Tento přehled se zabývá využitím různých elektrochemických detekčních systémů v průtokovýchmetodách analýzy léčiv (jako jsou metody FIA a SIA). Přehled pokrývá období od roku 1988-1998a zahrnuje 78 odkazů. Stanovované léčivé látky jsou seřazeny podle funkčních skupin podléhajícíchelektrochemické transformaci; analytická data zahrnují detekční podmínky, detekční limity a rozsahy kvantity. Rovněž se zabývá výhodami a nevýhodami amperometrické detekce léčiv v průtokových systémech.
The present review dealing with the use of various electrochemical detection systems in flowmethods of analysis of drugs (such as FIA and SIA techniques). The review covers the period of 1988to 1998 and involves 78 references. The drugs determined are arranged according to the functionalgroups undergoing electrochemical transformation; for all the analytes data on the detectionconditions, detection limits and ranges of quantitation are included. Advantages and drawbacks ofamperometric detection of drugs in flow systems are discussed.
4th ed. xlix, 681 s., obr.
- MeSH
- Flow Cytometry MeSH
- Conspectus
- Buněčná biologie. Cytologie
- NML Fields
- chemie, klinická chemie
- cytologie, klinická cytologie
Field-flow fractionation (FFF) represents a group of elution separation methods where external force fields act perpendicularly on analytes in a carrier liquid flows with nonuniform velocity profiles. It is an elution separation method that enables to separate analytes in relatively short times and collect fractions for further characterization or for investigation of their properties. Other advantages of FFF are small consumption of samples and gentle experimental conditions. These make FFF uniquely qualified for separation and purification of biological samples. The most promising are applications of different variants of flow FFF utilizing a cross flow through membrane channel walls to separate proteins. The separation is based on differences in protein diffusion coefficients, which allows calculating the size of macromolecules. Other FFF techniques (e.g., electrical, isoelectric, and sedimentation FFF) were also used for separation of biomolecules. FFF appears to be not only promising rapid technique for protein separation but it offers some other advantages in sample preparation, especially, focusing (hyperlayer) FFF techniques that enable preparation of homogeneous fractions of cells. Selected applications of FFF to protein analysis are described and future trends in application of FFF to proteomics are discussed.
- MeSH
- Financing, Organized MeSH
- Fractionation, Field Flow MeSH
- Proteomics MeSH
- Publication type
- Review MeSH
- Comparative Study MeSH
OBJECTIVES: Risk-based stratification approaches using measurable residual disease (MRD) successfully help to identify T-acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) patients at risk of relapse, whose treatment outcomes are very poor. Because of T-ALL heterogeneity and rarity, a reliable and standardized approach for flow cytometry (FC)-based MRD measurement and analysis is often missing. METHODS: Within the international AIEOP-BFM-ALL-FLOW study group we made a consensus on markers and a standard operating procedure for common 8- and 12-color T-ALL MRD panels. Custom manufactured tubes with dried backbone antibodies were tested in parallel to local FC standards. RESULTS: Altogether, 66 diagnostic and 67 day 15 samples were analyzed. We designed two guided MRD gating strategies to identify blast cells in parallel to expert-based evaluation. We proved that the optimized tubes allowed the correct identification of blast cells in all diagnostic samples. Both, expert and guided analysis of day 15 samples correlated to local standard (Spearman R=0.98 and R=0.94, respectively). Only in 2 (3 %) and 4 (6 %) patients expert gating and guided analysis results were substantially discordant from local standard, respectively. The cases that require an individualized approach may be partially identified at diagnosis through a rare immunophenotype or mixed phenotype acute leukemia status. CONCLUSIONS: Our work shows that standardized operating procedures together with guided analysis are applicable in a great majority of T-ALL cases. Further improvement of MRD detection is needed, as in some cases an individualized analytical approach is still required due to the challenging nature of the T-ALL phenotype.
- MeSH
- Child MeSH
- Infant MeSH
- Consensus MeSH
- Humans MeSH
- Precursor T-Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma * diagnosis pathology MeSH
- Adolescent MeSH
- Child, Preschool MeSH
- Flow Cytometry * standards methods MeSH
- Neoplasm, Residual * diagnosis MeSH
- Check Tag
- Child MeSH
- Infant MeSH
- Humans MeSH
- Adolescent MeSH
- Male MeSH
- Child, Preschool MeSH
- Female MeSH
- Publication type
- Journal Article MeSH
- Multicenter Study MeSH
Cíl studie: Cílem práce bylo mikrodialýzou posoudit glukózový a lipidový metabolismus ve vztahu k průtoku krve intersticiem kosterního svalu během mimotělního oběhu (MO) a v časné pooperační fázi u pacientů operovaných v normotermii a v hypotermii. Typ studie: Prospektivní randomizovaná studie. Název a sídlo pracoviště: Ústav klinické biochemie a diagnostiky a Kardiochirurgická klinika, Fakultní nemocnice v Hradci Králové. Materiál a metody: U 40 nemocných, rozdělených metodou náhodného výběru pro provedení chirurgické revaskularizace myokardu standardním způsobem v mimotělním oběhu (MO) do 2 skupin, byla prováděna mikrodialýza. Skupina 1: operace v normotermii (36 °C) NT, n = 20; Skupina 2: operace v hypotermii (32 °C) HT, n = 20. Na operačním sále byly po úvodu do celkové anestezie zavedeny do konstantních míst v musculus deltoideus dvě mikrodialyzační sondy CMA 60 (perfúze samotným Ringerovým roztokem a Ringerovým roztokem s přídavkem gentamicinu rychlostí 300 µl/h). Mikrodialyzáty byly odebírány v intervalech:0. (po 30 minutod úvodu do anestezie), 1. (do zahájení MO),2. (běhemMO),3. (do konceoperace), interval 4.–7. (za 2, 4, 6 a 8 hodin po operaci). Byly stanoveny: glukóza, močovina a laktát (analyzátor Hitachi 917), glycerol (set firmy Randox). Krevní průtok byl hodnocen ze změn koncentrací flow-marker gentamicinu, stanoveného na přístroji Axsym (Abbott). Výsledky: Koncentrace glukózy byla v průběhu 1.–4. intervalu odběru vyšší u skupiny NT než u skupiny HT, v průběhu 5.–6. intervalu naopak nižší. V posledních intervalech došlo k vzestupu koncentrací u obou skupin. Podobnou dynamiku změn jsme nalezli u koncentrací močoviny. V posledních intervalech byl u obou skupin zaznamenán nesignifikantní nárůst koncentrací laktátu i glycerolu. Koncentrace gentamicinu v mikrodialyzátu byly signifikantně vyšší u HT ve srovnání se skupinou NT, s výjimkou posledního intervalu. Závěr: Předpokládáme, že intersticiální koncentrace sledovaných analytů běhemMO jsou ovlivněny jak změnami v průtoku krve intersticiem, tak i změnami v metabolismu buněk kosterního svalu. Suprese syntézy glukózy v souvislosti s použitím MOjiž byla v literatuře popsána. Intersticiální metabolismus je však ovlivněn řadou jiných faktorů,zejména náhlými změnami kapilárního hydrostatického tlaku a osmolality.
Objective: The aim of the study was to compare the interstitial metabolism of glucose, lactate, urea and glycerol in skeletal muscle with interstitial blood flow by microdialysis in two groups of patients undergoing cardiac surgery with a cardiopulmonary bypass (CBP) under normothermic and hypothermic conditions. Design: Prospective randomised study. Setting: Institute of Clinical Biochemistry and Diagnostics, Department of Cardiosurgery, University Hospital, Hradec Králové. Material and Methods: Microdialysis was performed in forty patients undergoing cardiac surgery with a cardiopulmonary bypass (CBP). After an institutional approval, patients were randomized into two groups. Group 1 (NT, N=20): patients were operated under normothermic condition (36 °C). Group 2 (HT, N=20): patients were operated under hypothermic conditions (32 °C). Two microdialysis (MD) probes CMA 60 (CMA Microdialysis AB) were inserted into a standard site of musculus deltoideus during introduction of anaesthesia. Microdialysis was performed with Ringer’s solution with perfusion flow 0.3 ml/hour (300 µl/hour). Microdialysis samples were collected: 0) initial phase of operation, 1) beginning of operation to beginning of CPB, 2) CPB 3) end of CPB to the end of operation, 4) 2 hours, 5) 4 hours, 6) 6 hours and 7) 8 hours after surgery. Microdialysate glucose, urea and lactate levels (mmol/l) were assessed by Hitachi 917 analyser, glycerol concentration by kit (Randox). Interstitial blood flow was monitored using flow marker gentamicin added in a known concentration in microdialysis fluid. Microdialysis gentamicin concentration was estimated by Axsym analyser (Abbott) – FPIA Method. Results: Glucose concentration in a skeletal muscle microdialysate during the 1st to the 4th intervals was higher in NT patients comparing to HT patients, and than lower. The similar applied for urea concentration. There were no significant differences in concentration of lactate and glycerol between groups. Gentamicin microdialysate concentrations were significantly higher in HT patients in comparison with NT patients at all intervals. Conclusion:We suppose that interstitial concentrations of analytes during CPBwere influenced both by blood flow changes and by metabolic changes in skeletal muscle cells. Suppression of glucose synthesis after CPB was described by other authors. There were other factors influencing interstitial metabolism, for instance dramatic changes in capillary fluid pressure and osmolality.
Current clinical pathology
[1st ed.] xiv, 220 s. : il. + 1 CD-ROM
- MeSH
- Hematology MeSH
- Flow Cytometry MeSH
- Conspectus
- Patologie. Klinická medicína
- NML Fields
- hematologie a transfuzní lékařství
- cytologie, klinická cytologie
Průtoková cytometrie našla uplatnění jako analytická i diagnostická metoda v mnoha oblastech praktické medicíny i v základním a aplikovaném biomedicínském výzkumu. S postupujícím technickým pokrokem se její možnosti stále rozšiřují a jednoduché dvojbarevné a trojbarevné průtokové cytometry jsou stále častěji nahrazovány vysoce citlivými polychromatickými analyzátory či vysokorychlostními průtokovými třídiči buněk, které se používají při multiparametrické charakterizaci a třídění dobře definovaných buněčných subpopulací, včetně prekurzorů a progenitorů s minimálním zastoupením, a buněk kmenových. Polychromatická FCM se stala nenahraditelnou v klinické medicíně a v současné době se zvažuje její využití i v oblasti polního zdravotnického systému. Zde se tato metoda jeví jako velmi perspektivní zejména z biodozimetrického hlediska, a to např. pro stanovení zpětného odečtu obdržené dávky ionizujícího záření. Článek podává přehled nejběžnějších aplikací používaných v klinickém výzkumu i praxi, s možným rozšířením do oblasti vojenské medicíny.
Flow cytometry has proved a useful analytical and therapeutic technique in many fields of practical medicine as well as in basic and applied biomedical research. With ongoing technological development its potential permanently increases and simple, two- and three-color flow cytometers are being replaced by highly sensitive polychromatic analyzers and high speed sorters that are used for multiparametric characterization and sorting of well-defined cell subpopulations including precursors, progenitors and stem cells. Polychromatic flow cytometry has thus become an essential tool in clinical medicine and its use in the battlefield medical system is under consideration. In military healthcare this technique appears quite promising namely for biodosimetric purposes, e.g. for retrospective determination of the received dose of ionizing radiation. The paper brings an overview of most frequent applications used in clinical research and practice with possible ramifications to military medicine.
- MeSH
- Chromosome Aberrations radiation effects MeSH
- Financing, Organized MeSH
- Hematology methods trends MeSH
- Immunophenotyping methods utilization MeSH
- Medical Oncology methods trends MeSH
- Humans MeSH
- Flow Cytometry methods instrumentation trends MeSH
- Radiobiology methods trends MeSH
- Radiometry methods trends utilization MeSH
- Transplantation methods utilization MeSH
- Military Medicine methods instrumentation trends MeSH
- Check Tag
- Humans MeSH
Průtoková cytometrie je moderní analytická metoda používaná v klinických i výzkumných laboratořích k imunofenotypizaci vybraných buněčných subpopulací v suspenzi (periferní krve, aspirátu kostní dřeně, mozkomíšního moku atd., ale i buněčné suspenzi získané z nefixovaného solidního tumoru). Poskytuje současně informace o četných povrchových nebo intracelulárních znacích analyzovaných elementů. V klinické praxi k tomu využívá fluorescenčních monoklonálních protilátek proti povrchovým nebo intracelulárním antigenům, které jsou asociovány s určitým typem buněk (T-lymfocyty, B-lymfocyty, apod.), jejím vývojovým stádiem nebo monoklonalitou (např. lehké řetězce povrchových imunoglobulinů). Pravděpodobně nejširšího využití dosáhla metoda v diagnostice hematologických malignit, kde právě rychlá a přesná diagnostika dává lékaři stěžejní informace ke správnému stanovení diagnózy a k výběru optimální léčby, následně lze takřka v reálném čase sledovat efekt léčby. Klíčová slova: průtoková cytometrie – imunofenotypizace – non-Hodgkinské lymfomy
Flow cytometry represents a modern analytical method useful for an assessment of selected cellular subpopulations in suspension (peripheral blood, aspirate of bone marrow, liquid fluid etc. and also in suspensions prepared from non-fixed solid tumors) in clinical and research laboratories. The method provides information on numerous surface or intracellular markers of the analyzed elements at the same time. The usage of fluorescent monoclonal antibodies against surface or intracellular antigens associated with specific type of cells (T-lymphocytes, B-lymphocytes etc.), with their developmental stage, or with monoclonality (for example antibodies against light chains of immunoglobulins), are the most valuable for the clinical practice. The most important application of flow cytometry in pathology has remained in hematologic malignancies, where this fast and exact method provides, practically in a real time, crucial information for correct diagnosis as well as for the choice of optimal therapy, and subsequently for assessing the effect of the therapy. Keywords: flow cytometry – immunophenotypization – non-Hodgkin lymphomas
- MeSH
- Antigens, Neoplasm analysis MeSH
- Antigens, Surface analysis MeSH
- DNA analysis MeSH
- Immunophenotyping * methods MeSH
- Humans MeSH
- Lymphoma, Non-Hodgkin diagnosis genetics immunology MeSH
- Flow Cytometry * methods utilization MeSH
- Check Tag
- Humans MeSH
- Publication type
- Research Support, Non-U.S. Gov't MeSH
- Review MeSH
Atomization of hydrides and their methylated analogues in a dielectric barrier discharge (DBD) plasma atomizer was investigated. Selected ion flow tube mass spectrometry (SIFT-MS) was chosen as a detector being capable of selective detection of non-atomized original volatile species allowing thus direct quantification of atomization efficiency. Selenium hydride (SeH2) and three volatile arsenic species, namely arsenic hydride (AsH3), monomethylarsane (CH3AsH2) and dimethylarsane ((CH3)2AsH), were selected as model analytes. The mechanistic study performed contributes to understanding of the atomization processes in atomic absorption spectrometry (AAS). The presented results are compatible with a complete atomization of arsenic hydride as well as its methylated analogues and with atomization efficiency of SeH2 below 80%. Using AsH3 as a model analyte and a combination of AAS and SIFT-MS detectors has revealed that the hydride is not atomized, but decomposed in the DBD atomizer in absence of hydrogen fraction in the carrier gas. Apart from investigation of analyte atomization, the SIFT-MS detector is capable of quantitative determination of water vapor content being either transported to, or produced in the atomizer. This information is crucial especially in the case of the low-power/temperature DBD atomizer since its performance is sensitive to the amount of water vapor introduced into the plasma.
- MeSH
- Arsenic * MeSH
- Mass Spectrometry MeSH
- Nebulizers and Vaporizers MeSH
- Spectrophotometry, Atomic MeSH
- Hydrogen MeSH
- Publication type
- Journal Article MeSH
