Na základě analýzy globálních profilů exprese sérových miRNA chceme vytvořit nový prognostický panel umožňující stratifikaci pacientů s monoklonální gamapatií podle individuální míry rizika progrese onemocnění až do mnohočetného myelomu. Vytvořený prognostický panel miRNA bude identifikovatelný ve snadno dostupném biologickém materiálu (krevní sérum), který lze odebírat opakovaně, a jehož odběr je spojen s minimální mírou invazivity pro pacienta. Dalším krokem bude identifikace podobného panelu cirkulujících miRNA v jiných biologických materiálech. Použití diagnostického panelu miRNA bude spojeno s vyšší mírou individualizace léčby pacientů s MM a v důsledku povede nejen k lepším léčebným výsledkům u těchto pacientů, ale také ke zvýšení kvality jejich života.; Based on analysis of global profiles of expression of serum miRNA, we want to create a new prognostic panel allowing for stratification of patients with monoclonal gammopathies according to individual risk of disease progression to multiple myeloma. The created prognostic panel of miRNA will be identifiable in easily accessible biological material (blood serum) that can be sampled repeatedly and its sampling is minimally invasive for the patient. The next step will be identification of a similar panel of circulating miRNA in other biological materials. Using the diagnostic panel of miRNA will be connected to a higher degree of individualisation of MM patients treatment and will lead to better therapeutic results of these patients as well as increase of quality of life.

• MeSH
• biologické markery MeSH
• individualizovaná medicína MeSH
• mikro RNA analýza   krev   MeSH
• mnohočetný myelom MeSH
• monoklonální gamapatie nejasného významu diagnóza   MeSH
• prognóza MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• molekulární biologie, molekulární medicína
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• MeSH
• antivirové látky MeSH
• fyziologie virů MeSH
• virové struktury MeSH
• virové vakcíny MeSH
• viry * MeSH

Východiska: Přirozená reakce organizmu na hypoxii je regulována různými mechanizmy a transkripčními faktory, zahrnujícími hypoxií indukovatelné faktory (HIFs). Aktivace HIF-1α je u nádorových buněk spojována se zvýšenou expresí P-glykoproteinu a multilékovou rezistencí. V této retrospektivní analýze jsme sledovali kandidátní jednonukleotidové polymorfizmy (single-nucleotide polymorphisms - SNP) genů HIF-1α a HIF-1β a jejich spojení s rizikem vzniku onemocnění monoklonální gamapatie nejasného významu (monoclonal gammopathy of undetermined significance - MGUS) nebo mnohočetného myelomu (MM). Soubor pacientů a metody: Genotypy jednonukleotidových polymorfizmů spojovaných s hypoxií byly určovány pomocí real time polymerázové řetězové reakce alelické diskriminace u nezávislé skupiny pacientů s monoklonální gamapatií (MG) (275 pacientů s MM a 228 s MGUS) a u 219 kontrol bez nádorového onemocnění. Výsledky: Při porovnání pacientů s MM a kontrol jsme pozorovali příznivější vliv genotypu CG genu HIF-1β (rs2228099) oproti genotypu CC (OR 0,65; CI 0,45-0,95; p = 0,026). Obdobně i při zohlednění věku pacientů a jejich indexu tělesné hmotnosti byla signifikantně nižší šance (OR 0,55; p = 0,045) rozvoje onemocnění MM u genotypu CG oproti CC. Log-rank test potvrdil souvislost GT haplotypu (rs11549467, rs2057482) genu HIF-1α s lepším celkovým přežitím (medián 41,8 měsíce; (CI 35,1-48,5) u haplotypu „žádné GT“ a medián 93,8 měsíce (CI 31,3-156,4) u haplotypu „nejméně jeden GT“ (p = 0,0500). Dále byla zjištěna významná souvislost mezi jednonukleotidovými polymorfizmy v genu MDR1 a léčebným účinkem u 110 pacientů s MM léčených bortezomibem. Závěr: Naše studie ukázala možnou genetickou predispozici k riziku rozvoje MG a/nebo k léčebné odpovědi pacientů s MM, nicméně je třeba provést další studie k potvrzení naší počáteční analýzy.

Background: Adaptive response to hypoxia is regulated by several mechanisms and transcription factors, including hypoxia-inducible factors (HIFs). Activation of HIF-1α is associated with increased expression of P-glycoprotein and multidrug resistance in cancer cells. In this retrospective study, we analyzed candidate single-nucleotide polymorphisms (SNPs) in HIF-1α and HIF-1β associated with risk of monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS) or multiple myeloma (MM). Patients and Methods: Genotypes of SNPs associated with hypoxia were determined in an independent cohort of monoclonal gammopathies (MG) (275 MM and 228 MGUS patients) and in 219 cancer-free controls by real time polymerase chain reaction allelic discrimination. Results: When MM patients were compared to controls, protective role of CG genotype compared to CC in HIF-1β (rs2228099) for MM development was observed (OR = 0.65; CI 0.45-0.95; p = 0.026). Even after adjustment for patients´ age and body mass index (BMI), there were significantly lower odds (OR = 0.55; p = 0.045) of developing MM patients of CG genotype in comparison to CC genotype. Log-rank test confirmed association of GT haplotype (rs11549467, rs2057482) in HIF-1α with better overall survival (median 41.8 months; (CI 35.1-48.5)) for „none GT“ and median 93.8 months (CI 31.3-156.4) for „at least one GT“ haplotype (p = 0.0500). Further, significant associations between SNPs in MDR1 and outcome of MM were found in 110 MM patients that underwent bortezomib-based treatment. Conclusion: Our study showed a genetic predisposition for risk of MG development and/or outcome of MM patients; nevertheless, further studies are needed to confirm our initial analysis.

• MeSH
• analýza přežití MeSH
• genotyp MeSH
• hypoxie MeSH
• klinická studie jako téma MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom * genetika   MeSH
• paraproteinemie genetika   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   MeSH
• polymorfismus genetický MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

BACKGROUND: Extramedullary disease in multiple myeloma patients is an uncommon event occurring either at the time of diagnosis, or during disease progression/relapse. This manifestation is frequently associated with poor outcome and resistance to treatment. We evaluated chromosomal alterations of plasma cells of multiple myeloma patients with extramedullary relapse, either in the bone marrow (BM) or at extramedullary sites, and in previous BM collection by interphase fluorescence in situ hybridization. MATERIAL AND METHODS: Thirty-one patients [25 BM plasma cells (BMPCs), 18 extramedullary tumor plasma cells], of which 12 had paired samples of BM and extramedullary plasma cells and 14 had previous collection of BM, were investigated for the presence of chromosomal aberrations (CHAs): del(17)(p13), del(13)(q14), 14q32 disruption, t(4;14)(p16;q32), t(14;16)(q32;q23), gain(1)(q21), and hyperdiploidy status. RESULTS: Overall, in unrelated samples, t(4;14) was more prevalent in extramedullary plasma cells, and hyperdiploidy was more frequent in BMPCs. In paired samples, there was a higher frequency of del(13)(q14) and 14q32 disruption in BMPCs. Frequency of all studied CHAs was higher in BMPCs of extramedullary patients than in their previous sample collection. CONCLUSION: These data show that plasma cells harbor more aberrations during their transformation into extramedullary form.

• MeSH
• chromozomální aberace * MeSH
• dospělí MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční MeSH
• kostní dřeň patologie   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• metastázy nádorů MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• progrese nemoci MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• staging nádorů MeSH
• translokace genetická MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

BACKGROUND: In this study, we aimed to identify microRNA from urine of multiple myeloma patients that could serve as a biomarker for the disease. RESULTS: Analysis of urine samples was performed using Serum/Plasma Focus PCR MicroRNA Panel (Exiqon) and verified using individual TaqMan miRNA assays for qPCR. We found 20 deregulated microRNA (p < 0.05); for further validation, we chose 8 of them. Nevertheless, only differences in expression levels of miR-22-3p remained close to statistical significance. CONCLUSIONS: Our preliminary results did not confirm urine microRNA as a potential biomarker for multiple myeloma.

• MeSH
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mikro RNA genetika   moč   MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   genetika   moč   MeSH
• nádorové biomarkery moč   MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• stanovení celkové genové exprese metody   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Poor outcome of extramedullary disease in multiple myeloma patients and lack of outcome predictors prompt continued search for new markers of the disease. In this report, we show circulating microRNA distinguishing multiple myeloma patients with extramedullary disease from myeloma patients without such manifestation and from healthy donors. MicroRNA-130a was identified by TaqMan Low Density Arrays and verified by quantitative PCR on 144 serum samples (59 multiple myeloma, 55 myeloma with extramedullary disease, 30 healthy donors) in test and validation cohorts as being down-regulated in myeloma patients with extramedullary disease. Circulating microRNA-130a distinguished myeloma patients with extramedullary disease from healthy donors with specificity of 90.0% and sensitivity of 77.1%, patients with extramedullary disease from newly diagnosed multiple myeloma patients with specificity of 77.1% and sensitivity of 34.3% in the test cohort and with specificity of 91.7% and sensitivity of 30.0% in the validation cohort of patients. Circulating microRNA-130a in patients with extramedullary myeloma was associated with bone marrow plasma cells infiltration. Further, microRNA-130a was decreased in bone marrow plasma cells obtained from patients with extramedullary myeloma in comparison to bone marrow plasma cells of myeloma patients without such manifestation, but it was increased in tumor site plasma cells of patients with extramedullary disease compared to bone marrow plasma cells of such patients (p<0.0001). Together, our data suggest connection between lower level of microRNA-130a and extramedullary disease and prompt further work to evaluate this miRNA as a marker of extramedullary disease in multiple myeloma.

• MeSH
• dospělí MeSH
• kostní dřeň patologie   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mikro RNA analýza   krev   genetika   MeSH
• mnohočetný myelom krev   diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• nádorové biomarkery analýza   krev   genetika   MeSH
• plazmatické buňky patologie   MeSH
• prognóza MeSH
• regulace genové exprese u nádorů * MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Volná cirkulující DNA (cf‑DNA) je charakterizována jako extracelulární DNA, která může být přítomna v nízkých koncentracích v krvi zdravých jedinců. Cf‑DNA je do krevního řečiště uvolňována apoptózou, ale i nekrózou. Zvýšené hladiny se vyskytují u patologických stavů, jako je zánět, stres či autoimunitní onemocnění. Výrazně zvýšené hodnoty cf‑DNA jsou patrné zejména u pacientů s malignitami, a to především v pokročilých stadiích nemoci. V takovémto případě je nádorově specifická cf‑DNA uvolňována nekrózou z buněk primárního nádoru a metastáz. V poslední době se hodně studií zabývá tzv. liquid biopsy (tekutou biopsií), která umožňuje poměrně snadnou detekci cirkulujících nádorových buněk i cirkulujících molekul nukleových kyselin z periferní krve k diagnostice nádorových onemocnění. Kvantitativní stanovení a detekce genetických a epigenetických změn v cf‑DNA u pacientů s různými malignitami má potenciální využití v molekulární diagnostice, prognóze, monitorování průběhu nemoci a odpovědi na léčbu. Tento článek je zaměřen na potenciální využití cf‑DNA jako krevního biomarkeru u vybraných solidních nádorů a hematologických malignit.

Circulating cell‑free DNA (cf‑DNA) is characterized as extracellular DNA that may be present in the blood of healthy individuals in low concentrations. Cf‑DNA is released by apoptosis or necrosis into the bloodstream. Increased levels are found in pathological conditions, such as inflammation, autoimmune diseases, or stress. Significant increase of cf‑DNA is particularly evident in patients with malignancies, especially in the advanced stages of the disease. In this case, the tumor specific cf‑DNA is released by necrosis from the cells of primary tumor and metastases. Recently, many studies concentrate on the so‑called ‘liquid biopsies’ that allow detection of circulating tumor cells and circulating nucleic acids from peripheral blood for tumor diagnostics. Quantitative methods and detection of genetic and epigenetic alternations of cf‑DNA in patients with different malignancies have potential applications in molecular diagnosis, prognosis, monitoring of disease progression and response to treatment. This review focuses on potential utility of cf‑DNA as a blood biomarker in selected solid tumors and hematologic malignancies. Key words: circulating cell‑free DNA – tumor marker – solid tumors – hematological malignancies This study was supported by grant of Internal Grant Agency of the Czech Ministry of Health NT14575. The authors declare they have no potential conflicts of interest concerning drugs, products, or services used in the study. The Editorial Board declares that the manuscript met the ICMJE “uniform requirements” for biomedical papers. Submitted: 13. 3. 2015 Accepted: 18. 5. 2015

• MeSH
• biopsie metody   MeSH
• DNA * diagnostické užití   genetika   krev   MeSH
• hematologické nádory genetika   krev   MeSH
• kolorektální nádory krev   MeSH
• lidé MeSH
• metylace DNA MeSH
• mutace MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• nádory plic genetika   krev   MeSH
• nádory prsu genetika   krev   MeSH
• nádory * genetika   krev   MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• imunoglobulin M krev   MeSH
• lidé MeSH
• mikro RNA krev   genetika   MeSH
• monoklonální gamapatie nejasného významu krev   diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• nádorové biomarkery krev   genetika   MeSH
• regulace genové exprese MeSH
• ROC křivka MeSH
• Waldenströmova makroglobulinemie krev   diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• dopisy MeSH
• práce podpořená grantem MeSH