elektronický časopis
Migrace a invazivita jsou fenotypovými vlastnostmi buněk, které významně přispívají k průběhu žádoucích fyziologických dějů, jako je hojení ran či embryogeneze, i k velmi závažným patologickým procesům, především pak k metastazování nádorů. Dostupnost vhodných metod studia migračních a invazivních vlastností buněk je tedy zásadní pro pochopení molekulární podstaty těchto dějů a v případě nádorových onemocnění je migrační, invazivní a metastatický potenciál nádorových buněk klíčovým faktorem určujícím klinickou prognózu pacienta. Tento článek podává přehled základních metod in vitro a in vivo, které se využívají při studiu buněčné migrace, invazivity a mechanizmů metastazování nádorů. In vitro metody studia buněčné migrace zahrnují jednoduché dvourozměrné testy (scratch‑wound assay a test založený na účinku hepatocytárního růstového faktoru) a dále metody využívající účinku chemotaxe (Dunnova komůrka, videomikroskopie buněk a použití nosičů s chemoatraktanty). Metody pro studium buněčné migrace a invazivity in vitro zahrnují složitější systémy založené na principu Boydenovy komůrky (Transwell migrační/invazivní test, analýza buněčné migrace a invazivity pomocí systému xCELLigence, a analýzy prováděné s využitím konfokální mikroskopie) a rovněž pak metodu studia buněčné migrace v mikrokanálcích. Přehled in vivo metod shrnuje základní organizmy a metody užívané ke studiu buněčné migrace a invazivity s hlavním důrazem na studium metastazování in vivo v myších modelech. Popsané metody se uplatňují především ve výzkumných projektech zaměřených na vývoj nových diagnostických a terapeutických přístupů v onkologii.
Migration and invasiveness are phenotypic characteristics of cells that contribute to physiological processes, such as wound healing or embryogenesis and they are involved in serious pathological processes, namely in tumor cell metastasis. Availability of methods for studying migration and invasiveness of the cells is important for understanding molecular basis of these processes. In the case of cancer, migration, invasiveness and metastatic potential of tumor cells are key factors that determine clinical prognosis of the patients. This communication provides an overview of in vitro and in vivo methods which are used to study cell migration, invasion and metastasis. In vitro methods for studying cell migration include simple two‑dimensional assays (scratch – wound assay and the assay based on the effect of hepatocyte growth factor) and methods based on chemotaxis (Dunn‘s chamber, videomicroscopy of cells, the use of carriers with chemoattractants). Methods for studying both cell migration and invasiveness in vitro include more complex systems based on the principle of the Boyden chamber (transwell migration/invasive test, analysis of cell migration and invasion in xCELLigence system, confocal microscopy based approaches) as well as analysis of cell migration in micro‑channels. Our overview of in vivo methods provides an introduction into model organisms and methods used in this field, with an emphasis on the study of cancer metastasis in mouse models. The methods described in this review are mainly involved in larger research projects aiming at developing new diagnostic and therapeutic approaches in oncology. Key words: migration – invasiveness – in vitro assays – in vivo models – metastasis – tumor cells This work was supported by the project of Czech Science Foundation No. 14-19250S, by the European Regional Development Fund and the State Budget of the Czech Republic (RECAMO, CZ.1.05/2.1.00/03.0101) and by MH CZ – DRO (MMCI, 00209805). The authors declare they have no potential conflicts of interest concerning drugs, products, or services used in the study. The Editorial Board declares that the manuscript met the ICMJE “uniform requirements” for biomedical papers. Submitted: 27. 1. 2014 Accepted: 31. 3. 2014
- Keywords
- in vitro assaye, in vivo modely, scratch-wound assay, scatter test, Boydenova komůrka, Dunnova komůrka,
- MeSH
- Cell Migration Assays * methods instrumentation MeSH
- Cell Culture Techniques * methods MeSH
- Chemotaxis MeSH
- Neoplasm Invasiveness * MeSH
- Microscopy, Confocal MeSH
- Culture Media MeSH
- Neoplasm Metastasis MeSH
- Microfluidics MeSH
- Cell Line, Tumor MeSH
- Cell Movement MeSH
- Microscopy, Video MeSH
- Animals MeSH
- Check Tag
- Animals MeSH
- Publication type
- Research Support, Non-U.S. Gov't MeSH
[1st ed.] XLVIII, 349 s. : il.
A better understanding of the molecular mechanisms leading to mast cell migration and chemotaxis is the long-term goal in mast cell research and is essential for comprehension of mast cell function in health and disease. Various techniques have been developed in recent decades for in vitro and in vivo assessment of mast cell motility and chemotaxis. In this chapter three microscopy assays facilitating real-time quantification of mast cell chemotaxis and migration are described, focusing on individual cell tracking and data analysis.
- MeSH
- Cell Migration Assays methods MeSH
- Cell Culture Techniques instrumentation methods MeSH
- Cell Tracking methods MeSH
- Chemotactic Factors pharmacology MeSH
- Chemotaxis MeSH
- Cells, Cultured MeSH
- Humans MeSH
- Mast Cells cytology drug effects physiology MeSH
- Microscopy methods MeSH
- Cell Movement * drug effects MeSH
- Check Tag
- Humans MeSH
- Publication type
- Journal Article MeSH
- Research Support, Non-U.S. Gov't MeSH
- MeSH
- Arboviruses MeSH
- Immunity, Cellular MeSH
- Cell Migration Inhibition MeSH
- Mice MeSH
- Cross Reactions MeSH
- Check Tag
- Mice MeSH
