Protilátkami zprostředkovaná (humorální) rejekce je závažná komplikace, která je asociována se zhoršenou prognózou přežití transplantovaných orgánů. Její diagnostika byla dlouho zaměřena na detekci protilátek specifických proti HLA antigenům, nicméně se v posledních letech ukázalo, že při rozvoji této rejekce mohou hrát roli i protilátky proti antigenům, které jsou kódovány geny mimo HLA komplex. Non HLA antigeny jsou polymorfní molekuly, a proto mohou být rozpoznány imunitním systémem příjemců orgánů. Tyto antigeny se vyskytují na povrchu endoteliálních a epiteliálních buněk, ale mohou být lokalizovány i intracelulárně a uvolňovat se v případě buněčné lýze. Mezi non HLA antigeny patří molekuly MICA – major-histocompatibility-complex (MHC) class I-related chain A, receptor angiotensinu II-R1, kolagen, K-α1 tubulin, srdeční myosin, vimentin a další. Non HLA protilátky se mohou vyskytovat před transplantací, ale rovněž mohou být produkovány i de novo. Diagnostika non HLA protilátek se provádí za využití xMap technologie (Luminex) nebo endoteliálním crossmatch (křížová zkouška) a dalšími technikami. Nicméně všechny metodiky i interpretace výsledků non HLA má svá úskalí.

Antibody-mediated (humoral) rejection (AMR) is a serious complication that is associated with a worse prognosis of survival of transplanted organs. The diagnosis of AMR has been long time focused on the detection of antibodies specific to HLA antigens, however, in recent years it has become clear that antibodies against antigens encoded by genes outside the HLA complex can also play a role in the development of AMR. Non-HLA antigens are polymorphic molecules and therefore can be recognised by the immune system of organ transplant recipients. These antigens are expressed on the surface of endothelial and epithelial cells, but can also be localised intracellularly and released in case of cell lysis. Non-HLA antigens include molecules MICA – major-histocompatibility-complex (MHC) class I-related chain A, angiotensin II-R1 receptor (ATR1), collagen, K-α1 tubulin, cardiac myosin, vimentin and others. Non-HLA antibodies can occur before transplantation, but may also be produced de novo. The diagnosis of non-HLA antibodies is carried out using xMap technology (Luminex), the so-called endothelial crossmatch and other techniques, however, all methodologies and interpretation of results have their pitfalls.

• Klíčová slova
• non HLA protilátky, technologie Luminex,
• MeSH
• autoprotilátky klasifikace   škodlivé účinky   toxicita   MeSH
• HLA antigeny * imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• rejekce štěpu diagnóza   etiologie   komplikace   MeSH
• testování histokompatibility metody   MeSH
• transplantace orgánů MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

• Klíčová slova
• non HLA protilátky, technologie Luminex,
• MeSH
• autoprotilátky * klasifikace   škodlivé účinky   toxicita   MeSH
• HLA antigeny imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• rejekce štěpu diagnóza   etiologie   komplikace   MeSH
• testování histokompatibility metody   MeSH
• transplantace orgánů * MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

• MeSH
• B-lymfocyty MeSH
• cytotoxické testy imunologické MeSH
• dárci krve MeSH
• isoantigeny analýza   krev   MeSH
• lidé MeSH
• monocyty MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH

The clinical significance of antibodies against HLA antigens (alloantibodies) in patients after kidney transplantation and its relation to chronic rejection is not still completely elucidated. The aim of this study is to investigate the correlation between antibodies to HLA antigens after transplantation and the morphological and clinical symptoms of chronic rejection. Alloantibodies will be analyzed according to their HLA (or non-HLA) specificity, immunoglobulin class and dynamics of development.

Klinický význam vzniku protilátek proti HLA antigenům (aloprotilátek) u pacientů po transplantaci ledviny a jejich vztah k chronické rejekci není zatím dostatečně vyjasněn. V navrhovaném projektu si klademe za cíl studovat korelaci mezi vznikem protilátek proti HLA antigenům po transplantaci a morfologickými a klinickými příznaky chronické rejekce. Protilátky budou analyzovány podle jejich specificity proti HLA antigenům, dynamiky vzniku a imunoglobulinové třídy.

• MeSH
• chronická nemoc MeSH
• ELISA MeSH
• histocytochemie MeSH
• HLA antigeny imunologie   MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• rejekce štěpu komplikace   MeSH
• transplantace ledvin škodlivé účinky   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• nefrologie
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

The application of solid-phase assays for detection and definition of Human leucocyte antigen (HLA)-specific antibodies has significantly facilitated the diagnosis and monitoring of treatment of antibody-mediated rejection (AMR). There is, however, a major discussion in the literature concerning the clinical relevance of the use of the Luminex technique for the prediction of cellular and/or AMR and survival. This may be explained on one hand by the complexities of the method and on the other by variations in patient demographic characteristics, immunosuppression and other factors. As far as non-HLA antibodies, it is clear that they may induce AMR; nevertheless, a difficult problem in their definition remains the fact that most of the non-HLA antigens still remain to be identified. Hereby is a short literature review of several recent publications discussing the role of HLA- and non-HLA-specific antibodies in organ transplant rejection and survival.

• MeSH
• buněčná imunita MeSH
• HLA antigeny imunologie   MeSH
• humorální imunita MeSH
• lidé MeSH
• MHC antigeny I. třídy imunologie   MeSH
• prognóza MeSH
• protilátky imunologie   MeSH
• rejekce štěpu imunologie   MeSH
• testování histokompatibility MeSH
• transplantace orgánů * MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

Podávání transfuzních přípravků je nedílnou součástí léčby hematologických pacientů. Přítomnost protilátek proti alogenním antigenům krevních buněk u příjemce může transfuzní terapii komplikovat. Byla provedena retrospektivní analýza 100 polytransfundovaných hematologických pacientů ÚHKT s cílem zjistit u nich míru senzibilizace alogenními erytrocytovými a HLA antigeny. Pro screening a identifikaci erytrocytových protilátek byl použit NAT test a enzymový test v systému sloupcové aglutinace. Pro detekci HLA protilátek byl použit lymfocytotoxický test (LCT-NIH) a ELISA kity: QuikScreen [GTI] pro detekci HLA protilátek I. třídy (IgG a IgM) a B-Screen [GTI] pro detekci HLA protilátek II. třídy (IgG), pro identifikaci a určení % PRA(panel reactive antibody) HLA I. třídy (IgG) byl použit kit Quik-ID Class I [GTI]. Celkem bylo imunizováno alogenními erytrocytovými a/nebo HLA antigeny 29 % pacientů. Alogenními antigeny erytrocytů bylo imunizováno 11 % pacientů, HLA antigeny bylo imunizováno 23 % pacientů. Míra imunizace se lišila podle pohlaví: HLA antigeny se statisticky významně více imunizovaly ženy než muži (32,6 % versus 14,8 %; p = 0,035), erytrocytovými antigeny se imunizovalo více mužů než žen (14,8 % versus 6,5 %), tento rozdíl nebyl statisticky významný.

Blood transfusions represent an integral part of the treatment of haematological patients. One of the side effects of this therapy is the possible alloimmunisation of recipients to donor blood cell antigens, which may complicate subsequent transfusion therapy. Aretrospective analysis of 100 multiply transfused haematological patients was performed. The aim of this study was to establish the prevalence of anti-red-blood cell and anti-HLA antibodies in these patients. Column agglutination methods in NAT and the enzyme test were used for screening and identification of red blood cell antibodies. The standard complement-dependent lymphocytotoxicity test (CDC-NIH) and ELISA techniques were used for screening of HLA antibodies: QuikScreen [GTI] forHLAclass I antibodies detection (IgG and IgM), B-Screen [GTI] forHLA class II antibodies detection (IgG). Kit Quik-ID Class I GTI for HLA class I (IgG) antibodies. The prevalence of HLA and/or red-blood-cell alloimmunisation in our studied group was 29%. 11% of patients developed antibodies against red-blood-cell antigens, 23% of patients developed anti-HLA antibodies. The degree of immunisation differed according to gender: the prevalence of antibodies against red-blood-cell was 6.5% in women and 14.8% in men (this difference was not statistically significant). The prevalence of anti-HLA antibodies was significantly higher in women compared to men (32.6% versus 14.8%; p=0.035).

• Klíčová slova
• aloimunizace erytrocytovými antigeny, aloimunizace HLA antigeny, refrakternost na podání trombocytů,
• MeSH
• antigeny trombocytů imunologie   krev   terapeutické užití   MeSH
• antigeny krev   terapeutické užití   MeSH
• ELISA metody   využití   MeSH
• erytrocyty enzymologie   imunologie   MeSH
• financování organizované MeSH
• HLA antigeny krev   terapeutické užití   MeSH
• imunizace metody   využití   MeSH
• krevní nemoci krev   prevence a kontrola   terapie   MeSH
• krevní transfuze metody   využití   MeSH
• leukoredukce metody   využití   MeSH
• lidé MeSH
• potransfuzní reakce MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• separace krevních složek MeSH
• statistika jako téma MeSH
• výsledky a postupy - zhodnocení (zdravotní péče) MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Protilátkami zprostředkovaná rejekce (AMR, z angl. Antibody Mediated Rejection) významným způsobem ovlivňuje dlouhodobé přežívání štěpu a kvalitu života po transplantaci ledviny. V patogenezi rejekce se uplatňují protilátky namířené proti HLA antigenům dárce, tzv. DSA (z angl. Donor-Specific Antibody), vytvořené již v době transplantace nebo formované de novo po transplantaci. Nově zaváděné senzitivnější techniky detekce anti-HLA protilátek na principu ALBIA (z angl. Adressable Laser Bead ImmunoAssay) umožňují záchyt širokého spektra klinicky potenciálně relevantních protilátek (protilátky, které nevážou komplement, v nízkém titru nebo nízkoafinitní), jejichž reálný význam pro výsledek transplantace je však stále předmětem intenzivní odborné diskuze transplantačních imunologů a nefrologů. Pravidelné monitorování anti-HLA protilátek po transplantaci ledviny může napomoci včasné a neinvazivní diagnostice rozvíjející se humorální rejekce štěpu, především u vysoce imunizovaných příjemců nebo u pacientů podstupujících transplantaci ledviny opakovaně. Cílem našeho sdělení je 1) charakterizovat způsob monitorování anti-HLA protilátek metodou ALBIA (technologie Luminex – průtoková cytometrie využívající mikrosférické částice s navázanými HLA molekulami) v období po transplantaci ledviny a 2) na vybraných kazuistikách demonstrovat využití interpretace získaných dat pro klinické nefrology k včasnému terapeutickému zásahu a kontrole léčby humorální rejekce.

Antibody mediated rejection significantly influences long-term graft survival and quality of life after kidney transplantation. Antibodies against HLA antigens of the donor, i.e. DSA (Donor-Specific Antibodies) preformed in the time of transplantation or produced de novo after transplantation are involved in the pathogenesis of rejection. More sensitive, current techniques for anti-HLA antibodies detection based on the ALBIA (Adressable Laser Bead ImmunoAssay) principle, enable detection of the wide spectrum of clinically potentially relevant antibodies (non-complement fixing, low titre or low affinity antibodies) whose real impact for transplantation outcome is still a matter of the intensive debate of transplant immunologists and nephrologists. Regular post-transplantation HLA antibodies monitoring can be used for early and non-invasive antibody-mediated rejection diagnostics, mainly in highly immunized recipients or re-transplanted patients. The aim of our work is 1) to characterize the possibility of anti-HLA antibodies post-transplantation monitoring by ALBIA assay (Luminex technology – HLA antigen-coated beads based flow cytomtery) and 2) to demonstrate interpretation of data for clinical nephrologists for their early therapy of humoral rejection and control of its effectiveness using representative case reports. Key words: kidney transplantation, antibody-mediated rejection, anti-HLA antibodies, Luminex technology

• MeSH
• chronické selhání ledvin chirurgie   MeSH
• HLA antigeny * analýza   MeSH
• intravenózní imunoglobuliny terapeutické užití   MeSH
• klinická studie jako téma MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• monitorování imunologické * metody   MeSH
• následná péče metody   MeSH
• plazmaferéza využití   MeSH
• pooperační péče metody   MeSH
• rejekce štěpu * prevence a kontrola   MeSH
• senioři MeSH
• specificita protilátek MeSH
• transplantace ledvin * MeSH
• výsledek terapie MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

• MeSH
• cytotoxicita imunologická MeSH
• dárci krve MeSH
• ELISA metody   využití   MeSH
• financování organizované MeSH
• HLA antigeny diagnostické užití   imunologie   MeSH
• krevní transfuze MeSH
• lidé MeSH
• lymfocyty imunologie   MeSH
• potransfuzní reakce MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• těhotenství MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• těhotenství MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• abstrakty MeSH

• MeSH
• fluorescenční protilátková technika MeSH
• histokompatibilita MeSH
• imunogenetika MeSH
• imunokomplex MeSH
• specificita protilátek MeSH