Peripheral blood monocytes will be obtained after the blood withdrawal and synovial fibroblasts after the mechanical and enzymatical modifications of the synovial tissue obtained during the joint surgery. Extracellular roles will be studied by stimulatory experiments with an additional inhibition of the RAGE and intracellular roles by means of gene silencing using small interfering (si) RNA. Nucleofector device Amaxa will be used for cell transfection. Gene expression of apoptotic molecules (bax, bcl-family, XIAP, smac), pro-inflammatory cytokines (TNF, IL-1, IL-6 and MCP-1) and matrix degrading enzymes (MMP-1, MMP-3 and MMP-13) will be analyzed using real-time PCR. The protein synthesis will be confirmed by means of ELISA and Western-blot. Activationof the programmed cell death pathway will be measured using fluorimetric Caspase-3 activity assay.

Periferní krevní monocyty budou získány stočením krve po krevním odběru a synoviální fibroblasty po mechanické a enzymatické úpravě synoviální tkáně získané během transplantace kloubu. Extracelulární působení bude studováno pomocí stimulačních experimentů s využitím inhibice receptoru RAGE a intracelulární úloha pomocí utlumení genové exprese za použití malého inhibitoru (si) RNA s využitím nukleofekčního přístroje Amaxa. Genová exprese apoptotických molekul (bax, bcl rodiny, XIAP, smac), prozánětlivýchcytokinů (TNF, IL-1, IL-6 a MCP-1) a matrix degradujících enzymů (MMP-1, MMP-3 a MMP-13) bude analyzována pomocí real-time PCR. Syntéza proteinů bude potvrzena pomocí metod ELISA a Western-blot. Aktivace dráhy vedoucí k programované smrti buněk bude analyzována pomocí fluorimetrické eseje měřící aktivitu kaspázy-3.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• cytokiny MeSH
• malá interferující RNA MeSH
• matrixové metaloproteinasy MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• proteiny S100 MeSH
• revmatoidní artritida patofyziologie   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• revmatologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Characterization and differentiation of subpopulations of NK and NKT cells in peripheral blood of PM/DM patients and healthy controls. Analysis of cytotoxic activity, cytokine production (IFNgamma, IL-5, granzyme B) and CD1d mRNA isoforms in identified NK/NKT cell subpopulations in peripheral blood of PM/DM patients and healthy controls. Correlation of the data with clinical features and activity of the disease, effect of a therapy on distribution of NK and NKT cell subpopulations. Conclusions deduced form the results could suggest whether exist NK/NKT cell subpopulations specific for PM and/or DM and whether the autoimmunity is a result of aberrant function of these cells.

Charakterizace a diferenciace subpopulací NK a NKT buněk v periferní krvi pacientů s PM a DM a periferní krve kontrol. Analýza cytotoxické aktivity a produkce cytokinů (IFNgamma, IL-5, granzym B) ve zjištěných NK/NKT subpopulacích periferní krve pacientůs PM/DM a kontrol.Analýza exprese izoforem CD1d mRNA v buňkách periferní krve pacientů s DM/PM a zdravých kontrol. Korelace dat s klinickými údaji a aktivitou PM/DM, vliv terapie na složení subpopulací NK a NKT buněk. Závěry vyvozené z výsledků by mohlyobjasnit, zda existují subpoplace NK/NKT buněk specifické pro PM nebo DM, a zda je autoimunitní stav výsledkem abrantní funkce těchto buněk.

• MeSH
• antigeny CD1d MeSH
• buňky NK MeSH
• dermatomyozitida MeSH
• histidin-tRNA-ligasa MeSH
• NKT buňky MeSH
• počítačové systémy MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• polymyozitida MeSH
• průtoková cytometrie MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• revmatologie
• biochemie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The evalution of the importance of inflammation on the occurrence and progression of erosive OA both genetically (IL-1RN2 polymorphism), biochemically (highly sensitive CRP and GR519 Cys COl 2A1 mutation) and by means of scintigraphy. The importance of so-called biochemical markers of cartilage degradation (COMp, pentosidine) for the evalution of EOA progression in non-erosive OA. Evalution of the importance of anti-inflammatory treatment of EOA MTX compared to placebo.

Hodnocení významu zánětu na vznik a progresi erozivní OA na úrovni genetické (polymorfismus Il-1RN2 a polymorfismus genu pro matrilin 3), biochemické (vysoce sensitivní CRP) a scintigrafické. Význam tzv. biochemických markerů degradace chrupavky (COMP, pentosidin) pro hodnocení progrese EOA u neerozivní OA. Hodnocení významu protizánětlivé léčby u EOA MTX oproti placebu.

• MeSH
• extracelulární matrix - proteiny analýza   MeSH
• genetická predispozice k nemoci MeSH
• genetické testování MeSH
• interleukin-1 analýza   MeSH
• klouby ruky patofyziologie   MeSH
• kolenní kloub patofyziologie   MeSH
• osteoartróza MeSH
• polymorfismus genetický MeSH
• radioisotopová scintigrafie metody   využití   MeSH
• výsledky a postupy - zhodnocení (zdravotní péče) MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• revmatologie
• radiologie, nukleární medicína a zobrazovací metody
• biochemie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Differentiation of production of IL-1RA izoforms in cell populations in peripheral blood/synovial tissue of JIA patients and peripheral blood of controls. Correlation of expression profile with clinical parameters and disease activity of JIA and IL-1RN*1/1, IL-1RN*1/2 a IL-1RN*2/2 genotypes in JIA patients and controls Conclusions deduced from the results could suggest whether icIL-1RA izoforms actively participates in the maintenance of IL-1/IL-1RA balance, whether their activity is limited to particular immune compartment, cell type or JIA subgroup

Diferenciace produkce intracelulárních isoforem IL-1RA v buněčných populacích periferní krve/synoviální tkáně pacientů s JIA a periferní krve kontrol Korelace expresního profilu s klinickými parametry a aktivitou JIA a IL-1RN*1/1, IL-1RN*1/2 a IL-1RN*2/2genotypy pacientů s JIA a kontrol. Vliv anti-TNF terapie na produkci intracelulárních forem IL-1RA. Závěry vyvozené z výsledků by mohly objasnit, zda se icIL-1RA izoformy účastní udržování IL-1/IL-1RA rovnováhy aktivně, zda je jejich aktivita omezena naurčitý imunologický kompartment, buněčný typ nebo podskupinu JIA.

• MeSH
• autoimunitní nemoci MeSH
• chronická nemoc MeSH
• dítě MeSH
• interleukin-1 MeSH
• juvenilní artritida MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• receptory interleukinu-1 antagonisté a inhibitory   MeSH
• revmatoidní faktor analýza   MeSH
• synoviální tekutina MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• pediatrie
• revmatologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Analysis of immunoglobulin genes on the mRNA level in individual citrulline specific B lymphocytes. Investigation of clonality of B cells and possible restricted usage and pairing of expressed VH and VL Ig genes. Conlusions deduced from the results couldsuggest the way of activation process of individual B lymphocytes with respect to local or systemic activation and to predominance of polyclonal and/or antigen-mediated activation.

Analýza imunoglobulinových genů na úrovni mRNA z jednotlivých B lymvocytů specifických pro citrulin. Zjištění klonality buněk a možné restrikce výběru a párování exprimovaných VH a VL Ig genů Závěry derivované z výsledků naznačí cestu aktivace jednotlivých B lymfocytů z hlediska převahy lokální či systémové stimulace a z hlediska polyklonální či antigenem indukované aktivace.

• MeSH
• B-lymfocyty cytologie   MeSH
• citrulin MeSH
• imunoglobuliny MeSH
• polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
• revmatoidní artritida MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• revmatologie
• biologie
• biochemie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Fluorescenční sondy centromer chromosomů 13-21,18 a Agh hybridujeme na nekultivovaných buňkách plodu, pro detekci vrozených trisomií. Studie populačních polymorfizmů velikosti hybridovaných oblastí, umožní vyloučit falešně negativní výsledky.

• MeSH
• aberace pohlavních chromozomů genetika   diagnóza   MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční využití   metody   MeSH
• lidské chromozomy, pár 13 genetika   MeSH
• lidské chromozomy, pár 18 genetika   MeSH
• lidské chromozomy, pár 21 genetika   MeSH
• prenatální diagnóza využití   metody   MeSH
• trizomie genetika   diagnóza   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• embryologie a teratologie
• radiologie, nukleární medicína a zobrazovací metody
• genetika, lékařská genetika
• chemie, klinická chemie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Cílem je přímá diagnostika H.chorey, dif.diagnostika, analýza populace ČR, korelace délky (CAG)n repetice s věkem nástupu, závažností choroby, typem přenosu DNA banka 64 vzorků, vyšetřeno 40, 50 kontrol. Zahr. kontakty Dr. Riess, SRN, S. Simpson, GB.

• MeSH
• Huntingtonova nemoc patologie   genetika   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• embryologie a teratologie
• neurologie
• genetika, lékařská genetika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• nádory prsu genetika   terapie   patologie   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• embryologie a teratologie
• genetika, lékařská genetika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

x

x

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH