Pro posouzení změn, které nastávají v imunitním systému dětí alergických matek, u nichž je genetická predispozice ke vzniku alergického onemocnění, proti dětem zdravých matek, jsme sledovali rozdíly v produkci cytokinů IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, IFN-gama a TGF-beta v séru a mléce zdravých a alergických matek a v séru a stolici jejich dětí po dobu dvou let. Vzorky byly odebírány v den porodu a 4. den po porodu a dále ve 3. a 6. měsíci a 1. a 2. roce života. Děti i jejich matky byly také klinicky sledovány pro výskyt alergií. Signifikantní rozdíly mezi sledovanými skupinami byly pozorovány v produkci IL-4, IL-5, IL-6, IL- 10 a IFN -gama. IL-4 byl nalezen ve vyšší koncentraci v séru a mléce alergických matek. Množství IL-4 bylo vysoké také v séru a stolici jeich dětí, ale do druhého roku života postupně kleslo na množství srovnatelné s dětmi zdravých matek. Zvýšené množství IL-5 bylo zjištěno v séru alergických matek. V séru dětí podobný rozdíl nebyl nalezen. V mléce byl zaznamenán rozdíl v množství IL-6, kde byly zjištěny vyšší hladiny tohoto cytokinu u zdravých matek až do 3. měsíce kojení. U alergických matek bylo zjištěno vyšší množství IL-10 v séru a v mléce až do 3. měsíce kojení. IFN-gama v séru v době porodu byl vyšší u dětí zdravých matek. V 1. roce života byl zaznamenán vrchol výskytu IFN-gama v séru a stolici dětí alergických matak.

For detection of changes which occur in immune system of childr en of allergic mothers, genetically predisposed to allergic dise ases, in opposite to children of healthy mothers, we tested differences in IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, IFN-gamma and TGF-beta cytokine produc tion in sera and milk of healthy and allergic mothers and in sera and stool fi ltrates of their children for a period of 2 years. Specimens w ere collected at the day of birth, at the 4th day after delivery, then at the 3rd and 6th month and at the 1st and 2nd year of life. Children and th eir mothers were also clinically followed for occurrence of allergy. Significant differences in production of IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 and IFN-gamma were detected between groups followed. IL-4 was found in higher concentration in sera and milk of allergic mothers. IL-4 levels were also high in sera and stool filtrates of their children bu t these levels conti- nuously decreased to the levels found in samples of children of healthy mothers. Higher levels of IL-5 in sera of allergic moth ers were observed. In children sera, similar differences were not found. In milk, higher levels of IL-6 were detected in the group of healthy moth ers up to the 3rd month of breast feeding. Allergic mothers had higher levels of IL-10 in sera and milk than healthy ones up to the 3rd month of breast feeding. IFN-gamma levels at the time of delivery were higher in group of children of healthy mothers. At the 1st year of life, peak con centration of IFN- gamma in stool filtrates and children sera in allergic group were detected.

• MeSH
• alergie imunologie   MeSH
• cytokiny analýza   krev   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• imunita získaná od matky účinky léků   MeSH
• interleukin-18 analýza   MeSH
• lidé MeSH
• mateřské mléko MeSH
• matky MeSH
• novorozenec MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• novorozenec MeSH

Adenosine plays an important role during inflammation, particularly through modulation of monocyte function. The objective of the present study was to evaluate the effect of synthetic adenosine analogs on cytokine production by porcine monocytes. The LPS-stimulated cytokine production was measured by flow cytometry and quantitative real-time PCR. Adenosine receptor expression was measured by quantitative real-time PCR. The present study demonstrates that adenosine analog N-ethylcarboxyamidoadenosine (NECA) down-regulates TNF-α production and up-regulates IL-8 production by LPS-stimulated porcine monocytes. The effect was more pronounced in CD163(-) subset of monocytes compared to the CD163(+) subset. Although both monocyte subsets express mRNA for A1, A2A, A2B and A3 adenosine receptors, the treatment of monocytes with various adenosine receptor agonists and antagonists proved that the effect of adenosine is mediated preferentially via A2A adenosine receptor. Moreover, the study suggests that the effect of NECA on porcine monocytes alters the levels of the cytokines which could play a role in the differentiation of naive T cells into Th17 cells. The results suggest that adenosine plays an important role in modulation of cytokine production by porcine monocytes.

• MeSH
• adenosin-5'-(N-ethylkarboxamid) farmakologie   MeSH
• adenosin farmakologie   MeSH
• agonisté purinergního receptoru P1 farmakologie   MeSH
• antagonisté purinergního receptoru P1 farmakologie   MeSH
• antigeny diferenciační myelomonocytární metabolismus   MeSH
• CD antigeny metabolismus   MeSH
• cytokiny biosyntéza   genetika   MeSH
• lipopolysacharidy farmakologie   MeSH
• messenger RNA genetika   metabolismus   MeSH
• monocyty účinky léků   metabolismus   MeSH
• purinergní receptory P1 genetika   metabolismus   MeSH
• receptory buněčného povrchu metabolismus   MeSH
• regulace genové exprese účinky léků   MeSH
• Sus scrofa metabolismus   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Úspěšnost transplantační léčby je podmíněna kromě klinických faktorů a využití moderní farmakoterapie také genetickou predispozicí příjemce i dárce transplantátu. Úloha hlavního komplexu tkáňové slučitelnosti (MHC; HLA u člověka) pro transplantace je všeobecně uznávána. Nověji byla popsána řada dalších genů s prokázaným nebo předpokládaným vztahem k úspěšnosti transplantací (tzv. „non MHC“ polymorfismy). Do této skupiny patří také polymorfismy cytokinových genů (PCG). Tyto polymorfismy se mohou uplatňovat v patogenezi komplikací po transplantaci prostřednictvím svého vlivu na produkci a regulaci cytokinů – základních mediátorů imunitně zprostředkovaných transplantačních komplikací. Tento stručný přehled předkládá základní charakteristiku PCG a shrnuje nálezy týkající se jejich významu pro transplantace orgánů a kmenových buněk krvetvorby. Na podkladě současných znalostí je diskutováno perspektivní praktické využití poznatků o PCG v transplantační léčbě, a to zejména pro individualizaci preventivních a profylaktických opatření v souvislosti s transplantací.

Except clinical factors and advanced pharmacotherapy the overall outcome of transplantation depends also on genetic predisposition of both transplant donor and recipient. The impact of main histocompatibility complex (MHC; HLA in humans) on transplantation is widely recognized. In addition, a number of other genes with evidenced or anticipated importance for transplantation outcome has recently been described („non MHC“ polymorphisms). This group of genes comprises also polymorphisms in cytokine genes (PCG). Cytokines are the key mediators of immune-mediated transplant complications, and, therefore, PCG may be implicated in the pathogenesis of transplant complications via their effect on cytokine production and regulation. Present review briefly characterises PCG and summarises findings concerning their association with organ and hematopoietic stem cell transplantation. Based on current knowledge, a perspective of practical exploitation of PCG in transplantation therapy is discussed, with emphasis to individualisation of preventive and prophylactic arrangements in transplantation.

• MeSH
• cytokiny genetika   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• genetická predispozice k nemoci MeSH
• lidé MeSH
• polymorfismus genetický MeSH
• rejekce štěpu genetika   MeSH
• transplantace hematopoetických kmenových buněk MeSH
• transplantace orgánů MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH
• srovnávací studie MeSH

• Konspekt
• Fyziologie člověka a srovnávací fyziologie
• NLK Obory
• endokrinologie
• biochemie

• MeSH
• cytokiny fyziologie   MeSH
• lymfocyty fyziologie   MeSH
• tvorba protilátek fyziologie   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie

Tato práce popisuje zavedení a optimalizaci metody umožňující analýzu produkce prozánětlivých cytokinů buňkami vrozené imunity. Diagnos-tika autoinflamatorních onemocnění, jako jsou familiární středozemní horečka (Familial Mediterranean Fever, FMF), syndrom Schnitzlerové či hyper IgD syndrom (HIDS), imunodysregulačních a autoimunitních onemocnění s autoinflamatorní složkou, je často složitá pro nespecifický klinický obraz. Přesná diagnóza je možná až genetickým vyšetřením, které však není u všech pacientů průkazné a u některých onemocnění ani není genetický původ znám. Nejasnosti v diagnostice onemocnění a rozlišení patogenetických pochodů u konkrétních pacientů ztěžují či zcela znemožňují nastavení cílené terapie, která v současné době zahrnuje i možnosti specifické blokády jednotlivých prozánětlivých cytokinů. Z tohoto důvodu jsme se zaměřili na zavedení, nastavení a optimalizaci metody, která by umožnila rychle a ekonomicky v malém množství lehce dostupného biomateriálu (periferní krve) odhalit aberantní produkci vybraných prozánětlivých cytokinů, a přispěla by tak ke správné diagnostice a výběru vhodné terapie. Produkce základních prozánětlivých cytokinů (IL-1β, IL-6, TNFα) tvořených zejména monocyty po stimulaci lipopo-lysacharidem (LPS) byla v práci testována pomocí dvou rozdílných metod – průtokovou cytometrií detekující intracelulární produkci cytokinů a metodou ALBIA (Addressable Laser Bead Immuno Assay) – Luminex, která umožňuje stanovení množství cytokinů uvolněných do superna-tantu. Na zdravých dárcích byla optimalizována délka stimulace, koncentrace LPS a čas zastavení uvolňování cytokinů z buněk Brefeldinem A.

This work aims at the introduction and optimization of methods for innate immune parameters analysis with a detailed focus on proinflammatory cytokines. Autoinflammatory diseases like Familial Mediterranean Fever (FMF), Schnitzler syndrome and Hyper-IgD syndrome (HIDS), as well as autoimmune diseases that involve the inflammatory component, are usually characterized by a non-specific clinical manifestation. Therefore, obtaining a proper diagnosis of these disorders remains complicated. Genetic examination serves as an accurate diagnostic method for the esta-blishment of monogenic autoinflammatory disease diagnosis. However, genetic profiling cannot be provided to all patients. Moreover, some of the mutations responsible for the development of the disease haven’t been defined yet. Therapy of inflammatory diseases is currently based on molecules that are capable of blocking the function of inflammatory cytokines. In inflammatory diseases, the proper understanding of disease pathogenesis is still far from satisfactory and therefore, selecting the right therapeutic treatment modality keeps causing difficulties. For this reason, we focused on the introduction and optimization of a novel method which has a potential to detect activation of inflammatory cytokines and may, therefore, contribute to the correct diagnosis and direct therapeutic strategy. Production of main proinflammatory cytokines (IL-1β, IL-6, TNFα), which are produced by monocytes after lipopolysaccharide stimulation, was tested with two different methods – flow cytometry, detecting the intracellular production of cytokines, and ALBIA (Addressable Laser Bead Immuno Assay) - Luminex method, which can detect extracellular cytokine release into supernatant. Using flow cytometry we optimized the setting by detecting the optimal time of stimulation, concentration of LPS and the optimal time to stop cytokine exocytosis after adding Brefeldin A.

• Klíčová slova
• metoda Luminex,
• MeSH
• analýza dat MeSH
• časové faktory MeSH
• cytokiny * imunologie   krev   MeSH
• horečka neznámého původu * diagnóza   genetika   imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Úvod: Makrofágy jsou buňky přirozené imunity, které hrají důležitou roli v imunitní reakci. V časných fázích zánětu jsou hlavním zdrojem prozánětlivých cytokinů. Cytokiny jsou tvořeny během interakce buněk s antigenem a hrají významnou úlohu v aktivaci i regulaci imunitní odpovědi. Cíl práce, metoda: Cílem práce bylo sledování tvorby cytokinů u tkáňové linie THP1 (monocyto-makrofágová linie lidského původu), kultivované po dobu pěti dnů s přídavkem solí kovů titanu, rtuti, chromu, kobaltu, niklu a paladia, a to z toho důvodu, že tyto kovy jsou častou součástí dentálních slitin. V případě koroze slitiny ve vlhkém prostředí dutiny ústní mohou u některých pacientů vyvolávat hypersenzitivní reakci organismu. Výsledky a závěr: Výsledkem práce bylo zjištění, že zkoumané ionty kovů mohou v různé míře ovlivňovat buňky linie THP1 ve smyslu zvýšené, ale i snížené tvorby chemotaktických faktorů, prozánětlivých cytokinů, ale i cytokinů, které se podílejí na regulaci imunitní odpovědi. Ovlivnění jejich tvorby po expozici kovům v podmínkách in vivo může vést k rozvoji nežádoucí reakce na kovové materiály. Klíčová slova: cytokiny – makrofágy – multiplexové stanovení – koroze – dentální slitiny

Introduction: Macrophages, the cells of the innate immunity play the significant role in immune reactions. In the early stages of inflammatory processes they are the main source of pro-inflammatory cytokines. Cytokines are produced during the interaction of cells with antigen and play an important role in the activation and regulation of immune response. Aim and Method: Our study aimed at exploring their production in a cell line THP1 (monocyte-macrophage cell line of human origin), cultivated for five days with an addition of salts of titanium, mercury, chromium, cobalt, nickel and palladium, which are frequent components of dental alloys. In the case of corrosion in the oral cavity environment these alloys can evoke in some patients a hypersensitive response. Results and Conclusion: The ions under study were found to affect the cells of the THP1 line to different extents, giving rise to a lowered but also enhanced production of chemotactic factors, pro-inflammatory cytokines and also cytokines participating in the regulation of the immune response. The influence of their production after exposition to metals can then lead to the development of an undesirable response to dental alloys. Key words: cytokines – macrophages – multiplex assay – corrosion – dental alloys

• MeSH
• buněčná imunita MeSH
• chemotaktické faktory MeSH
• cytokiny * MeSH
• fyziologie buňky * MeSH
• ionty MeSH
• klinické laboratorní techniky MeSH
• kovy * MeSH
• kultivované buňky * MeSH
• lidé MeSH
• makrofágy * fyziologie   imunologie   MeSH
• statistika jako téma MeSH
• zubní slitiny * MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• MeSH
• cytokiny terapeutické užití   MeSH
• denzitometrie metody   využití   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• kostní denzita MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom MeSH
• tumor nekrotizující faktory diagnostické užití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• srovnávací studie MeSH

Východisko. Kardiochirurgická operace vyvolává zánětovou odpověď, která zahrnuje regulační mechanizmy omezující potenciálně poškozující složky zánětu. Jedním z důležitých regulačních mechanizmů je tvorba protizánětových cytokinů, např. IL-10. Metody a výsledky. Porovnali jsme sérové hladiny cytokinů IL-10, IL-6 a IL-13 u nemocných podstupujících kardiochirurgickou operaci s použitím kardiopulmonálního bypasu (CPB, n=17 osob) nebo operovaných na bijícím srdci (n=17 osob). Podařilo se nám prokázat významně zvýšenou tvorbu protizánětového cytokinu IL-10 již v průběhu operace s vrcholem bezprostředně po operaci u kardiochirurgických nemocných operovaných s použitím CPB. U nemocných operovaných na tepajícím srdci jsou změny sérových hladin IL-10 významně vyšší po operaci s vrcholem v první pooperační den. Bezprostředně po operaci je hladina IL-10 u nemocných s CPB řádově vyšší v porovnání s nemocnými bez CPB. U nemocných operovaných s použitím i bez použití CPB dochází k významnému zvýšení tvorby pluripotentního prozánětového cytokinu IL-6 s vrcholy po operaci s použitím CPB, respektive první pooperační den v případě operace bez CPB. Sérové hladiny cytokinu IL-13, který je zapojen do regulací aktivit subsetu TH2, jsou na hranici detekovatelnosti, nevykazují časovou závislost a neodlišují se mezi nemocnými operovanými s použitím a bez použití CPB. Závěry. Operace s použitím CPB, při kterých dochází k masivní kontaktní aktivaci humorálních i buněčných složek krve a k výrazným ischemicko-reperfúzním dějům v tkáních, stimuluje tvorbu IL-10 s protizánětovým působením.

Background. Cardiac surgical operation is followed by the development of inflammatory reaction. This reaction is regulated in many ways including the production of antiinflammatory cytokines such as IL-10 to avoid potentially harmful effects of inflammation. Methods and Results. We compared serum levels of cytokines IL-10, IL-6, and IL-13 in the group of patients undergoing cardiac surgical operation using either cardiopulmonary bypass (CPB, n=17) or surged on the beating heart (n=17). We found significant elevation in the serum level of IL-10 during surgery with the peak immediately after finishing surgery in CPB patients and at the first postoperative day in non-CPB patients, respectively. There is statistically significantly higher level of IL-10 in CPB patients in comparison with non-CPB patients at the end of surgery. Serum level of IL-6 is elevated in both groups during surgery reaching maximum immediately after surgery in CPB patients and at the first postoperative day in patients without CPB, respectively. The serum levels of IL-13 are only nonsignificantly changed during operation and in postoperative period in both groups. Conclusions. The intensity of inflammatory response in CPB patients which is enhanced by massive contact activation of blood and extensive ischemia-reperfusion injury is regulated by the production of antiiflammatory IL-10 cytokine.

• MeSH
• biologické markery krev   MeSH
• cytokiny analýza   imunologie   krev   MeSH
• dospělí MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• imunitní systém patofyziologie   MeSH
• interleukin-10 imunologie   krev   metabolismus   MeSH
• interpretace statistických dat MeSH
• kardiochirurgické výkony metody   škodlivé účinky   využití   MeSH
• kardiopulmonální bypass metody   statistika a číselné údaje   využití   MeSH
• klinické laboratorní techniky využití   MeSH
• lidé MeSH
• zánět imunologie   krev   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH

The existence of a restrained inflammatory state in schizophrenic individuals posed the question whether anti-inflammatory drugs may exert antipsychotic effects. Therefore, the effect of ibuprofen (IB) on cytokine production by human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from schizophrenic patients was examined and compared to that of healthy subjects. PBMC from 25 schizophrenic patients and 24 healthy volunteers were incubated for 24 h with lipopolysaccharide (LPS) in the absence or presence of various concentrations of IB. The levels of IL-1β, IL-6, TNF-α, IL-10 and IL-1ra in the supernatants were tested applying ELISA kits. The secretion of TNF-α by cells from schizophrenic patients was significantly lower compared with controls. IB caused stimulation of TNF-α and IL-6 production by cells of the two groups and enhanced IL-1β secretion by cells from schizophrenic patients. IB inhibited IL-1ra and IL-10 generation by cells from the two groups. Without IB, IL-1ra secretion was negatively correlated with the disease severity, while 200 μg/ml of IB positively correlated with the PANSS total score. IL-10 production was positively correlated with the PANSS positive subscale score both in the absence or presence of IB. The findings suggest that the effect of IB on the production of inflammatory cytokines may benefit the health of schizophrenic patients.

• MeSH
• antagonista receptoru pro interleukin 1 metabolismus   MeSH
• cytokiny biosyntéza   MeSH
• dospělí MeSH
• ibuprofen farmakologie   MeSH
• interleukin-10 biosyntéza   MeSH
• interleukin-1beta biosyntéza   MeSH
• interleukin-6 biosyntéza   MeSH
• leukocyty mononukleární účinky léků   metabolismus   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mediátory zánětu metabolismus   MeSH
• mladý dospělý MeSH
• schizofrenie krev   imunologie   MeSH
• TNF-alfa biosyntéza   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mladý dospělý MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH