- Publikační typ
- abstrakt z konference MeSH
Východiska: K průkazu cytotoxického efektu T lymfocytů vůči cílovým, resp. nádorovým buňkám, je standardně používán in vitro test s radioaktivním chromem 51Cr. Tento test má však určité limitace, zejména vysoké procento nespecifického pozadí, nízkou citlivost a použití radioaktivních materiálů. Vědomi si těchto limitací zavedli jsme neradioaktivní cytotoxický test s využitím fluorochromu 5-(6-) karboxyfluorescein diacetát sukcinimidyl esteru (CFSE) a propidium iodidu. Obsah a cíle práce: Cílem práce bylo ověřit cytotoxický efekt protinádorových T lymfocytů neradioaktivním testem. Metody: Ve studii byl použit model specifických T lymfocytů cytotoxických vůči nádorové linii buněk mnohočetného myelomu ARH 77. Specifické cytotoxické T lymfocyty byly získané imunomagnetickou separací na základě produkce interferonu gama a expandované na potřebné množství. T lymfocyty byly barveny CFSE a kultivovány s nádorovými buňkami ARH 77, pozdně apoptotické a nekrotické buňky byly odlišeny barvením propidium jodidem a hodnoceny pomocí průtokové cytometrie. Výsledky: Nejprve byla nalezena optimální barvicí koncentrace CFSE (1μM). Cytotoxicita byla hodnocena při poměru efektorové:terčové buňky 2:1, 10:1 a 50:1 a to po 4, 24 a 48 hodinách kultivace. Specificita expandovaných T lymfocytů byla ověřena kultivací s alogenními mononukleárními buňkami a kultivací nespecifických T lymfocytů s buňkami nádorové linie ARH 77. Závěr: Takto zavedený test cytotoxicity je cenným nástrojem pro hodnocení efektorové složky imunitního systému a účinnosti protinádorových vakcín.
Objectives: Cytotoxicity test using radioactive chromium 51Cr has been standardly used to evaluate specific cytolytic activity of T lymphocytes. This test has some significant disadvantages because of the high non-specific background caused by spontaneous release of 51Cr from target cells, low sensitivity, and health risks associated with the use of a radioactive isotope. To avoid these limitations we have introduced a cytotoxicity test using 5-(6-) karboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE) and propidium iodide (PI). Aim: The aim of this study was to evaluate cytotoxic effect of antigen-specific T lymphocyte using a non-radioactive test with CFSE and PI staining. Methods: The model of cytotoxic T lymphocytes specific to multiple myeloma cell line ARH 77 was used. Activated myeloma-specific T cells that produce interferon-γ were isolated using immunomagnetic beads and further expanded in vitro. T lymphocyte labeled with CFSE were co-cultured with ARH77 target cells. To identify target cells in late apoptosis or necrosis, PI was used and measured by flow cytometry. Results: The optimal staining concentration of CFSE has been found (1μM). Cytotoxicity has been evaluated with effector cells:target cells ratio 2:1, 10:1 and 50:1 after 4, 24 and 48 hours of in vitro cultivation. Tumor specificity has been verified by 2 sets of controls: third-party PBMC as negative control target cells and expanded CFSE-labeled interferon gamma negative fraction of T cells as negative control effector cells. Conclusion: The newly established cytotoxicity test is a valuable instrument to evaluate effector part of the immune system and efficacy of anticancer vaccines.
- MeSH
- heparin nízkomolekulární aplikace a dávkování farmakokinetika škodlivé účinky MeSH
- heparin aplikace a dávkování farmakokinetika škodlivé účinky MeSH
- krvácení chemicky indukované MeSH
- léková alergie MeSH
- léková rezistence MeSH
- lidé MeSH
- osteoporóza chemicky indukované MeSH
- protaminy aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- transaminasy krev MeSH
- trombocytopenie chemicky indukované MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Předpokládá se, že lupus antikoagulans (LA) může interferovat nejen s klinickým průběhem antikoagulační léčby, ale také se stanovením protrombinového času. Tak u nemocných s antifosfolipidovým syndromem vzniká otázka validity monitorování léčby warfarinem s použitím INR. K objasnění tohoto problému jsme srovnali hodnoty INR získané od dvou skupin nemocných na antikoagulační léčbě; jedna s přítomností LA a druhá bez tohoto nálezu, a to v průběhu jednoho roku. Neprokázali jsme žádné rozdíly při srovnání obou skupin nemocných co do klinického průběhu, relativního počtu hodnot INR pod či nad cílový terapeutický interval a počtu dní v cílovém terapeutickém rozmezí.
It has been suggested that lupus anticoagulants (LA) could interfere not only with clinical course of the oral anticoagulant treatment but also with determination of prothrombin time. Thus question of the validity of monitoring warfarin treatment using INR arises in patients with antiphospholipid syndrome. To clarify this point, we compared the values of INR obtained in the plasmas of two groups of patients on oral anticoagulant treatment; one with LA and the other one without LA, during one year period. We could not prove any differences comparing clinical course, relative number of INR values under or over target therapeutic interval and number of the days in the target therapeutic range between these two groups of the patients.
Antifosfolipidové protilátky (APA) jsou spojeny s trombotickými příhodami a opakovanými ztrátami plodu. Jejich možné působení na koagulační systém je zřejmě různorodé a může vést k protrombotické dispozici. Důležitý mechanismus, který je zmiňován v těchto procesech, je vliv na systém inhibitoru proteinu C. Cílem naší studie bylo určit změny systému proteinu C u nemocných s antifosfolipidovými protilátkami za použití testu ProC®global. Bylo vyšetřeno 126 pacientů a 64 osob kontrolní skupiny. Hodnoty ProC®global byly signifikantně nižší u pacientů nežli u zdravých osob (p < 0,001) a u pacientů, kteří prodělali žilní trombembolismus (p < 0,001) při srovnání s osobami bez této komplikace. Za použití ROC analýzy jsme mohli stanovit rozhraní pacientů s vyšším rizikem trombózy. Hodnoty ProC®global < 0,8 byly u žen spojeny s 1,8násobným zvýšením rizika trombózy, u mužů hodnoty < 0,71 s 1,7násobným.
Antiphospholipid antibodies (APA) are known to be associated with thrombembolic events and/or recurrent foetal loss. Their possible action to the blood coagulation system seems to be various and could lead to prothrombotic tendency. An important mechanism involved in this process has been referred – the influence on the protein C inhibiting pathway. The aim of our study was to determine abnormalities in protein C pathway by the test ProC®global in patients with antiphospholipid antibodies. 126 patients and 64 controls were evaluated. ProC®global values were significantly lower (p < 0.001) in patients than in healthy persons and in patients who undervent venous thromebolism (p < 0.001) when comparing them with persons without this complication. Using ROC analysis we could determine cut off patients with higer risk of the thrombosis. In women ProC®global value < 0.8 were asociated with the 1.8-fold thrombotic risk increasing, in men ProC®global value < 0.71 with 1.7-fold.
- MeSH
- antifosfopeptidové protilátky analýza škodlivé účinky MeSH
- inhibitor proteinu C imunologie MeSH
- lidé MeSH
- parciální tromboplastinový čas metody využití MeSH
- protein C analýza MeSH
- protein S analýza MeSH
- rezistence k aktivovanému proteinu C imunologie MeSH
- trombóza etiologie patofyziologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Autoři shrnují zkušenosti využití různé citlivosti aPTT reagens k přítomnosti lupus antikoagulans v diagnostice tohoto nespecifického inhibitoru krevního srážení. Na retrospektivní analýze 100 pozitivních a 100 negativních nálezů jsme prokázali, že hodnota R (poměr času pacienta/čas normální plazmy) je statisticky významně odlišná u pozitivních a negativních nálezů diagnostikovaných při použití standardní diagnostické techniky zohledňující kritéria standardizačního výboru Mezinárodní společnosti pro trombózu a hemostázu. Využití indexu RLA tyto rozdíly zvýrazňuje a použití logistické regrese umožňuje rozlišení LA pozitivních a LA negativních vzorků jen na základě tohoto jediného kriteria. Specifické nastavení umožňuje využití i u nemocných na antikoagulační léčbě, kde je jinak diagnostika ještě více komplikovaná.
The authors summarise their own experience concerning to the application of the different sensitivity of aPTT reagents to lupus anticoagulant (LA) presence in the diagnostic process of the unspecific inhibitor of blood coagulation. By retrospective analysis of 100 LA positive and 100 LA negative samples we proved that value R (ratio of patient time/normal plasma time) is statistically different in LA positive and LA negative findings, in which lupus anticoagulant presence was determined by standard diagnostic procedures using criteria of the Standardisation Committee of International Society of Thrombosis and Haemostasis. These differences become more significant if use the index RLA. The application of logistic regression permits differentiation of LA positive and LA negative samples on the basis of only this one criterion. The specific adjustment allows application even in patients with anticoagulant therapy, in whom the diagnostic procedure is otherwise much more complicated.
- MeSH
- antifosfolipidový syndrom diagnóza etiologie MeSH
- dospělí MeSH
- klinické laboratorní techniky metody statistika a číselné údaje MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- lupusový inhibiční faktor koagulace krev MeSH
- samovolný potrat MeSH
- senioři MeSH
- systémový lupus erythematodes diagnóza etiologie MeSH
- trombóza diagnóza etiologie MeSH
- žilní trombóza diagnóza MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
- srovnávací studie MeSH
Fagocytární aktivita plazmatických buněk je pozorována vzácně. Předkládáme popis 68letého mužes diagnostikovaným mnohočetným myelomem, u kterého jsme zaznamenali významnou fagocytózuerytrocytů, erytroblastů, neutrofilních leukocytů a trombocytů plazmocyty v kostní dřeni. Vzhledemk tomu, že u nemocného nebyla prokázána klinicky významná cytopenie na podkladě fagocytózykrevních elementů,nemá tento stav bezprostřední odezvu v léčebnémpostupu. Jde však o morfologickyzajímavý fenomén.
Plasmatic cells rarely show phagocytic activity. In this paper we describe that plasmatic cells significantlyphagocytose erythrocytes, erythroblasts, neutrophils and thrombocytes in bone marrow of 68years old man in whom multiple myeloma was diagnosed. Considering that clinically significantcytopenia, on the basis of phagocytosis of blood elements, was not evaluated, the status has notimmediate response to treatment. However, it is morphologically interesting phenomenon.
- MeSH
- erytrocyty MeSH
- fagocytóza MeSH
- kostní dřeň patologie MeSH
- lidé MeSH
- mnohočetný myelom diagnóza farmakoterapie MeSH
- neutrofily MeSH
- plazmatické buňky patologie MeSH
- senioři MeSH
- trombocyty MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
Dědičné trombocytopenie jsou heterogenní skupinou extrémně vzácných chorob, pro něž je charakteristický hereditární nedostatek krevních destiček a různě závažný sklon ke krvácení. Některé z těchto nemocí postihují pouze krevní destičky, pro jiné jsou charakteristické i defekty dalších buněk. I když jde o raritní nemoci, je třeba na ně myslet. Dědičné trombocytopenie se dělí do tří skupin podle velikosti trombocytů. Hereditární trombocytopenie s obřími krevními destičkami jsou jednou z těchto skupin. Celkem je dosud známo asi čtrnáct dědičných trombocytopenií s velkými destičkami. K nejčastějším chorobám z této skupiny patří Bernardův-Soulierův syndrom, syndrom šedých destiček a Mayova-Hegglinova anomálie. Pro Mayovu-Hegglinovu anomálii je typická následující triáda nálezů: trombocytopenie, obří krevní destičky a bledě modré inkluze v leukocytech. Jde o autozomálně dominantně dědičnou poruchu. V článku zmiňujeme klinické a laboratorní nálezy od tří dospělých žen z jedné rodiny s nově diagnostikovanouMayovou-Hegglinovou anomálií. Popsané případy jsou pravděpodobně prvními případy Mayovy- Hegglinovy anomálie pozorovanými v českých zemích.
Hereditary thrombocytopenias are a heterogeneous group of extremely rare diseases characterized by a reduced number of blood platelets and by bleeding tendency of variable severity. Some of these diseases are exclusive to platelets, while in others the pathology extends to other cell types. Although rare, hereditary thrombocytopenias should be considered in the diagnosis. Hereditary thrombocytopenias have been classified into three groups depending on platelet volume. Hereditary thrombocytopenias with giant platelets form one of these groups. About fourteen clinical entities of inherited giant platelet disorders have been described. Bernard-Soulier syndrome, grey platelet syndrome andMay-Hegglin anomaly are the most common giant platelet thrombocytopenias.May-Hegglin anomaly is condition characterized by the triad of thrombocytopenia, giant platelets, and pale-blue inclusions in leukocytes. May-Hegglin anomaly has an autosomal-dominant mode of inheritance.We described clinical and laboratory features of three adult women from one family with recently diagnosedMay-Hegglin anomaly. Described cases are probably the first observed cases of May-Hegglin anomaly in the Czech lands.
- MeSH
- buněčná inkluze MeSH
- diferenciální diagnóza metody MeSH
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- mikroskopie MeSH
- nesvalový myosin typu IIA genetika MeSH
- neutrofily MeSH
- počet trombocytů MeSH
- trombocytopenie diagnóza genetika klasifikace MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- přehledy MeSH
