Mezi hlavní činnosti, které dětská sestra vykonává v ordinaci praktického lékaře pro děti a dorost, patří preventivní péče. V rámci této péče je dětská sestra kompetentní sledovat celkové chování dítěte a hodnotit jeho psychomotorický vývoj. Existují vývojové mezníky, dle kterých se dětská sestra může při posuzování řídit, ale standardizovaný nástroj, který lze použít pro zmapování psychomotorického vývoje dítěte sestrou, v české podobě dosud není sestrám k dispozici. Z tohoto důvodu byla zakoupena originální verze Denverského vývojového testu II, která byla přeložena do českého jazyka a po lingvistické a odborné revizi využita při pilotním testování na vybrané populaci čtyřletých dětí. Výsledky tohoto testování konstatují 30minutovou administraci, vysokou úspěšnost českých dětí v testu a minimum problematických úkolů pro děti. Příspěvek dále prezentuje charakteristiku Denverského vývojového screeningového testu II.

Among the main activities carried out by paediatric nurse in practitioner's office for children and adolescents belongs preventive care. Within this care is paediatric nurse qualified to monitor the overall behaviour of the child and assess his psychomotor development. There are developmental turning points, according to which the paediatric nurse may manage during the assessment, but a standardized tool that can be used by nurse to map psychomotor development of the child is not available yet in the Czech form. For this reason was bought the original version of Denver developmental test II, that was translated into Czech language and after the linguistic and technical revision used for pilot testing in selected population of four-year children. The results of this testing states 30-minute administration, a high success rate of Czech children and minimum of difficult tasks for children. The paper also presents the characteristics of the Denver developmental screening test II.

• MeSH
• lidé MeSH
• pilotní projekty MeSH
• plošný screening metody   normy   MeSH
• předškolní dítě MeSH
• primární zdravotní péče * MeSH
• psychologické testy * normy   MeSH
• vývoj dítěte MeSH
• vývojové poruchy u dětí * diagnóza   MeSH
• zdravotní sestry MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• předškolní dítě MeSH
• Publikační typ
• validační studie MeSH

Autoři popisují možnosti detekce produkce rozšířeného spektra beta-laktamáz (ESBL) pomocí průkazu synergie diskovým difúzním testem (double desk synergy test - DDST) a uvádějí charakteristiku kvantitativního profilu rezistence k antimikrobiálním agens u BSBL-pozitivních kmenů Klehsiella pneumoniae (s 4,6% prevalencí v Univerzitní nemocnici v Olomouci). Ze získaných výsledků vyplývá, že ESBL-pozitivní kmeny K. pneumoniae mají následující profil rezistence: jsou citlivé na ampicillin/sulbactam a rezistentní vůči cefalosporinovým antibiotikům první, druhé a třetí generace (cefalozin, cefuroxim, cefotaxim a ceftazidim) a vůči aztreonamu. V případě cef alosporinů III. generace, všechny hodnoty mirúmální inhibičmí koncentrace (MIC) byly > 2 mg/L, tj. ESBL-pozitivní kmeny K. pneumoniae mohly být citlivé i vůči cefotaximu a ceftazidimu (5 %, resp. 14 %). Rezistence těchto kmenů vůči gentamicinu dosahovala 74 %, zatímco rezistence ESBL-negativních kmenů k tomuto antibiotiku byla 9 %.

Authors describe a possibility to evidence the production of Extended-Spectrum Beta-Lactamases (ESBL) on the basis of double disk synergy test (DDST) and present characteristics of the quantitative profile of resistance to antimicrobial agents inESBL-positive strains of Klebsiella pneumoniae (with prevalence of 4.6% in the University Hospital in Olomouc). The obtained results revealed the following resistance profile of ESBL-positive strains of K. pneumoniae: sensitivity to ampicillin/sulbactam, resistance to cephalosporin antibiotics of the first, second and third generation (cefazolin, cefuroxime, cefotaxime, ceftazidime) and to aztreonam. In the case of cephalosporins of the 3rd generation, all values of minimum inhibitory concentrations (MIC) were> 2 mg/L, i.e. ESBL-positive strains of K. pneumoniae might also be sensitive to cefotaxime and ceftazidime (5%, 147o resp.). Resistance of these strains to gentamicin reached 74%, while in ESBL-negative strains, resistance to gentamicin was evidenced in 9%.

• MeSH
• antiinfekční látky terapeutické užití   MeSH
• beta-laktamasy analýza   MeSH
• beta-laktamová rezistence MeSH
• Klebsiella pneumoniae enzymologie   účinky léků   MeSH
• mikrobiální testy citlivosti metody   MeSH
• mnohočetná léková rezistence MeSH

BACKGROUND: Enterobacteriaceae producing ESBL and AmpC enzymes can be associated with failure of antibiotic therapy and related morbidity and mortality. Their routine detection in microbiology laboratories is still a problem. The aim of this study was to compare the sensitivity of selected phenotypic methods. MATERIAL/METHODS: A total of 106 strains of the Enterobacteriaceae family were tested, in which molecular biology methods confirmed the presence of genes encoding ESBL or AmpC. In ESBL-positive strains, the sensitivity of the ESBL Etest (AB Biodisk) and a modified double-disk synergy test (DDST) were evaluated. AmpC strains were tested by a modified AmpC disk method using 3-aminophenylboronic acid. For simultaneous detection of ESBL and AmpC, the microdilution method with a modified set of antimicrobial agents was used. RESULTS: The sensitivity of the ESBL Etest was 95%; the modified DDST yielded 100% sensitivity for ESBL producers and the AmpC test correctly detected 95% of AmpC-positive strains. The sensitivity of the modified microdilution method was 87% and 95% for ESBL and AmpC beta lactamases, respectively. CONCLUSIONS: The detection of ESBL and AmpC beta lactamases should be based on specific phenotypic methods such as the modified DDST, ESBL Etest, AmpC disk test and the modified microdilution method.

• MeSH
• antiinfekční látky farmakologie   MeSH
• bakteriální proteiny analýza   MeSH
• beta-laktamasy analýza   MeSH
• cefalosporiny farmakologie   MeSH
• Enterobacteriaceae cytologie   účinky léků   enzymologie   MeSH
• fenotyp MeSH
• Klebsiella pneumoniae cytologie   účinky léků   enzymologie   MeSH
• mikrobiální testy citlivosti metody   MeSH
• referenční standardy MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

ß-laktamázy typu AmpC, enzymy produkované řadou gramnegativních bakterií, které hydrolyzují peniciliny, monobaktamy, cefalosporiny a cefamyciny, nejsou inhibovány inhibitory ß-laktamáz. Jsou šířeny cestou plazmidů a představují velký epidemiologický a také diagnostický problém. Zjišťovali jsme produkci ß-laktamáz typu AmpC u různých gramnegativních bakterií. Kmeny, izolované z močí pacientů s diagnózou močové infekce, byly vybrány na základě rezistence k cefalosporinům 3. generace a přitom nebyly určeny jako producenti ESBL (extended-spectrum beta lactamases). Produkce inducibilních AmpC byla zjišťována pomocí DDST (double disk synergy test) a produkce konstitutivních AmpC pomocí agaru s oxacilinem, který slouží jako inhibitor enzymů AmpC. U všech kmenů s produkcí konstitutivních AmpC byla testována také citlivost k amikacinu, piperacilinu s tazobaktamem, cefoperazonu se sulbaktamem, imipenemu, meropenemu a kolistinu pomocí diskové difuzní metody na MH-agaru. Celkem bylo testováno 119 kmenů (z toho 68 kmenů Klebsiella pneumoniae, 20 Escherichia coli a 12 Enterobacter aerogenes). Bylo zachyceno 38 konstitutivních AmpC producentů. Produkce byla nejvýraznější u kmenů K. pneumoniae (17), E. coli (10) a E. aerogenes (4). Produkce inducibilní AmpC ß-laktamázy byla prokázána u 32 kmenů (z toho 21 bylo kmenů K. pneumoniae, 6 kmenů Morganella morganii a 3 kmeny E. aerogenes). U 2 kmenů (K. pneumoniae) byla zjištěna současná produkce ESBL a AmpC. Kmeny s konstitutivními AmpC byly poměrně dobře citlivé k cefepimu (84,2 %), také citlivost ke karbapenemům zůstala zachována.

AmpC beta-lactamases, enzymes produced by a range of Gram-negative bacteria and able to hydrolyse penicillins, monobactams, cephalosporins and cephamycins, are not inhibited by beta-lactamase inhibitors. They are spread via plasmids and pose a huge epidemiological and diagnostic problem. The production of AmpC B-lactamases was tested in various Gram-negative bacteria. Of strains isolated from urine of patients diagnosed with urinary tract infection, we selected those that were resistant to third generation cephalosporins and did not produce extended-spectrum beta-lactamases (ESBL). The production of inducible AmpC was assayed by modified DDST (double disk synergy test) and that of constitutive AmpC was tested on agar containing oxacillin as an AmpC inhibitor. All constitutive AmpC producers were also tested for susceptibility to amikacin, piperacillin/tazobactam, cefoperazon/sulbactam, imipenem, meropenem and colistin by the disk diffusion method on MH-agar. Altoghether 119 strains (68 strains of Klebsiella pneumoniae, 20 strains of Escherichia coli and 12 strains of Enterobacter aerogenes) were tested. We detected 38 constitutive AmpC producers, including primarily K. pneumoniae (17 strains), E. coli (10 strains) and E. aerogenes (4 strains). Thirty-two strains were inducible AmpC producers (21 K pneumoniae strains, 6 Morganella morganii strains and 3 E. aerogenes strains). Two K. pneumoniae strains were ESBL/AmpC coproducers. The constitutive AmpC producers showed relatively good susceptibility to cefepim (84.2%) and carbapenems.

• MeSH
• bakteriální proteiny metabolismus   MeSH
• beta-laktamasy metabolismus   MeSH
• gramnegativní bakterie enzymologie   MeSH
• infekce močového ústrojí mikrobiologie   MeSH
• lidé MeSH
• moč mikrobiologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

A collection of 201 Escherichia coli strains isolated from urine of patients in a Tunisian hospital between January 2006 and July 2008 was studied. Microbial identification was done by conventional methods, and antibiotic susceptibility with disk diffusion method was performed according to the Clinical Laboratory and Standards Institute guidelines. Detection of extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) was performed by double-disk synergy test (DDST) and identification was done by PCR and sequencing. ESBL-producing isolates were subjected to molecular typing by random amplified polymorphic DNA (RAPD) and ST131 detection by PCR. Four phylogenetic groups (A, B1, B2 and D), 18 virulence genes and CTX-M group were individualized using PCR. Statistical analysis was done by Pearson χ2 test and Mann-Whitney U test. The strains were recovered primarily from urology (28%), maternity (19%) and medicine (16%) wards. Antibiotic resistance rates were ampicilin (72.1%), nalidixic acid (41.8%), ciprofloxacin (38.8%), gentamicin (23.9%) and cefotaxime (17.4%). Thirty-one of cefotaxime-resistant isolates (n = 35) had a positive DDST and harboured bla CTX-M-15 gene. Twenty of them (64.5%) belonged to the ST131 clone and showed the same RAPD DNA profile. Ciprofloxacin- and cotrimoxazole-susceptible isolates were significantly associated with phylogenetic group B2, whereas isolates that were resistant to these molecules were associated with B1 and D phylogenetic groups, respectively. Virulence genes were significantly more frequent among ciprofloxacin- and cotrimoxazole-susceptible strains than those resistant to these antibiotics. However, CXT-M-15-producing isolates were associated with many virulence genes. Isolates concomitantly susceptible to the three antimicrobials agents (ciprofloxacin, cefotaxime and cotrimoxazole) were significantly associated with group B2 and high virulence score, whereas isolates with resistance patterns especially those including resistance to ciprofloxacin belonged predominantly to B1 phylogroup and haboured few virulence genes. The emergence of virulent and multidrug-resistant E. coli is a concerning development that deserves close attention in our institution.

• MeSH
• antibakteriální látky farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• beta-laktamasy genetika   metabolismus   MeSH
• fylogeneze MeSH
• genotyp * MeSH
• infekce močového ústrojí farmakoterapie   epidemiologie   mikrobiologie   MeSH
• infekce spojené se zdravotní péčí * MeSH
• infekce vyvolané Escherichia coli farmakoterapie   epidemiologie   mikrobiologie   MeSH
• lidé MeSH
• mikrobiální testy citlivosti MeSH
• mnohočetná bakteriální léková rezistence * MeSH
• uropatogenní Escherichia coli klasifikace   účinky léků   genetika   izolace a purifikace   MeSH
• virulence genetika   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• Geografické názvy
• Tunisko MeSH

Úvod: Karbapenemy představují léky volby v případě závažných infekcí způsobených ESBL- a AmpC-pozitivními enterobakteriemi. Bohužel, v poslední době se objevuje vzrůstající trend vzniku odolnosti k těmto antimikrobním přípravkům. Cílem práce bylo stanovit výskyt rezistence ke karbapenemům u klinických izolátů čeledi Enterobacteriaceae a v případě záchytu stanovit její mechanizmus. Metodika: V časovém období 1. 4. 2009–31. 8. 2010 byly z klinického materiálu pacientů hospitalizovaných ve Fakultní nemocnici Olomouc (FN OL) (1 406 lůžek, z toho 155 na JIP), izolovány enterobakterie. Kultury byly identifikovány standardními mikrobiologickými postupy a jejich citlivost k antibiotikům byla stanovena diluční mikrometodou. U izolátů s minimální inhibiční koncentrací (MIC) meropenemu 2 mg/l a vyšší byla identifikace konfirmována automatickým systémem Phoenix (Becton Dickinson). Rovněž MIC meropenemu byla potvrzena E-testem a systémem Phoenix. Produkce karbapenemáz byla testována modifikovaným Hodgeho testem a kombinovaným testem s kys. 3-aminofenylboritou (3-APB) a EDTA. Dále byly použity CD-test k průkazu serinových karbapenemáz a modifikovaný DDST (mDDST) k průkazu metalo-beta-laktamáz (MBL). Tvorba ESBL a AmpC byla stanovena pomocí mDDST a modifikovaného AmpC testu. U vybraných izolátů pak byly detekovány geny kódující uvedené enzymy s využitím sady primerů umožňujícich amplifikaci specifických úseků jednotlivých beta-laktamáz. Následná charakterizace TEM a SHV pozitivních PCR produktů byla provedena pomocí restrikční analýzy. Výsledky: Z celkového počtu 12 605 enterobakterií bylo získáno 9 izolátů s MIC meropenemu 2 mg/l a vyšší. Sedm z nich bylo určeno jako Klebsiella pneumoniae, ve dvou případech se jednalo o Enterobacter cloacae. MIC meropenemu se u všech pohybovala v rozmezí 2–16 mg/l. Přitom produkce serinových karbapenemáz a MBL nebyla prokázána u žádného z nich. Stejně i PCR analýzy u nich neprokázaly přítomnost kódujících genů. U 7 kmenů (6x Klebsiella pneumoniae a 1x Enterobacter cloacae) byla detekována tvorba ESBL mDDST testem, AmpC byla zachycena vždy jednou u obou druhů enterobakterií modifikovaným AmpC testem. Genetická analýza potvrdila výskyt CTX-M a SHV typů u ESBL kmenů; multiplex PCR určila AmpC-pozitivní kmeny jako typy DHA a EBC. Závěr: Ve FN OL bylo v průběhu 17 měsíců identifikováno 9 (0,07 %) zástupců čeledi Enterobacteriaceae s MIC meropenemu 2 mg/l a vyšší. U žádného z nich nebyla prokázána produkce serinových karbapenemáz ani MBL. Jejich hraniční citlivost a rezistence ke karbapenemům byla podmíněna produkcí širokospektrých beta-laktamáz typu ESBL a AmpC spolu s jiným přidruženým mechanismem, především sníženou propustností buněčné stěny.

Objectives: Carbapenems are the drugs of choice for the treatment of serious infections caused by ESBL- and AmpC-positive Enterobacteriaceae. An increasing trend of resistance to these antibiotics has been observed recently. The aim of the study was to determine resistance to carbapenems in clinical isolates of the Enterobacteriaceae family and its mechanism. Methods: Between 1 April 2009 and 31 August 2010, Enterobacteriaceae were isolated from clinical samples obtained from patients hospitalized in the University Hospital Olomouc, Czech Republic (1,406 beds incl. 155 ICU beds). The strains were identified using the standard microbiological methods and their susceptibility to antibiotics was determined by the microdilution method. The identification of the isolates with the minimum inhibitory concentration (MIC) of meropenem of 2 mg/L or more was confirmed by the Phoenix automated system (Becton Dickinson). The MIC of meropenem was verified by the E-test and also Phoenix automated system. The isolates were tested for carbapenemase production using the modified Hodge test, a combined test with 3-aminophenylboronic acid (3-APB) and EDTA, the CD-test for serine carbapenemases and modified DDST (mDDST) for metallo-beta-lactamases (MBL). ESBL and AmpC production was determined by the mDDST and modified AmpC test, respectively. Genes encoding production of serine carbapenemases, MBL, blaOXA-23, blaOXA-48, ESBL and AmpC enzymes were detected with a set of primers that amplify specific segments of individual beta-lactamases. TEM- and SHV-positive PCR products were characterized by restriction analysis. Results: From a total of 12,605 Enterobacteriaceae, 9 strains were isolates with the MIC of meropenem of 2 mg/L or more. Seven isolates were classified as Klebsiella pneumoniae and two as Enterobacter cloacae. The MIC of meropenem for these strains ranged from 2 mg/L to 16 mg/L. The modified Hodge test, the combined test with 3-APB and EDTA, CD-test, mDDST for MBL and a series of PCR analyses did not detect production of class A carbapenemases, MBL, OXA-23 or OXA-48 enzymes in any of the tested strains. In 6 Klebsiella pneumoniae strains and 1 Enterobacter cloacae strain, the mDDST test and genetic analysis revealed ESBL production (CTX-M and SHV types), and in 2 strains, AmpC production was detected (DHA and EBC types). Conclusion: The prevalence of the Enterobacteriaceae with the MIC of meropenem ? 2 mg/L in the University Hospital Olomouc was 0.07 %. None of the strains produced either serine carbapenemases or MBL. Borderline resistance of the strains to carbapenems was determined by the ESBL and AmpC production with another associated mechanism of resistance.

• Klíčová slova
• karbapenemázy,
• MeSH
• bakteriální léková rezistence MeSH
• Enterobacter cloacae účinky léků   MeSH
• Enterobacteriaceae MeSH
• karbapenemy farmakologie   MeSH
• Klebsiella pneumoniae účinky léků   MeSH
• prevalence MeSH

Nalezení spolehlivé metody detekce karbapenemáz u enterobakterií a některých gramnegativních nefermentujících tyček je velkou výzvou současné klinicko-mikrobiologické diagnostiky. Tento článek shrnuje možnosti detekce karbapenemáz u enterobakterií inhibičními fenotypovými testy, pomocí MALDI-TOF hmotnostní spektrometrie a molekulárně-mikrobiologickými metodami.

Finding a reliable method for the detection of carbapenemases in enterobacteria and some Gram-negative nonfermenting rods is a big challenge for current clinical microbiological diagnosis. This article summarizes the possibilities for carbapenemase detection in enterobacteria provided by inhibitor-based phenotypic tests, MALDI- TOF mass spectrometry, and molecular microbiology techniques.

• Klíčová slova
• KPC, MBL, metropenem, DDST,
• MeSH
• beta-laktamasy analýza   izolace a purifikace   MeSH
• Enterobacteriaceae izolace a purifikace   patogenita   MeSH
• fenotyp MeSH
• financování organizované MeSH
• karbapenemy terapeutické užití   MeSH
• lidé MeSH
• mikrobiologické techniky metody   využití   MeSH
• molekulární biologie metody   MeSH
• spektrometrie hmotnostní - ionizace laserem za účasti matrice metody   využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

BACKGROUND: Problematic bacteria in the community include enterobacteria which produce extended-spectrum beta-lactamases. As yet there is no description of the prevalence of these bacteria in persons in the community in the Czech Republic. Therefore the main goal of this study was to determine the prevalence of ESBL-positive enterobacteria in the gastrointestinal tracts of subjects in the community in the Czech Republic. MATERIAL/METHODS: Rectal swabs from the investigated subjects were inoculated onto chromID ESBL selective medium and enterobacteria were identified by the Vitek2 automated system. ESBL were detected using a modified DDST test. The results were confirmed by PCR and direct sequencing of CTX-M-positive amplicons. RESULTS: A total of 579 rectal swabs from subjects in the community were analyzed and ESBL production was both phenotypically and genotypically confirmed in 7 isolates. Thus the prevalence of ESBL-positive bacteria in the gastrointestinal tracts of the persons in the community was 1.2%. All the cases were Escherichia coli strains producing the CTX-M-type ESBL. CTX-M-15 was the most prevalent type in this group of isolates. CONCLUSIONS: The presented results are in accord with other authors' studies and suggest that the epidemiologic profile of ESBL-positive enterobacteria in the Czech Republic is comparable to that in other European countries.

• MeSH
• beta-laktamasy metabolismus   MeSH
• charakteristiky bydlení MeSH
• Enterobacteriaceae enzymologie   izolace a purifikace   klasifikace   MeSH
• lidé MeSH
• mikrobiální testy citlivosti MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• prevalence MeSH
• techniky typizace bakterií MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• Geografické názvy
• Česká republika MeSH