Coufalová, Lenka*
Dotaz
Zobrazit nápovědu
A series of final twelve propanoyloxy derivatives of 5β-cholan-24-oic acid (O-propanoyl derivatives of cholic acid) as potential drug absorption modifiers (skin penetration enhancers, intestinal absorption promoters) was generated by multistep synthesis. Structure confirmation of all generated compounds was accomplished by 1H NMR, 13C NMR, IR and MS spectroscopy methods. All the prepared compounds were analyzed using RP-TLC, and their lipophilicity (RM) was determined. The hydrophobicity (log P), solubility (log S), polar surface area (PSA) and molar volume (MV) of the studied compounds were also calculated. All the target compounds were tested for their in vitro transdermal penetration effect and as potential intestinal absorption enhancers. The cytotoxicity of all the evaluated compounds was evaluated against normal human skin fibroblast cells. Their anti-proliferative activity was also assessed against human cancer cell lines: T-lymphoblastic leukemia cell line and breast adenocarcinoma cell line. One compound showed selective cytotoxicity against human skin fibroblast cells and another compound possessed the highest cytotoxicity against all the tested cell lines. Only one compound expressed anti-proliferative effect on leukemia cancer cells without affecting the growth of normal cells, which should be promising in potential development of new drugs. Most of the target compounds showed minimal anti-proliferative activity (IC50>37 μM), indicating they would have moderate cytotoxicity when administered as chemical absorption modifiers. The relationships between the lipophilicity/polarity and the chemical structure of the studied compounds as well as the relationships between their chemical structure and enhancement effect are discussed in this article.
- MeSH
- buněčná membrána účinky léků metabolismus MeSH
- farmakokinetika MeSH
- hydrofobní a hydrofilní interakce MeSH
- intestinální absorpce účinky léků MeSH
- kožní absorpce účinky léků MeSH
- kyseliny cholové chemie farmakologie toxicita MeSH
- léčivé přípravky metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- nádorové buněčné linie MeSH
- permeabilita účinky léků MeSH
- proliferace buněk účinky léků MeSH
- vztahy mezi strukturou a aktivitou MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
A series of final six propanoyloxy derivatives of 5β-cholan-24-oic acid (tridecafluoroctylsulfanyl- and tridecafluoroctylsulfinylethoxycarbonylpropanoyloxy derivatives) as potential drug absorption promoters (skin penetration enhancers, intestinal absorption promoters) was generated by multistep synthesis. Structure confirmation of all generated compounds was accomplished by (1)H NMR, (13)C NMR, IR and MS spectroscopy methods. All the prepared compounds were analyzed using RP-TLC, and their lipophilicity (RM) was determined. The hydrophobicity (log P), solubility (logS), polar surface area (PSA) and molar volume (MV) of the studied compounds were also calculated. All the target compounds were tested for their in vitro transdermal penetration effect and as potential intestinal absorption enhancers. The cytotoxicity of all the evaluated compounds was evaluated against normal human skin fibroblast cells. Their anti-proliferative activity was also assessed against human cancer cell lines: T-lymphoblastic leukaemia cell line and breast adenocarcinoma cell line. One compound showed high selective cytotoxicity against human skin fibroblast cells and another compound possessed high cytotoxicity against breast adenocarcinoma cell line and skin fibroblast cells. Only one compound expressed anti-proliferative effect on leukaemia and breast adenocarcinoma cells without affecting the growth of normal cells, which should be promising in potential development of new drugs. Most of the target compounds showed minimal anti-proliferative activity (IC50>37μM), indicating they would have moderate cytotoxicity when administered as chemical absorption modifiers. The relationships between the lipophilicity/polarity and the chemical structure of the studied compounds as well as the relationships between their chemical structure and penetration enhancement effect are discussed in this article.
- MeSH
- fibroblasty účinky léků metabolismus MeSH
- fluorované uhlovodíky chemická syntéza metabolismus toxicita MeSH
- hydrofobní a hydrofilní interakce MeSH
- intestinální absorpce MeSH
- kožní absorpce MeSH
- kyseliny cholové chemie MeSH
- lidé MeSH
- membrány umělé MeSH
- MFC-7 buňky MeSH
- permeabilita MeSH
- pomocné látky chemická syntéza metabolismus toxicita MeSH
- proliferace buněk účinky léků MeSH
- propionáty chemická syntéza metabolismus toxicita MeSH
- rozpustnost MeSH
- viabilita buněk účinky léků MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- MeSH
- alkoholismus prevence a kontrola terapie MeSH
- ambulantní péče psychologie statistika a číselné údaje využití MeSH
- komunitní psychiatrická střediska MeSH
- lidé MeSH
- poruchy spojené s užíváním psychoaktivních látek prevence a kontrola terapie MeSH
- poruchy vyvolané užíváním tabáku MeSH
- poskytování zdravotní péče MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Národní monitorovací středisko pro drogy a drogové závislosti provedlo výzkum zaměřený na poskytování ambulantní psychiatrické péče uživatelům drog v r. 2003 v ČR. Šetření proběhlo v průběhu roku 2004. Cílem práce bylo zjistit, kolik ambulantních psychiatrických ordinací je primárně zaměřeno na poskytování lékařské péče uživatelům drog, tedy kolik je v ČR ordinací AT. Do výzkumu se zapojilo celkem 195 psychiatrických ordinací, z nichž 35 v r. 2003 neléčilo žádného uživatele drog. Celkem se tedy 160 zapojených psychiatrických ordinací zabývalo kromě své jiné činnosti také léčbou uživatelů drog. Z tohoto souboru ordinací jich 128 poskytuje léčbu uživatelům alkoholu, 33 léčbu uživatelům tabáku a 70 léčbu uživatelům nelegálních drog. V těchto psychiatrických ordinacích se léčilo 43 201 pacientů (67 % tvořili uživatelé alkoholu, 15,5 % uživatelé tabáku a 15 % uživatelé nelegálních drog). Nejčastěji užívanými drogami po alkoholu a tabáku byly pervitin a marihuana. Ordinace nejvíce spolupracují s psychiatrickými léčebnami, klinikami a odděleními a dále s praktickými lékaři. Spolupráce se specializovanými nestátními organizacemi poskytujícími léčbu a následnou péči uživatelům drog je hodnocena jako nedostatečná.
The Czech National Monitoring Centre for Drugs and Drug Addiction carried out a survey focused on the out-patient psychiatric treatment provision to drug users in 2003. The survey was realised in 2004. The aim of the study was to find out how many out-patient treatment centres are primarily oriented on drug users, i.e. how many so called "AT ambulances" do exist in the Czech Republic. Altogether 195 out-patient psychiatric centres participated in the study, out of them 35 centres had no drug user in treatment in 2003. Therefore 160 out-patient treatment centres were focused on treatment of drug users. 128 out-patient psychiatric centres provide treatment to alcohol users, 33 to tobacco users and 70 to illicit drug users. In these 160 centres, 43 201 patients were treated in 2003 (67% alcohol users, 15.5% tobacco users and 15% illicit drug users). The most frequent illicit drugs used were pervitin (methamphetamine) and marijuana. These centres co-operate mostly with in-patient psychiatric clinics and departments, as well as with general practitioners. Collaboration with non-governmental organisations in the field of drug treatment and after-care is assessed as insufficient.
Východiska: Vývoj biofarmaceutik je nejrychleji se rozvíjející oblastí dnešního farmaceutického průmyslu. Analýza proteinových terapeutik je však velice náročný úkol kvůli jejich velikosti a komplexnosti prostorové struktury. Jakékoliv změny v primární, sekundární, terciální či kvarterní struktuře proteinů mohou mít výrazný vliv na jejich funkci, účinnost a v neposlední řadě i toxicitu. Hmotnostní spektrometrie se v minulosti osvědčila jako kvalitní nástroj pro analýzu primární struktury proteinů (aminokyselinové sekvence) a v posledních letech je díky rozvoji nových metod schopná analyzovat i vyšší proteinové struktury. Jednou z těchto nových metod je vodík/deuteriová výměna (HDX). HDX je založena na výměně amidových vodíků aminokyselinového řetězce za deuteria z okolního roztoku. Vodíky nacházející se na povrchu proteinu jsou za deuteria vyměňovány mnohem rychleji než vodíky schované uvnitř proteinu. Získané výsledky z HDX metody mohou poskytnout informace o prostorové struktuře proteinu a také o protein-proteinových a protein-ligandových interakcí. Navíc analýzou výměny deuterií v různých časových intervalech může tato metoda poskytnout informace i o dynamických změnách proteinové struktury a dynamice proteinových interakcí. Vzhledem k možnostem, které tato metoda nabízí, se HDX stala atraktivní metodou pro charakterizaci proteinových biofarmaceutik. Cíl: Cílem tohoto přehledového článku je poukázat na možnosti využití hmotnostní spektrometrie v biofarmaceutickém průmyslu se zaměřením na metodu HDX a její aplikace.
Background: The development of biopharmaceutics is the fastest growing segment of the present pharmaceutical industry. The analysis of proteins therapeutics is a challenging task due to their large size and complexity of spatial structure. Any changes in the primary, secondary, tertiary or quaternary protein structure can have huge impact on their function, efficiency and toxicity. Mass spectrometry proved itself to be a powerful tool for analysis of primary protein structure (amino acid sequence) and thanks to the development of new techniques in last years it is able to analyse higher order protein structures. One of these new techniques is hydrogen/deuterium exchange (HDX). HDX is based on exchange of amid protons with deuterium from solution on the protein backbone chain. Protons on the surface of protein are exchanging with deuterium much faster than protons buried inside of protein. HDX results could provide information about spatial protein structure and also about protein-protein interactions and protein-ligand interactions. Furthermore, by analysing of deuterium exchange in different time points this method could give information about dynamic changes of protein structure and dynamics of proteins interactions. Because of possibilities of this method, HDX become attractive method for characterization of protein biopharmaceuticals. Aims: This review article is focused on the utilization of mass spectrometry in biopharmaceutical industry and mainly on HDX method and its applications.
- Klíčová slova
- vodík/deuteriová výměna,
- MeSH
- farmaceutický průmysl MeSH
- hmotnostní spektrometrie metody využití MeSH
- konformace proteinů MeSH
- krystalografie rentgenová využití MeSH
- lidé MeSH
- mapování epitopu metody využití MeSH
- objevování léků metody MeSH
- proteiny analýza terapeutické užití MeSH
- proteomika metody MeSH
- translační modifikace proteinu MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
Mnoho buněčných proteinů tvoří oligomery. Rovnováha mezi monomerním a oligomerním stavem těchto proteinů hraje důležitou roli v regulaci proteinové aktivity. Ovlivnění oligomerizace se tudíž nabízí jako zajímavý přístup při vývoji nových terapeutických látek. Cílem tohoto přehledového článku je shrnout informace o procesu proteinové oligomerizace a možnostech její cílené modulace. Role oligomerizace v onkogenezi je prezentována na příkladu nádorového supresorového proteinu p53, u kterého jsou v současné době zkoumány látky stabilizující jeho tetramerní strukturu. Z metod pro studium oligomerizace je zde představena metoda vodík/deuteriové výměny ve spojení s hmotnostní spektrometrií, která je vhodná pro detekci protein‑proteinových interakcí a analýzu dynamiky oligomerizace.
Many cellular proteins form oligomers. The equilibrium between monomeric and oligomeric states of these proteins is important for the regulation of protein activity. Modulation of the oligomerization equilibrium could be an interesting approach in the development of new therapeutic agents. This review summarizes information about protein oligomerization and modulation of this process, demonstrating the role of oligomerization in oncogenesis by tumor suppressor protein p53, which forms tetrameric structure. Today, many studies focus on finding compounds that stabilize its tetramers. Among the methods for studying oligomerization, we present hydrogen/deuterium exchange method coupled with mass spectrometry which is suitable for the detection of protein‑protein interaction and analysis of oligomerization dynamics. Key words: proteomics – drug design – tumor suppressor protein p53 – oligomerization – hydrogen/deuterium exchange This study was supported by the European Regional Development Fund and the State Budget of the Czech Republic (RECAMO, CZ.1.05/2.1.00/03.0101), MEYS – NPS I – LO1413, MH CZ – DRO (MMCI, 00209805) and BBMRI_CZ (LM2010004). The authors declare they have no potential confl icts of interest concerning drugs, products, or services used in the study. The Editorial Board declares that the manuscript met the ICMJE “uniform requirements” for biomedical papers. Submitted: 9. 4. 2015 Accepted: 15. 6. 2015
- Klíčová slova
- vodík/deuteriová výměna,
- MeSH
- deuterium MeSH
- konformace proteinů MeSH
- lidé MeSH
- nádorový supresorový protein p53 * MeSH
- objevování léků MeSH
- proteiny chemie MeSH
- proteomika * MeSH
- sbalování proteinů MeSH
- vodík-deuteriová výměna * MeSH
- vodík MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
Východiska: K léčbě onkologických onemocnění se používají kombinace postupů založených nejčastěji na chirurgickém odstranění nádoru, radioterapii, chemoterapii či hormonální terapii, přičemž samotný chirurgický zákrok většinou představuje stěžejní krok pro odstranění nádorové masy. Je ovšem často provázen problémy s určením ohraničení nádoru. Chirurg má před operací k dispozici pouze informace z předoperačních vyšetření, která naznačují lokalizaci a rozsah nádoru, ale neurčí jasné hranice mezi nádorovou a zdravou tkání. Tuto oblast ve většině případů nelze rozeznat zrakem či hmatem, a pokud není nádor zcela odstraněn, musí pacient podstoupit reoperaci. Cíl: Nové technologie vyvíjené ve výzkumných centrech umožňují operatérovi získat informace o stavu nádorové tkáně v reálném čase přímo na operačním sále v průběhu chirurgického zákroku. Patří mezi ně přístroje MarginProbe, Spectropen a spektroskopický tkáňový skener. Další skupinu tvoří zobrazovací techniky využívající hmotnostní spektrometrii k určování tkáňové specifičnosti. V posledních letech prošla obrovským vývojem technika intraoperativní hmotnostní spektrometrie (REIMS). Využívá elektronický skalpel, kterým chirurg provádí řez tkáně, přičemž vznikající aerosol je odváděn do hmotnostního spektrometru, jenž během několika desetin sekund získá hmotnostní spektra fosfolipidů specifických pro operovanou tkáň (nádorovou či zdravou). V České republice se již tato technologie využívá ve výzkumu k detekci koncentrace léčiva deponovaného v nádorové a zdravé tkáni myší trpících melanomem. Získané výsledky ukazují, že pomocí tohoto přístroje by bylo možné zásadním způsobem ovlivnit léčbu i její účinnost u onkologických onemocnění. O těchto nových technologiích vás v článku budeme podrobněji informovat a seznamovat s jejich principy a využitím.
Background: The treatment of oncological diseases is based on the combination of surgery, representing the key step for the removal of the tumor tissue, radiotherapy, chemotherapy, and hormone therapy. However, the surgery is often accompanied by issue of determining the boundaries of the tumor. Prior the operation, the surgeon has information on preoperative ndings, which indicate the location a
- Klíčová slova
- MarginProbe, SpectroPen, Ramanův skener, REIMS,
- MeSH
- hmotnostní spektrometrie dějiny využití MeSH
- lidé MeSH
- mikroskopie metody využití MeSH
- molekulární patologie metody MeSH
- nádory podle lokalizace MeSH
- nádory * chirurgie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
This study is focused on in vitro permeation of the original Czech compound, a skin/mucosa tissue regeneration promoter, known under the international nonproprietary name "alaptide," in micronized and nanonized forms. Alaptide showed a great potential for local applications for treatment and/or regeneration of the injured skin. The above mentioned technological modifications influence the permeation of alaptide through artificial or biological membranes, such as PAMPA or skin. The permeation of micronized and nanonized form of alaptide formulated to various semisolid pharmaceutical compositions through full-thickness pig ear skin using a Franz cell has been investigated in detail. In general, it can be concluded that the nanonized alaptide permeated through the skin less than the micronized form; different observations were made for permeation through the PAMPA system, where the micronized form showed lower permeation than the nanonized alaptide.
