Zavedení systému depistáže Lynchova syndromu na pracovištích patologie v Plzni vedlo v letech 2013-2016 k diagnóze 24 případů, z toho 20 prezentujících se kolorektálním karcinomem. V 8 z těchto 24 případů byly detekovány germinální mutace MMR genů, které předtím nebyly v databázích evidovány jako patogenní. V celkovém souhrnu byla sice četnost Lynchova syndromu u pacientů s kolorektálním karcinomem pouze 0,34 %, po zavedení systému univerzálního imunohistochemického vyšetřování exprese MMR (mismatch repair) proteinů ve všech kolorektálních karcinomech diagnostikovaných v Šiklově ústavu patologie však četnost případů Lynchova syndromu za rok na tomto pracovišti dosáhla až 2,4 %. Naše výsledky svědčí ve prospěch univerzálního imunohistochemického screeningu Lynchova syndromu v případech kolorektálního a endometriálního karcinomu oproti výběrovým depistážním metodám založeným především na klinických, méně i morfologických znacích. Vyšší efektivita univerzálního screeningu nespočívá pouze ve vyšší senzitivitě imunohistochemického vyšetření, ale i v možné automatizaci procesu a tím zvýšení adherence k depistáži i patologů přímo nezainteresovaných v managementu Lynchova syndromu. Plošné zavedení národního univerzálního depistážního systému však vyžaduje podporu ze strany státní správy a zdravotních pojišťoven.
The introduction of a screening system for Lynch syndrome in pathology laboratories in Plzen yielded 24 diagnoses of Lynch syndrome during the period of 2013-2016, 20 of them presenting with colorectal cancer. In 8 of those 24 cases germline mutations of MMR genes, previously not recognized as pathogenic with certainty, were detected. Although the frequency of Lynch syndrome in patients with colorectal cancer was only 0.34 % in total, following introduction of the universal immunohistochemical investigation of MMR (mismatch repair) proteins expression in all colorectal cancers examined in Sikl's Institute of Pathology the frequency per year in this department reached 2.4 %. The results favor universal immunohistochemical screening for Lynch syndrome in colorectal and endometrial cancer cases over a selective approach based on a combination of clinical and morphological criteria. Increased effectiveness of the universal approach is not brought about only by higher sensitivity of the immunohistochemical examination per se, but also by the possibility of automation of the process leading to increased adherence even of pathologists not directly engaged in Lynch syndrome management. However, the introduction of a nation-wide universal screening system requires support from the government and health insurance companies.
- MeSH
- dědičné nepolypózní kolorektální nádory * genetika MeSH
- exprese genu MeSH
- imunohistochemie MeSH
- incidence MeSH
- kolorektální nádory diagnóza genetika MeSH
- lidé MeSH
- mutace genetika MeSH
- nádory endometria genetika MeSH
- oprava chybného párování bází DNA MeSH
- plošný screening * MeSH
- rizikové faktory MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
The study presents tracking of 58 pesticide residues associated with hops to estimate their carryover into brewed beer. The pesticides were spiked onto organic hops at a concentration of 15 mg/kg, and the wort was boiled with the artificially contaminated hops and fermented on a laboratory scale. Samples were collected during the whole brewing process and pesticide residues were extracted using a method known as QuEChERS (quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe). An HPLC-HR-MS/MS method was developed and validated to identify and quantitate pesticide residues in treated hops, spent hops, hopped wort, green beer, and beer samples. Quantitation was achieved using standard addition with isotopically labeled standards. The carryover percentages into hopped wort and the percentages of decay reduction relative to the amount spiked on hops were calculated. The relationship between the partition coefficients n-octanol-water (log P values) and the residual ratios ( RW and RB) of a pesticide were evaluated to predict their behavior during hopping of wort and fermentation. Pesticides with a high log P values (>3.75) tended to remain in spent hops. The pesticides that have a low log P value up to approximately 3 could represent the demarcation lines of appreciable transfer rate of pesticides from hops to beer. Consequently, the pesticides were divided into three categories depending upon their fate during the brewing process. The most potential risk category represents a group involving the thermostable pesticides, such as azoxystrobin, boscalid, dimethomorph, flonicamid, imidacloprid, mandipropamid, myclobutanil, and thiamethoxam, which were transferred at high rates from the pesticide enriched hops into beer during the laboratory brewing trial. These results can be used as a guideline in the application of pesticides on hop plants that would reduce the level of pesticide residues in beer and their exposure in humans.
Lynchův syndrom (dříve nazývaný hereditární nepolypózní kolorektální karcinom) je nejčastější genetickou příčinou familiárního výskytu kolorektálního karcinomu. Způsobuje jej zárodečná mutace některého z genů, které jsou zodpovědné za opravy chyb ve struktuře DNA vznikající při její replikaci. V důsledku toho dochází k dysfunkci opravného komplexu způsobující rozvoj nestability mikrosatelitů (MSI), která je asociována se zvýšením rizika vzniku nádorů, zejména kolorektálního karcinomu. V současné době se odhaduje, že až 5 % kolorektálních karcinomů vzniká v souvislosti s Lynchovým syndromem. Vzhledem k této poměrně vysoké četnosti, absenci premorbidního fenotypu, familiárnímu výskytu a prezentaci maligních nádorů v produktivním věku je včasná diagnostika Lynchova syndromu důležitá nejen z etického, ale i ekonomického hlediska. Klinická kritéria představovaná zejména revidovanými Bethesda guidelines, která byla navržena pro detekci pacientů vhodných ke genetickému vyšetření možnosti Lynchova syndromu, nejsou však dostatečně senzitivní. Vyšší senzitivity lze dosáhnout aplikací metod moderní patologie. Tato diagnostika je založena na přímém nebo nepřímém průkazu MSI. Mezi metody nepřímého průkazu MSI patří jednak detekce morfologických znaků asociovaných s MSI při histologickém vyšetření vzorků kolorektálních karcinomů, jednak imunohistochemické vyšetření exprese MMR proteinů, které navíc umožní i identifikaci dysfunkčního proteinu. K vyloučení sporadických MSI-H karcinomů způsobených somatickou epigenetickou inaktivací MMR genu z dalšího testování slouží hlavně vyšetření genu BRAF a analýza metylace promotoru genu MLH1. Podezření na Lynchův syndrom vyplývající z výsledků těchto vyšetření by mělo být nakonec potvrzeno detekcí zárodečné mutace některého z MMR genů v periferní krvi pacienta.
Lynch syndrome (formerly known as hereditary non-polyposis colorectal cancer) is the most common hereditary colorectal cancer syndrome. The syndrome is caused by a germline mutation of one of the mismatch repair (MMR) genes responsible for DNA replication error repair. Impaired function of the proteins encoded by these genes leads to microsatellite instability (MSI), which is associated with increased incidence of neoplasms: mainly colorectal cancer. According to recent estimates, up to 5% of all colorectal cancers are associated with Lynch syndrome. Due to this relatively high frequency, familial occurence, absence of premorbid phenotype, and development of malignant tumors at a reproductive age, a correct diagnosis is important not only from an ethical but also from an economical point of view. Unfortunately, clinical means of diagnosis, namely, the revised Bethesda guidelines designed to detect patients suitable for genetic testing for Lynch syndrome, lack sufficient sensitivity. The methods associated with modern pathology are more sensitive than the clinical criteria used to detect patients suspected of having Lynch syndrome. Pathological diagnostics are based on direct or indirect detection of MSI. Indirect methods include analysis of morphological signs associated with MSI in histological samples from colorectal carcinoma patients and immunohistochemical investigation of MMR protein expression. To rule out sporadic cases caused by epigenetic inactivation of an MMR gene, molecular genetic investigation of the BRAF gene and methylation analysis of the MLH1 promoter are performed during diagnostic workup. A suspicion of Lynch syndrome based on the results of the methods mentioned above should be proven by detection of a germline mutation in an MMR gene in peripheral blood leukocytes.
- MeSH
- adaptorové proteiny signální transdukční * genetika MeSH
- algoritmy MeSH
- chybné párování bází MeSH
- dědičné nepolypózní kolorektální nádory * diagnóza genetika klasifikace patologie MeSH
- homolog 2 proteinu MutS * genetika MeSH
- imunohistochemie MeSH
- lidé MeSH
- mikrosatelitní nestabilita MeSH
- mutace genetika MeSH
- mutační analýza DNA MeSH
- oprava chybného párování bází DNA MeSH
- Torrého-Muirův syndrom MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- přehledy MeSH
The phenolic compounds, secondary metabolites of hops represent a large family of compounds that could be subsequently divided into smaller groups based on the similarities between their chemical structures. The antibacterial, antifungal and antiviral properties of hops are well known, but there is a lack of information about antimicrobial activities of individual hop compounds. This study was carried out with an objective to identify compounds present in hops that have potential antibacterial activity. In the first stage of experiment, the active compounds with potential anti-microbial activity had to be extracted from hop cones. Therefore, minced hop cones were applied on solid growth medium inoculated with Staphylococcus aureus. The active substances that migrated into the medium created an inhibition zone. In the second stage of experiment, the inhibition zones were cut out from Petri dishes, active compounds were extracted from these zones and consequently analyzed using LC-HRMS. These complex assays were developed and optimized. The data were acquired by using a quadrupole-orbitrap hybrid mass spectrometer by targeted-MS2 experiment in both ionization modes. The MS method has been developed as a screening method with a subsequent fragmentation of compound of interest on the base of inclusion mass list. The unknown compounds extracted from inhibition zones have been identified either by searching against a database or their structure has been elucidated on the basis of their fragmentation spectra. On the basis of this experiment the list of active compounds with potential anti-microbial activities was enhanced.
- MeSH
- antiinfekční látky analýza izolace a purifikace farmakologie MeSH
- chemická frakcionace metody MeSH
- fenoly analýza izolace a purifikace farmakologie MeSH
- Humulus chemie růst a vývoj MeSH
- lidé MeSH
- stafylokokové infekce farmakoterapie MeSH
- Staphylococcus aureus účinky léků MeSH
- tandemová hmotnostní spektrometrie metody MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Hops represent an important source of β-acids with antimicrobial and sensory properties. Transformation products of β-acids formed during their oxidation, mainly hulupones, have been shown to have an interesting kind of bitterness. Their structures were recently elucidated using LC-TOFMS and 1D/2D NMR in solution after thermal treatment of the hop β-acids. This study demonstrates the advantages of MS detection with high resolution and accurate mass measurements. The structure of transformation products in an experimental solution of oxidized β-acids was elucidated using a newly developed method by hybrid quadrupole-Orbitrap MS. In addition to already known structures, two new ones were identified and named epoxycohulupone and epoxyhulupone. The method was verified on real samples; the profiles of these products in Sládek hops harvested in 2008 and 2012 and in corresponding beers were compared. For this purpose, a new QuEChERS assay was used for the preparation of beer samples.
- MeSH
- chuť MeSH
- Humulus chemie MeSH
- magnetická rezonanční spektroskopie metody MeSH
- molekulární struktura MeSH
- oxidace-redukce MeSH
- pivo analýza MeSH
- tandemová hmotnostní spektrometrie metody MeSH
- terpeny analýza chemie MeSH
- vysokoúčinná kapalinová chromatografie metody MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Úvod: Optimální staging kolorektálního karcinomu (KRK) má zásadní význam pro odhad prognózy a adekvátní léčbu nemocných. Kromě velikosti karcinomu a hloubky nádorové invaze ve stěně střevní je pro určení stagingu rozhodující stav lymfatických uzlin. Z tohoto důvodu se při histologickém vyšetřování resekátů tlustého střeva s KRK klade důraz na detekci a vyšetření maximálního počtu lymfatických uzlin. Jejich počet je závislý na mnoha okolnostech. V naší studii jsme se zaměřili na faktory, které mohou množství perikolických lymfatických uzlin ovlivňovat. Materiál a metodika: Vyšetřili jsme 30 nemocných s KRK tlustého střeva a rekta ve věku 32–50 let (průměrný věk 47,5 roku) a 90 nemocných ve věkovém rozmezí 51–87 let (průměrný věk 68 let). KRK se nacházel v průběhu celého tlustého střeva, nejčastěji v colon descendens a v colon sigmoideum; u 23 nemocných byl KRK lokalizovám v rektu, z toho u 10 nemocných bez předoperační léčby a ve 13 případech po předchozí aktinochemoterapii. Délka resekátů tlustého střeva se pohybovala mezi 6–51 cm; ve všech případech se jednalo o radikální výkon. KRK dosahoval maximální délky 0,5–15 cm (průměr 4,5 cm) s maximální hloubkou nádorové invaze do subserózního vaziva stěny střevní a perikolické tukové tkáně. Výsledky: Počet lymfatických uzlin se ve 120 resekátech tlustého střeva pohyboval od 1 do 60 uzlin a byl závislý na lokalizaci KRK v tlustém střevě. V resekátech céka s KRK dosahoval průměrný počet 11,5 lymfatické uzliny, zatímco u KRK rekta pouze 7 lymfatických uzlin. Největší množství perikolické tukové tkáně se nacházelo v oblasti céka a nejmenší na obvodu rekta. U nemocných s KRK do 50 let se počet perikolických lymfatických uzlin pohyboval od 2 do 60 uzlin (průměr 17 uzlin) a u nemocných ve věku 51–87 let od 1 do 46 lymfatických uzlin (průměr 11 uzlin). V resekátech tlustého střeva a rekta délky 6–12 cm bylo nalezeno 1–18 lymfatických uzlin (průměr 8 uzlin), v resekátech délky >12–51 cm 1–60 lymfatických uzlin (průměr 13,8 uzlin). Ve 13 resekátech KRK rekta po předoperační aktinochemoterapii převažovaly malé lymfatické uzliny o průměru 1–3 mm a vyskytovaly se v počtu 1–13 uzlin (průměr 5 lymfatických uzlin). Požadovaný limit 12 lymfatických uzlin byl dosažen ve 4 resekátech rekta (31 %). Závěr: Počet perikolických lymfatických uzlin v resekátech tlustého střeva a rekta s KRK je závislý na mnoha faktorech. Kromě individuálních rozdílů ovlivňuje množství perikolických lymfatických uzlin lokalizace KRK v tlustém střevě, rozsah resekované perikolické tukové tkáně, věk nemocných, délka resekovaného tlustého střeva a u nemocných s KRK rekta předoperační aktinochemoterapie.
Introduction: Optimized staging of colorectal carcinoma (CRC) is essential for treatment planning and for estimating the prognosis of the disease. In addition to tumour size and the depth of bowel wall infiltration, the lymph node status is very important for the determination of the disease stage. For this reason, detection and assessment of the maximum number of lymph nodes is emphasized in the examination of resected segments of the large bowel. The number of lymph nodes (LNs) found in the segments resected depends on various circumstances. In our study, we focused on factors which could influence the number of pericolic LNs. Material and methods: We examined two groups of CRC patients. The first group included 30 patients within the age range of 32–50 years (average: 47.5 years) and the second group consisted of 90 patients aged between 51 and 87 years (average: 68 years). The tumours were localized in various parts of the colon, predominantly in the descending colon and the sigmoid colon. Rectal tumour was present in 23 patients; 13 of them underwent preoperative chemoradiation therapy and 10 of them received no preoperative therapy. The length of the resected colon segments (radical intervention) ranged from 6 to 51 cm. The size of CRC ranged from 0.5 to 15 cm (average: 4.5 cm). The maximum tumour invasion depth reached into the subserosal tissue and pericolic adipose tissue Results: The number of LNs found in 120 resected colon segments ranged from 1 to 60 LNs per case. The number of LNs showed differences among the patients and also depended on the location of CRC within the large intestine. In the resected segments of the ceacum with CRC, the average number of LNs was 11.5, whereas it was only 7 in rectal CRC. The largest volume of pericolic adipose tissue was found in the caecum, whereas the smallest volume was seen on the rectal circumference. In CRC patients aged 50 years or younger, the number of LNs was from 2 to 60 (average: 17). In contrast, the number of LNs ranged from 1 to 46 (average: 11) in patients older than 50 years. In resected segments that were 6 to 12 cm long, the number of LNs ranged from 1 to 18 (average: 8). In resected segments that were 12 to 51 cm long, the number of LNs was from 1 to 60 (average: 13.8). In 13 cases of rectal CRC with preoperative chemoradiation therapy, small LNs of an average length of 1–3 mm predominated, and the number of LNs ranged between 1 and 13 (average: 5). The required number of 12 LNs was reached in 4 resected parts of the rectum (31%). Conclusion: The number of pericolic LNs found in the resected segments of the colon and the rectum with CRC depends on various factors. Besides individual differences, the number of LNs is influenced by the CRC location in the colon, the extent of the resected pericolic adipose tissue, the patient’s age and the length of the segment resected. In cases of rectal CRCs, it is also influenced by preoperative chemoradiation therapy.
- Klíčová slova
- perikolické a mezorektální lymfatické uzliny,
- MeSH
- dospělí MeSH
- kolon * patologie MeSH
- kolorektální nádory * diagnóza patologie MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- lymfatické uzliny * MeSH
- metastázy nádorů MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- staging nádorů * MeSH
- tuková tkáň MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- MeSH
- ibuprofen dějiny terapeutické užití MeSH
- revmatologie MeSH
- Publikační typ
- rozhovory MeSH
