasnění role vybraných humorálních a buněčných regulačních mechanismů v etiopatogenezi orgánově specifických autoimunit: autoimunitních endokrinopatií a celiakie. Třikrát v odstupu 9 měsíců projektu bude vyšetřeno 140 pacientů s různými autoimunitními endokrinopatiemi a celiakií a kontrolní skupina 20 osob. U každé osoby budou vyšetřeny vybrané parametry imunitního systému (anti-C1q protilátky, nový komplementový inhibitor CRIT, regulační T lymfocyty, exprese kostimulačníchmolekul, intracelulární cytokiny) v krvi a v punktátech štítné žlázy. Předmětem výzkumu bude zjistit, liší-li se tyto parametry u jednotlivých typů autoimunit a kontrolní skupiny, liší-li se v periferní krvi a lokálně v punktátech získaných FNAB a mají-li vztah k průběhu onemocnění.; The aim of the project is to gain better unterstanding of the immunological pathogenesis of organ-specific autoimmune disorders, especially autoimmune endocrinopathies and celiac disease, and thus achieve a better therapeutical approach. In the 1., 2. and 3. year 140 outpatients with autoimmune endocrinopathies and celiac disease and 20 control persons will be repeatedly examined. Parameters of the immune system (anti-C1q antibodies, CRIT on thyrocytes, regulatory T-lymphocytes, co-stimulatory and adhesive molecules, intracellular cytokines) will be examined in blood and in case of thyroid disease, also in thyroid aspirates. We want do determine the differences between each autoimmune disorder (thyroiditis, diabetes type 1, polyglandular disorders, celiac disease), compare the data in peripheral blood and thyroid aspirates, and study their relation to the course of disease.

• MeSH
• autoimunitní nemoci MeSH
• autoimunitní polyglandulární syndromy patofyziologie   MeSH
• autoimunitní tyreoiditida imunologie   MeSH
• cytokiny MeSH
• Gravesova nemoc imunologie   MeSH
• Hashimotova nemoc imunologie   MeSH
• komplement C1q MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• endokrinologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR