Diagnostika a správná klasifikace lymfomů vyžaduje komplexní laboratorní přístup. Základem je klasické histopatologické, morfologické a cytologické vyšetření, na které navazuje imunohistochemický průkaz exprese proteinů, vyšetření metodami fluorescenční in situ hybridizace, a analýza nukleových kyselin molekulárními metodami. Mnohdy je výhodné, když se základním vyšetřením probíhá zároveň nebo mu předchází vyšetření pomocí průtokové cytometrie. Důležitá je také komunikace s klinickými spolupracovníky – onkology, hematology, internisty a zobrazovacími specialisty. Na příkladu osmi kazuistických případů chceme dokumentovat účelnost komplexního laboratorního přístupu v diagnostice lymfomů. V některých případech by bez specializovaných vyšetření nebyla správná diagnostika možná, někdy mohou být naopak některé dílčí výsledky zavádějící. Proto je vhodné, aby všechny speciální laboratoře zaměřené na hematopatologickou diagnostiku byly součástí jednoho pracoviště, tedy ústavu či oddělení patologie, a bylo tak možné jednotlivá vyšetření jednoduše a účelně propojit. Tímto přístupem je možné dospět k přesné diagnóze ve většině případů a tak vyhovět nárokům kladeným na správné zařazení lymfomů pro následnou terapii nemocných.
Complex laboratory investigation is necessary for the diagnosis and relevant classification of lymphomas. The classical histopathological morphology and cytology investigation is essential, but further investigations such as immunohistochemistry and fluorescence in situ hybridization are necessary. It is also important to employ flow cytometry as a method of investigation running synchronously or preceding the histopathological approach. Last but not least, the investigation of nucleic acids in lymphoma by molecular approaches is necessary and has become an everyday practice. Communication between pathologists and clinical colleagues (oncologists, hematologists, internal medicine specialists and radiologists) is very important. We demonstrate the necessity of a complex diagnostic approach to lymphomas and an appropriate interpretation of all laboratory investigations giving examples of eight patients with various types of lymphomas. In some cases, it is impossible to properly diagnose a lymphoma without molecular investigation. Occasionally, the results of the molecular investigation may be misleading and/or may be inaccurately interpreted, leading to an incorrect conclusion. For that reason, it is very important to incorporate all specialized laboratories and their teams under one roof (preferably that of pathology departments), enabling tight and daily cooperation between the specialists. This is the way to reach a precise diagnosis in a majority of cases, as well as how to comply with clinical expectations of properly classified lymphomas for a targeted therapy of patients.
- MeSH
- Burkittův lymfom MeSH
- difúzní velkobuněčný B-lymfom MeSH
- dospělí MeSH
- geny bcl-2 MeSH
- histologie MeSH
- homologní transplantace škodlivé účinky MeSH
- hybridizace in situ fluorescenční * MeSH
- hybridizace in situ * MeSH
- hyperplazie diagnóza MeSH
- imunofenotypizace * MeSH
- imunohistochemie * využití MeSH
- imunosupresivní léčba škodlivé účinky MeSH
- infekce virem Epsteina-Barrové MeSH
- lidé MeSH
- lymfatické nemoci * diagnóza MeSH
- lymfom T-buněčný diagnóza MeSH
- lymfom * diagnóza MeSH
- mladiství MeSH
- molekulární biologie metody MeSH
- polymerázová řetězová reakce * MeSH
- průtoková cytometrie * MeSH
- senioři MeSH
- T-lymfocyty MeSH
- transplantace kostní dřeně škodlivé účinky MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Průtoková cytometrie je moderní analytická metoda používaná v klinických i výzkumných laboratořích k imunofenotypizaci vybraných buněčných subpopulací v suspenzi (periferní krve, aspirátu kostní dřeně, mozkomíšního moku atd., ale i buněčné suspenzi získané z nefixovaného solidního tumoru). Poskytuje současně informace o četných povrchových nebo intracelulárních znacích analyzovaných elementů. V klinické praxi k tomu využívá fluorescenčních monoklonálních protilátek proti povrchovým nebo intracelulárním antigenům, které jsou asociovány s určitým typem buněk (T-lymfocyty, B-lymfocyty, apod.), jejím vývojovým stádiem nebo monoklonalitou (např. lehké řetězce povrchových imunoglobulinů). Pravděpodobně nejširšího využití dosáhla metoda v diagnostice hematologických malignit, kde právě rychlá a přesná diagnostika dává lékaři stěžejní informace ke správnému stanovení diagnózy a k výběru optimální léčby, následně lze takřka v reálném čase sledovat efekt léčby. Klíčová slova: průtoková cytometrie – imunofenotypizace – non-Hodgkinské lymfomy
Flow cytometry represents a modern analytical method useful for an assessment of selected cellular subpopulations in suspension (peripheral blood, aspirate of bone marrow, liquid fluid etc. and also in suspensions prepared from non-fixed solid tumors) in clinical and research laboratories. The method provides information on numerous surface or intracellular markers of the analyzed elements at the same time. The usage of fluorescent monoclonal antibodies against surface or intracellular antigens associated with specific type of cells (T-lymphocytes, B-lymphocytes etc.), with their developmental stage, or with monoclonality (for example antibodies against light chains of immunoglobulins), are the most valuable for the clinical practice. The most important application of flow cytometry in pathology has remained in hematologic malignancies, where this fast and exact method provides, practically in a real time, crucial information for correct diagnosis as well as for the choice of optimal therapy, and subsequently for assessing the effect of the therapy. Keywords: flow cytometry – immunophenotypization – non-Hodgkin lymphomas
- MeSH
- antigeny nádorové analýza MeSH
- antigeny povrchové analýza MeSH
- DNA analýza MeSH
- imunofenotypizace * metody MeSH
- lidé MeSH
- nehodgkinský lymfom diagnóza genetika imunologie MeSH
- průtoková cytometrie * metody využití MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
BACKGROUND: Th-2 cytokine milieu including interleukin 4 (IL-4) was detected in fibrotic lung diseases. Chronic extrinsic allergic alveolitis (EAA) may be also accompanied by marked fibrogenesis. The aim of this study was to determine if IL-4 and its receptor (IL-4R-alpha) play any role in the clinical presentation and pathogenesis of chronic EAA. METHODS: Twenty patients originally investigated for interstitial lung disease and finally diagnosed affected with chronic EAA and sarcoidosis were prospectively enrolled into the study. Concentrations of IL-4, IL-4R-aplha and total protein were assessed in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of all enrolled subjects as well as high resolution computed tomography (HRCT) scores and pulmonary function tests. RESULTS: BALF IL-4R-alpha and total protein concentrations were significantly higher in chronic EAA patients (p < 0.05). Concentrations of BALF IL-4R-alpha were significantly higher in men than in women (p < 0.05) in EAA group. Total protein BALF levels were significantly elevated in ex-smokers with EAA compared to nonsmokers (p < 0.05). A positive correlation (p < 0.01) between IL-4R-alpha BALF concentrations and HRCT interstitial scores were observed in chronic EAA group; the IL-4R-alpha/total protein ratio showed the same significant positive correlation. A negative correlation between lung function results and IL-4R-alpha, and IL-4R-alpha/total protein as well, was also found (p < 0.05). CONCLUSIONS: We suggest a clinical relevance for the IL-4/IL-4R axis in the etiopathogenesis of chronic EAA. IL-4R-alpha could serve as a potential biomarker of lung fibrogenesis.
Závěrečná zpráva o řešení grantu Interní grantové agentury MZ ČR
Přeruš. str. : il., tab. ; 31 cm
Předpokládáme rozdílné zastoupení cytokinů, chemokinů a jejich receptorů a PAR´s u pacientů s IPF a CHOPN. Lze předpokládat, že hladina exprese PAR´s bude v případě chronického zánětlivého procesu typu CHOPN výraznější. Naše dosavadní výsledky vyšetřenígenových polymorfismů cytokinů ukazují na možnost lokalizace specifických genových polymorfismů disponujících k rozvoji plicní fibrózy v oblasti promotoru IL-1 alfa, v oblasti genu pro IL-2 a v oblasti promotoru IL-4. Lze tedy předpokládat, že tyto polymorfismy mohou ovlivňovat i expresi těchto působků a tudíž i jejich receptorů a PAR?s. Modelové výsledky našich předchozích prací také dokládají, že produkce PAR´s koreluje s expresí TGF- beta při radiačním poškození, a proto předpokládáme změnu exprese PAR´s i u pacientů s IPF a/ nebo CHOPN v korelaci s uvedenými polymorfismy. Předpokládáme i odlišnou expresi mezi jednotlivými typy PAR´s.; We assume differences between expression of cytokines, chemokines and their receptors in patients diseased by IPF and COPD. It could be expected that the level of PAR´s expression will be significantly higher in chronic inflamatory process (COPD) than inIPF. Our previous results showed that specific gene polymorphisms could be associated with the predispositon for IPF development. It could be premised that specific gene polymorphic variants infulence expression of these substances and their receptors and moreover could modulate expression of PAR´s. Our previous experimental data illustrated correlation of production of PAR´s and TGF-beta in the mouse model of irradiation induced pneumopathy, thus, we hypothesise significant change of PAR´s expressionin patients with IPF and/or COPD in correlation with mentioned gene polymorphisms. Moreover we are expecting different expression of different PAR´s types.
- MeSH
- chemokiny MeSH
- chronická obstrukční plicní nemoc MeSH
- erbB receptory MeSH
- exprese genu MeSH
- idiopatická plicní fibróza MeSH
- imunoenzymatické techniky MeSH
- inhibitory ACE MeSH
- polymorfismus genetický MeSH
- receptor PAR-1 MeSH
- receptor PAR-2 MeSH
- Konspekt
- Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
- NLK Obory
- pneumologie a ftizeologie
- biochemie
- NLK Publikační typ
- závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR
AIMS: The main feature of fibrosing idiopathic interstitial pneumonias (fIIPs) is the fibroproliferative potential of underlying pathogenetic process. We hypothesize that the concentration of potential markers of fibroproliferative healing, PAR-2, TGF-β1, TNF-α and IL-4Rα in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) differ in patients with fIIPs compared to controls (C). PATIENTS AND METHODS: 10 patients with fIIPs and 9 controls (C) were included to the study. Concentrations of CD124 (IL4Rα), PAR-2, TGF-β1 and TNF-α in BALF were determined using the ELISA method. RESULTS: We observed higher concentrations of IL4Rα (fIIPS 1499.4 pg/ml vs C 255.5 pg/ml; p < 0.05), PAR-2 (fIIPS 1807.9 pg/ml vs C 421.0 pg/ml; p < 0.05) and TGF-β1(fIIPS 283.0 pg/ml vs C 197.1 pg/ml; p < 0.01) in BALF in fIIPs versus C. The values of TNF-a in BALF did not differ significantly in fIIPs compared to controls. The ratios also showed differences in fIIPS and C: IL4Rα/TGF-β1 (fIIPS 6.19 vs C 0.68; p = 0.0143); TNF-α/IL4Rα (fIIPS 0.84 vs C 7.93; p = 0.043); TGF-β1/TNF-α (fIIPS 0.21 vs C 0.16; p = 0.0179) and protein/PAR-2 (fIIPS 0.06 vs C 0.28; p = 0.0033). CONCLUSIONS: We found that PAR-2, TGF-β1 and IL-4Rα are significantly up-regulated in the BALF of fIIPs compared to controls, therefore we suppose they could become biomarkers of fibroproliferative healing.
- Klíčová slova
- IL4R.; Idiopathic interstitial pneumonias; PAR-2; TGF-beta; biomarkers; bronchoalveolar lavage fluid; fibroproliferative healing,
- MeSH
- biologické markery * MeSH
- bronchoalveolární lavážní tekutina * MeSH
- idiopatická plicní fibróza * MeSH
- idiopatické intersticiální pneumonie * MeSH
- lidé MeSH
- receptor PAR-2 * MeSH
- receptory interleukinu-4 * MeSH
- transformující růstový faktor beta * MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
