A series of platinum(II) diiodido complexes containing 7-azaindole derivatives, having the general formula cis-[PtI2(naza)2] (1-8), has been prepared and thoroughly characterized, including X-ray structure analysis of cis-[PtI2(2Me4Claza)2]∙DMF (8∙DMF; 2Me4Claza = 2-methyl-4-chloro-7-azaindole). Complexes showed high in vitro cytotoxicity against nine human cancer cell lines (IC50 ranging from 0.4 to 12.8 μM), including the cisplatin-resistant ovarian cancer cell line (A2780R; IC50 = 1.0-3.5 μM). The results of in vivo testing, using the L1210 lymphocytic leukaemia model, at the equimolar doses of Pt with cisplatin (2 mg/kg) confirmed the activity of complex 8 comparable to cisplatin. From the mechanistic point of view, evaluated ex vivo by Western blot analyses on the samples of isolated tumour tissues, the treatment of the animals with complex 8, contrary to cisplatin, decreased the levels of tumour suppressor p53 and increased significantly the amount of intracellular anti-apoptotic protein MCL-1L (37 kDa). Additionally, the active form of caspase 3 was significantly elevated in the sample of tumour tissues treated with complex 8, indicating that the activation of p53-independent cell-death pathway was initiated. The light and electron microscopy observations of the cancerous tissues revealed necrosis as a dominant mechanism of cell death, followed by scarce signs of apoptosis. The additional results (e.g. in vitro interaction experiments with selected biomolecules, cell cycle perturbations, gel electrophoretic studies on pUC19 plasmid DNA) supported the hypothesis that the complexes might be involved in the mechanism of action quite different from cisplatin.

• MeSH
• apoptóza účinky léků   MeSH
• buněčný cyklus účinky léků   MeSH
• chemorezistence účinky léků   MeSH
• cisplatina aplikace a dávkování   MeSH
• indoly aplikace a dávkování   chemie   MeSH
• kaspasa 3 genetika   MeSH
• lidé MeSH
• molekulární struktura MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• nádorový supresorový protein p53 genetika   MeSH
• nádory vaječníků farmakoterapie   genetika   patologie   MeSH
• organoplatinové sloučeniny aplikace a dávkování   chemie   MeSH
• plazmidy účinky léků   MeSH
• proliferace buněk účinky léků   MeSH
• viabilita buněk účinky léků   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Halogenido and carboxylato Ru(II) half-sandwich complexes of the general composition [Ru(η⁶-p-cym)(dpa)X]PF₆ (1-5) were prepared and thoroughly characterized with various techniques (e.g., mass spectrometry, NMR spectroscopy and X-ray analysis); dpa = 2,2'-dipyridylamine; p-cym = p-cymene; X = Cl(-) (for 1), Br(-) (for 2), I(-) (for 3), valproate(1-) (for 4) or 4-phenylbutyrate(1-) (for 5). A single-crystal X-ray analysis showed a pseudo-octahedral piano-stool geometry of [Ru(η⁶-p-cym)(dpa)I]PF₆ (3), with a η⁶-coordinated p-cymene, bidentate N-donor dpa ligand and iodido ligand coordinated to the Ru(II) atom. The results of the ¹H-NMR solution behaviour studies proved that the complexes 1-5 hydrolyse were in the mixture of solvents used (10% MeOD-d₄/90% D₂O). Complexes 1-5 were in vitro inactive against the A2780 human ovarian carcinoma cell line, up to the highest tested concentration (IC50 > 100 μM).

• MeSH
• glutathion chemie   MeSH
• krystalografie rentgenová MeSH
• lidé MeSH
• molekulární modely MeSH
• molekulární struktura MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• nádory farmakoterapie   MeSH
• protinádorové látky chemická syntéza   chemie   MeSH
• protonová magnetická rezonanční spektroskopie MeSH
• racionální návrh léčiv * MeSH
• rozpouštědla chemická syntéza   chemie   MeSH
• ruthenium chemie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

The platinum(II) iodido complexes 1-5 of the general formula cis-[PtI2(Ln)2], where Ln stands for O-substituted 9-deazahypoxanthine derivatives, were prepared and thoroughly characterized by various techniques, including multinuclear 1D and 2D NMR spectroscopy. The complexes were screened for their anticancer potential in vitro on ten human cancer cell lines, concretely breast adenocarcinoma (MCF7), osteosarcoma (HOS), lung carcinoma (A549), cervix epithelioid carcinoma (HeLa), malignant melanoma (G-361), prostate carcinoma (22Rv1, PC-3), hepatocellular carcinoma (HepG2), ovarian carcinoma (A2780) and cisplatin-resistant ovarian carcinoma (A2780R). The complexes exhibited significant wide-spectrum anticancer activity in vitro against all the employed cell lines, with IC50≈0.5-24.0μM. Very good correlation between the lipophilicity parameter log P and IC50 values of anticancer activity in vitro were obtained by simple QSAR analysis. The most lipophilic complexes 2, 4 and 5 showed the best results, as they reached the sub-micromolar IC50 values against the A2780 and A2780R sub-lines, with the best result equal 0.5±0.1μM on A2780 for complex 5. The in vivo testing of the representative complexes 1, 4 and 5 (applied at the same dose of Pt as 2mg/kg dose of cisplatin) on a L1210 leukaemia model revealed their positive effect on the prolongation of the mean survival time, even if it was lower than that of cisplatin. The 1H NMR interaction study revealed the ability of complexes to interact with glutathione (GSH) and 5'-guanosine monophosphate (GMP) and overall higher stability of the complexes 1-5 as compared to cisplatin. The electrospray-ionization mass spectrometry experiments with complex 1 identified the formation of a rich collection of hydrolytic species in water-containing media after 24h and the interaction intermediates with sulfur-containing biomolecule l-cysteine, but not with the reduced glutathione at physiologically relevant concentration levels.

• MeSH
• apoptóza účinky léků   MeSH
• buňky Hep G2 MeSH
• HeLa buňky MeSH
• hypoxanthiny chemie   MeSH
• jod chemie   MeSH
• Kaplanův-Meierův odhad MeSH
• komplexní sloučeniny chemie   terapeutické užití   toxicita   MeSH
• lidé MeSH
• MFC-7 buňky MeSH
• myši inbrední DBA MeSH
• myši MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• nádory farmakoterapie   mortalita   patologie   MeSH
• platina chemie   MeSH
• protinádorové látky chemie   terapeutické užití   toxicita   MeSH
• screeningové testy protinádorových léčiv MeSH
• transplantace heterologní MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• myši MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Byla vypracována in vitro metoda stanovení přecitlivělosti na nikl. Lymfocyty byly stimulovány a inkubovány se síranem nikelnatým. Proliferace T lymfocytů byla stanovena pomocí protilátek proti antigenu Ki-67. Výsledky byly srovnány s epikutáními testy a se značením propidium iodidem. K ověření postupu bylo vybráno 26 pacientů podle jejich anamnézy. Bylo zjištěno, že test blastickétransformace, využívaný ke sta novení přecitlivělosti na léky a potraviny, je vhodný i pro stanovení přecitlivělosti na nikl.

An in vitro method for nickel hypersensitivity diagnostics has been developed. Lymphocytes are incubated and stimulated with nickel sulphate. T-cell proliferation was determined with anti-Ki-67 antibodies. Results were compared to epicutaneous patch test and to propidium iodide staining. To verify the procedure, 26 patients were selected according to their medical history. Our finding is that the lymphocyte transformation test used mainly for food and drugs hypersensitivity is also suitable for nickel.

• MeSH
• aktivace lymfocytů imunologie   MeSH
• antigen Ki-67 analýza   MeSH
• kontaktní dermatitida * etiologie   imunologie   MeSH
• kožní testy klasifikace   metody   MeSH
• lidé MeSH
• nikl * imunologie   škodlivé účinky   MeSH
• pilotní projekty MeSH
• průtoková cytometrie metody   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• klinická studie MeSH

V príspevku sa hodnotil vplyv troch tenzidov (karbetopendecínium halogenidov) na uvoľňovanie liečiva chlórhexidínium dichlorid (CHX) v 0,1 % (m/m) koncentrácii z liekovej formy – gél. Predmetom štúdie boli aj tokové vlastnosti gélov. Hodnotenými tenzidmi boli: karbetopendecínium bromid (SB), karbetopendecínium chlorid (SC) a karbetopendecínium iodid (SI). Koncentrácia tenzidov bola zvolená pod kritickou micelovou koncentráciou – 0,01 % (m/m). Ako gélotvorná látka bol použitý biopolymér – chitosan (CHIT) v 2,5 % (m/m) koncentrácii. Na základe štúdie tokových vlastností hodnotených gélov sa zistilo, že použité tenzidy nemali vplyv na zmenu charakteru sústavy. Gély vykazovali charakter plastických sústav s časovo nezávislým tokom. Uvoľňovanie liečiva sa sledovalo pri teplotách 20; 30 a 40 °C. Zistili sa štatisticky významné rozdiely (P < 0,05) v množstve uvoľneného CHX medzi jednotlivými typmi tenzidov. S rastúcou teplotou rástla rýchlostná konštanta uvoľňovania CHX, čo sa prejavilo aj na stúpajúcom množstve uvoľneného liečiva. Na základe dosiahnutých výsledkov bol vyhodnotený prídavok tenzidu SI ako najvhodnejší. Z gélu s obsahom tohto tenzidu sa uvoľnilo najviac CHX s najvyššou hodnotou rýchlostnej konštanty uvoľňovania.

The paper evaluates the influence of three surfactants (carbetopendecinium halogenides) on the liberation of the drug chlorhexidine dihydrochloride (CHX) in 0.1% (w/w) from the dosage form-gel and also the flow properties of gels. The following tensides were evaluated: carbetopendecinium bromide (SB), carbetopendecinium chloride (SC), and carbetopendecinium iodide (SI). The tenside concentration was set under the critical micelle concentration. The biopolymer – chitosan (CHIT) in 2.5% (w/w) concentration was used as a gel creating substance. Based on the flow properties of the studied gels, it was found that the employed tensides exhibited no influence on the character of the system. The gels exhibited the character of plastic systems with time-independent flow. The drug liberation was evaluated at the temperatures of 20, 30 and 40 °C. Between the types of the tensides, the statistically significant differences (P < 0.05) were found as to the amount of the liberated CHX, which was reflected by the increased amount of the liberated drug. Based on the obtained results, it can be concluded that the most suitable was the SI tenside. From the gel with this tenside the greatest amount of CHX was liberated, which had the highest value of the liberation rate constant.

• MeSH
• antiinfekční látky lokální MeSH
• chitosan MeSH
• chlorhexidin * MeSH
• farmaceutická technologie MeSH
• hydrogely MeSH
• kvartérní amoniové sloučeniny * chemie   MeSH
• lékové transportní systémy MeSH
• lidé MeSH
• povrchově aktivní látky MeSH
• vztahy mezi strukturou a aktivitou MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Iodine deficiency is still one of acute global public health problems. The best strategy to ensure its required amount in human population is salt fortification with potassium iodate or iodide. Food industry plays an important role in supporting good health status of consumers. Using iodized salt in meat production is not mandatory in the Czech Republic. The aim of this pilot study was to evaluate a group of salty meat products - fermented meats purchased in the Czech Republic in terms of iodine and sodium content. Totally 36 samples purchased in 9 major retail chains, produced in 9 different European countries were analyzed by spectrophotometric methods. As the results show, the use of iodinated salt was obvious only among Czech producers. The application of iodinated and marine salt does not mean that those products are a good source of iodine. Consumers should be more informed about iodine and sodium content in food. They should also be more aware about the health impact of high sodium intake. This pilot study compares iodine and sodium content in this type of meat products produced in different European countries but purchased in the Czech Republic.

• Klíčová slova
• jodovaná sůl,
• MeSH
• analýza potravin MeSH
• fermentované potraviny MeSH
• jod * nedostatek   MeSH
• kuchyňská sůl MeSH
• lidé MeSH
• masné výrobky * analýza   MeSH
• pilotní projekty MeSH
• sodík dietní MeSH
• zdravá strava MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• Geografické názvy
• Česká republika MeSH
• Evropa MeSH

Východiska: K průkazu cytotoxického efektu T lymfocytů vůči cílovým, resp. nádorovým buňkám, je standardně používán in vitro test s radioaktivním chromem 51Cr. Tento test má však určité limitace, zejména vysoké procento nespecifického pozadí, nízkou citlivost a použití radioaktivních materiálů. Vědomi si těchto limitací zavedli jsme neradioaktivní cytotoxický test s využitím fluorochromu 5-(6-) karboxyfluorescein diacetát sukcinimidyl esteru (CFSE) a propidium iodidu. Obsah a cíle práce: Cílem práce bylo ověřit cytotoxický efekt protinádorových T lymfocytů neradioaktivním testem. Metody: Ve studii byl použit model specifických T lymfocytů cytotoxických vůči nádorové linii buněk mnohočetného myelomu ARH 77. Specifické cytotoxické T lymfocyty byly získané imunomagnetickou separací na základě produkce interferonu gama a expandované na potřebné množství. T lymfocyty byly barveny CFSE a kultivovány s nádorovými buňkami ARH 77, pozdně apoptotické a nekrotické buňky byly odlišeny barvením propidium jodidem a hodnoceny pomocí průtokové cytometrie. Výsledky: Nejprve byla nalezena optimální barvicí koncentrace CFSE (1μM). Cytotoxicita byla hodnocena při poměru efektorové:terčové buňky 2:1, 10:1 a 50:1 a to po 4, 24 a 48 hodinách kultivace. Specificita expandovaných T lymfocytů byla ověřena kultivací s alogenními mononukleárními buňkami a kultivací nespecifických T lymfocytů s buňkami nádorové linie ARH 77. Závěr: Takto zavedený test cytotoxicity je cenným nástrojem pro hodnocení efektorové složky imunitního systému a účinnosti protinádorových vakcín.

Objectives: Cytotoxicity test using radioactive chromium 51Cr has been standardly used to evaluate specific cytolytic activity of T lymphocytes. This test has some significant disadvantages because of the high non-specific background caused by spontaneous release of 51Cr from target cells, low sensitivity, and health risks associated with the use of a radioactive isotope. To avoid these limitations we have introduced a cytotoxicity test using 5-(6-) karboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE) and propidium iodide (PI). Aim: The aim of this study was to evaluate cytotoxic effect of antigen-specific T lymphocyte using a non-radioactive test with CFSE and PI staining. Methods: The model of cytotoxic T lymphocytes specific to multiple myeloma cell line ARH 77 was used. Activated myeloma-specific T cells that produce interferon-γ were isolated using immunomagnetic beads and further expanded in vitro. T lymphocyte labeled with CFSE were co-cultured with ARH77 target cells. To identify target cells in late apoptosis or necrosis, PI was used and measured by flow cytometry. Results: The optimal staining concentration of CFSE has been found (1μM). Cytotoxicity has been evaluated with effector cells:target cells ratio 2:1, 10:1 and 50:1 after 4, 24 and 48 hours of in vitro cultivation. Tumor specificity has been verified by 2 sets of controls: third-party PBMC as negative control target cells and expanded CFSE-labeled interferon gamma negative fraction of T cells as negative control effector cells. Conclusion: The newly established cytotoxicity test is a valuable instrument to evaluate effector part of the immune system and efficacy of anticancer vaccines.

• MeSH
• buněčná cytotoxicita závislá na protilátkách MeSH
• cytotoxické T-lymfocyty fyziologie   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• mnohočetný myelom terapie   MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• protinádorové látky MeSH
• průtoková cytometrie využití   MeSH
• techniky in vitro MeSH

Equipment for fast and accurate detection of organophosphate nerve agents is developed and tested. The method is based on the spectrophotometric monitoring of the enzyme activity of butyrylcholinesterase after its contact with air in a special absorption unit (a “scrubber”) developed for the purpose. The scrubber was made from a glass tube filled with glass beads (diam. 3 mm) and filled with approx. 5 ml of butyrylcholinesterase in a phosphate buffer of pH 7.4. The air sample was bubbled through this solution for 20 s at a flow rate of 80 l hour-1. Thereafter 8 microl of the enzyme solution were aspirated into the micro-SIA-LOV analyzer and the activity of the enzymes were evaluated by using Ellman’s reagent, i.e. 2.5 mmol l-1 butyrylthiocholine iodide and 0.25 mmol 5,5’-dithiobis (2-nitrobenzoic acid). The absorbance of the coloured reaction product was measured at 412 nm after the reaction time of 60 s. The residue of the absorption liquid was washed away from the absorber and the system was washed with the enzyme solution prior to next analysis. The contaminated air caused partial inhibition of the enzyme activity of the absorption liquid. The activity of the contaminated sample was compared with the activity of the unaffected enzyme (blank measurement). The analysis was controlled by two PCs. The effect of the concentration of analyte in the absorption liquid on the enzyme activity was tested for 10-5-10-9 mol l-1 sarin. A single analysis (including the absorption step) took <130 s.

• MeSH
• butyrylcholinesterasa MeSH
• chemické bojové látky MeSH
• cholinesterasové inhibitory analýza   MeSH
• design vybavení MeSH
• laboratorní automatizace přístrojové vybavení   MeSH
• organofosforové sloučeniny analýza   MeSH
• průtoková injekční analýza * metody   přístrojové vybavení   statistika a číselné údaje   MeSH
• sarin * analýza   MeSH
• sekvenční analýza metody   MeSH
• spektrofotometrie metody   MeSH
• zdravotnické prostředky MeSH
• znečištění ovzduší * analýza   statistika a číselné údaje   MeSH
• Publikační typ
• hodnotící studie MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Pooperační hypoparatyreóza po paratyreoidektomiích (PTE) se jeví dle našich zkušeností se 230 výkony na příštítných tělíscích(PT) u nemocných se všemi typy hyperparatyreóz (HPT) jako závažný problém, i když v případě totální PTE standardně provádíme implantace částí tkáně, kryokonzervace a od roku 1995 i reimplantace zmrazených tkání PT. Soubory: Skupinu 1 tvoří 55 zmrazených vzorků získaných od 41 nemocných po PTE. Průměrná délka kryokonzervace byla 84±49 měsíců. Skup. 2 tvoří tzv. čerstvá tkáň PT, odebraná během PTE a uchovaná v ledové tříšti. Viabilita byla vyšetřena v určitých časových intervalech u 8 nemocných s HPT. Skup. 3 tvoří 8 kadaverozních dárců tkáně PT, která byla odebrána v rámci multiorgánových odběrů (teplá ischémie 32 min). Metodika: Vyšetření byla prováděna průtokovou cytometrií na přístrojích Coulter Epics a Becton Dickinson po desintegraci tkáně a kvantifikaci počtu buněk v suspenzi, a to pomocí propidium iodidu, který jsou viabilní buňky schopny vyloučit. U 25 zmrazených vzorků byla viabilita současně měřena metodikou pomocí trypanové modře. Histologickým vyšetřením zbytků tkáně po desintegraci a cytospinů vyšetřovaných suspenzí bylo potvrzeno, že byla vyšetřena tkáň PT. Výsledky: Zjištěná viabilita ve skup. 1 byla v průměru 36,9±24,7 %. Při měření tryp. modří byla 18,7±14,9 %. Nebyl prokázán významný vztah viability tkáně a délky kryokonzervace. Průměrná viabilita všech vzorků ve skup. 2 byla 54,2±28 %, v prvních 7 h po PTE byla 60,5±29 %, 24 h po PTE 54,9±29 % a 32-120 h po PTE 44,6±28 %. Viabilita ve 3 skup. byla 91,7±2,4 %. Mezi skupinami 1 vs.2 a mezi 2vs.3 byl zachycen statistický rozdíl p < 0,05 a mezi 1 vs.3 p < 0,001. Závěr: Nejvyšší viabilita PT byla nalezena u tkáně kadaverozních dárců, nejnižší u zmrazené tkáně bez ohledu na délku kryokonzervace.

• MeSH
• lidé MeSH
• paratyreoidea transplantace   MeSH
• paratyreoidektomie škodlivé účinky   MeSH
• přežití tkáně MeSH
• průtoková cytometrie využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• kongresy MeSH

• MeSH
• hormony štítné žlázy krev   MeSH
• jod * metabolismus   MeSH
• jodidperoxidasa * metabolismus   MeSH
• lidé MeSH
• perchloráty diagnostické užití   MeSH
• radioizotopy jodu * diagnostické užití   MeSH
• uzly štítné žlázy * enzymologie   metabolismus   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• komentáře MeSH
• souhrny MeSH