Two-phase flow
Dotaz
Zobrazit nápovědu
Ukazatelé proliferační aktivity patří mezi nejdůležitější prognostické charakteristiky monoklonálních gamapatií. Cílem naší práce bylo zavedení postupu DNA analýzy buněčného cyklu, včetně určení ploidity populace plazmatických buněk průtokovou cytometrií s využitím metody dvoubarevného značení monoklonální protilátkou antiCD38 FITC a propidium jodidem. Provedli jsme vyšetření vzorků kostní dřeně 13 nemocných s mnohočetným myelomem a 5 nemocných s monoklonální gamapatií nejasného významu (MGUS). Ve skupině nemocných s mnohočetným myelomem činil podíl myelomových buněk v S fázi 4,37 % ± 1,485 a byl významně vyšší (p = 0,0016) v porovnání s nemocnými s MGUS (1,6 % ± 0,678). U nemocných s monoklonální gamapatií nejasného významu nebyla zaznamenána aneuploidie u žádného nemocného, při přechodu monoklonální gamapatií nejasného významu do obrazu mnohočetného myelomu dochází ke zvýšení podílu myelomových buněk v S fázi. Analýza buněčného cyklu a určení ploidity plazmatické buněčné populace s vyhodnocením průtokovou cytometrií je vhodným postupem v diferenciání diagnostice monoklonálních gamapatií.
The markers of proliferative activity rank among the most important prognostic factors in monoclonal gamapathies. The aim of the present study was to introduce the method of cell cycle analysis including the determination of ploidy of plasma cells using the two-color flow cytometry with FITC-labeled anti-CD38 monoclonal antibody and propidium iodide (PI). We examined the bone marrow samples of 13 multiple myeloma patients and 5 patients with monoclonal gammopathy of unknown significance (MGUS). In multiple myeloma patients, the proportion of myeloma cells in S phase was significantly higher than in patients with MGUS (4,37 % ± 1,485 % vs. 1,6 % ± 0,678, p=0,0016). No case of aneuploidy was observed in patients with MGUS, but an increase of myeloma cells in S phase was observed in cases of MGUS transforming into multiple myeloma. The cell cycle analysis and determination of ploidy represents an effective diagnostic test in the differential diagnosis of monoclonal gammopathies.
- MeSH
- buněčný cyklus fyziologie MeSH
- DNA analýza MeSH
- dospělí MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mnohočetný myelom krev MeSH
- paraproteinemie diagnóza genetika krev MeSH
- plazmatické buňky fyziologie MeSH
- průtoková cytometrie metody MeSH
- senioři MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
Průtoková cytometrie se stanovením DNA-ploidie a proliferačního indexu byla aplikována na souboru 19 primárních renálních nádorů ledvin u délí. Byly zastoupeny všechny klinicky významné jednotky. Materiál byl získán z parafinových bloků. Vysloveně aneuploidní populací se vyznačovaly dva anaplastické nefroblastomy a primární renální rabdomyosarkom. Mírná DNA- hyperdiploidie byla zjištěna u jednoho klasického nefroblastomu. Za pravděpodobně aneuploidní byl považován jeden rabdoidní nádor. Všechny ostatní nádory, včetně nádorů s vysokým stupněm malignity (jeden rabdoidní nádor a dva tzv. nádory s kostními metastázami) byly hodnoceny v rozsahu DNA-euploidie. Proliferační index byl ve většině případů maligních nádorů vysoký a u šesti tumorů se pohyboval kolem 40 a výše. Mitotický index stanovený vyšetřením histologických řezů koreloval ve většině případů s hodnotami G2+M fáze. Ve dvou případech diskrepance mezi vysokým procentem G2+M fáze a nízkým mitotickým indexem bylo uvažováno o skryté tetraploidii. Přestože je vyšetřená sestava malá, je zřejmé, že prognostická kritéria nelze u všech nádorů ledvin opírat o DNA obsah, ani o proliferační index. Významné může být zjištění výrazné aneuploidie u nefroblastomu, které koresponduje s histologicky definovanou tzv. anaplastickou variantou o nepříznivém průběhu. V diskusi je upozorněno na obtíže v interpretaci výsledků průtokové cytometrie.
A group of nineteen primary renal tumors in childhood was analyzed by fiow-cytometry. All clinically important entities were included. Paraffin embedded material was used. Two anaplastic nephroblastomas and a case of renal rhabdomyosarcoma had an aneuploid DNA content. One Wilms' tumor showed a moderate DNA-hyperdiploidy. One of two rhabdoid tumors showed a marked rightsided shift of G1/G0 phase from that of a control and was considered as probably hyperdiploid. All other tumors including high grade neoplasms such as rhabdoid tumor and bone metastasizing tumors were found in the DNA-diploid range. Proliferation index was high in most tumors and in six it reached or exceeded 40. Mitotic index counted in the histological sections correlated with the percentage of G2+M phase in most cases. Although small, the group of tumors under study shows that prognostic criteria cannot be based on the DNA content or on the proliferation index only. The only relevant result may be an overt DNA-aneuploidy in anaplastic nephroblastomas. Difficulties in interpreting the results of flow cytometry are discussed.
- MeSH
- dítě MeSH
- DNA nádorová MeSH
- lidé MeSH
- nádory ledvin patologie MeSH
- průtoková cytometrie MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- lidé MeSH
Cíl studie: Cílem práce bylo mikrodialýzou posoudit glukózový a lipidový metabolismus ve vztahu k průtoku krve intersticiem kosterního svalu během mimotělního oběhu (MO) a v časné pooperační fázi u pacientů operovaných v normotermii a v hypotermii. Typ studie: Prospektivní randomizovaná studie. Název a sídlo pracoviště: Ústav klinické biochemie a diagnostiky a Kardiochirurgická klinika, Fakultní nemocnice v Hradci Králové. Materiál a metody: U 40 nemocných, rozdělených metodou náhodného výběru pro provedení chirurgické revaskularizace myokardu standardním způsobem v mimotělním oběhu (MO) do 2 skupin, byla prováděna mikrodialýza. Skupina 1: operace v normotermii (36 °C) NT, n = 20; Skupina 2: operace v hypotermii (32 °C) HT, n = 20. Na operačním sále byly po úvodu do celkové anestezie zavedeny do konstantních míst v musculus deltoideus dvě mikrodialyzační sondy CMA 60 (perfúze samotným Ringerovým roztokem a Ringerovým roztokem s přídavkem gentamicinu rychlostí 300 µl/h). Mikrodialyzáty byly odebírány v intervalech:0. (po 30 minutod úvodu do anestezie), 1. (do zahájení MO),2. (běhemMO),3. (do konceoperace), interval 4.–7. (za 2, 4, 6 a 8 hodin po operaci). Byly stanoveny: glukóza, močovina a laktát (analyzátor Hitachi 917), glycerol (set firmy Randox). Krevní průtok byl hodnocen ze změn koncentrací flow-marker gentamicinu, stanoveného na přístroji Axsym (Abbott). Výsledky: Koncentrace glukózy byla v průběhu 1.–4. intervalu odběru vyšší u skupiny NT než u skupiny HT, v průběhu 5.–6. intervalu naopak nižší. V posledních intervalech došlo k vzestupu koncentrací u obou skupin. Podobnou dynamiku změn jsme nalezli u koncentrací močoviny. V posledních intervalech byl u obou skupin zaznamenán nesignifikantní nárůst koncentrací laktátu i glycerolu. Koncentrace gentamicinu v mikrodialyzátu byly signifikantně vyšší u HT ve srovnání se skupinou NT, s výjimkou posledního intervalu. Závěr: Předpokládáme, že intersticiální koncentrace sledovaných analytů běhemMO jsou ovlivněny jak změnami v průtoku krve intersticiem, tak i změnami v metabolismu buněk kosterního svalu. Suprese syntézy glukózy v souvislosti s použitím MOjiž byla v literatuře popsána. Intersticiální metabolismus je však ovlivněn řadou jiných faktorů,zejména náhlými změnami kapilárního hydrostatického tlaku a osmolality.
Objective: The aim of the study was to compare the interstitial metabolism of glucose, lactate, urea and glycerol in skeletal muscle with interstitial blood flow by microdialysis in two groups of patients undergoing cardiac surgery with a cardiopulmonary bypass (CBP) under normothermic and hypothermic conditions. Design: Prospective randomised study. Setting: Institute of Clinical Biochemistry and Diagnostics, Department of Cardiosurgery, University Hospital, Hradec Králové. Material and Methods: Microdialysis was performed in forty patients undergoing cardiac surgery with a cardiopulmonary bypass (CBP). After an institutional approval, patients were randomized into two groups. Group 1 (NT, N=20): patients were operated under normothermic condition (36 °C). Group 2 (HT, N=20): patients were operated under hypothermic conditions (32 °C). Two microdialysis (MD) probes CMA 60 (CMA Microdialysis AB) were inserted into a standard site of musculus deltoideus during introduction of anaesthesia. Microdialysis was performed with Ringer’s solution with perfusion flow 0.3 ml/hour (300 µl/hour). Microdialysis samples were collected: 0) initial phase of operation, 1) beginning of operation to beginning of CPB, 2) CPB 3) end of CPB to the end of operation, 4) 2 hours, 5) 4 hours, 6) 6 hours and 7) 8 hours after surgery. Microdialysate glucose, urea and lactate levels (mmol/l) were assessed by Hitachi 917 analyser, glycerol concentration by kit (Randox). Interstitial blood flow was monitored using flow marker gentamicin added in a known concentration in microdialysis fluid. Microdialysis gentamicin concentration was estimated by Axsym analyser (Abbott) – FPIA Method. Results: Glucose concentration in a skeletal muscle microdialysate during the 1st to the 4th intervals was higher in NT patients comparing to HT patients, and than lower. The similar applied for urea concentration. There were no significant differences in concentration of lactate and glycerol between groups. Gentamicin microdialysate concentrations were significantly higher in HT patients in comparison with NT patients at all intervals. Conclusion:We suppose that interstitial concentrations of analytes during CPBwere influenced both by blood flow changes and by metabolic changes in skeletal muscle cells. Suppression of glucose synthesis after CPB was described by other authors. There were other factors influencing interstitial metabolism, for instance dramatic changes in capillary fluid pressure and osmolality.
The distribution of fluorescence signals measured with flow cytometry can be influenced by several factors, including qualitative and quantitative properties of the used fluorochromes, optical properties of the detection system, as well as the variability within the analyzed cell population itself. Most of the single cell samples prepared from in vitrocultures or clinical specimens contain a variable cell cycle component. Cell cycle, together with changes in the cell size, are two of the factors that alter the functional properties of analyzed cells and thus affect the interpretation of obtained results. Here, we describe the association between cell cycle status and cell size, and the variability in the distribution of fluorescence intensity as determined with flow cytometry, at population scale. We show that variability in the distribution of background and specific fluorescence signals is related to the cell cycle state of the selected population, with the 10% low fluorescence signal fraction enriched mainly in cells in their G0/G1 cell cycle phase, and the 10% high fraction containing cells mostly in the G2/M phase. Therefore we advise using caution and additional experimental validation when comparing populations defined by fractions at both ends of fluorescence signal distribution to avoid biases caused by the effect of cell cycle and cell size.
- MeSH
- buněčné dělení MeSH
- buněčný cyklus fyziologie MeSH
- G2 fáze * MeSH
- průtoková cytometrie metody MeSH
- velikost buňky MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Cíl: Hypoperfuze periferních tkání a splanchnických orgánů během operace srdce v mimotělním oběhu může vézt ke vzniku závažných komplikací. Cílem studie bylo monitorování metabolismu a krevního toku v intersticiu periferní tkáně, kosterním svalu, během operace v mimotělním oběhu (MO) a v časném pooperačním období pomocí mikrodialýzy. Metody: Instersticiální mikrodialýza je minimálně invazivní metoda k biochemickému monitorování metabolických změn a krevního toku v extracelulárním prostoru tkání. Substance v intersticiu přecházejí přes semipermeabilní membránu zavedené mikrodialyzační sondy a mohou být analyzovány. Mikrodialýza v této studii byla prováděna 2 mikrodialyzačními sondami CMA (CMA Microdialysis AB®, Sweden), zavedenými do deltového svalu operovaného nemocného. Sondy byly perfundovány Ringerovým roztokem rychlostí 0,3 ml/hod. Dialyzáty byly odebírány v intervalech: začátek operace, začátek MO, konec MO, konec operace, po 2 hodinách v pooperačním období. Standardními biochemickými metodami byly v dialyzátech vyhodnocovány glukóza, urea, flycerol a laktát. Krevní průtok v intersticiu byl monitorován pomocí dynamické mikrodialýzy gentamicinu jako markeru. Mikrodialýza byla prováděna u 40 pacientů s ischemickou chorobou srdeční, operovaných v mimotělním oběhu. U 20 nemocných byl MO veden v normotermii (NT), u 20 nemocných v hypotermii (HT). Výsledky: U obou skupin, NT vs. HT, byla zjištěna obdobná dynamika intersticiálních koncentrací sledovalých látek v závislosti na fázi operace a v časném pooperačním období. Nízké iniciální koncentrace byly následovány jejich postupným zvyšováním během mimotělního oběhu, dalším zvýšením hodnot po ukončení mimotělního oběhu i v následující fázi operace. Hodnoty koncentrací sledovaných analytů pak byly vyšší ve skupině operovaných v normotermii, což bylo dáno normální metabolickou aktivitou buněk při normotermii (vs. nižší hodnoty při hypotermii). Bezprostředně po operaci docházelo, opět v obou skupinách, k poklesu sledovaných hodnot, s jejich postupným zvyšováním v následném pooperačním období v obou skupinách. Trend dynamických změn sledovaných analytů, jako látek mapujících metabolickou aktivitu kosterního svalu, dokladuje nižší metabolickou aktivitu buněk během hypotermie a její výrazný nárůst (oproti NT) ve fázi následné normalizace teploty tkáně. Analýzou koncentrací laktátu, jako látky mapující anaerobní metabolismus kosterního svalu, byly zjištěny obdobné dynamické změny v obou skupinách (NT vs. HT). Nebyla zjištěny významné odlišnosti, vázané na fázi operace ani fázi bezprostředního pooperačního průběhu při porovnání obou skupin. Analýza koncentrací gentamicinu, jako flow-markeru, ukázala nižší hodnoty koncentrací gentamicinu v dialyzátu, během operace, MO i v časném pooperačním období, u skupiny operovaných v normotermii (vs. HT), což dokladuje vyšší tkáňový průtok v kosterním svalu oproti skupině nemocných operovaných v hypotermii. Zduěr.-Výsledky mikrodialyzační studie prokázaly dynamické změny v intersticiálních koncentracích sledováných látek (glukózy, urey, glycerolu a laktátu) v závislosti na fázi srdeční operace v mimotělním oběhu a V časném pooperačním období. Vyšší tkáňová perfuze kosterního svalu byla zaznamenána u nemocných operovaných v normotermii. Bylo prokázáno, že dynamika změn koncentrací sledovaných látek v intersticiu kosterního svaluje dána jak metabolickou aktivitou tkáně, tak průtokem krve intersticiem svalu.
Aim: Hypoperfusion of peripheral tissues and splanchnic organs during cardiac surgery in extracorporeal circulation may lead to the origin of serious complications. The aim of the study was to monitor metabolism and blood pressure in interstital peripheral tissue, skeletal muscle, during the operation on the patient with extracorporeal circulation (ECC) in an early post-operation period by means of microdialysis. Methods: The interstitial microdialysis is a minimally invasive method for the biochemical monitoring of metabolic changes and blood pressure in extracellular space of tissue. The substances in interstitium pass across a semipermeable membrane of the inserted microdialysis probe and may be analyzed. Microdialysis in this study was performed by means of two microdialysis probes CMA (CMA Microdialysis AB \ Sweden) inserted into the deltoid muscle of the surgically treated patient. The probes were perfused by the Ringer solution at the rate of 0.3 ml/hour. The dialysates were sampled in the following intervals: beginning of the operation, beginning of ECC, end of ECC, end of the operation, two hours during the post-operation period. Standard biochemical methods were to evaluate, in the dialysates, glucose, urea, glycerol and lactate. The blood flow in the interstitium was monitored by means of dynamic microdialysis of gentamycine as a marker. Microdialysis was performed in 40 patients with ischemic heart disease, operated on in the extracorporeal circulation. In 20 patients the ECC was performed in normothermia (NT), while in the other 20 patients it was made in hypothermia (HT). Results: In both groups, NT versus HT, a similar dynamism of interstitial concentration of the observed substances in relation to the operation phase and in early post-operation period. Low initial concentrations were gradually increasing during the extracorporeal circulation and increased further after the end of extracorporeal circulation and also in the subsequent phase of the operation. The concentration values of the analytes under observation were higher in the groups operated on under normothermia, apparently due to normal cellular activity during normothermia (versus values in hypothermia). Immediately after the operation the observe values decreased in the both groups and subsequently gradually increased in the post-operation period in the both groups. The trend of dynamic changes of the observed analytes, selected as compounds indicating metabolic activity of skeletal muscles during hypothermia documents a lower metabolic activity of the cells during hypothermia and its marked increase (against NT) in the phase of subsequent normalization of the tissue temperature. Analysis of the concentrations of lactate, as a compounds mapping anaerobic metabolism of skeletal muscle, revealed similar dynamic changes in the both groups (NT vs. HT). There were no significant differences. related to the phase of the operation or the phase of immediate post-operation course when the both groups were compared. The analysis of gentamycine concentrations as a flow marker revealed lower gentamycine concentrations in dialysate during the operation, ECC and the early post-operation course in the group operated on in normotheramia (vs. HT), indicating a higher tissue flow in skeletal muscle against the group of patients operated on under hypothermia. Conclusion: The results of the microdialysis study demonstrated dynamic changes in interstitial concentrations of the observed compounds (glucose, urea, glycerol and lactate) related to the phase of operation on the heart in extracorporeal circulation and in early post-operation period. A higher perfusion of skeletal muscle was documented in patients operated on under normothermia. It became obvious that the dynamism in the changes of the compounds observed in the interstitium of skeletal muscle was determined by metabolic activity of the tissue as well as by blood flow in the muscle interstitium.
- MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- gentamiciny diagnostické užití krev MeSH
- hypotermie MeSH
- kosterní svaly metabolismus MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mikrodialýza metody přístrojové vybavení MeSH
- mimotělní oběh MeSH
- regionální krevní průtok MeSH
- revaskularizace myokardu metody MeSH
- senioři MeSH
- Check Tag
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
- srovnávací studie MeSH
The separation selectivity of octadecyl-silica (C18) and of bonded pentafluorophenylpropyl-silica (F5) and PEG-silica columns was compared for natural phenolic antioxidants. The separation selectivities for phenolic antioxidants on C18 and F5 columns are strongly correlated, but low selectivity correlation indicating strong differences in the retention mechanism was observed between the C18 and PEG columns. Hence, the combination of a C18 and a PEG column is useful for separation of phenolic antioxidants that are not fully separated on single columns. Two-dimensional comprehensive liquid chromatography using a short PEG-silica column in the first dimension and a conventional C18-silica in the second dimension has the advantage of on-column focusing of the fractions transferred onto the C18 column in the second dimension, as a weaker mobile phase is used in the first dimension than in the second dimension. However, a stop-flow set-up in the first dimension system is necessary after the transfer of each fraction to the second dimension. Peak capacity is considerably larger but the separation time is much longer than with serially coupled PEG and C18 columns, which were employed for separation of beer and hop extract samples in connection with coulometric detection.
- MeSH
- antioxidancia analýza MeSH
- fenoly analýza MeSH
- financování organizované MeSH
- lidé MeSH
- oxid křemičitý chemie MeSH
- polyethylenglykoly chemie MeSH
- rostlinné extrakty chemie MeSH
- vysokoúčinná kapalinová chromatografie metody přístrojové vybavení MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- hodnotící studie MeSH
Nuclear genome size is an inherited quantitative trait of eukaryotic organisms with both practical and biological consequences. A detailed analysis of major families is a promising approach to fully understand the biological meaning of the extensive variation in genome size in plants. Although Orchidaceae accounts for ∼10% of the angiosperm diversity, the knowledge of patterns and dynamics of their genome size is limited, in part due to difficulties in flow cytometric analyses. Cells in various somatic tissues of orchids undergo extensive endoreplication, either whole-genome or partial, and the G1-phase nuclei with 2C DNA amounts may be lacking, resulting in overestimated genome size values. Interpretation of DNA content histograms is particularly challenging in species with progressively partial endoreplication, in which the ratios between the positions of two neighboring DNA peaks are lower than two. In order to assess distributions of nuclear DNA amounts and identify tissue suitable for reliable estimation of nuclear DNA content, we analyzed six different tissue types in 48 orchid species belonging to all recognized subfamilies. Although traditionally used leaves may provide incorrect C-values, particularly in species with progressively partial endoreplication, young ovaries and pollinaria consistently yield 2C and 1C peaks of their G1-phase nuclei, respectively, and are, therefore, the most suitable parts for genome size studies in orchids. We also provide new DNA C-values for 22 orchid genera and 42 species. Adhering to the proposed methodology would allow for reliable genome size estimates in this largest plant family. Although our research was limited to orchids, the need to find a suitable tissue with dominant 2C peak of G1-phase nuclei applies to all endopolyploid species.
A fully-standardized EuroFlow 8-color antibody panel and laboratory procedure was stepwise designed to measure minimal residual disease (MRD) in B-cell precursor (BCP) acute lymphoblastic leukemia (ALL) patients with a sensitivity of ≤10(-5), comparable to real-time quantitative polymerase chain reaction (RQ-PCR)-based MRD detection via antigen-receptor rearrangements. Leukocyte markers and the corresponding antibodies and fluorochromes were selected based on their contribution in separating BCP-ALL cells from normal/regenerating BCP cells in multidimensional principal component analyses. After 5 multicenter design-test-evaluate-redesign phases with a total of 319 BCP-ALL patients at diagnosis, two 8-color antibody tubes were selected, which allowed separation between normal and malignant BCP cells in 99% of studied patients. These 2 tubes were tested with a new erythrocyte bulk-lysis protocol allowing acquisition of high cell numbers in 377 bone marrow follow-up samples of 178 BCP-ALL patients. Comparison with RQ-PCR-based MRD data showed a clear positive relation between the percentage concordant cases and the number of cells acquired. For those samples with >4 million cells acquired, concordant results were obtained in 93% of samples. Most discordances were clarified upon high-throughput sequencing of antigen-receptor rearrangements and blind multicenter reanalysis of flow cytometric data, resulting in an unprecedented concordance of 98% (97% for samples with MRD < 0.01%). In conclusion, the fully standardized EuroFlow BCP-ALL MRD strategy is applicable in >98% of patients with sensitivities at least similar to RQ-PCR (≤10(-5)), if sufficient cells (>4 × 10(6), preferably more) are evaluated.
- MeSH
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- genová přestavba MeSH
- kojenec MeSH
- kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mladý dospělý MeSH
- novorozenec MeSH
- pre-B-buněčná leukemie diagnóza MeSH
- předškolní dítě MeSH
- průtoková cytometrie metody normy MeSH
- receptory antigenů B-buněk genetika MeSH
- reziduální nádor diagnóza MeSH
- senioři MeSH
- senzitivita a specificita MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- kojenec MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mladý dospělý MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- novorozenec MeSH
- předškolní dítě MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- multicentrická studie MeSH
Minimal residual disease (MRD) by multiparameter flow cytometry (MFC) is the most effective tool to define a deep response in multiple myeloma (MM). We conducted an MRD correlative study of the EMN02/HO95 MM phase III trial in newly diagnosed MM patients achieving a suspected complete response before maintenance and every 6 months during maintenance. Patients received high-dose melphalan (HDM) versus bortezomib-melphalan-prednisone (VMP) intensification, followed by bortezomib-lenalidomide-dexamethasone (VRd) versus no consolidation, and lenalidomide maintenance. Bone marrow (BM) samples were processed in three European laboratories, applying EuroFlow-based MFC protocols (eight colors, two tubes) with 10-4-10-5 sensitivity. At enrollment in the MRD correlative study, 76% (244/321) of patients were MRD-negative. In the intention-to-treat analysis, after a median follow-up of 75 months, 5-year progression-free survival was 66% in MRD-negative versus 31% in MRD-positive patients (HR 0.39; p < 0.001), 5-year overall survival was 86% versus 69%, respectively (HR 0.41; p < 0.001). MRD negativity was associated with reduced risk of progression or death in all subgroups, including ISS-III (HR 0.37) and high-risk fluorescence in situ hybridization (FISH) patients (HR 0.38;). In the 1-year maintenance MRD population, 42% of MRD-positive patients at pre-maintenance became MRD-negative after lenalidomide exposure. In conclusion, MRD by MFC is a strong prognostic factor. Lenalidomide maintenance further improved MRD-negativity rate.
- MeSH
- autologní štěp MeSH
- bortezomib aplikace a dávkování MeSH
- buňky kostní dřeně metabolismus MeSH
- dexamethason aplikace a dávkování MeSH
- lenalidomid aplikace a dávkování MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- melfalan aplikace a dávkování MeSH
- míra přežití MeSH
- mnohočetný myelom * metabolismus mortalita terapie MeSH
- přežití bez známek nemoci MeSH
- protokoly protinádorové kombinované chemoterapie aplikace a dávkování MeSH
- průtoková cytometrie * MeSH
- reziduální nádor MeSH
- transplantace hematopoetických kmenových buněk * MeSH
- Check Tag
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- klinické zkoušky, fáze III MeSH
- multicentrická studie MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- randomizované kontrolované studie MeSH
Minimal residual disease (MRD) by multiparameter flow cytometry (MFC) is the most effective tool to define a deep response in multiple myeloma (MM). We conducted an MRD correlative study of the EMN02/HO95 MM phase III trial in newly diagnosed MM patients achieving a suspected complete response before maintenance and every 6 months during maintenance. Patients received high-dose melphalan (HDM) versus bortezomib-melphalan-prednisone (VMP) intensification, followed by bortezomib-lenalidomide-dexamethasone (VRd) versus no consolidation, and lenalidomide maintenance. Bone marrow (BM) samples were processed in three European laboratories, applying EuroFlow-based MFC protocols (eight colors, two tubes) with 10-4-10-5 sensitivity. At enrollment in the MRD correlative study, 76% (244/321) of patients were MRD-negative. In the intention-to-treat analysis, after a median follow-up of 75 months, 5-year progression-free survival was 66% in MRD-negative versus 31% in MRD-positive patients (HR 0.39; p < 0.001), 5-year overall survival was 86% versus 69%, respectively (HR 0.41; p < 0.001). MRD negativity was associated with reduced risk of progression or death in all subgroups, including ISS-III (HR 0.37) and high-risk fluorescence in situ hybridization (FISH) patients (HR 0.38;). In the 1-year maintenance MRD population, 42% of MRD-positive patients at pre-maintenance became MRD-negative after lenalidomide exposure. In conclusion, MRD by MFC is a strong prognostic factor. Lenalidomide maintenance further improved MRD-negativity rate.
- MeSH
- autologní štěp MeSH
- bortezomib aplikace a dávkování MeSH
- buňky kostní dřeně metabolismus MeSH
- dexamethason aplikace a dávkování MeSH
- lenalidomid aplikace a dávkování MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- melfalan aplikace a dávkování MeSH
- míra přežití MeSH
- mnohočetný myelom * metabolismus mortalita terapie MeSH
- přežití bez známek nemoci MeSH
- protokoly protinádorové kombinované chemoterapie aplikace a dávkování MeSH
- průtoková cytometrie * MeSH
- reziduální nádor MeSH
- transplantace hematopoetických kmenových buněk * MeSH
- Check Tag
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- klinické zkoušky, fáze III MeSH
- multicentrická studie MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- randomizované kontrolované studie MeSH
