Basofily a žímé buňky působí jako regulační a efektorové buňky přirozených imunitních mechanismů a v současné době jsou považovány za spojnici mezi vrozenou a adaptivní imunitou. Spolu s žímými buňkami se podílejí na vzniku alergické reakce okamžitého typu zprostředkované IgE. Nejvýznamnější úlohu v aktivaci basofilů a žímých buněk sehrává vysokoafinitní FceRI receptor. Jeho přemostění IgE molekulami je signálem pro zahájení aktivační kaskády žímých buněk a basofilů, vedoucí k uvolnění mediátorů alergického zánětu. Mezi hlavní tyrosinkinázy podílející se na FceRI mediovaných signalizačních drahách patří proteinové tyrosinkinázy Fyn, Lyn a Syk vedoucí k fosforylaci molekul signálních drah. Diagnostika alergie u pacientů s hypo-, resp. agamaglobulinémií je značně problematická vzhledem k nízké koncentraci nebo absenci IgE. I když se zdá, že vznik atopic je u těchto pacientů značně spekulativní, řada z nich vykazuje symptomy charakteristické pro alergickou hypersenzitivitu. Je známo, že řada imunodeficitů je spojena rovněž s defekty určitých signálních drah. V naší práci jsme zjišťovali, zda status non-respondéra v případě pacientů s hypo-, resp. agamaglobulinémií je spojen pouze s absencí IgE, nebojsou přítomny i změny ve funkci příslušných signálních drah. Ukázalo se, že proteináza Btk (Bmton tyrosinkináza) hraje rozhodující úlohu nejen v případě B-lymfocytů, ale rovněž v případě buněčné aktivace mediované FceRI.

Basophils and mast cells act as regulatory and effector cells of natural immune mechanisms and and are currently considered as a bridge between innate and adaptive immunity. Along with mast cells they play pivotal roles in the initiation of allergic reaction. IgE cross-linking of the highaffinity FcεRI receptor on these cells activates intracellular signaling pathways that lead to the degranulation and release of allergic inflammaton mediators. The main tyrosine kinase involved in signaling pathwas mediated FcεRI include protein tyrosine kinase Fyn, Lyn and Syk, leading to phosphorylation of signaling pathways. Patients with immunoglobulin deficiency do not react to positive, e.g. anti-IgE stimu - lation because of lack of IgE. It is generally known that immunedeficiencies are connected with defects in signal transduction pathways. The aim of our study was to find out whether the non-responder status in patients with hypo-, resp. agamaglobulinemia is related only to the absence of IgE or whether some dysfunctions in basophil signaling are also present. Our results confirmed that BTK plays crucial role in B-lymphocytes as well as mast cell activation through FcεRI.

• Klíčová slova
• Brutonova tyrosinkináza, FcεRI receptor, basofily,
• MeSH
• agamaglobulinemie MeSH
• alergie etiologie   MeSH
• B-lymfocyty MeSH
• bazofily fyziologie   imunologie   MeSH
• běžná variabilní imunodeficience MeSH
• buněčná imunita MeSH
• fyziologie buňky MeSH
• lidé MeSH
• mastocyty imunologie   MeSH
• protilátky MeSH
• průtoková cytometrie využití   MeSH
• receptory Fc MeSH
• receptory IgE MeSH
• signální transdukce MeSH
• syndromy imunologické nedostatečnosti etiologie   krev   MeSH
• tyrosinkinasy MeSH
• výběr pacientů MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Chronická kopř ivka (urtikarie CU) je definována jako přítomnost kopř ivky vyskytující se déle než šest týdnů . Etiologie onemocnění je různorodá, přičemž společ ným znakem většiny urtikarií je aktivace a degranulace žírných buněk a přičemž vyvolávací faktory mohou být jak neimunologického, tak imunologického charakteru. V patogenezi autoimunitní podskupiny je patogenní mechanismus spojován s přítomností protilátek IgG izotypu proti alfa podjednotce vysokoafinitního FcεRI receptoru nebo IgE. Diagnostika chronické kopřivky je obtížná a často založená pouze na klinických a anamnestických údajích. Do dnešního dne byla vyvinuta řada metod k detekci sérových autoprotilátek, je- jich nedostatkem je však značná různorodost v principu stanovení, a tudíž i vysoká metodická a mezilaboratorní variabilita. K nejužívanějším patří intradermální test za užití autologního séra (ASSST), který však nepatří mezi standardizovaná vyšetření. Laboratorní in vitro průkaz anti-FcεRI autoprotilátek je možno provádět funkč ními testy, jako je metoda uvolňování histaminu z basofilů periferní krve nebo imunoana- lytickými metodami jako western blot nebo enzymová imunoanalýza (ELISA). V této práci byla užita modifikace testu aktivace basofilů , kdy basofily zdravého byly stimulovány sérem pacientů s CU. Schopnost aktivoval basofily nealergického dárce vykazovala séra 5 z 11 vyšetřovaných pacientek a lze předpokládat, že aktivace basofilů byla mediována protilátkami proti FcεRI eventuálně anti-IgE protilátkami. Na rozdíl od metod založených na principu imunoanalýzy spočívá pozitivní přínos tohoto testu především v průkazu funkční aktivity séra vázané k FcεRI a odpovědné za aktivaci, resp. degranulaci basofilů a mohl by sloužit jako vhodná metoda pro identifikaci podskupiny pacientů s chronickou kopřivkou autoimunitního původu.

Chronic urticaria (CU) is defined as the presence of urticaria for at least 6 weeks. It is frequently caused by allergic reacti ons; however, there are many nonallergic causes. The majority of chronic urticaria cases have an unknown cause. The autoimmune subgroup is associat ed with the IgG anti-IgE receptor alpha subunit in 35–40% of patients and IgG anti-IgE in an additional 5–10%. These autoantibodies have be en shown to activate blood basophils and cutaneous mast cells in vitro with augmentation of basophil activation by complement and release o f C5a. This autoimmune subgroup can be identified by an autologous skin test or histamine release from human basophils or cutaneous mast ce lls or binding methods as immunoblot and ELISA. However, binding assays do not correlate with these functional assai. Activation of basophils or mast cells causing histamine release is quite specific for chronic urticaria and defines the autoimmune subgroup. To detect autoantibodies to the Fc ε RI in sera of CU patients by a modified serum-induced basophil activation test measured by flow cytometry. Sera of 11 CU patients wer e tested and serum of 5 of these sera upregulated CD63 expression on the surface of basophils. Chronic urticaria serum-induced CD63 expressi on assay seems to be a useful tool for identification of a subset of patiens with autoimmune CU.

• Klíčová slova
• chronická kopřivka, CD63,
• MeSH
• autoprotilátky krev   škodlivé účinky   MeSH
• bazofily imunologie   MeSH
• kožní testy MeSH
• lidé MeSH
• receptory IgE antagonisté a inhibitory   fyziologie   MeSH
• test degranulace bazofilů MeSH
• urtikarie * diagnóza   imunologie   krev   patologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Ethanol has multiple effects on biochemical events in a variety of cell types, including the high-affinity immunoglobulin E receptor (FcεRI) signaling in antigen-activated mast cells. However, the underlying molecular mechanism remains unknown. To get better understanding of the effect of ethanol on FcεRI-mediated signaling we examined the effect of short-term treatment with non-toxic concentrations of ethanol on FcεRI signaling events in mouse bone marrow-derived mast cells. We found that 15 min exposure to ethanol inhibited antigen-induced degranulation, calcium mobilization, expression of proinflammatory cytokine genes (tumor necrosis factor-α, interleukin-6, and interleukin-13), and formation of reactive oxygen species in a dose-dependent manner. Removal of cellular cholesterol with methyl-β-cyclodextrin had a similar effect and potentiated some of the inhibitory effects of ethanol. In contrast, exposure of the cells to cholesterol-saturated methyl-β-cyclodextrin abolished in part the inhibitory effect of ethanol on calcium response and production of reactive oxygen species, supporting lipid-centric theories of ethanol action on the earliest stages of mast cell signaling. Further studies showed that exposure to ethanol and/or removal of cholesterol inhibited early FcεRI activation events, including tyrosine phosphorylation of the FcεRI β and γ subunits, SYK kinases, LAT adaptor protein, phospholipase Cγ, STAT5, and AKT and internalization of aggregated FcεRI. Interestingly, ethanol alone, and particularly in combination with methyl-β-cyclodextrin, enhanced phosphorylation of negative regulatory tyrosine 507 of LYN kinase. Finally, we found that ethanol reduced passive cutaneous anaphylactic reaction in mice, suggesting that ethanol also inhibits FcεRI signaling under in vivo conditions. The combined data indicate that ethanol interferes with early antigen-induced signaling events in mast cells by suppressing the function of FcεRI-cholesterol signalosomes at the plasma membrane.

• MeSH
• cholesterol metabolismus   MeSH
• cytokiny genetika   metabolismus   MeSH
• ethanol farmakologie   MeSH
• exprese genu účinky léků   MeSH
• fosforylace MeSH
• mastocyty účinky léků   metabolismus   MeSH
• myši MeSH
• receptory IgE metabolismus   MeSH
• signální transdukce účinky léků   MeSH
• vápník metabolismus   MeSH
• vztah mezi dávkou a účinkem léčiva MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Protein 4.1R, a member of the 4.1 family, functions as a bridge between cytoskeletal and plasma membrane proteins. It is expressed in T cells, where it binds to a linker for activation of T cell (LAT) family member 1 and inhibits its phosphorylation and downstream signaling events after T cell receptor triggering. The role of the 4.1R protein in cell activation through other immunoreceptors is not known. In this study, we used 4.1R-deficient (4.1R-KO) and 4.1R wild-type (WT) mice and explored the role of the 4.1R protein in the high-affinity IgE receptor (FcεRI) signaling in mast cells. We found that bone marrow mast cells (BMMCs) derived from 4.1R-KO mice showed normal growth in vitro and expressed FcεRI and c-KIT at levels comparable to WT cells. However, 4.1R-KO cells exhibited reduced antigen-induced degranulation, calcium response, and secretion of tumor necrosis factor-α. Chemotaxis toward antigen and stem cell factor (SCF) and spreading on fibronectin were also reduced in 4.1R-KO BMMCs, whereas prostaglandin E2-mediated chemotaxis was not affected. Antibody-induced aggregation of tetraspanin CD9 inhibited chemotaxis toward antigen in WT but not 4.1R-KO BMMCs, implying a CD9-4.1R protein cross-talk. Further studies documented that in the absence of 4.1R, antigen-mediated phosphorylation of FcεRI β and γ subunits was not affected, but phosphorylation of SYK and subsequent signaling events such as phosphorylation of LAT1, phospholipase Cγ1, phosphatases (SHP1 and SHIP), MAP family kinases (p38, ERK, JNK), STAT5, CBL, and mTOR were reduced. Immunoprecipitation studies showed the presence of both LAT1 and LAT2 (LAT, family member 2) in 4.1R immunocomplexes. The positive regulatory role of 4.1R protein in FcεRI-triggered activation was supported by in vivo experiments in which 4.1R-KO mice showed the normal presence of mast cells in the ears and peritoneum, but exhibited impaired passive cutaneous anaphylaxis. The combined data indicate that the 4.1R protein functions as a positive regulator in the early activation events after FcεRI triggering in mast cells.

• MeSH
• chemotaxe imunologie   MeSH
• degranulace buněk imunologie   MeSH
• mastocyty imunologie   metabolismus   MeSH
• mikrofilamentové proteiny imunologie   metabolismus   MeSH
• myši inbrední C57BL MeSH
• myši knockoutované MeSH
• myši MeSH
• pasivní kožní anafylaxe imunologie   MeSH
• receptory IgE imunologie   metabolismus   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

C-terminal Src kinase (CSK) is a major negative regulator of Src family tyrosine kinases (SFKs) that play critical roles in immunoreceptor signaling. CSK is brought in contiguity to the plasma membrane-bound SFKs via binding to transmembrane adaptor PAG, also known as CSK-binding protein. The recent finding that PAG can function as a positive regulator of the high-affinity IgE receptor (FcεRI)-mediated mast cell signaling suggested that PAG and CSK have some non-overlapping regulatory functions in mast cell activation. To determine the regulatory roles of CSK in FcεRI signaling, we derived bone marrow-derived mast cells (BMMCs) with reduced or enhanced expression of CSK from wild-type (WT) or PAG knockout (KO) mice and analyzed their FcεRI-mediated activation events. We found that in contrast to PAG-KO cells, antigen-activated BMMCs with CSK knockdown (KD) exhibited significantly higher degranulation, calcium response, and tyrosine phosphorylation of FcεRI, SYK, and phospholipase C. Interestingly, FcεRI-mediated events in BMMCs with PAG-KO were restored upon CSK silencing. BMMCs with CSK-KD/PAG-KO resembled BMMCs with CSK-KD alone. Unexpectedly, cells with CSK-KD showed reduced kinase activity of LYN and decreased phosphorylation of transcription factor STAT5. This was accompanied by impaired production of proinflammatory cytokines and chemokines in antigen-activated cells. In line with this, BMMCs with CSK-KD exhibited enhanced phosphorylation of protein phosphatase SHP-1, which provides a negative feedback loop for regulating phosphorylation of STAT5 and LYN kinase activity. Furthermore, we found that in WT BMMCs SHP-1 forms complexes containing LYN, CSK, and STAT5. Altogether, our data demonstrate that in FcεRI-activated mast cells CSK is a negative regulator of degranulation and chemotaxis, but a positive regulator of adhesion to fibronectin and production of proinflammatory cytokines. Some of these pathways are not dependent on the presence of PAG.

• MeSH
• analýza rozptylu MeSH
• buňky kostní dřeně fyziologie   MeSH
• C-terminální Src kinasa MeSH
• cytokiny metabolismus   MeSH
• degranulace buněk MeSH
• fibronektiny metabolismus   MeSH
• fosfoproteiny metabolismus   MeSH
• fosforylace MeSH
• genetické vektory MeSH
• HEK293 buňky MeSH
• lidé MeSH
• mastocyty fyziologie   MeSH
• membránové proteiny metabolismus   MeSH
• mezibuněčné signální peptidy a proteiny MeSH
• myši inbrední C57BL MeSH
• myši knockoutované MeSH
• myši MeSH
• receptory IgE metabolismus   MeSH
• signální transdukce imunologie   MeSH
• skupina kinas odvozených od src-genu metabolismus   fyziologie   MeSH
• transkripční faktor STAT5 metabolismus   MeSH
• tyrosin metabolismus   MeSH
• tyrosinfosfatasa nereceptorového typu 6 metabolismus   MeSH
• vápník metabolismus   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Single-nucleotide polymorphism studies have linked the chromosome 17q12-q21 region, where the human orosomucoid-like (ORMDL)3 gene is localized, to the risk of asthma and several other inflammatory diseases. Although mast cells are involved in the development of these diseases, the contribution of ORMDL3 to the mast cell physiology is unknown. In this study, we examined the role of ORMDL3 in antigen-induced activation of murine mast cells with reduced or enhanced ORMDL3 expression. Our data show that in antigen-activated mast cells, reduced expression of the ORMDL3 protein had no effect on degranulation and calcium response, but significantly enhanced phosphorylation of AKT kinase at Ser 473 followed by enhanced phosphorylation and degradation of IκBα and translocation of the NF-κB p65 subunit into the nucleus. These events were associated with an increased expression of proinflammatory cytokines (TNF-α, IL-6, and IL-13), chemokines (CCL3 and CCL4), and cyclooxygenase-2 dependent synthesis of prostaglandin D2. Antigen-mediated chemotaxis was also enhanced in ORMDL3-deficient cells, whereas spreading on fibronectin was decreased. On the other hand, increased expression of ORMDL3 had no significant effect on the studied signaling events, except for reduced antigen-mediated chemotaxis. These data were corroborated by increased IgE-antigen-dependent passive cutaneous anaphylaxis in mice with locally silenced ORMDL3 using short interfering RNAs. Our data also show that antigen triggers suppression of ORMDL3 expression in the mast cells. In summary, we provide evidence that downregulation of ORMDL3 expression in mast cells enhances AKT and NF-κB-directed signaling pathways and chemotaxis and contributes to the development of mast cell-mediated local inflammation in vivo.

• MeSH
• chemotaxe * MeSH
• cytokiny genetika   imunologie   MeSH
• degranulace buněk * MeSH
• down regulace MeSH
• kultivované buňky MeSH
• mastocyty cytologie   imunologie   metabolismus   MeSH
• membránové proteiny genetika   imunologie   MeSH
• messenger RNA genetika   MeSH
• myši inbrední BALB C MeSH
• myši MeSH
• receptory IgE imunologie   MeSH
• upregulace MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Anafylaktické reakce jsou v převážné míře způsobeny aktivací vysokoafinitního receptoru pro IgE (FcεRI) na povrchu bazofilů a ž írných buněk (tzv. klasická dráha), popřípadě aktivací nízkoafinitního receptoru pro IgG na povrchu makrofágů (tzv. alternativní dráha). Zde se více zaměříme na dráhu klasickou. Agregace FcεRI sama o sobě spouští signa lizační kaskády zahrnující desítky molekul; navenek se projevuje ze jména vylitím obsahu cytoplazmatických granulí obsahujících řadu proteáz, důležitým jevem je rovněž uvolnění histaminu. Často podceňovanou sk utečností je možnost aktivace bazofilů přes řadu dalších receptorů mě nících intenzitu signálu induko vanou agregací FcεRI, jde o CD28, CD1 37, CD226, Toll-like receptory, integriny apod. Některé povrchové molekuly jsou dokonce schopny aktivovat bazofily i při absenci souběžné aktivace FcεRI, patří mezi ně c-kit, Thy-1, C3a receptor, apod. V klinickém či preklinickém užití je již celá řada inhibitorů nežádoucí aktivac e bazofilů při anafy- laxi. Mezi jinými to jsou inhibitory tyrosinových kináz – Gleeve c, dasatinib, či semaxinib. Nadějné je využití humanizovaných m onoklonálních protilátek, fúzních proteinů a zejména epitopově-specifických peptidů zvaných mimotopy.

Anafylactic reactions are mostly caused via the activation of the high affinity IgE receptor (FcεRI) on the surface of basophils and mast cells (classical pathway), or via the activation of the low affinity IgG receptor on the surface of macrophages (alternative pathway). Here we will focus on the classical pathway. Aggregation of FcεRI itself initiates signalization cascades involving tens of proteins, among the ph ysiological effects are degranulation and histamine release. Frequently underscored is the possibility of activation of basophils via number of surface receptors (CD28, CD137, CD226, Toll-like receptors, and integrins, etc.) modulating inte nsity of signal induced by FcεRI aggregation. Some surfa ce molecules (c-kit, Thy-1, C3a receptor, etc.) are even able to activate basophils in absence of the parallel FcεRI aggregation. In clinica l or preclinical use is a number of inhibitors of unwanted activation of basophils du ring anaphylaxis. Among them are inhibitors of tyrosine kinases – Gleevec, da- satinib, or semaxinib. Promising are also humanized monoclonal antibodies, fusion proteins and above all the epitope-specific p eptides called mimotopes.

• MeSH
• anafylaxe imunologie   patofyziologie   MeSH
• bazofily chemie   imunologie   MeSH
• faktory aktivující makrofágy chemie   imunologie   MeSH
• financování organizované MeSH
• lidé MeSH
• mastocyty chemie   imunologie   MeSH
• molekulární biologie metody   trendy   MeSH
• monoklonální protilátky imunologie   izolace a purifikace   terapeutické užití   MeSH
• receptory IgE imunologie   MeSH
• toll-like receptory genetika   imunologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

Stav problematiky: Psoriáza je v posledních letech stále více vnímána jako onemocnění zprostředkované T-lymfocyty možné autoimunitní povahy. Dendritické buňky, zejména exprimující FXIIIa, představují buněčnou populaci, která, vzhledem k tomu, že je v psoriatické lézi výrazně zmnožená a schopná aktivace T-lymfocytů, může hrát roli v patogenezi psoriázy. U psoriázy popsané poruchy bazální membrány mohou přispívat k průniku buněk do epidermis, které v ní za normálních podmínek nejsou přítomny. Cíle: Ověřit přítomnost dendritických CD1a-/FcεDR+CD68+FXIIIa+ buněk v epidermis a kori u psoriatické léze, okolní nepostižené kůži a srovnat, zdali se vyskytují i u jiných dermatóz, u zdravýchjedinců či jsou charakteristické pro psoriázu. Sledovat, zda případné poruchy bazální membrány mají vztah k přítomnosti těchto buněk.Metody: Pomocí jednoduchého i dvojitého imunobarvení imunofluorescenční metodou za použití značených protilátek byla hodnocena přítomnost těchto buněk u pacientů s psoriázou, morfeou,systémovou sklerodermií a atopickým ekzémem. Výsledky: Potvrdila se přítomnost dendritických CD1a+/FcεDR+CD68+FXIIIa+ buněk v epidermispouze u psoriázy. Poruchy integrity bazální membrány pomocí imunofluorescenční metody nebylypozorovány.Závěr: Přítomnost dendritických CD1a-/FcεRI-DR+CD68+FXIIIa+ buněk v epidermis psoriázy a jejich absence u ostatních sledovaných dermatóz podporují hypotézu o jejich patogenetické, zatím blíže neurčené, roli v patogenezi psoriázy. Neprokázané změny bazální membrány mohou být důsledkem volby příliš hrubé metody pro jejich detekci.

Background: In the last years, psoriasis is by a greater number of authors considered as T-cellmediated disease of autoimmune nature. Dendritic cells, namely these expressing FXIIIa, representone of the three most proliferative cell population in psoriatic lesional skin. Because these cells arecapable to present antigen to T-cells, it is probable, that they can play a role in the pathogenesis ofpsoriasis. In the literature described alterations of epidermal basement membrane structures canbe the basis of penetration of such cell subtypes in the epidermis, which, under normal conditions,there are not present.Objective: To verify if the presence of dendritic CA1a-/FcεRI-DR+CD68+FXIIIa+ cells in the psoriaticlesional epidermis and dermis, in comparison with perilesional psoriatic skin and other dermatosisand healthy control, is characteristic feature of psoriasis. To verify if the potential alterationsof epidermal basal membrane integrity are in relation to the presence of this subtype of dendriticcells.Methods: Simple and double-labelling imunofluorescence technique with the use of labelledantibodies were used in identification of these cell subtypes in patients with psoriasis, morphea,systemic scleroderma, atopic eczema and healthy controls. Results: Dendritic CD1a-/FcεRI-DR+CD68+FXIIIa+ cells were present only in the psoriatic epidermis.Alterations of epidermal basement membrane were not found.Conclusions: The presence of dendritic CD1a-/FcεRI-DR+CD68+FXIIIa+ cells in the psoriaticepidermis and their absence in the epidermis of other investigated dermatoses support the hypothesisof their, otherwise not specified, pathogenetic role in the pathogenesis of this disease. Alterationsof the epidermal basement membrane integrity were not confirmed, probably because of notsufficiently sensitive technique used for its detection.

• MeSH
• atopická dermatitida diagnóza   MeSH
• bazální membrána fyziologie   MeSH
• dendritické buňky fyziologie   krev   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• fluorescenční protilátková technika metody   MeSH
• lidé MeSH
• psoriáza diagnóza   etiologie   MeSH
• systémová sklerodermie diagnóza   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH
• srovnávací studie MeSH

Aggregation of the high-affinity receptor for IgE (FcεRI) in mast cells initiates activation events that lead to degranulation and release of inflammatory mediators. To better understand the signaling pathways and genes involved in mast cell activation, we developed a high-throughput mast cell degranulation assay suitable for RNA interference experiments using lentivirus-based short hairpin RNA (shRNA) delivery. We tested 432 shRNAs specific for 144 selected genes for effects on FcεRI-mediated mast cell degranulation and identified 15 potential regulators. In further studies, we focused on galectin-3 (Gal3), identified in this study as a negative regulator of mast cell degranulation. FcεRI-activated cells with Gal3 knockdown exhibited upregulated tyrosine phosphorylation of spleen tyrosine kinase and several other signal transduction molecules and enhanced calcium response. We show that Gal3 promotes internalization of IgE-FcεRI complexes; this may be related to our finding that Gal3 is a positive regulator of FcεRI ubiquitination. Furthermore, we found that Gal3 facilitates mast cell adhesion and motility on fibronectin but negatively regulates antigen-induced chemotaxis. The combined data indicate that Gal3 is involved in both positive and negative regulation of FcεRI-mediated signaling events in mast cells.

• MeSH
• aktiny metabolismus   MeSH
• buněčná adheze MeSH
• chemotaxe MeSH
• cytokiny genetika   metabolismus   MeSH
• fosforylace MeSH
• galektin 3 genetika   metabolismus   MeSH
• lyzozomy metabolismus   MeSH
• malá interferující RNA MeSH
• mastocyty cytologie   fyziologie   MeSH
• myši inbrední BALB C MeSH
• prostaglandin D2 metabolismus   MeSH
• receptory IgE genetika   metabolismus   MeSH
• signální transdukce MeSH
• ubikvitinace MeSH
• vápník metabolismus   MeSH
• vysoce účinné nukleotidové sekvenování MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• Research Support, N.I.H., Extramural MeSH