To improve knowledge about pathological homocysteine metabolism and relation to oxidative stress, gonadal function and DNA structure of human germinal cells. To analyze predictive value of homocysteine, oxidative stress and sperm chromatine integrity forexamination and treatment of human infertility. To identify health risks factors of life style and their impact on reproductive health and improve effective prevention.

Získání nových poznatků o patologickém metabolismu homocysteinu, jeho souvislosti s oxidačním stresem a poškozením DNA lidských zárodečných buněk a funkcí gonád. Ověření prediktivní hodnoty vyšetření homocysteinu, oxidačního stresu a integrity chromatinuspermie pro diagnostiku a léčbu poruch plodnosti. Identifikace zdravotních rizik vyplývajících ze způsobu života a jejich vlivu na reprodukční zdraví, zlepšení předpokladů pro efektivní prevenci.

• MeSH
• asistovaná reprodukce MeSH
• chromatin MeSH
• folikulární tekutina MeSH
• hodnocení rizik MeSH
• homocystein genetika   metabolismus   MeSH
• infertilita patofyziologie   MeSH
• oxidační stres MeSH
• reprodukční zdraví MeSH
• spermie MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• reprodukční lékařství
• biochemie
• vnitřní lékařství
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Cíl: Seminální plazma obsahuje proteiny, které jsou důležitými markery patologií reprodukčního ústrojí. Cílem práce je analyzovat rozdíly detekované v proteomu seminální plazmy mužů s azoospermií a dárců spermatu. Materiál a metodika: Vzorky seminální plazmy byly získány standardním postupem od mužů s azoospermií a dárců spermatu a zamrazeny v kapalném dusíku. Proteiny ve vzorcích byly solubilizovány lyzačním pufrem obsahujícím detergent CHAPS. Výsledné proteinové izoláty byly separovány dvourozměrnou gelovou elektroforézou (2-DE). V prvním rozměru byl pro izoelektrickou fokusaci použit imobilizovaný gradient pH 3?10 NL, pro dělení v druhém rozměru 12 % SDS-PAGE. Proteiny v gelu byly barveny fluorescenčním barvivem Sypro Ruby. Kvalitativní a kvantitativní rozdíly mezi jednotlivými vzorky byly vyhodnoceny pomocí programu PDQuest. Proteiny ve vybraných spotech vykazující rozdíly byly následně štěpeny trypsinem a identifikovány pomocí MALDI-MS/MS (resp. LC-MS/MS) a vyhodnocovacího programu Mascot. Výsledky: Vyšetření byla provedena na vzorcích od 6 dárců spermatu a 6 mužů s azoospermií. V proteomu dárců spermatu s normospermií byly nalezeny minimální rozdíly, mezi dárci spermatu a skupinou pacientů s azoospermií byly zjištěny četné kvalitativní a kvantitativní rozdíly. Na základě výsledků analýzy obrazu bylo pomocí hmotnostní spektrometrie identifikováno 18 kvalitativně odlišných proteinů. Závěr: Bylo nalezeno 18 kandidátních proteinů, které mohou být potenciálními biomarkery azoospermie. Komparativní proteomika je perspektivním nástrojem výzkumu poruch plodnosti a oxidačního stresu.

• Klíčová slova
• neplodnost,
• MeSH
• analýza spermatu metody   MeSH
• azoospermie diagnóza   MeSH
• biologické markery MeSH
• financování organizované MeSH
• hmotnostní spektrometrie využití   MeSH
• krevní plazma MeSH
• lidé MeSH
• mužská infertilita diagnóza   MeSH
• oxidační stres MeSH
• proteom analýza   diagnostické užití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH

Metabolizmus homocysteinu a dalších thiolů hraje významnou roli v řadě fyziologických procesů v lidských gonádách. Jeho narušení je spojeno se zvýšeným rizikem oxidačního stresu a s ovlivněním methylačních reakcí. Nerovnováha mezi nadprodukcí volných radikálů a účinností antioxidačních systémů zárodečných buněk je považována za jeden ze základních faktorů poškození buněčné membrány a genetické informace. Hyperhomocysteinemie inhibuje methylační reakce hrající důležitou roli mimo jiné při opravách DNA a stabilizaci genomu. Cílem práce je uvést přehled současných poznatků o metabolizmu homocysteinu a ostatních thiolů v souvislosti s lidskou reprodukcí.

• Klíčová slova
• thioly, neplodnost,
• MeSH
• asistovaná reprodukce MeSH
• estradiol fyziologie   MeSH
• glutathion MeSH
• habituální potrat MeSH
• homocystein fyziologie   metabolismus   škodlivé účinky   MeSH
• hyperhomocysteinemie MeSH
• klinické zkoušky jako téma MeSH
• lidé MeSH
• mužská infertilita MeSH
• oxidační stres MeSH
• reprodukční chování MeSH
• samovolný potrat MeSH
• sulfhydrylové sloučeniny fyziologie   metabolismus   škodlivé účinky   MeSH
• těhotenství MeSH
• vrozené vady MeSH
• ženská infertilita MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• těhotenství MeSH
• ženské pohlaví MeSH

PURPOSE: To determine intraindividual variability in concentrations of homocysteine and related thiols in follicular fluids of particular follicles after ovarian stimulation and assess the differences between follicles with/or without oocytes. METHODS: HPLC-FD analysis of plasma and follicular fluid cysteine, homocysteine, cysteinylglycine and glutathione in women undergoing IVF. RESULTS: In blood plasma, the homocysteine, cysteine, and cysteinylglycine concentrations decreased significantly during stimulation with rec FSH (p<0.001). We found significant differences in concentrations of cysteine and glutathione between follicles with or without retrieved oocytes. High intraindividual variability in concentrations of thiols was determined. CONCLUSIONS: The concentration variability of thiols between single follicles is very high and we recommend mean at least from 3 follicles with/or without oocytes for characterization of each woman. It is the best to examine individual follicles for further research and analysis of fertility outcomes.

• MeSH
• cystein krev   metabolismus   MeSH
• dipeptidy krev   metabolismus   MeSH
• dospělí MeSH
• folikulární tekutina metabolismus   MeSH
• glutathion krev   metabolismus   MeSH
• homocystein krev   metabolismus   MeSH
• lidé MeSH
• sulfhydrylové sloučeniny krev   metabolismus   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Cíl studie: Představení technik reprodukční ochrany u pacientů s nově diagnostikovaným onkologickým onemocněním dokumentované vlastními zkušenostmi z praxe. Typ studie: Literární přehled a vlastní zkušenosti. Název a sídlo pracoviště: Gynekologicko-porodnická klinika LF MU a FN Brno. Předmět a metodika: Práce prezentuje možnosti ochrany reprodukčních funkcí u pacientů s nově diagnostikovaným onkologickým onemocněním v reprodukčním věku. Autoři popisují jednotlivé techniky reprodukční ochrany a možnosti jejich využití v klinické praxi, které jsou dokumentovány vlastními praktickými zkušenostmi. Závěr: Onkofertilita jako nová medicínská disciplína nabízí moderní, ale zároveň reálnou možnost podpůrné léčby mladým lidem, kteří musí bojovat s rakovinou. Zatím neexistuje efektivní a univerzální technika reprodukční ochrany vhodná pro každého pacienta. Poskytování těchto specializovaných poradenských služeb by mělo být směrováno do center, kde je možné pacientovi nabídnout celé portfolio metod reprodukční ochrany.

Effective treatment of cancer often causes patients irreversible damage of reproductive abilities. New trend in reproductive medicine commonly described as oncofertility offers cancer patients not only infertility treatment, but also potent prevention of irreversible damage of reproductive organs and functions. Efficacious methods of women reproductive function damage prevention has been developed at Brno University Hospital Department of Obstetrics and Gynecology since year 2004. The paper describes current oncofertility techniques implemented to clinical practice – embryo and oocyte banking, ovarian tissue cryopreservation including further possibility of its orthotopic autotransplantation and administration of gonadoliberin analogues for ovarian protection. During past 6 years expert consultation before start of gonadotoxic treatment has been provided to 195 young women with newly diagnosed cancer or autoimmune disease. Attention is applied to pro and contras of previously described methods of ovarian protection in the discussion. Limitations regarding implementation of oncofertility techniques in practice are mentioned. Furthermore short recommendations regarding pre-treatment oncofertility consultation with patients are given.

• Klíčová slova
• kryokonzervace oocytů, kryokonzervace ovariální tkáně, neplodnost,
• MeSH
• dospělí MeSH
• hormon uvolňující gonadotropiny analogy a deriváty   MeSH
• kryoprezervace MeSH
• lidé MeSH
• mužská infertilita etiologie   prevence a kontrola   MeSH
• nádory terapie   MeSH
• oocyty MeSH
• těhotenství MeSH
• tkáňové banky MeSH
• vitrifikace MeSH
• ženská infertilita etiologie   prevence a kontrola   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• těhotenství MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

PURPOSE: The aim of this study was to use digital holographic microscopy (DHM) in human sperm imaging and compare quantitative phase contrast of sperm heads in normozoospermia (NZ) and oligoasthenozoospermia (OAT). METHODS: DHM spermatozoa imaging and repeated quantitative phase shift evaluation were used. Five NZ and 5 OAT samples were examined. Semen samples were examined by semen analysis and processed for DHM. Main outcome measures were maximum phase shift value of the sperm heads. Differences of the phase shift and in NZ and OAT samples were statistically tested. RESULTS: In NZ samples median phase shifts were in the range 2.72-3.21 rad and 2.00-2.15 in OAT samples. Differences among individual samples were statistically significant (p < 0.001) in both groups. Median phase shift according to sperm count was 2.90 rad in NZ samples and 2.00 rad in OAT samples. This difference was statistically significant (p < 0.001). CONCLUSION: Quantitative evaluation of the phase shift by DHM could provide new information on the exact structure and composition of the sperm head. At present, this technique is not established for clinical utility.

• MeSH
• dospělí MeSH
• hlavička spermie ultrastruktura   MeSH
• holografie MeSH
• lidé MeSH
• mikroskopie metody   MeSH
• spermie ultrastruktura   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Souhrn: Práce podává přehled o vývoji a možnostech kryokonzervace zárodečných buněk, embryí a tkání v asistované reprodukci. Uvádí indikace k mrazení a skladování spermií, oocytů, embryí, testikulární a ovariální tkáně. Popisuje dva zmrazovací a rozmrazovací postupy (pomalé počítačem řízené mrazení, vitrifikace) včetně použití kryoprotektiv (glycerol, DMSO, PROH). Před skladováním je nutné provést sérologické vyšetření na HIV1, 2, hepatitis a syfilis, aby se zabránilo křížové kontaminaci biologického materiálu v prostředí skladovacího kontejneru.

• Klíčová slova
• kryoprotektivum, rozmrazení, oocyt, embryo, ovariální tkáň,
• MeSH
• asistovaná reprodukce MeSH
• embryo savčí MeSH
• kryoprezervace metody   využití   MeSH
• lidé MeSH
• oocyty MeSH
• ovarium MeSH
• spermie MeSH
• vitrifikace MeSH
• zákonodárství lékařské MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Cílem práce je aktuální přehled racionálního využití analog gonadoliberinu (GnRH = gonadotropin releasing hormone) při terapii poruch plodnosti žen. Pro rešerši průkazných dokumentů byly použity databáze Cochrane Library Reviews and Protocols, Database of Abstractsof Reviews of Effects (DARE) a MEDLINEplus a léčebné postupy Centra asistované reprodukce Gynekologicko-porodnické kliniky. GnRH-analoga jsou využívána při léčbě endometriózy, děložních myomů, v protokolech ovariální stimulace pro metody asistované reprodukce a pro ochranu ovarií při gonadotoxické léčbě. GnRH-analoga mají velký přínos pro terapii poruch plodnosti žen.

Objective to provide the most up to date overview of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) analogues application in human infertility treatment. Papers extracted from the Cochrane Library of Reviews and Protocols, Database of Abstracts of Reviews of Effects (DARE), MEDLINEplus and the treatment guidelines used in our Assisted Reproduction Centre were analysedGnRH analogues are used in the treatment of endometriosis, uterine fibromyomas, in ovarian stimulation protocols and for fertility protection during gonadotoxic treatment. GnRH analogues represent a very effective way of treatment of fertility disorders.

• Klíčová slova
• GnRH analoga, triptorelin, neplodnost, myomatóza,
• MeSH
• antitumorózní látky škodlivé účinky   MeSH
• endometrióza farmakoterapie   MeSH
• financování organizované MeSH
• hormon uvolňující gonadotropiny analogy a deriváty   aplikace a dávkování   MeSH
• lidé MeSH
• myom farmakoterapie   MeSH
• primární ovariální insuficience farmakoterapie   chemicky indukované   MeSH
• uterus patologie   MeSH
• ženská infertilita etiologie   farmakoterapie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Poruchy plodnosti se v současné době projevují u 15–20 % párů snažících se o těhotenství. V České republice se v současnosti rodí více jak 3 % dětí po metodách asistované reprodukce. K základním lékům na stimulaci ovulace patří clomifen citrát, pro cykly in vitro fertilizace (IVF) se nejčastěji využívají protokoly s folikulostimulačním hormonem (FSH) kombinované s analogy gonadoliberinu (GnRH analoga). Pro indukci maturace oocytů se využívá aplikace lidského choriového gonadotropinu (hCG). Základem podpory sekreční transformace endometria a luteální fáze cyklu je aplikace progesteronu. Pečlivé monitorování průběhu stimulace a komplexní zázemí centra včetně možnosti hospitalizace jsou důležitým předpokladem snížení rizik nežádoucích účinků léčby neplodnosti.

Approximately 15–20 % couples have problems with fertility. In the Czech Republic, more than 3 % of children are born after assisted reproduction techniques. Clomifen citrate is the basic substance for ovarian stimulation. Protocols with follicle stimulation hormone (FSH) and gonadoliberine (GnRH) analogues are used for assisted reproduction techniques (ART). Human chorionic gonadotropine (hCG) is used for eggs maturation. Progesteron is used for endometrium transformation and luteal phase support. Careful monitoring of ovarian stimulation decreases risk of possible complications.

• Klíčová slova
• neplodnost, stimulace ovulace,
• MeSH
• asistovaná reprodukce MeSH
• endometrióza farmakoterapie   komplikace   MeSH
• farmakoterapie klasifikace   využití   MeSH
• hyperprolaktinemie diagnóza   farmakoterapie   komplikace   MeSH
• indukce ovulace metody   MeSH
• lidé MeSH
• přenos embrya metody   MeSH
• reprodukční lékařství metody   organizace a řízení   trendy   MeSH
• ženská infertilita etiologie   farmakoterapie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH

• Klíčová slova
• IVF, neplodnost, BMI,
• MeSH
• financování organizované MeSH
• hubenost metabolismus   patofyziologie   MeSH
• index tělesné hmotnosti MeSH
• lidé MeSH
• obezita metabolismus   patofyziologie   MeSH
• přenos embrya statistika a číselné údaje   MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• úhrn těhotenství na počet žen v reprodukčním věku MeSH
• ženská infertilita dietoterapie   patofyziologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH