Aktivační mutace genu KRAS (Kirsten rat sarcoma viral oncogene homologue) lze detekovat u cca 25-30 % nemalobuněčných plicních karcinomů (non-small cell lung cancer, NSCLC), představuje nejčastější genetickou aberaci u těchto pacientů. Nejčastěji je detekována mutace KRAS p.G12Cs frekvencí cca 13 %. Sotorasib je specifický ireverzibilní inhibitor proteinu KRAS G12C. V rámci studie CodeBreaK 100 byl prokázán významný přínos léčby sotorasibem u pacientů s KRAS G12C NSCLC. Bezpečnostní profil sotorasibu je příznivý.
An activating mutation of the KRAS gene (Kirsten rat sarcoma viral oncogene homologue) is detected in approximately 25 to 30% of NSCLC and represents the most common genetic aberration in these patients. The most frequently detected mutation is KRAS p.G12C with a frequency of approximately 13%. Sotorasib is a specific irreversible inhibitor of the KRAS G12C protein. In the CodeBreaK 100 trial, there was a significant benefit of sotorasib treatment in patients with KRAS G12C NSCLC. The safety profile of sotorasib is favorable.
- Klíčová slova
- sotorasib, studie CodeBreaK 100,
- MeSH
- aktivační mutace účinky léků MeSH
- antitumorózní látky farmakologie MeSH
- doba přežití bez progrese choroby MeSH
- geny ras * účinky léků MeSH
- inhibitory syntézy proteinů farmakologie škodlivé účinky terapeutické užití MeSH
- klinické zkoušky, fáze II jako téma MeSH
- lidé MeSH
- nemalobuněčný karcinom plic * farmakoterapie genetika MeSH
- senioři MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
RelA-SpoT Homolog (RSH) enzymes control bacterial physiology through synthesis and degradation of the nucleotide alarmone (p)ppGpp. We recently discovered multiple families of small alarmone synthetase (SAS) RSH acting as toxins of toxin-antitoxin (TA) modules, with the FaRel subfamily of toxSAS abrogating bacterial growth by producing an analog of (p)ppGpp, (pp)pApp. Here we probe the mechanism of growth arrest used by four experimentally unexplored subfamilies of toxSAS: FaRel2, PhRel, PhRel2, and CapRel. Surprisingly, all these toxins specifically inhibit protein synthesis. To do so, they transfer a pyrophosphate moiety from ATP to the tRNA 3' CCA. The modification inhibits both tRNA aminoacylation and the sensing of cellular amino acid starvation by the ribosome-associated RSH RelA. Conversely, we show that some small alarmone hydrolase (SAH) RSH enzymes can reverse the pyrophosphorylation of tRNA to counter the growth inhibition by toxSAS. Collectively, we establish RSHs as RNA-modifying enzymes.
- MeSH
- bakteriální toxiny genetika metabolismus farmakologie MeSH
- fosforylace účinky léků MeSH
- grampozitivní nesporulující tyčinky chemie metabolismus MeSH
- guanosinpentafosfát chemie metabolismus MeSH
- inhibitory syntézy proteinů farmakologie MeSH
- ligasy chemie genetika metabolismus MeSH
- proteosyntéza účinky léků fyziologie MeSH
- pyrofosfatasy MeSH
- ribozomy metabolismus MeSH
- RNA transferová metabolismus MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Cíl práce: Periprotetické infekce jsou závažnou komplikací totálních endoprotéz (TEP) kyčelního a kolenního kloubu. Součástí komplexního terapeutického přístupu v rámci dvojdobé reimplantace je použití spacerů (dočasné kloubní náhrady) s obsahem antibiotik. Cílem této práce bylo zhodnotit bakteriologické nálezy u vybraných pacientů s periprotetickou infekcí, u kterých byl použit komerčně připravený spacer s gentamicinem. Materiál a metodika: V letech 2008–2012 byl použit u 24 pacientů při ošetření infekce kloubní náhrady kyčelního nebo kolenního kloubu – v rámci dvojdobé reimplantace – ready-made cementový spacer s gentamicinem. K mikrobiologickému vyšetření byly z první revize odeslány všechny komponenty endoprotézy a vzorky periprotetické tkáně, v druhé době pak spacer a vzorky okolní tkáně. U šesti pacientů se zavedeným spacerem kolenního kloubu byla měřena hladinu gentamicinu v kloubní tekutině. Pacienti byli následně pravidelně sledováni. Výsledky: Výsledkem bakteriologického vyšetření byl kultivační průkaz agens v 22 případech z 24 (92 %). Nejčastěji byly vykultivovány koaguláza-negativní stafylokoky, dále byl izolován Staphylococcus aureus, korynebakteria, anaerobní bakterie a Salmonella Enteritidis, citlivých ke gentamicinu bylo 19 z 25 prokázaných agens (76 %). Kultivační vyšetření spacerů bylo pozitivní u dvou pacientů, vykultivovány byly koaguláza-negativní stafylokoky, v obou případech rezistentní ke gentamicinu. Po dobu sledování (minimálně 2 roky) pacientů nedošlo u žádného z nich k rozvoji další periprotetické infekce. Závěr: Úspěšnost reimplantací TEP kyčelního a kolenního kloubu ve dvojdobém rytmu s užitím ready-made spacerů s gentamicinem byla v našem souboru 100 %, po dobu minimálně dvou let nedošlo v našem souboru pacientů k zaznamenání dalšího periprotetického infektu. Z hodnocení nálezů bakteriologického vyšetření našeho souboru vyplývá, že ready-made spacer s gentamicinem pokrývá pouze 76 % spektra původců. Řešením by bylo použití spaceru nasyceného kombinací vankomycinu a gentamicinu, které by zajistilo antimikrobiální působení vůči všem vykultivovaným agens.
Background: Periprosthetic infection is a serious complication in total hip and knee arthroplasty. The complex therapeutic approach within two-stage reimplantation includes the use of antibiotic-impregnated spacers (temporary joint replacements). The aim of this paper was to evaluate bacteriological findings in selected patients with periprosthetic infection in whom a ready-made gentamicin-impregnated spacer was used to treat the infection. Materials and methods: Between 2008 and 2012, a ready-made, gentamicin-impregnated cement spacer was used in 24 patients to treat periprosthetic hip or knee infection within two-stage reimplantation. All components of the prosthesis and periprosthetic tissue samples were sent for microbiological examination at the first revision surgery, while at the second revision surgery, the spacer and surrounding tissue samples were sent in. In six patients with an inserted knee spacer, the level of gentamicin in the joint fluid was measured. Subsequently, the patients were regularly monitored. Results: Twenty-two (92%) of 24 patients were bacteriologically positive by culture. The most commonly detected causative agents were coagulase-negative staphylococci. Other isolates were Staphylococcus aureus, Corynebacterium, anaerobic bacteria, and Salmonella serotype Enteritidis. Nineteen (76%) of 25 primary pathogens were gentamicin sensitive. Spacers from two patients were culture positive for coagulase-negative staphylococci that tested resistant to gentamicin. During the follow-up of at least two years, none of the patients developed another periprosthetic infection. Conclusion: The success rate of two-stage-reimplantation total hip and knee arthroplasty using ready-made, gentamicin-impregnated spacers was 100 % in our cohort of patients; no other periprosthetic infection was reported during the follow-up of at least two years. From the bacteriological results, it appears that the ready-made, gentamicin-impregnated spacer only covers 76 % of the range of the causative agents. The solution would be to use a spacer impregnated with a combination of vancomycin and gentamicin that would be effective against all cultured species.
- MeSH
- antibakteriální látky * aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- artroplastiky kloubů * MeSH
- bakteriologické techniky metody MeSH
- chemoprofylaxe metody MeSH
- chirurgie operační metody MeSH
- debridement MeSH
- DNA bakterií analýza MeSH
- infekce spojené s protézou * diagnóza mikrobiologie terapie MeSH
- inhibitory syntézy proteinů farmakologie terapeutické užití MeSH
- kostní cementy MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mikrobiální testy citlivosti MeSH
- okultní krev MeSH
- ortopedie MeSH
- polymethylmethakrylát chemie MeSH
- pooperační komplikace etiologie mikrobiologie terapie MeSH
- protetické prostředky MeSH
- protézy - design MeSH
- protézy kloubů mikrobiologie MeSH
- replantace MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- stafylokokové infekce diagnóza terapie MeSH
- Staphylococcus epidermidis izolace a purifikace MeSH
- Check Tag
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
x
- MeSH
- antibakteriální látky farmakologie MeSH
- dihydroxyfenylalanin * farmakologie chemická syntéza MeSH
- dopaminové látky farmakologie chemická syntéza MeSH
- elektronová paramagnetická rezonance * statistika a číselné údaje MeSH
- fixní kombinace léků MeSH
- inhibitory syntézy proteinů farmakologie MeSH
- kyslík * fyziologie MeSH
- melaniny * farmakologie chemická syntéza MeSH
- streptomycin * farmakologie MeSH
- volné radikály analýza MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
Cíl práce: Periprotetické infekce jsou závažnou komplikací totálních endoprotéz (TEP) kyčelního a kolenního kloubu. Součástí komplexního terapeutického přístupu v rámci dvojdobé reimplantace je použití spacerů (dočasné kloubní náhrady) s obsahem antibiotik. Cílem této práce bylo zhodnotit bakteriologické nálezy u vybraných pacientů s periprotetickou infekcí, u kterých byl použit komerčně připravený spacer s gentamicinem. Materiál a metodika: V letech 2008–2012 byl použit u 24 pacientů při ošetření infekce kloubní náhrady kyčelního nebo kolenního kloubu – v rámci dvojdobé reimplantace – ready-made cementový spacer s gentamicinem. K mikrobiologickému vyšetření byly z první revize odeslány všechny komponenty endoprotézy a vzorky periprotetické tkáně, v druhé době pak spacer a vzorky okolní tkáně. U šesti pacientů se zavedeným spacerem kolenního kloubu byla měřena hladinu gentamicinu v kloubní tekutině. Pacienti byli následně pravidelně sledováni. Výsledky: Výsledkem bakteriologického vyšetření byl kultivační průkaz agens v 22 případech z 24 (92 %). Nejčastěji byly vykultivovány koaguláza-negativní stafylokoky, dále byl izolován Staphylococcus aureus, korynebakteria, anaerobní bakterie a Salmonella Enteritidis, citlivých ke gentamicinu bylo 19 z 25 prokázaných agens (76 %). Kultivační vyšetření spacerů bylo pozitivní u dvou pacientů, vykultivovány byly koaguláza-negativní stafylokoky, v obou případech rezistentní ke gentamicinu. Po dobu sledování (minimálně 2 roky) pacientů nedošlo u žádného z nich k rozvoji další periprotetické infekce. Závěr: Úspěšnost reimplantací TEP kyčelního a kolenního kloubu ve dvojdobém rytmu s užitím ready-made spacerů s gentamicinem byla v našem souboru 100 %, po dobu minimálně dvou let nedošlo v našem souboru pacientů k zaznamenání dalšího periprotetického infektu. Z hodnocení nálezů bakteriologického vyšetření našeho souboru vyplývá, že ready-made spacer s gentamicinem pokrývá pouze 76 % spektra původců. Řešením by bylo použití spaceru nasyceného kombinací vankomycinu a gentamicinu, které by zajistilo antimikrobiální působení vůči všem vykultivovaným agens.
Background: Periprosthetic infection is a serious complication in total hip and knee arthroplasty. The complex therapeutic approach within two-stage reimplantation includes the use of antibiotic-impregnated spacers (temporary joint replacements). The aim of this paper was to evaluate bacteriological findings in selected patients with periprosthetic infection in whom a ready-made gentamicin-impregnated spacer was used to treat the infection. Materials and methods: Between 2008 and 2012, a ready-made, gentamicin-impregnated cement spacer was used in 24 patients to treat periprosthetic hip or knee infection within two-stage reimplantation. All components of the prosthesis and periprosthetic tissue samples were sent for microbiological examination at the first revision surgery, while at the second revision surgery, the spacer and surrounding tissue samples were sent in. In six patients with an inserted knee spacer, the level of gentamicin in the joint fluid was measured. Subsequently, the patients were regularly monitored. Results: Twenty-two (92%) of 24 patients were bacteriologically positive by culture. The most commonly detected causative agents were coagulase-negative staphylococci. Other isolates were Staphylococcus aureus, Corynebacterium, anaerobic bacteria, and Salmonella serotype Enteritidis. Nineteen (76%) of 25 primary pathogens were gentamicin sensitive. Spacers from two patients were culture positive for coagulase-negative staphylococci that tested resistant to gentamicin. During the follow-up of at least two years, none of the patients developed another periprosthetic infection. Conclusion: The success rate of two-stage-reimplantation total hip and knee arthroplasty using ready-made, gentamicin-impregnated spacers was 100 % in our cohort of patients; no other periprosthetic infection was reported during the follow-up of at least two years. From the bacteriological results, it appears that the ready-made, gentamicin-impregnated spacer only covers 76 % of the range of the causative agents. The solution would be to use a spacer impregnated with a combination of vancomycin and gentamicin that would be effective against all cultured species.
- MeSH
- antibakteriální látky * aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- artroplastiky kloubů * MeSH
- bakteriologické techniky metody MeSH
- chemoprofylaxe metody MeSH
- chirurgie operační metody MeSH
- debridement MeSH
- DNA bakterií analýza MeSH
- infekce spojené s protézou * diagnóza mikrobiologie terapie MeSH
- inhibitory syntézy proteinů farmakologie terapeutické užití MeSH
- kostní cementy MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mikrobiální testy citlivosti MeSH
- okultní krev MeSH
- ortopedie MeSH
- polymethylmethakrylát chemie MeSH
- pooperační komplikace etiologie mikrobiologie terapie MeSH
- protetické prostředky MeSH
- protézy - design MeSH
- protézy kloubů mikrobiologie MeSH
- replantace MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- stafylokokové infekce diagnóza terapie MeSH
- Staphylococcus epidermidis izolace a purifikace MeSH
- Check Tag
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- Klíčová slova
- Clarithromycin,
- MeSH
- antibakteriální látky * aplikace a dávkování farmakologie terapeutické užití MeSH
- bakteriální pneumonie * farmakoterapie MeSH
- inhibitory syntézy proteinů * aplikace a dávkování farmakologie terapeutické užití MeSH
- lidé MeSH
- mykoplazmová pneumonie farmakoterapie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Death ligands and their tumor necrosis factor receptor (TNFR) family receptors are the best-characterized and most efficient inducers of apoptotic signaling in somatic cells. In this study, we analyzed whether these prototypic activators of apoptosis are also expressed and able to be activated in human pluripotent stem cells. We examined human embryonic stem cells (hESC) and human-induced pluripotent stem cells (hiPSC) and found that both cell types express primarily TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) receptors and TNFR1, but very low levels of Fas/CD95. We also found that although hESC and hiPSC contain all the proteins required for efficient induction and progression of extrinsic apoptotic signaling, they are resistant to TRAIL-induced apoptosis. However, both hESC and hiPSC can be sensitized to TRAIL-induced apoptosis by co-treatment with protein synthesis inhibitors such as the anti-leukemia drug homoharringtonine (HHT). HHT treatment led to suppression of cellular FLICE inhibitory protein (cFLIP) and Mcl-1 expression and, in combination with TRAIL, enhanced processing of caspase-8 and full activation of caspase-3. cFLIP likely represents an important regulatory node, as its shRNA-mediated down-regulation significantly sensitized hESC to TRAIL-induced apoptosis. Thus, we provide the first evidence that, irrespective of their origin, human pluripotent stem cells express canonical components of the extrinsic apoptotic system and on stress can activate death receptor-mediated apoptosis.
- MeSH
- antigeny CD95 genetika metabolismus MeSH
- apoptóza účinky léků MeSH
- buněčná diferenciace MeSH
- embryonální kmenové buňky cytologie účinky léků metabolismus MeSH
- FLIP (buněčný) antagonisté a inhibitory genetika metabolismus MeSH
- harringtoniny farmakologie MeSH
- inhibitory syntézy proteinů farmakologie MeSH
- kaspasa 3 genetika metabolismus MeSH
- kaspasa 8 genetika metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- malá interferující RNA genetika metabolismus MeSH
- pluripotentní kmenové buňky cytologie účinky léků metabolismus MeSH
- proliferace buněk MeSH
- protein MCL-1 genetika metabolismus MeSH
- protein TRAIL genetika metabolismus farmakologie MeSH
- receptory TNF - typ I genetika metabolismus MeSH
- regulace genové exprese MeSH
- signální transdukce MeSH
- synergismus léků MeSH
- TRAIL receptory genetika metabolismus MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Although it is well known that chromosomes are non-randomly organized during interphase, it is not completely clear whether higher-order chromatin structure is transmitted from mother to daughter cells. Therefore, we addressed the question of how chromatin is rearranged during interphase and whether heterochromatin pattern is transmitted after mitosis. We additionally tested the similarity of chromatin arrangement in sister interphase nuclei. We noticed a very active cell rotation during interphase, especially when histone hyperacetylation was induced or transcription was inhibited. This natural phenomenon can influence the analysis of nuclear arrangement. Using photoconversion of Dendra2-tagged core histone H4 we showed that the distribution of chromatin in daughter interphase nuclei differed from that in mother cells. Similarly, the nuclear distribution of heterochromatin protein 1β (HP1β) was not completely identical in mother and daughter cells. However, identity between mother and daughter cells was in many cases evidenced by nucleolar composition. Moreover, morphology of nucleoli, HP1β protein, Cajal bodies, chromosome territories, and gene transcripts were identical in sister cell nuclei. We conclude that the arrangement of interphase chromatin is not transmitted through mitosis, but the nuclear pattern is identical in naturally synchronized sister cells. It is also necessary to take into account the possibility that cell rotation and the degree of chromatin condensation during functionally specific cell cycle phases might influence our view of nuclear architecture.
- MeSH
- buněčné jadérko účinky léků genetika ultrastruktura MeSH
- buněčné linie MeSH
- Cajalova tělíska účinky léků genetika ultrastruktura MeSH
- chromozomální proteiny, nehistonové genetika metabolismus MeSH
- daktinomycin farmakologie MeSH
- fluorescenční barviva MeSH
- fluorescenční mikroskopie MeSH
- fotochemické procesy MeSH
- heterochromatin účinky léků genetika ultrastruktura MeSH
- histony genetika metabolismus MeSH
- inhibitory histondeacetylas farmakologie MeSH
- inhibitory syntézy proteinů farmakologie MeSH
- interfáze účinky léků genetika MeSH
- kyseliny hydroxamové farmakologie MeSH
- lidé MeSH
- messenger RNA biosyntéza MeSH
- mitóza účinky léků genetika MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Small ubiquitin-related modifiers 1, 2 and 3 (SUMO-1, -2, -3), members of the ubiquitin-like protein family, can be conjugated to various cellular proteins. Conjugates of SUMO-2 and SUMO-3 (SUMO-2/3) accumulate in cells exposed to various stress stimuli or to MG132 treatment. Although the proteins modified by SUMO-2/3 during heat shock or under MG132 treatment have been identified, the significance of this modification remains unclear. Our data show that the inhibition of translation by puromycin or cycloheximide blocks both the heat shock and MG132 induced accumulation of SUMO-2/3 conjugates in HEK 293T and U2OS cells. However, the heat shock induced accumulation of SUMO-2/3 conjugates was restored by proteasome inhibition, which suggests that the inhibition of translation did not abolish SUMOylation itself. Furthermore, we show that some of the proteins truncated due to the treatment by low concentration of puromycin are SUMOylated in HEK 293T cells. We suggest that the SUMO-2/3 conjugates accumulating under the heat shock or MG132 treatment result largely from new protein synthesis and that portion of them is incorrectly folded.
- MeSH
- benzochinony farmakologie MeSH
- biologické modely MeSH
- cykloheximid farmakologie MeSH
- HEK293 buňky MeSH
- HeLa buňky MeSH
- inhibitory syntézy proteinů farmakologie MeSH
- leupeptiny farmakologie MeSH
- lidé MeSH
- makrocyklické laktamy farmakologie MeSH
- malé modifikační proteiny související s ubikvitinem metabolismus MeSH
- proteasomový endopeptidasový komplex metabolismus MeSH
- proteosyntéza účinky léků MeSH
- puromycin farmakologie MeSH
- reakce na tepelný šok účinky léků MeSH
- sumoylace účinky léků MeSH
- ubikvitiny metabolismus MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
Quantitative real-time RT-PCR study was conducted to reveal the effects of normal (5 mmol/l) and high (30 mmol/l) glucose without or with oleate (0.3 mmol/l) on mRNA levels of peroxisome proliferator-activated receptor- (PPAR-)alpha, -gamma1, -gamma2, and peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator- (PGC-)1alpha and -1beta in commercial human hepatoma-derived HepG2 cells maintained under low-serum condition. Significant decrease in PPAR-gamma1 and PGC-1alpha mRNA levels to about 50 % was observed during the first 4 h incubation period. During the next 4 h period, both PPAR-gamma1 and PGC-1alpha mRNAs were partly but significantly restored in high glucose batches. In this period, the presence of the transcriptional inhibitor actinomycin D revealed a significant protective effect of excess glucose on mature PPAR-gamma1 and PGC-1alpha mRNAs. Furthermore, PPAR-gamma1 and -gamma2 mRNAs were differentially superinduced 1.2-2.5 fold in cells upon the administration of the translational inhibitor cycloheximide. When the cells were co-treated with the combination of cycloheximide and actinomycin D, superinduction was completely suppressed, however. Altogether, the experiments revealed, first, an unexpected protective effect of abundant glucose on PPAR-gamma1 and PGC-1alpha mRNAs in HepG2 cells. Second, we demonstrated cycloheximide-induced, transcription-dependent upregulation of mature PPAR-gamma1 and -gamma2 mRNAs in HepG2 cells associated with preferential expression of the PPAR-gamma2 mRNA variant. The results draw attention to as yet unexplored mechanisms involved in the control of PPAR and PGC genes.
- MeSH
- buňky Hep G2 MeSH
- cykloheximid farmakologie MeSH
- genetická variace MeSH
- glukosa farmakologie MeSH
- inhibitory syntézy proteinů farmakologie MeSH
- kyselina olejová farmakologie MeSH
- lidé MeSH
- messenger RNA metabolismus MeSH
- nádorové buněčné linie MeSH
- polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
- PPAR gama genetika metabolismus MeSH
- regulace genové exprese účinky léků MeSH
- upregulace MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
