Cíl studie: Zhodnocení výsledků transferů jednoho embrya na souboru pacientek za dané časové období. Typ studie: Retrospektivní studie. Název a sídlo pracoviště: Sanatorium Pronatal, s.r.o., Praha. Metodika: V období leden 2008 až květen 2010 jsme hodnotili výsledky všech cyklů s přenosem jednoho embrya na našem pracovišti. Šlo o čtyři skupiny pacientek: s elektivním přenosem jednoho embrya (eSET, n=147), s přenosem pouze jediného embrya bez možnosti selekce (SET, n=269), přenos jednoho embrya získaného z nativního cyklu (NC, n=70) a s přenosem pouze jediného embrya vyšetřeného metodou preimplantační genetické diagnostiky (PGD, n=104). U všech pacientek byl sledován věk, délka kultivace embrya, klinické těhotenství/transfer (CPR/ET), těhotenské ztráty (AB) a porod zdravého dítěte (BTR). Statistické zhodnocení bylo provedeno pomocí ?2 testu. Výsledky: Ve skupině s eSET byla dosažena signifikantně vyšší úspěšnost (50% CPR/ET, p<0,001) oproti ostatním skupinám: 22% u SET, 7% ve spontánních cyklech a 18% po PGD. Signifikantní rozdíl (p<0,001) byl též při hodnocení BTR: eSET 41%, SET 16%, NC 4%, PGD 12,5%. Pacientky, u kterých byl proveden eSET, byly signifikantně mladší (p<0,001) oproti ostatním sledovaným skupinám (eSET 32,9, SET 35,2, NC 39,6, PGD 39,1). Závěr: Za úspěch asistované reprodukce považujeme porod jednoho zdravého dítěte. U žen do 38 let nesníží přenos 1 vysoce kvalitního embrya úspěšnost léčby a zcela eliminuje vícečetná těhotenství. Věk ženy a kvalita embrya jsou zásadním prognostickým faktorem.

Objective: To evaluate the results of single embryo transfers, on a set of patients, for a given period of time. Design: Retrospective study. Setting: Pronatal Sanatorium, Prague. Methods: Between January 2008 and May 2010, we evaluated the results of all cycles with single embryo transfers in our workplace. There were four groups of patients: the first group with elective single embryo transfers (ESET, n=147), the second group with only a single embryo transfer without selection (SET n=269), the third group with transfer of one embryo derived from the native cycle (NC, n=70) and the last group with transfer of only one embryo examinated by preimplantation genetic diagnosis (PGD, n=104). All patients were monitored by age, length of cultivation of embryos, clinical pregnancy rate / transfer (CPR / ET), pregnancy loss (AB) and baby take home rate (BTR). Statistical evaluation was performed using the chi square test. Results: The group with ESET achieved a significantly higher success rate (50% CPR / ET, p <0.001) compared to the other groups: 22% for SET, 7% of spontaneous cycles and 18% after PGD. A significant difference (p <0.001) was also apparent in the evaluation of BTR: ESET 41%, 16% SET, NC 4%, 12.5% of PGD. Patients that made ESET were significantly younger (p <0.001) compared to the other monitored groups (32.9 ESET, SET 35.2, NC 39.6, 39.1 PGD). Conclusion: We consider that assisted reproduction is only successful with the birth of one healthy child. For women 38 years old or younger the most successful treatment is to transfer a single high quality embryo and to therefore eliminate multiple pregnancy. The age of a woman and the quality of the embryo are major prognostic factors.

• Klíčová slova
• elektivní embryotransfer, jednočetné těhotenství,
• MeSH
• asistovaná reprodukce MeSH
• interpretace statistických dat MeSH
• lidé MeSH
• přenos embrya metody   využití   MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• statistika jako téma MeSH
• těhotenství mnohočetné MeSH
• těhotenství MeSH
• věkové faktory MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• těhotenství MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Krykonzervace umožňuje reverzibilně zastavit vývoj preimplantačních embryí, která pak mohou být v tomto stavu dlouhodobě uchovávána. Její technika byla propracována na laboratorních hlodavcích a byla úspěšně zavedena do procesu reprodukce hospodářských zvířat. Úspěchy ve veterinární medicíně vzbudily zájem o užití této reprodukční technologie v humánní medicíně, neboť zdokonalování ovariální stimulace vedoucí k zisku velkého počtu preovulačních oocytů a tudíž transferu velkého počtu embryí v jednom cyklu nese s sebou určitá rizika. Jednou z výhodných možností jak tato rizika omezit je kryokonzervace. Někteří autoři předpokládají, že zavedení kryokonzervace do programu in vitro fertilizace (IVF) zlepší jeho úspěšnost o dalších 8-12 % (8). V této práci uvádíme naše první zkušenosti s touto metodikou.

We present our first experience with human embryo cryopreser- vation. In our hands the best results were obtained with cryopreservation of pro- nuclear-staged embryos using propanediol as cryoprotectant. In this group 3 embryos out of 4 continued their development after thawing. The advantages of embryo cryopreservation in IVF programs are discussed.

• MeSH
• embryo savčí MeSH
• infertilita terapie   MeSH
• kryoprotektivní látky MeSH
• lidé MeSH
• přenos embrya MeSH
• techniky in vitro MeSH
• transplantace MeSH
• uchovávání tkání metody   MeSH
• zmrazování MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Text reflektuje skutečnost, že preimplantační genetická diagnostika poskytuje naději na zdravé dítě i takovým párům, u kterých více pokusů o zdravého potomka selhalo. V rámci tohoto vyšetření embryí se však dozvídáme také informaci o pohlaví. Tento fakt by neměl být zneužíván k realizaci přání o narození chlapce, nebo děvčete. Nechtěná, přestože zcela zdravá embrya jsou totiž likvidována.

The manuscript reflects the fact that pre-implantation genetic diagnosis provides hope for a healthy child even for couples who have failed several times to have a healthy descendant. However, as part of this examination of the embryos, we also learn information about the sex. This fact should not be abused to realize the wish for the birth of a boy or a girl. Although completely healthy, unwanted embryos are disposed.

• MeSH
• asistovaná reprodukce * etika   MeSH
• genetické testování etika   metody   MeSH
• lidé MeSH
• pohlaví * MeSH
• preimplantační diagnóza etika   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Text reflektuje skutečnost, že preimplantační genetická diagnostika poskytuje naději na zdravé dítě i takovým párům, u kterých více pokusů o zdravého potomka selhalo. V rámci tohoto vyšetření embryí se však dozvídáme také informaci o pohlaví. Tento fakt by neměl být zneužíván k realizaci přání o narození chlapce, nebo děvčete. Nechtěná, přestože zcela zdravá embrya jsou totiž likvidována.

The manuscript reflects the fact that pre-implantation genetic diagnosis provides hope for a healthy child even for couples who have failed several times to have a healthy descendant. However, as part of this examination of the embryos, we also learn information about the sex. This fact should not be abused to realize the wish for the birth of a boy or a girl. Although completely healthy, unwanted embryos are disposed.

• MeSH
• asistovaná reprodukce etika   trendy   MeSH
• infertilita klasifikace   MeSH
• pohlaví MeSH
• preimplantační diagnóza etika   MeSH
• prenatální diagnóza etika   MeSH

Clorgylin je špecifický inhibitor enzýmu monoamínooxidáza A (MAO-A), ktorý je zodpovedný za metabolizmus noradrenalínu, serotonínu a dopamínu. Samice potkana Wistar sme náhodne rozdelili do skupín: 1) kontrolná, 2) nízka dávka clorgylínu, 3)vysoká dávka clorgylínu. Po ukončení aplikácie boli zvieratá pripúšťané so samcami a na 5. deň gravidity usmrtené letálnou dávkou tiopentalu. Embryá boli vypláchnuté z rohov maternice a zatriedené do jednotlivých vývinových skupín. Blastocysty a moruly sme dofarbili pomocou DAPI. Zvieratá po aplikácii nízkej dávky clorgylínu malí sice najvyšší počet izolovaných ale zároveň aj najvyšší počet degenerovaných embryí. U zvierat po vysokej dávke clorgylínu sme zase zistili najvyšší počet buniek v blastocystách. Zmeny hladín noradreninalínu. serotonínu a dopamínu môžu teda výrazne ovplyvňovať vývin nového jedinca už od jeho najranejšíďch štádií.

Clorgyline is a specific inhibitor of monoamine oxidase A (MAO-A), which is responsible for the degradation of the noradrenalin, serotonin and dopamine. Females of the Wistar rats were divided into the three groups: 1) controls, 2) animals after the low dose of the clorgyline, 3) animals after the high dose of the clorgyline. After the treatment were females mated with the males and on the 5th day of the pregnancy killed by the lethal dose of the tiopental. Embryos were flushed out from the horns of the uterus and divided into the developmental groups by the morphological examination. Blastocysts and morulae were stained with the DAPI. We have found that females from the group after the low clorgyline dose had the higher number of isolated embryos per female but also the higher number of the degenerated embryos. In the group with the high clorgyline dose we have found the higher numbers of cells in the blastocysts. From our results is clear that disturbed levels of noradrenalin, serotonin and dopamine can influence the new individual from its most early stages of the development.

• Klíčová slova
• preimplantačné embryo, clorgyline, MAO,
• Publikační typ
• abstrakty MeSH

Úvod: Účastníci 22. sympozia asistované reprodukce konaného v listopadu 2012 v Brně se v rámci pracovního obědu zabývali některými aktuálními tématy asistované reprodukce. Řešená témata: Více než 150 účastníků diskutovalo u kulatých stolů o 10 tématech, jejichž obsahem bylo:1. IVF v nativním cyklu AR, 2. sledování dynamiky vývoje embryí, 3. hodnocení a podpora receptivity endometria,4. zvýšení počtů elektivního single embryo transferu (eSET), 5. transport gamet a embryí v ČR a mezi ČR a zahraničím, 6. národní registr asistované reprodukce,7. nový pohled na patologie spermatu, 8. problémy s členskou evidencí SAR, 9. problematika surogátního mateřství a 10. preimplantační genetická diagnostika. Závěr: Všechny závěry byly prezentovány v odpoledním bloku. Některá témata přinesla konkrétní výsledek. Některá nebylo možné jednoznačně uzavřít a budou předmětem dalších jednání. Stručný souhrn závěrů jednotlivých diskusí je shrnut v této práci.

Introduction: Participants of the lunch table discussion held during the 22nd symposium of assisted reproduction in Brno discussed some current topics of assisted reproduction. Discussed topics: More than 150 participants at round tables discussed 10 topics: 1. IVF in native AR cycle,2. observation of the embryo development dynamics, 3. evaluation and support of endometrial receptivity,4. increased number of elective single embryo transfers (eSET), 5. transport of gametes and embryos in the Czech Republic and between the Czech Republic and abroad, 6. National registry of assisted reproduction,7. new view on sperm pathology, 8. problems with the SAR membership records, 9. surogacy motherhood and 10. preimplantation genetic diagnosis and preimplantation genetic screening. Conclusions: All findings were presented in the afternoon session. Some of the topics brought concrete results. Some topics could not be clearly concluded and will be the subject of further discussions. A brief summary of those discussion conclusions presents this paper.

• MeSH
• asistovaná reprodukce * MeSH
• embryo savčí MeSH
• kongresy jako téma MeSH
• přenos embrya MeSH
• reprodukční lékařství MeSH

Cíl studie: Naší snahou bylo vypracovat jednoduchou metodu pro kvantitativní hodnocení morfologieoocytů a embryí v programu in vitro fertilizace (IVF) s cílem zkvalitnění predikce implantačníschopnosti embryí s možností stanovení optimálního počtu transferovaných embryí prodaný případ. Ve studii se zabýváme jednou strukturou, která je zajímavá svojí jedinečností prooocyt a preimplantační embryo – zona pellucida (ZP). Práce je součástí plánovaného komplexníhovýzkumu morfologie oocytu, vzniklézygo ty a embrya.Typ studie: Prospektivní studie.Název a sídlo pracoviště: Oddělení asistovanérep rodukce, Gynekologicko-porodnická klinika, UK,LF a FN v Plzni.Metodika: Práce zahrnuje analýzu celkem 66 mikrofotografií oocytů, zygot a embryí celkem 10pacientek, kterépod stoupily léčbu neplodnosti metodou IVF na našem pracovišti v období září ažprosinec 2000. Mikrofotografie oocytů a embryí byly pořízeny pomocí digitálního mikrofotografickéhosystému. Analýza parametrů zona pellucida byla provedena pomocí programového vybavenípro zpracování obrazu AnalySIS, Soft Imaging System GmbH.Výsledky: Byla zjištěna průměrná tloušťka ZP 18,4 mm±2,1 mmsminimem 12,3 mma maximem23,1 mm.Závěr: U žen, které v daném IVF cyklu otěhotněly, byla zjištěna u oocytů, zygot a následně transferovanýchembryí statisticky významně užší zona pellucida než u žen, kteréneotě hotněly.

Objective: Our aim was to design simple method for quantitative evaluation of oocyte and embryomorphology in in vitro fertilization (IVF) programme efforting of embryo implantation predictionto be able to set the optimal number of embryos for transfer for given specific case. This studydeals with zona pellucida (ZP) – the one interesting and for oocyte unique structure. The work isthe part of comprehensive research of oocyte, zygote and embryo morphology.Design: Prospektive study.Setting: Center of Assisted Reproduction, Department of Gynaecology and Obstetrics, MedicalFaculty of Charles University, Pilsen.Methods: The study includes analysis of 66 microphotography pictures of oocytes, zygotes andembryos of patients who were treated by IVF on our department between September and December2000. The microphotographs were taken by digital microphotographic system. Analysis of zona pellucida parameters was conducted by image analysis software called AnalySIS, Soft ImagingSystem GmbH.Results: It was found out the average widht of the zona pellucida 18.4 mm ± 2.1 mm, the minimumwidth was 12.3 mm a maximum 23.1 mm.Conclusion: There was found significant narrower zona pellucida in women who conceived in thisIVF cycle then in the women who did not.

• MeSH
• embryo savčí anatomie a histologie   embryologie   MeSH
• fertilizace in vitro MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• lidé MeSH
• oocyty anatomie a histologie   MeSH
• reprodukční lékařství MeSH
• reprodukční techniky MeSH
• zona pellucida MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Preimplantační genetická diagnostika představuje soubor genetických nebo cytogenetických vyšetření, pomocí kterých můžeme odhalit genetické abnormality embrya před jeho přenosem do dělohy matky. I v této oblasti se začínají využívat moderní genomické technologie založené na DNA mikročipech. Cílem práce je informovat o možnostech i prvních zkušenostech s celogenomovým vyšetřením chromozomových abnormalit v buňkách trofoektodermu pětidenních embryí pomocí techniky single cell array-CGH (komparativní genomová hybridizace na mikročipech) s využitím 60-merové oligonukleotidové platformy DNA mikročipů CytoSure 8 × 15 K Aneuploidy Array. I když byla tato platforma původně vyvinuta pro genetická vyšetření prováděná na neamplifikované DNA, současné pokroky v oblasti genomiky jedné buňky umožnily využít tuto technologii v oblasti preimplantačních genetických analýz. Metoda single cell array-CGH byla validována testováním 30 negativních a pozitivních kontrol, tj. amplifikací a následným vyšetřením DNA izolované z 5–10 buněk s normálním karyotypem a ze vzorků buněk se známými početními i strukturními abnormalitami chromozomů. Následně jsme úspěšně amplifikovali a vyšetřili vzorky 118 embryí a detekovali aneuploidie u 26,7 % a segmentální nebalancované změny u 6,8 % embryí. Naše zkušenosti potvrzují, že oligonukleotidové platformy DNA mikročipů s vysokým rozlišením jsou vhodné jak pro preimplantační genetický screening aneuploidií všech 23 párů chromozomů embrya, tak pro citlivou preimplantační diagnostiku segmentálních nebalancovaných aberací typu delecí, duplikací či amplifikací.

Preimplantation genetic diagnosis (PGD) is a complex approach for detecting genetic abnormalities in early-stage embryos using genetic or molecular cytogenetic methods. Recently, single cell genomic methods based on DNA microarrays have been used for PGD. In the presented paper, we discuss and demonstrate the possibility to detect copy number variation (CNVs) in trophectoderm cells biopsied from 5-day embryos using 60-mer oligonucleotide-based array-CGH with CytoSure 8 × 15K Aneuploidy Array. Whereas this microarray platform was originally designed for analysis of unamplified DNA derived from many cells, the new methods, developed for single-cell genomics, allow the application of oligo arrays technology in preimplanation genetic diagnosis. Preclinical validation of single cell array-CGH was made by analysis of 30 positive and negative controls. Validation process included whole genome amplification of DNA from 5–10 cells with normal karyotype and from samples with known aneuploidies and structural aberrations. Subsequently, we analyzed the whole genome profiles in 118 embryos; aneuploidies of chromosomes were observed in 26.7%; segmental imbalances were proved in 6.8% of embryos. Our first experience confirmed that this oligonucleotide-based array technique enables high-resolution preimplantation aneuploidy screening of all the 23 chromosome pairs and sensitive preimplantation diagnosis of segmental imbalances such as deletions, duplications and amplifications.

• MeSH
• asistovaná reprodukce MeSH
• chromozomální aberace MeSH
• DNA analýza   MeSH
• embryo savčí MeSH
• embryonální vývoj MeSH
• fertilizace in vitro MeSH
• genetická predispozice k nemoci embryologie   prevence a kontrola   MeSH
• genetické testování * metody   přístrojové vybavení   trendy   MeSH
• implantace embrya genetika   MeSH
• lidé MeSH
• molekulární biologie trendy   MeSH
• preimplantační diagnóza * metody   trendy   MeSH
• sekvenční analýza hybridizací s uspořádaným souborem oligonukleotidů * MeSH
• srovnávací genomová hybridizace trendy   MeSH
• trizomie MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

Cíl studie: Cílem této práce je shromáždit aktuální informace o možnostech preimplantačního genetického screeningu a diagnostiky. Typ studie: Souhrnný článek. Název a sídlo pracoviště: Gynekologicko-porodnické oddělení Nemocnice Šternberk, IVF Clinic Olomouc. Výsledky: Preimplantační genetické testování představuje soubor genetických a molekulárně cytogenetických vyšetření, s jejichž pomocí můžeme odhalit abnormality embrya ještě před jeho přenosem do dělohy matky. Toto specializované vyšetření vychází z nejnovějších poznatků genetiky a asistované reprodukce. Preimplantační genetické testování je nutně spojeno s metodou in vitro fertilizace a provádí se na izolovaných blastomerách třetí den kultivace embrya. V současnosti však bývá preferováno vyšetření buněk trofoektodermu z pětidenních blastocyst. Obecně lze konstatovat, že po provedení preimplantačního genetického testování lze k transferu do dělohy vybrat pouze embrya bez genetické zátěže. Závěr: Preimplantační genetické testování je v současné době důležitou součástí léčby neplodnosti. Komplexní diagnostika a léčba neplodných párů je stále více ovlivňována rozvojem a využitím moderních genomických technologií. Další rozvoj a aplikace těchto metod vyžaduje úzkou spolupráci mezi obory asistované reprodukce a klinické genetiky.

Objective: The aim of this work is to summarize the current knowledge about preimplantation genetic screening and diagnostics. Design: A review article. Setting: Department of Gynecology and Obstetrics, District Hospital Šternberk, IVF Clinic, Olomouc. Results: Preimplantation genetic testing is a complex of genetic and molecular cytogenetic examinations, which can help to detect abnormalities in embryos before transfer into the uterus of the mother. These specialized examinations are based on the latest findings in genetics and assisted reproduction. The preimplantation genetic testing is necessarily associated with a method of in vitro fertilization. It is performed on isolated blastomeres on the third day of embryo cultivation. Nowadays, it is preferred trophectoderm examination of cells from the five-day blastocysts. Generally speaking, after preimplantation genetic testing, we can select only embryos without genetic load to transfer into uterus. Conclusion: Preimplantation genetic testing is an important part of treatment of infertility. Complex diagnostics and treatment of infertile couples are increasingly influenced by the development and use of advanced genomic technologies. Further development and application of these modern methods require close cooperation between the field of assisted reproduction and clinical genetics.

• Klíčová slova
• aCGH, karyomapping, NGS,
• MeSH
• aneuploidie MeSH
• asistovaná reprodukce MeSH
• blastocysta cytologie   patologie   MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční metody   využití   MeSH
• infertilita terapie   MeSH
• lidé MeSH
• preimplantační diagnóza * metody   MeSH
• srovnávací genomová hybridizace metody   využití   MeSH
• výzkum embrya MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• souhrny MeSH

Cílem projektu je zdokonalení nejčasnější prevence chromozomálních VVV a cystické fibrózy (CF) v preimplantační fázi vývoje ke zvýšení efektivity asistované reprodukce (AR) a prenatální prevence těchto závažných poruch prenatálního a postnatálního vývojePreimplantační screening (PGS) chromozomálních aberací zvýší úspěch IVF u žen starších, s opakovnými potraty a neúspěchy stávajících forem AR. Preimplantační diagnostika (PGD) mutací CF umožní volbu nepostiženého plodu bez nutnosti ukončení těhotenství.K detekci specifických mutací a chromozomálních aberací pro optimální volbu gamet a embryí budou využity metody molekulární cytogenetiky (FISH/PRINS, CGH), molekulární genetiky (QF-PCR, QRT-PCR, DGGE a sekvenování) a polarizační mikroskopie. Vyšetření séra těhotných žen biochemickými markery a fetální DNA/RNA zdokonalí péči o prenatální vývoj plodu a gravidity s predikcí a prevencí preeklampsie a diagnózou Rh inkompatibility a geneticky rizikového pohlaví.; The aim is improvement of prevetion of the most common chromosomal aberrations and cystic fibrosis in the preimplantation phase of development for the improvement of IVF success rates and prevention of these severe errors of prenatal and postnatal phase.Preimplantation screening (PGS) of chromosomal aberrations will improve IVF success rates in older patients, with repeated miscarriages and unsuccessful IVF. Preimplantation diagnosis (PGD) of CF mutations will circumvent the necessity for selective TOPs We will use techniques of molecular cytogenetics (e.g. FISH, PRINS, CGH) and molecular genetics (QF-PCR, QRT-PCR, DGGE and minisequencing), including polarization microscopy for detection of chromosomal aneuploidies and genomic mutations. Examination selected biochemical markers and fetal DNA/RNA will improve our care about the prenatal development of the fetus, will predict preeclampsia, diagnose Rh-incompatibility and genetic risk gender.

• MeSH
• aneuploidie MeSH
• chromozomální poruchy prevence a kontrola   MeSH
• cystická fibróza prevence a kontrola   MeSH
• embryo savčí MeSH
• fluorescence MeSH
• mutace MeSH
• preimplantační diagnóza MeSH
• reprodukční lékařství MeSH
• rozmnožování MeSH

• Konspekt
• Fyziologie člověka a srovnávací fyziologie
• NLK Obory
• reprodukční lékařství
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR