Cíl práce: Ověření diagnostické účinnosti nové metody na stanovení IgM protilátek proti VCA EBV. Porovnání záchytu těchto protilátek ve vzorcích sér od pacientů v různých stadiích infekce EBV pomocí různých sérologických metod. Materiál a metodika: Ve čtyřech různých diagnostických laboratořích byly pomocí nového testu (Viditest anti-VCA EBV IgM, Vidia, ČR) vyšetřeny soubory sér: 1) od pacientů s infekční mononukleózou, 2) od pacientů se sérologickými znaky reaktivace infekce EBV, 3) od séropozitivních jedinců bez známek aktivní infekce, 4) od séronegativních jedinců, 5) vzorky pozitivní na IgM protilátky proti jiným herpetickým virům, 6) vzorky pozitivní na revmatoidní faktor. Jako srovnávací metody byly použity testy nepřímé imunofluorescence, nepřímé ELISA (Human, SRN) a reversní ELISA (DiaSorin, Itálie). Vzorky s rozdílnými výsledky ve Viditestu a srovnávacím testu byly přetestovány v referenční laboratoři metodou nepřímé imunofluorescence a reversní ELISA. Celkem bylo hodnoceno 854 IgM-pozitivních, či IgM-negativních vzorků. Výsledky: Citlivost testu Viditest anti-VCA EBV IgM byla 94,7 % a specifita 96,1 %. Srovnávací studie stanoveni IgM protilátek proti EBV různými sérologickými metodami ukázala, že všechny tři posuzované testy jsou srovnatelně spolehlivé při vyšetření vzorků z infekčních mononukleóz. U vzorků pacientů se vzorcem protilátek charakteristickým pro reaktivace však byl však záchyt IgM protilátek proti EBV metodou nepřímé imunofluorescence výrazně vyšší, než záchyt metodami ELISA. Zjištěné titry IgM protilátek proti EBV byly v této skupině vzorků podstatně nižší, než u vzorků z primoinfekcí. Závěr. Multilaboratorni studie účinnosti soupravy ELISA-Viditest anti-VCA EBV IgM (Vidia, s. r. o.), určené ke stanovení IgM protilátek proti VCA EBV ukázala, že účinnost této soupravy je srovnatelná s účinností jiných metod, které jsou pro tyto účely u nás běžně používány, a je proto vhodná pro sérologickou diagnostiku EBV.
Objectives: To test diagnostic efficiency of a novel method for detection of IgM antibodies to VCA EBV. To compare sensitivity and specificity of detection of IgM antibodies to VCA EBV from patients at various stages of EBV infection by various serological methods. Material and Methods: IgM antibodies to VCA EBV were detected using IgM ELISA Viditest anti-VCA EBV IgM assay (Vidia, Ltd., Czech Republic) and comparative serological methods (indirect immunofluorescence assay, indirect ELISA (Human, SRN) and reverse ELISA (DiaSorin, Italy) in four independent diagnostic laboratories on panels of sera from 1) infectious mononucleosis patients, 2) patients with serological markers of EBV reactivation, 3) seropositive individuals lacking serological markers of active EBV infection, 4) seronegative individuals, 5) patients with IgM antibodies against another herpesvirus and 6) patients positive for rheumatoid factor. The sera yielding discrepant results were retested in the reference laboratory using the reference methods (indirect immunofluorescence and reverse ELISA). Overall, 854 IgM anti-VCA-positive or -negative sera were evaluated. Results: The sensitivity and specificity of the IgM Viditest anti-VCA EBV assay were 94.7 and 96.1 %, respectively. All of the three tests compared were similarly reUable in detecting IgM anti -VCA EBV antibodies in the samples from infectious mononucleosis patients. On the other hand, indirect fluorescence assay proved clearly superior to ELISAs for detection of IgM anti-VCA antibodies in the samples with serological pattern of EBV reactivation, typically showing significantly lower IgM anti-VCA titers compared with those from primary infection. Conclusions: The multilaboratory comparative study proved that the novel IgM ELISA-Viditest anti-VCA EBV assay (Vidia, Ltd., Czech Republic) which shows comparable diagnostic efficiency for detection of IgM EBV antibodies to viral capsid antigen (VCA) as compared to the other assays tested, i.e. ELISA (Human, Germany) and reverse ELISA (DiaSorin, Italy), is suitable for use in serological diagnosis of EBV.
- MeSH
- Agglutination Tests MeSH
- Child MeSH
- Feces analysis microbiology MeSH
- Gastroenteritis MeSH
- Immunologic Techniques MeSH
- Infant MeSH
- Child, Preschool MeSH
- RNA Viruses MeSH
- Virus Diseases diagnosis MeSH
- Check Tag
- Child MeSH
- Infant MeSH
- Child, Preschool MeSH
- Publication type
- Comparative Study MeSH
A new ELISA method of analysis of N,N?-diacetylspermine in urine and a test for urinary bladder cancer were developed and validated. However, the compound does not seem to be a useful marker for urinary bladder cancer.
- MeSH
- Diagnostic Techniques, Urological instrumentation utilization MeSH
- Enzyme-Linked Immunosorbent Assay history methods utilization MeSH
- Clinical Laboratory Techniques instrumentation utilization MeSH
- Clinical Trials as Topic methods utilization MeSH
- Humans MeSH
- Urinary Bladder Neoplasms diagnosis urine MeSH
- Spermine analogs & derivatives urine MeSH
- Statistics as Topic MeSH
- Check Tag
- Humans MeSH
Toxoplazmóza je infekční onemocnění, jehož původcem je parazitický prvok Toxoplasma gondii. V šíření infekčního agens hraje významnou roli kočka. Rutinní diagnostika toxoplazmózy je založena na sérologických vyšetřeních. Využívá se komplement-fixační reakce a imunoenzymatických metod (především ELISA). Primární infekce T. gondii je v akutní fázi charakterizována strmým vzestupem IgA a IgM, pozvolněji stoupá hladina IgG. Poté titry imunoglobulinů A a M postupně klesají, IgG zůstávají zvýšené (chronická toxoplazmóza). Pro latentní infekci je typická přítomnost osamocených IgG protilátek, většinou v nízkých hladinách. Existuje možnost reaktivace onemocnění a reinfekce antigenně odlišným kmenem T. gondii. Zvláštní pozornost je třeba věnovat otázce toxoplazmózy v graviditě a diagnostice infekce u novorozenců. Lymeská borelióza (LB) je především klíšťaty přenášené zánětlivé onemocnění. V ČR se jako etiologická agens uplatňují převážně druhy Borrelia afzelii a B. garinii. Děti jsou při hrách, vzhledem k těsnějšímu kontaktu s prostředím s výskytem klíšťat, vystaveny poměrně značnému riziku nákazy. Základním prostředkem diagnostiky LB jsou nepřímé metody (ELISA a Western blot) prokazující boreliové protilátky v séru, mozkomíšním moku a synoviální tekutině. Humorální reakce na boreliovou infekci je individuálně značně variabilní. Detekuje se přítomnost IgG a IgM protilátek. Výsledky sérologických testů nelze hodnotit izolovaně. Stanovení diagnózy musí vycházet především z posouzení pacientovy anamnézy a klinického nálezu, v indikovaných případech je vhodné použít přímých metod průkazu původce.
Toxoplasmosis is an infectious disease caused by a parasitic protozoon Toxoplasma gondii. In spreading of infectious agent the cat plays an important role. A routine diagnostics of toxoplasmosis is based on serological tests. Complement-fixing reaction and immunoenzymatic methods (mainly ELISA) are used. In its acute phase, primary T. gondii infection is characterized by a rapid increase of IgA and IgM, the level of IgG increases slowly. Subsequently, the titres of immunoglobulins A and M gradually decrease, IgG remains increased (chronic toxoplasmosis). Presence of isolated IgG antibodies (mostly in low levels) is typical for latent toxoplasmosis. There is a possibility of reactivation of latent toxoplasmosis and reinfection by the T. gondii strain with different antigenic characteristic. A special attention should be given to the question of toxoplasmosis in pregnancy and to diagnostics of infection in newborn. Lyme borreliosis (LB) is mostly a tick-borne inflammatory disease. In the Czech Republic, Borrelia afzelii and B. garinii are mainly seen as etiologic agents. Children playing in environment where ticks occur are in high risk of infection. The diagnostics of LB is based on indirect methods (ELISA and Western blot) determining borrelial antibodies in serum, cerebrospinal and synovial fluids. Humoral reaction to the infection is individually highly variable. The presence of IgG and IgM antibodies is detected. The results of serological tests can not be evaluated separately. The determination of diagnosis must be above all based on patient´s medical history and clinical picture. If indicated, it is suitable to detect the etiologic agent using direct methods.
- MeSH
- Agglutination Tests MeSH
- Child MeSH
- Feces analysis microbiology MeSH
- Gastroenteritis MeSH
- Immunologic Techniques MeSH
- Infant MeSH
- Child, Preschool MeSH
- RNA Viruses MeSH
- Virus Diseases diagnosis MeSH
- Check Tag
- Child MeSH
- Infant MeSH
- Child, Preschool MeSH
- Publication type
- Comparative Study MeSH
