"The increasing centralisation of specialised tests and the divorce of clinical and laboratory haematology in many countries means that many haematologists now have no direct contact with an immunophenotyping laboratory. Despite this, the results from the laboratory are often crucial in the management of their patients. This book is intended to help haematologists and trainees to understand and interpret immunophenotyping results. It is not directed at those working in an immunophenotyping laboratory and technical details are therefore outlined only briefly. Such laboratories may, however, find it a useful source of information. For further reading on the subject, see the bibliography of each chapter"--

• MeSH
• hematologické testy MeSH
• imunofenotypizace * MeSH
• Publikační typ
• monografie MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství

Imunofenotypizace je již dnes standardní metodou v diagnostice hemato-onkologických onemocnění. V současné době zažíváme rozvoj mnohobarevné průtokové cytometrie, jak ve výzkumu, tak i v klinické diagnostice. Práce shrnuje diagnostiku a sledování akutní lymfoblastické leukemie pomocí průtokové cytometrie.

Immunophenotyping is a standard method used in diagnostics of hematological malignancies. Progress in number of multicolour cytometry as well as new targets identified by genomics bring new possibilities in research and diagnostics. These aspects are summarized in the article.

• MeSH
• akutní lymfatická leukemie diagnóza   klasifikace   terapie   MeSH
• antigeny diferenciační B-lymfocytární klasifikace   MeSH
• diferenciační antigeny T-lymfocytů klasifikace   MeSH
• dítě MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• imunofenotypizace metody   využití   MeSH
• lidé MeSH
• pre-B-buněčná leukemie diagnóza   patofyziologie   MeSH
• průtoková cytometrie metody   MeSH
• reziduální nádor MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• lidé MeSH

• MeSH
• imunofenotypizace metody   využití   MeSH
• lymfom diagnóza   imunologie   MeSH
• lymfoproliferativní nemoci diagnóza   klasifikace   MeSH
• plazmocytom diagnóza   imunologie   MeSH
• průtoková cytometrie využití   MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

• MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• krevní buňky cytologie   MeSH
• krevní nemoci diagnóza   MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• Publikační typ
• sborníky MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• alergologie a imunologie

• MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• imunofenotypizace využití   MeSH
• leukemie diagnóza   MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

• MeSH
• akutní erytroblastická leukemie diagnóza   MeSH
• akutní lymfatická leukemie diagnóza   MeSH
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• senioři MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• srovnávací studie MeSH

Komplexrií vyšetřování svalových dystrofií pomocí klinických, bioptických a molekulárně genetických diagnostických metod se v naší zemi dosud provádělo pouze ve velmi omezeném rozsahu. Naše skupina (kliiiiků, patologů a genetiků) vyšetřila od roku 1992 do roku 2000 přibližně 240 pacientů suspektních ze svalové dystrofie. Většina pacientů pochází z jihomoravského a severomoravského regionu. Pacienti byli k vyšetření odesíláni zeiména z kUnik a oddělení neurologie a dětské neurologie, dále z odděleni klinické genetiky a méně často z interních klinik a oddělení. Vyšetřovaní pacienti byli podle závěrečné diagnózy rozděleni do skupin pacientů s dystrofinopatií (DMD a BMD), přenašeček dystrofinopatií, pacientů s kongenitální svalovou dystrofií s deficitem merosinu a pacientů s Emery-Dreifussovou svalovou dystrofií, včetně přenašeček tohoto onemocnění. Někteří členové rodin, v nichž se vyskytla dystrofinopatie, byli následně vyšetřeni metodami segregační analýzy. Pacienti DMD/BMD mohou být pomoci molekulárně genetických metod zachyceni ve vysokém procentu. Metoda vyšetření mRŇA pomocí RT PCR a PTT z biopsie dovoluje detegovat delece, duplikace, ale i bodové mutace dystrofinového genu, a tím má vyšší diagnostický rozsah než vyšetření DNA lymfocytů periferní krve metodou multiplex PCR, které zachytí 65 % všech mutací, prakticky jenom delece. Imunofenotypizace dystrofinu se uplatní zejména v odhalování DMD. Deficit sarkolemové reaktivity v karboxytermmální a střední doméně (Dys 1 a Dys 2) jednoznačně signalizuje defektní dystrofiu. Naproti tomu menší deficity dystrofinu u BMD (a též u přenašeček) nemusejí být v biopsii zachyceny. V těchto případech je nutné doplnit vyšetření imunoblotingem nebo analýzou genotypu. Vyšetřování pacientů s klinicky diagnostikovanou svalovou dystrofií by mělo většinou začít vyšetřením biopsie, z níž je možno odhadnout přítomnost a stupeň strukturálních změn, a aplikací protilátek proti DGC případně odhalit patřičný deficit. Imunohistochemické vyšetření je možné doplnit imunoblotingem a tak navést další molekulárně genetické vyšetření DNA či mRNA. Svalovou biopsii je možno v případě deficitu merosinu a emerinu nahradit méně invazivními metodami, jako kožní biopsií nebo výtěrem z bukální sliznice. Při deficitech proteinů DGC je nutno při interpretaci nálezů respektovat možnost sekundární alterace jiných složek, a tak imunohistochemie sama o sobě nemusí být dostatečně informativní. Identifikace a bližší diagnostické zařazení pacientů s deficitem merosinu, sarkoglykanů, emerinu, kalpainu a dalších je možné díky možnosti použití protilátek, které jsou na trhu. Detekce těchto pacientů v naší zemi teprve čeká na jejich soustavné vyhledávání opřené o aplikaci metod popsaných a diskutovaných v tomto sdělení.

Complex diagnosis of muscular dystrophies including clinical, bioptical and molecular genetic approaches has been provided in a limited extent in this country. Our group of neurologists, pathologists and geneticists has examined approximately 240 patients suspected of having muscular dystrophies, mostly coming from Southern and Northern Moravia. The patients were sent to the examination most often firom departments of neurology and clinical genetics, and less firequently fi:om departments of internal medicine. According to the final diagnosis, the patients were divided into groups: with dystrophinopathies and carriers of dystrophinopathies (DMD/BMD), merosin deficient form of congenital muscular dystrophy, and Emery-Dreifuss muscular dystrophy including the carriers of this disease. Some relatives of patients with dystrophinopathies were also examined using the methods of segregation analysis. High proportion of the DMD/BMD patients can be detected by the methods of molecular genetics. Analysis of mRNA using RT PCR and PTT enables the detection of deletions, dupUcations, and point mutations in dystrophin gene and encompasses a larger diagnostic scope in comparison with examinations of DNA level by the multiplex PCR method from the peripheral blood which enables only deletion detections. Immunophenotyping of the dystrophin protein plays an important role especially using antibodies against carboxyterminal (DYS2) and rod domain (DYSl) of dystrophin. Deficient sarcolemmal expression of DYS2 and DYSl reveales unambiguously a pathological dystrophin. On the other hand, less pronounced deficiencies in dystrophin expression in BMD patients and DMD/BMD carriers may not always be detected in muscle biopsies. In this case, it is necessary to supplement the examination by Western blotting and genotype analysis. The examination of patients with clinically diagnosed muscular dystrophy shoidd start with á muscle biopsy which enables the estimation of presence and degree of structural changes. Application of antibodies against the components of DGC and emerin may reveal a deficiency in expression of these proteins. Immunohistochemical examination completed by Western blotting leads to the subsequent molecular genetic analysis of DNA or mRNA. Secondary deficiencies in expression of other DGC proteins are often revealed in muscle biopsies of dystrophinopathies and this fact must be taken into account in the evaluation of immunohistochemical findings. There is a possibility of replacement of invasive muscle biopsy by skin biopsy or buccal mucosal smears in cases of merosin and emerin deficiencies. Commercially available antibodies against merosin, emerin, calpain and sarcoglycans enable extensive identification and detailed classification of muscular dystrophies. Screening of the patients based on the application of methods described and discussed in this report is the task of the forthcoming period.

• MeSH
• DNA analýza   MeSH
• genotyp MeSH
• imunofenotypizace metody   MeSH
• messenger RNA analýza   MeSH
• molekulární biologie metody   MeSH
• svalové dystrofie diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• svalový tonus MeSH

Cieľom predkladanej štúdie bolo vyšetriť výskyt subpopulácií lymfocytov v kožnom tkanivezdravých jedincov. Vyšetrovali sme kožné biopsie 16 pacientov bez doteraz zisteného kožnéhoochorenia a bez akejkoľvek imunomodulačnej liečby. Vo vzorkách kože bolo nájdené relatívne nízkepercento lymfocytov (1 %). Vo vzorkách boli zastúpené takmer výlučne T-lymfocyty. Ďalej bolostanovované percento B-lymfocytov (CD19+), NK-buniek (CD16+56+), pomocných T-lymfocytov(CD3+CD4+), tlmivých T-lymfocytov (CD3+CD8+), pomer CD4/CD8, aktivovaných T-lymfocytov(CD3+HLA-DR+, CD3+CD25+, CD3+CD69+) a „naivných“ T-lymfocytov (CD4+CD45RA+). V porovnanís periférnou krvou bolo zistené zvýšené zastúpenie niektorých aktivačných markerov na povrchubuniek kožného tkaniva, čo môže byť pravdepodobne spôsobené neustálym kontaktom kože s antigénmivonkajšieho prostredia.

The aim of the recent study was to investigate the occurrence of the lymphocytes subpopulationsin a skin tissue of the healthy donors. We investigated the skin biopsies of 16 patients without anyskin diseases and without any immunomodulation treatment. There was found relatively lawpresence of lymphocytes (1 %) in the skin samples. There were found T-lymphocytes almost exclusively.In the skin samples percentage of B-cells (CD19+), naturals killers (CD16+CD56+), helper/inducerT-lymphocytes (CD3+CD4+), suppressor/cytotoxic T-lymphocytes (CD3+CD8+), CD4/CD8 ratio,activated T-lymphocytes (CD3+HLA-DR+, CD3+CD25+, CD3+CD69+), naive T-lymphocytesCD4+CD45RA+) was determined. Compared with peripheral blood there was an increase of some ofthe activation markers on the surface of the skin cells, what may be probably connected witha continuous touch of the skin with the antigens of an external environment.

• MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• kůže MeSH
• lidé MeSH
• podskupiny lymfocytů MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• MeSH
• aktivace lymfocytů MeSH
• B-lymfocyty MeSH
• chronická nemoc MeSH
• dospělí MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• lymfoidní leukemie diagnóza   krev   MeSH
• monoklonální protilátky MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• protilátky nádorové analýza   krev   MeSH
• senioři MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• senioři MeSH

• MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• leukemie MeSH
• průtoková cytometrie MeSH

• Konspekt
• Buněčná biologie. Cytologie
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• cytologie, klinická cytologie
• chemie, klinická chemie