Interquinone QA- → QB electron-transfer (ET) in isolated photosystem II reaction centers (PSII-RC) is protein-gated. The temperature-dependent gating frequency "k" is described by the Eyring equation till levelling off at T ≥ 240 °K. Although central to photosynthesis, the gating mechanism has not been resolved and due to experimental limitations, could not be explored in vivo. Here we mimic the temperature dependency of "k" by enlarging VD1-208, the volume of a single residue at the crossing point of the D1 and D2 PSII-RC subunits in Synechocystis 6803 whole cells. By controlling the interactions of the D1/D2 subunits, VD1-208 (or 1/T) determines the frequency of attaining an ET-active conformation. Decelerated ET, impaired photosynthesis, D1 repair rate and overall cell physiology upon increasing VD1-208 to above 130 Å3, rationalize the >99% conservation of small residues at D1-208 and its homologous motif in non-oxygenic bacteria. The experimental means and resolved mechanism are relevant for numerous transmembrane protein-gated reactions.
- MeSH
- buněčné dýchání genetika MeSH
- elektrony MeSH
- fotosyntéza genetika MeSH
- fotosystém II (proteinový komplex) chemie genetika MeSH
- kinetika MeSH
- světlo MeSH
- světlosběrné proteinové komplexy chemie genetika MeSH
- Synechocystis chemie genetika MeSH
- transport elektronů genetika MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
OBJECTIVE: Cell therapies have emerged as a promising approach in medicine. The basis of each therapy is the injection of 1-100×10(6) cells with regenerative potential into some part of the body. Mesenchymal stromal cells (MSCs) are the most used cell type in the cell therapy nowadays, but no gold standard for the labeling of the MSCs for magnetic resonance imaging (MRI) is available yet. This work evaluates our newly synthesized uncoated superparamagnetic maghemite nanoparticles (surface-active maghemite nanoparticles - SAMNs) as an MRI contrast intracellular probe usable in a clinical 1.5 T MRI system. METHODS: MSCs from rat and human donors were isolated, and then incubated at different concentrations (10-200 μg/mL) of SAMN maghemite nanoparticles for 48 hours. Viability, proliferation, and nanoparticle uptake efficiency were tested (using fluorescence microscopy, xCELLigence analysis, atomic absorption spectroscopy, and advanced microscopy techniques). Migration capacity, cluster of differentiation markers, effect of nanoparticles on long-term viability, contrast properties in MRI, and cocultivation of labeled cells with myocytes were also studied. RESULTS: SAMNs do not affect MSC viability if the concentration does not exceed 100 μg ferumoxide/mL, and this concentration does not alter their cell phenotype and long-term proliferation profile. After 48 hours of incubation, MSCs labeled with SAMNs show more than double the amount of iron per cell compared to Resovist-labeled cells, which correlates well with the better contrast properties of the SAMN cell sample in T2-weighted MRI. SAMN-labeled MSCs display strong adherence and excellent elasticity in a beating myocyte culture for a minimum of 7 days. CONCLUSION: Detailed in vitro tests and phantom tests on ex vivo tissue show that the new SAMNs are efficient MRI contrast agent probes with exclusive intracellular uptake and high biological safety.
- MeSH
- buněčný tracking metody MeSH
- dextrany chemie farmakokinetika toxicita MeSH
- fyziologie buňky účinky léků MeSH
- kontrastní látky chemie farmakokinetika toxicita MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- magnetická rezonanční tomografie MeSH
- magnetické nanočástice chemie toxicita MeSH
- mezenchymální kmenové buňky chemie cytologie účinky léků metabolismus MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- lidé MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- srovnávací studie MeSH
Cílem předkládaného příspěvku je seznámit odbornou veřejnost s analýzou, jak skupina studentů humanitních oborů vnímá smysl života a hodnoty (tvůrčí, zážitkové a postojové) kategorizované z vlastních písemných prací v kurzu Logoterapie a existenciální analýza. Studující společně s vyučující z nich následně provedli kvalitativní obsahovou analýzu prizmatem konceptu logoterapie a existenciální analýzy. Prostřednictvím této analýzy jsou předloženy názory vybrané skupiny studujících humanitních oborů a vyvozeny důsledky pro pedagogickou praxi.
The goal of presented paper is to introduce to the public outcomes of the analysis, how students of humanities perceive meaning of life and values (creative, experiential, attitudinal) categorised on the basis of own written reflections from the course Logotherapy and existential analysis. Students and the teacher then carried out the qualitative content analysis with the prism of logotherapy and existential analysis. Through the analysis there are the opinions of the limited group of students of humanities submitted and deduced the conclusions for teaching practice.
Hereditárna neuropatia so sklonom k tlakovým obrnám (HNPP), najľahšia forma CMT choroby, sa prejavuje epizodickými rekurentnými periférnymi obrnami, ktorým často predchádza nepatrná trauma na vulnerabilných miestach. V prvej kazuistike popisujeme prípad muža s viacerými úrazmi v anamnéze, ktorý bol pôvodne poukázaný na neurologickú kliniku pre slabosť oboch rúk s atrofiami interoseálneho svalstva. Klinický a EMG nález napovedal o obojstrannej lézii n. ulnaris s blokom vedenia v oblasti sulkus n. ulnaris. Stav sme hodnotili ako bilaterálny úžinový syndróm n. ulnaris v oblasti lakťa. Neurochirur-gický výkon lakťového nervu nepriniesol očakávaný benefit. Vzhľadom na vývoj slabosti a atrofií aj na dolných končatinách neskôr suponujeme hereditárnu neuropatiu. DNA analýza potvrdila deléciu v oblasti 17p11.2, ktorá obsahuje gén pre periférny myelínový proteín 22 (PMP22). Potvrdila sa tak HNPP. Druhým prípadom je dcéra menovaného pacienta, s obrazom obojstranného syndrómu karpálneho tunela. Vzhľadom na klinický stav a rodinnú anamnézu suponujeme takisto HNPP, výsledok DNA analýzy však ešte nie je k dispozícii. Včasnou a správnou diagnostikou HNPP môžeme predísť zbytočným operačným zákrokom v oblasti úžin a pacient môže byť informovaný o svojej diagnóze, prognóze a type dedičnosti.
Hereditary neuropathy with liability to pressure palsies (HNPP), the mildest form of CMT disease, is manifested by episodic, recurrent peripheral nerve palsy, which is often preceded by history of minor trauma at vulnerable sites. In the first report we describe a case of man with history of several injuries. The patient was initially presented to the Clinic of Neurology for upper limb weakness and atrophy of interosseal muscles. Clinical and EMG findings indicated for bilateral lesion of ulnar nerves with partial conduction block in the elbow region. The condition was considered as the bilateral ulnar nerv entrapment at the elbow. Neurosurgery of ulnar nerve didn´t provide excepted benefit. Due to a development of weakness and atrophy of the legs, we consecutive supposed hereditary neuropathy. DNA analysis confirmed deletion in 17p11.2 region, that contains the gene for peripheral myelin protein 22 (PMP 22). HNPP was thus established. In the second case we describe the daughter of the above named patient, who presented with a bilateral carpal tunnel syndrome. Given the clinical and EMG findings we assumed HNPP, the result of the DNA analysis still is not available. We can avoid unnecessary surgery at the entrapment regions by the early and correct diagnosis of HNPP. The patients can thus be informed about their diagnosis, prognosis ant type of inheritance.
Známe formy dedičnej nekonjugovanej hyperbilirubinémie sú geneticky príbuzné, ale symptomatologicky a prognosticky značne odlišné poruchy metabolizmu bilirubínu. Vznikajú následkom alterácií génu UGT1A1 kódujúceho enzým bilirubín UDP-glukuronyltransferázy (B-UGT). Cieľom danej práce bolo určiť spektrum genetických zmien, ktoré sa podieľajú na ich vzniku. Pacienti a metódy: Autori analyzovali vzorky DNA od 110 nepríbuzných pacientov s Gilbertovým syndrómom a od kontrolnej skupiny 240 klinicky asymptomatických dobrovoľníkov nerómskeho a rómskeho pôvodu (120 a 120 osôb) na prítomnosť promótorovej inzercie A(TA)7TAA a substitúcie T-3279G v regulačnej oblasti génu UGT1A1. Okrem toho v dvoch nepríbuzných slovenských rodinách s Criglerovým-Najjarovým syndrómom typ I sa uskutočnila aj mutačná analýza génu UGT1A1. Výsledky: Inzercia A(TA)7TAA a substitúcia T-3279G bola prítomná v homozygotnom stave u 101 zo 110 (91,8 %) pacientov s klinicky diagnostikovaným Gilbertovým syndrómom (alelová frekvencia 0,95). V kontrolných skupinách osôb rómskeho resp. nerómskeho pôvodu sa zistila rovnaká alelová frekvencia inzercie A(TA)7TAA (q = 0,36 a p = 0,64), čomu zodpovedá aj rovnaká, 12,9% očakávaná frekvencia homozygotov pre inzerciu (A(TA)7TAA. V dvoch nepríbuzných slovenských rodinách s Criglerovým-Najjarovým syndrómom typ I sa identifikovala delécia 1220delA v 4. exóne génu UGT1A1 v homozygotnom stave (rodina A) resp. sa našli dve rôzne delécie v géne UGT1A1, a to delécia 717-718delAG v 1. exóne a delécia 1220delA v 4. exóne génu UGT1A1 (rodina B). Záver: Dostupná molekulová analýza génu UGT1A1 umožňuje exaktnú klinickú diagnostiku Gilbertovho syndrómu a je prínosom pre prenatálnu diagnostiku Crieglerovho-Najjarovho syndrómu v postihnutých rodinách.
Known forms of hereditary unconjugated hyperbilirubinemias are symptomatically and prognostically diverse defects of bilirubin metabolism caused by various alterations of the UGT1 gene, which codes for the enzyme uridine diphosphoglucuronosyl transferase. The aim of the present work was to determine the spectrum of molecular alterations that contribute to their development in Slovak population. Patients and methods: Presence of insertion A(TA)7TAA and substitution T-3279G in the regulating areas of the UGT1A1 gene was determined in DNA samples from 110 unrelated subjects with clinically diagnosed Gilbert’s syndrome and from 240 clinically asymptomatic Slovak control subjects of both Gypsy and Non-Gypsy origin (120 and 120 subjects). In addition to this, mutation analysis of the UGT1A1 gene was accomplished in two unrelated Slovak kindreds with clinically diagnosed Crigler-Najjar syndrome type I. Results: 101 of 110 (91.8%) patients with Gilbert’s syndrome were homozygotes for both the insertional A(TA)7TAA as well as the substitutional T-3279G polymorphism detected in the UGT1A1 gene (allelic frequency 0.95). The allelic frequency of the A(TA)7TAA polymorphism was identical (q = 0.36 and p = 0.64) in control subjects of both Gypsy and Non-Gypsy origin that corresponds in this population to an expected frequency of homozygotes for A(TA)7TAA insertion of 12.9 %. In one of the two unrelated Slovak kindreds with Crigler-Najjar syndrome type I we found a homozygous deletion 1220delA in exon 4 of the UGT1A1 gene (kindred A). Affected subjects from kindred B carried two different deletions (717-718delAG in exon 1 and 1220delA in exon 4) in gene UGT1A1. Conclusion: Available molecular analysis of the UGT1A1 gene has an important role for exact clinical diagnosis of Gilbert’s syndrome and contributed to prenatal diagnosis of Criegler-Najjar syndrome in affected kindreds.
- MeSH
- Criglerův-Najjarův syndrom diagnóza genetika MeSH
- dítě MeSH
- financování organizované MeSH
- Gilbertova nemoc diagnóza genetika MeSH
- glukuronosyltransferasa genetika MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- molekulární biologie metody MeSH
- mutace genetika MeSH
- novorozenecká hyperbilirubinemie diagnóza genetika MeSH
- prenatální diagnóza metody MeSH
- Romové genetika MeSH
- vrozené, dědičné a novorozenecké nemoci a abnormality diagnóza genetika MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- srovnávací studie MeSH
- Geografické názvy
- Slovenská republika MeSH
- MeSH
- DNA MeSH
- hemofilie A diagnóza genetika MeSH
- polymerázová řetězová reakce MeSH
- Publikační typ
- kongresy MeSH
- MeSH
- alkaptonurie epidemiologie genetika MeSH
- DNA primery MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- lidé MeSH
- mutace genetika MeSH
- mutační analýza DNA MeSH
- oxygenasy genetika MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Geografické názvy
- Slovenská republika MeSH
