Progresivní multifokální leukoencefalopatie je onemocnění způsobené infekcí JC virem. Onemocnení postihuje většinou pacienty s imunodeficitem, při hematologických onemocněních nebo nemocné léčené radioterapií. Při onemocnění se objevují ložiska demyelinizace s histologicky prokazatelnou atypickou astroglií a oligodendroglií, ve které se nacházejí typické intranukleární inkluze. Progresivní multifokální leukoencefalopatie a její ověření je dokumentováno na třech případech. Dva pacienti zemřeli na progresi maligního nádoru a leukoencefalopatie se vyskytla jako komplikace jejich základního onemocnění. Třetím případem bylo bioptické vyšetření pacientky po transplantaci ledvin. Materiál byl vyšetřen optickou mikroskopií, elektronmikroskopicky a metodou in situ hybridizace. Z výsledků vyplývá, že in situ hybridizace je ze všech použitých přístupů nejspecifičtější, jednoduchá a spolehlivě prokazuje virovou infekci i v případech, ve kterých je histologicky detekovatelná leze diskrétní nebo nepříznačná, a v buňkách, ve kterých ji ostatními metodami nemůžeme odhalit.
Progressive multifocal leucoencephalopathy is caused by infection with JC virus. The disease affects patients with immunodeficiencies, hematologic diseases, and patients treated with radiotherapy. The disease is characterised by foci of demyelinisation with atypical astrocytes and ohgodendrocytes. Oligodendrocytes contain typical intranuclear inclusions. Progressive multifocal leucoencephalopathy and its verification is presented in three cases. Two patients died of progression of a malignant neoplasm and the leucoencephalopathy was a complication of the malignancy. The third case was a biopsy specimen taken from the brain of a patient who received a renal transplant. The material of all patients was analysed by light and electron microscopy, and in situ hybridisation with a probe specific for JC virus. In situ hybridisation proved to be the most specific and a simple method to demonstrate the infection in all cases. It is useful in instances in which the histologically detectable lesion is not characteristic, and in cells in which the conventional histologie methods fail to reveal the intranuclear inclusions of JC virus.
Akutní promyelocytární PML/RARAα pozitivní leukemie (APL) je onemocnění laboratorně definované přítomností leukemických promyelocytů v nátěru periferní krve a v aspirátu kostní dřeně a geneticky přítomností fúzního genu PML/RARAα, klinicky pak příznaky z intenzivního krvácení a z diseminované intravaskulární koagulace. Většina vzorků krevního obrazu je u pacientů s APL pancytopenických, výjimečně jsou vstupní vzorky s leukocytózou (častěji u mikrogranulární formy). Přítomné leukemické promyelocyty se od fyziologických buněk odlišují tvarem jádra a granulací. Kazuistika pacienta s hypergranulární formou APL je zaměřena na morfologickou diagnostiku vstupního nálezu a změny v morfologii buněk při relapsech onemocnění.
PML/RARα positive acute promyelocytic leukemia (APL) is characterized by the presence of leukemic promyelocytes in peripheral blood smear and bone marrow aspirate, genetically confirmed PML/RARAα fusion, clinical signs of bleeding and disseminated intravascular coagulation. The majority of cases present with pancytopenia, leukocytosis (more frequently in microgranular variants) is rare. Leukemic promyelocytes differ in nucleus shape and cytoplasmic granulation as compared to their physiological counterparts. The following case report focuses on morphological findings in a patient with hypergranular APL at presentation and relapse.
- MeSH
- akutní promyelocytární leukemie * diagnóza farmakoterapie MeSH
- buňky kostní dřeně patologie MeSH
- fatální výsledek MeSH
- histologické techniky MeSH
- kombinovaná farmakoterapie MeSH
- krevní buňky patologie MeSH
- lidé MeSH
- neúspěšná terapie MeSH
- protinádorové látky terapeutické užití MeSH
- recidiva MeSH
- transplantace periferních kmenových buněk MeSH
- vyšetřování kostní dřeně MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
Závěrečná zpráva o řešení grantu Interní grantové agentury MZ ČR
112 l. : tab., il. ; 30 cm
Bude pátráno po zárodečných mutacích genu PML u pacientů s nádory prsu a kolorekta, u nichž je podezření, že onemocnění mohlo vzniknout na podkladě hereditární predispozice. Bude stanovena amplifikace genu pro cyklin D1 a ZNF217 ve vzorcích nádorů prsu na podkladě hereditární predispozice a sporadických a pátráno po rozdílech mezi oběma skupinami nádorů.; Mutational analysis of PML gene will be performed in patients with breast and colon cancer with suspect hereditary predisposition to cancer. Cyclin D1 and ZNF217 gene amplification analysis will be performed in breast cancer samples associated with hereditary predisposition and sporadic ones and differences between both groups will be determined.
- MeSH
- amplifikace genu MeSH
- cyklin D1 MeSH
- kolorektální nádory etiologie genetika MeSH
- nádory prsu etiologie genetika MeSH
- protein SUMO-1 MeSH
- transkripční faktory Krüppel-like MeSH
- zárodečné mutace MeSH
- Konspekt
- Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
- NLK Obory
- hematologie a transfuzní lékařství
- onkologie
- biologie
- NLK Publikační typ
- závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR
PML, a multifunctional protein, is crucial for forming PML-nuclear bodies involved in stress responses. Under specific conditions, PML associates with nucleolar caps formed after RNA polymerase I (RNAPI) inhibition, leading to PML-nucleolar associations (PNAs). This study investigates PNAs-inducing stimuli by exposing cells to various genotoxic stresses. We found that the most potent inducers of PNAs introduced topological stress and inhibited RNAPI. Doxorubicin, the most effective compound, induced double-strand breaks (DSBs) in the rDNA locus. PNAs co-localized with damaged rDNA, segregating it from active nucleoli. Cleaving the rDNA locus with I-PpoI confirmed rDNA damage as a genuine stimulus for PNAs. Inhibition of ATM, ATR kinases, and RAD51 reduced I-PpoI-induced PNAs, highlighting the importance of ATM/ATR-dependent nucleolar cap formation and homologous recombination (HR) in their triggering. I-PpoI-induced PNAs co-localized with rDNA DSBs positive for RPA32-pS33 but deficient in RAD51, indicating resected DNA unable to complete HR repair. Our findings suggest that PNAs form in response to persistent rDNA damage within the nucleolar cap, highlighting the interplay between PML/PNAs and rDNA alterations due to topological stress, RNAPI inhibition, and rDNA DSBs destined for HR. Cells with persistent PNAs undergo senescence, suggesting PNAs help avoid rDNA instability, with implications for tumorigenesis and aging.
- MeSH
- buněčné jadérko * metabolismus MeSH
- dvouřetězcové zlomy DNA MeSH
- lidé MeSH
- poškození DNA MeSH
- protein promyelocytické leukemie * metabolismus genetika MeSH
- ribozomální DNA * genetika metabolismus MeSH
- RNA-polymerasa I metabolismus genetika MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Repetitive sequences are among the most unstable regions in the eukaryotic genome and defects in their maintenance correlate with premature aging and cancer development. Promyelocytic leukemia protein (PML) induces accumulation of proteins at distinct nuclear sites, thereby affecting a plethora of processes including DNA repair or maintenance of telomeres. Doxorubicin, the broadly used chemotherapeutic compound, induces formation of PML-nucleolar associations (PNAs). Nevertheless, molecular factors affecting formation of PNAs are still largely unknown. Here we show that PNAs can accumulate ribosomal DNA (rDNA) and, after restoration of RNA polymerase I activity, these structures transfer a fraction of rDNA outside the nucleolus. Mutagenesis of PML isoforms revealed that this process depends on the SUMO-interacting motif and adjacent serine-rich region, and is enhanced by exon8b present exclusively in PML IV isoform. Moreover, we demonstrate that PNAs formation is also regulated by p14ARF/p53 tumor suppressors and casein kinase 2. Our data elucidate how PML nucleolar compartment is assembled, bring the first evidence of PML interacting with rDNA, and show the PML-dependent translocation of rDNA away from the nucleolus.
The bulk of DNA damage caused by ionizing radiation (IR) is generally repaired within hours, yet a subset of DNA lesions may persist even for long periods of time. Such persisting IR-induced foci (pIRIF) co-associate with PML nuclear bodies (PML-NBs) and are among the characteristics of cellular senescence. Here we addressed some fundamental questions concerning the nature and determinants of this co-association, the role of PML-NBs at such sites, and the reason for the persistence of DNA damage in human primary cells. We show that the persistent DNA lesions are devoid of homologous recombination (HR) proteins BRCA1 and Rad51. Our super-resolution microscopy-based analysis showed that PML-NBs are juxtaposed to and partially overlap with the pIRIFs. Notably, depletion of 53BP1 resulted in decreased intersection between PML-NBs and pIRIFs implicating the RNF168-53BP1 pathway in their interaction. To test whether the formation and persistence of IRIFs is PML-dependent and to investigate the role of PML in the context of DNA repair and senescence, we genetically deleted PML in human hTERT-RPE-1 cells. Unexpectedly, upon high-dose IR treatment, cells displayed similar DNA damage signalling, repair dynamics and kinetics of cellular senescence regardless of the presence or absence of PML. In contrast, the PML knock-out cells showed increased sensitivity to low doses of IR and DNA-damaging agents mitomycin C, cisplatin and camptothecin that all cause DNA lesions requiring repair by HR. These results, along with enhanced sensitivity of the PML knock-out cells to DNA-PK and PARP inhibitors implicate PML as a factor contributing to HR-mediated DNA repair.
- MeSH
- 53BP1 metabolismus MeSH
- genový knockout MeSH
- intranukleární inkluzní tělíska metabolismus účinky záření MeSH
- lidé MeSH
- oprava DNA * účinky záření MeSH
- poškození DNA * MeSH
- protein promyelocytické leukemie nedostatek genetika metabolismus MeSH
- stárnutí buněk genetika účinky záření MeSH
- ubikvitinligasy metabolismus MeSH
- vztah dávky záření a odpovědi MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Diverse stress insults trigger interactions of PML with nucleolus, however, the function of these PML nucleolar associations (PNAs) remains unclear. Here we show that during induction of DNA damage-induced senescence in human non-cancerous cells, PML accumulates at the nucleolar periphery simultaneously with inactivation of RNA polymerase I (RNAP I) and nucleolar segregation. Using time-lapse and high-resolution microscopy, we followed the genesis, structural transitions and destiny of PNAs to show that: 1) the dynamic structural changes of the PML-nucleolar interaction are tightly associated with inactivation and reactivation of RNAP I-mediated transcription, respectively; 2) the PML-nucleolar compartment develops sequentially under stress and, upon stress termination, it culminates in either of two fates: disappearance or persistence; 3) all PNAs stages can associate with DNA damage markers; 4) the persistent, commonly long-lasting PML multi-protein nucleolar structures (PML-NDS) associate with markers of DNA damage, indicating a role of PNAs in persistent DNA damage response characteristic for senescent cells. Given the emerging evidence implicating PML in homologous recombination-directed DNA repair, we propose that PNAs contribute to sequestration and faithful repair of the highly unstable ribosomal DNA repeats, a fundamental process to maintain a precise balance between DNA repair mechanisms, with implications for genomic integrity and aging.
- MeSH
- buněčné jadérko metabolismus MeSH
- doxorubicin MeSH
- fyziologický stres MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- poškození DNA * MeSH
- protein promyelocytické leukemie metabolismus MeSH
- stárnutí buněk * MeSH
- zobrazování trojrozměrné MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
