Východiska: Režimy obsahující thalidomid a bortezomib jsou široce používané pro nově diagnostikované pacienty s mnohočetným myelomem neschopné autologní transplantace kostní dřeně. Cílem této práce bylo srovnat dlouhodobou efektivitu thalidomidového a bortezomibového režimu v dlouhém sledování. Metody: Celkově bylo mezi roky 2008 a 2012 retrospektivně analyzováno 142 pacientů s nově diagnostikovaným mnohočetným myelomem neschopných autologní transplantace. Bortezomib byl podáván ve standardním dávkování 1,3 mg/ m2 1krát týdně a thalidomid v denní dávce 100 mg. Oba léky byly kombinované s cyklofosfamidem a dexamethasonem. Celkem 95 pacientů bylo léčeno thalidomidovým režimem a 47 bortezomibovým režimem. V obou skupinách byl medián čtyři cykly léčby. Výsledky: Ve skupině s thalidomidem byla celková četnost odpovědí 60,6 %, medián přežití bez progrese (progression-free survival – PFS) byl 10,3 měsíce (95% CI 7,4– 13,2) a medián celkového přežití (over all survival – OS) 35,1 měsíce (95% CI 23,9– 46,3). Ve skupině s bortezomibem byla celková četnost odpovědí 51,1 %, medián PFS 11,9 měsíce (95% CI 8,8– 15) a medián OS 25,4 měsíce (95% CI 9,3– 41,6). Délka OS byla statisticky signifikantně delší u skupiny léčené thalidomidem (p = 0,027), ale počet dosažených léčebných odpovědí a interval PFS byl v obou skupinách srovnatelný. Medián času sledování byl ve skupině léčené thalidomidem 35,1 měsíce (95% CI 0,2– 95,9) a ve skupině léčené bortezomibem 25,1 měsíce (95% CI 0,4– 60,6), p = 0,004. Výskyt závažných nežádoucích účinků léčby byl srovnatelný v obou skupinách. Závěr: Za předpokladu krátkého trvání léčby jsou výsledky bortezomibového režimu srovnatelné s režimem thalidomidovým. Vzhledem k výsledkům ostatních klinických studií je zřejmé, že dlouhá doba léčby bortezomibem je spjata s delším přežitím bez progrese a též i přežitím celkovým.

Background: Thalidomide-and bortezomib-containing regimens are widely used for transplant-ineligible newly diagnosed multiple myeloma patients. The aim of this study was to analyse the efficiency of thalidomide-or bortezomib-based regimens in long-term follow-up. Materials and methods: From 2008 to 2012, 142 transplant-ineligible newly diagnosed multiple myeloma patients were analysed retrospectively. Bortezomib was administered at the standard dosing of 1.3 mg/m2 weekly, and thalidomide was administered at a daily dose of 100 mg. Both drugs were combined with cyclophosphamide and dexamethasone. A total of 95 patients were treated with thalidomide and 47 with bortezomib. A median four cycles of treatment were administered in both groups. Results: In the thalidomide group, the overall response rate was 60.6%, the median progression-free survival (PFS) was 10.3 months (95% CI 7.4-13.2) and the median overall survival (OS) was 35.1 months (95% CI 23.9-46.3). In the bortezomib group, the overall response rate was 51.1%, the median PFS was 11.9 months (95% CI 8.8-15) and the median OS was 25.4 months (95% CI 9.3-41.6). There was a statistically significant difference in OS (p = 0.027), favouring the cyclophosphamide/thalidomide/dexamethasone group, but the response rates and PFS intervals were not significantly different between both groups. The median follow-up in the thalidomide group was 35.1 months (95% CI 0.2-95.9) compared to 25.1 months (95% CI 0.4-60.6) in the bortezomib group (p = 0.004). The incidence of serious adverse events was comparable in both groups. Conclusion: In conclusion, the results of bortezomib treatment are comparable to thalidomide treatment under conditions of short administration. According to other clinical trials, long-term bortezomib treatment provides an additional advantage for PFS and OS.

• MeSH
• analýza přežití MeSH
• antitumorózní látky farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• bortezomib farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom * farmakoterapie   MeSH
• nežádoucí účinky léčiv MeSH
• protokoly protinádorové léčby MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• thalidomid farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Even in the era of new drugs, multiple myeloma patients with extramedullary relapse have a poor prognosis. Our goal was to analyze the frequency and outcome of extramedullary relapse occurring in relapsed multiple myeloma patients. In total, we analyzed the prognosis of 226 relapsed multiple myeloma patients treated between 2005 and 2008 and evaluated them for presence of extramedullary relapse. We found evidence of extramedullary relapse in 24% (55 of 226) of relapsed multiple myeloma patients. In 14% (32 of 226) of patients, the lesions were not adjacent to the bone, while extramedullary relapse adjacent to the bone was documented in 10% (23 of 226) of cases. Patients without extramedullary relapse had significantly longer overall survival than patients with extramedullary relapse (109 vs. 38 months; P<0.001). Moreover, patients with soft tissue-related extramedullary relapse had significantly poorer overall survival compared to bone-related extramedullary relapse patients (30 vs. 45 months; P=0.022). Also, overall survival from diagnosis was as low as five months for soft tissue-related extramedullary relapse patients when compared to 12 months overall survival for bone-related extramedullary relapse. This is the first study that shows a significant difference in prognosis for different types of extramedullary relapse. If the extramedullary myeloma infiltration was not bone-related, overall survival after relapse was extremely short (5 months).

• MeSH
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom * MeSH
• nádory kostí * patologie   sekundární   mortalita   MeSH
• nádory měkkých tkání mortalita   MeSH
• následné studie MeSH
• přežití po terapii bez příznaků nemoci MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• rizikové faktory MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Multiple myeloma still remains incurable in the majority of cases prompting a further search for new and better prognostic markers. Emerging evidence has suggested that circulating microRNAs can serve as minimally invasive biomarkers for multiple myeloma and monoclonal gammopathy of undetermined significance. In this study, a global analysis of serum microRNAs by TaqMan Low Density Arrays was performed, followed by quantitative real-time PCR. The analyses revealed five deregulated microRNAs: miR-744, miR-130a, miR-34a, let-7d and let-7e in monoclonal gammopathy of undetermined significance, newly diagnosed and relapsed multiple myeloma when compared to healthy donors. Multivariate logistical regression analysis showed that a combination of miR-34a and let-7e can distinguish multiple myeloma from healthy donors with a sensitivity of 80.6% and a specificity of 86.7%, and monoclonal gammopathy of undetermined significance from healthy donors with a sensitivity of 91.1% and a specificity of 96.7%. Furthermore, lower levels of miR-744 and let-7e were associated with shorter overall survival and remission of myeloma patients. One-year mortality rates for miR-744 and let-7e were 41.9% and 34.6% for the 'low' expression and 3.3% and 3.9% for the 'high' expression groups, respectively. Median time of remission for both miR-744 and let-7e was approximately 11 months for the 'low' expression and approximately 47 months for the 'high' expression groups of myeloma patients These data demonstrate that expression patterns of circulating microRNAs are altered in multiple myeloma and monoclonal gammopathy of undetermined significance and miR-744 with let-7e are associated with survival of myeloma patients.

• MeSH
• chromozomální aberace MeSH
• kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mikro RNA genetika   krev   MeSH
• mnohočetný myelom * diagnóza   genetika   mortalita   MeSH
• monoklonální gamapatie nejasného významu * MeSH
• nádorové biomarkery genetika   krev   MeSH
• prognóza MeSH
• progrese nemoci MeSH
• reprodukovatelnost výsledků MeSH
• ROC křivka MeSH
• sekvenční analýza hybridizací s uspořádaným souborem oligonukleotidů MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• shluková analýza MeSH
• staging nádorů MeSH
• stanovení celkové genové exprese MeSH
• studie případů a kontrol MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Mnohočetný myelom je druhé nejčastější hematoonkologické onemocnění. Je to velmi heterogenní onemocnění charakterizované komplexitou genomu, opakujícími se amplifikacemi a/nebo delecemi, které vedou k rozdílnému klinickému projevu nemoci, ale i přežití u pacientů. Zejména nové metody genomiky hrají klíčovou roli v pochopení příčin patogeneze, progrese nemoci, ale i klasifikace MM.

Multiple myeloma (MM) is the second most common hematological cancer. It is a very heterogeneous disease characterized by large genomic complexity, recurrent amplifications and/or deletions in the genome leading to different clinical manifestations and survival of patients. Thus, genomics plays an important role in identifying agents responsible for pathogenesis, prognosis and disease stratification of MM.

• Klíčová slova
• patogeneze, GEP, SNP, real-time PCR,
• MeSH
• celogenomová asociační studie MeSH
• financování organizované MeSH
• genomika MeSH
• jednonukleotidový polymorfismus MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom genetika   MeSH
• polymerázová řetězová reakce MeSH
• prognóza MeSH
• stanovení celkové genové exprese MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Přítomnost několika centrozomů v nádorových buňkách je spojena s formováním multipolárních mitotických vřetének a vede k aneuploidii dceřiných buněk. Centrozomové amplifikace jsou znakem všech nádorových buněk. Nedávno jsme popsali centrozomové amplifikace v abnormálních B buňkách. Další studium centrozomové amplifikace v různých stadiích vývoje B buněk by mohlo objasnit nové informace důležité pro patogenezi mnohočetného myelomu.

The presence of multiple centrosomes in tumor cells is associated with the formation of multipolar mitotic spindles and results in aneuploidy of both daughter cells. Centrosome amplification is a feature of all cancer cells. We have previously described centrosome amplification in abnormal B cells. Further studies of centrosome amplification in different stages of B lineage development could provide important information about multiple myeloma pathogenesis.

• Klíčová slova
• centrosomové amplifikace, B buňky,
• MeSH
• B-lymfocyty ultrastruktura   MeSH
• centrozom ultrastruktura   MeSH
• financování organizované MeSH
• fluorescenční protilátková technika metody   MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom ultrastruktura   MeSH
• plazmatické buňky ultrastruktura   MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

V tomto úvodním článku pro ostatní metodiky využívané na našem pracovišti při studiu mnohočetného myelomu a monoklonálních gamapatií jsme se zaměřili na postupy vlastního zpracování biologického materiálu, principy separace buněk a nastavené algoritmy dalších postupů. Běžně používaná metodika magnetické separace buněk MACS je vhodná pouze pro vzorky se vstupní infiltrací plazmatickými buňkami > 5 %. Pro nízce zastoupené populace buněk pak využíváme výhradně metodu fluorescencí aktivované separace FACS. Izolované plazmatické buňky jsou dále využívány pro molekulárně biologické studie, pro cytogenetická vyšetření a k proteinovým analýzám. Dále se v této práci zmiňujeme o úskalích, která souvisejí s výzkumem mnohočetného myelomu, některá z nich již umíme překonat, s jinými se zatím neúspěšně potýkáme.

In this paper, initial processing of biological material, cell separation algorithms and other procedures are discussed. For samples with initial infiltration of plasma cells > 5%, CD138 MicroBeads and Auto-Magnetic-Activated Cell Sorting program are used. Fluorescence-Activated Cell Sorting is used exclusively for cell populations with low-abundance; these samples are detected using fluorescently labeled antibodies only. Isolated plasma cells are further processed for molecular biological studies, for cytogenetics and protein analyses. Furthermore, this work examines the pitfalls of research related to multiple myeloma; some of them we have overcome, while the others are still problematic.

• Klíčová slova
• CD138, monoklonální gamapatie,
• MeSH
• banky biologického materiálu MeSH
• biomedicínský výzkum MeSH
• financování organizované MeSH
• kostní dřeň patologie   MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   MeSH
• odběr biologického vzorku MeSH
• plazmatické buňky imunologie   klasifikace   MeSH
• průtoková cytometrie metody   MeSH
• separace buněk MeSH
• syndekan-1 analýza   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

Mnohočetný myelom (MM) je onemocnění plazmatických buněk (PC), které bývá často spojeno s poruchami imunity. Fenotypizace a stanovení počtu regulačních T lymfocytů (Tregs) pomocí průtokové cytometrie může být využito k monitorování stavu imunity u myelomových pacientů. Charakterizace funkčního stavu Tregs pomocí proliferačních či inhibičních testů pak může odhalit jejich možnou poruchu. V naší studii bylo zjištěno, že u pacientů s MM jsou počty Tregs zvýšeny oproti zdravým kontrolám, což u těchto pacientů svědčí o deregulaci imunity.

Multiple myeloma (MM) is a plasma cell (PC) disorder and associated with immune impairments. Flow cytometry based phenotyping and quantification of regulatory T cells (Tregs) enable to monitor the immune status of myeloma patients. Apart from enumeration of Tregs, functional characterization using proliferation or suppression assay adds key value in demonstrating the functional value of Tregs. Our study revealed that in MM patients Tregs are elevated compared to healthy subjects, which demonstrate the immune deregulation in MM.

• Klíčová slova
• Treg buňky,
• MeSH
• financování organizované MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom imunologie   terapie   MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• regulační T-lymfocyty imunologie   klasifikace   MeSH
• thalidomid MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Mnohočetný myelom (MM) je hematologické onemocnění způsobené maligní proliferací klonálních plazmatických buněk (PCs), které se vyznačuje značnou klinickou a biologickou variabilitou. Identifikace chromozomových změn v genomu PCs hraje klíčovou roli v patogenezi MM a má také důležitý prognostický význam u pacientů s MM. Z genetického hlediska lze MM rozdělit na dva subtypy. Hyperdiploidní MM (H-MM), který se vyskytuje u 50 % případů, je charakterizován častou incidencí trizomií chromozomů 3, 5, 7, 9, 11, 15, 19 a 21 a dále nízkým výskytem translokací IgH. Téměř polovina případů je klasifikována jako non-hyperdiploidní MM (NH-MM), u kterého lze často najít jednu z pěti rekurentních translokací IgH: 4p16 (FGFR3 a MMSET), 6p21 (CCND3), 11q13 (CCND1), 16q23 (MAF), 20q12 (MAFB) a který je asociován s nepříznivou prognózou onemocnění. Rozvoj a rozšířené využívání nových technologií, jako je technika celogenomové komparativní genomové hybridizace na oligonukleotidových čipech (aCGH), výrazně posunula výzkum genomových změn u MM, jelikož umožňuje v rámci jedné reakci analýzou chromozomových změn v celém genomu, a tak představuje ideální nástroj pro studium nádorové genetiky a je vhodnou aplikací pro rutinní analýzy v klinické praxi. Technika aCGH významně překonává běžně používané cytogenetické techniky (G-pruhování, FISH), a to jak v možnostech minimálního rozlišení chromozomových změn, tak i v kvalitě a množství získaných genomických dat nezbytných pro další analýzy a klinické aplikace. Technika aCGH je nyní používána k lepšímu pochopení molekulárního fenotypu nádorových buněk, pro studium vlivu chromozomových změn na citlivost na určitá chemoterapeutika a prognózu onemocnění. Tento dokument přináší stručný metodický a literární přehled použití techniky oligonukleotidové aCGH v diagnostice MM.

Multiple myeloma (MM) is a hematological disease caused by malignant proliferation of clonal plasma cells (PCs) known for its clinical and biological heterogeneity. Identification of chromosomal changes in genome of PCs plays a key role in MM pathogenesis and is supposed to have important prognostic significance for MM patients. There are two major genetic entities in MM. Hyperdiploid tumors (H-MM), which include about 50% of MM tumors, often have multiple trisomies involving chromosomes 3, 5, 7, 9, 11, 15, 19, and 21 and a substantially lower prevalence of IgH translocations. Nearly half of tumors are non-hyperdiploid (NH-MM), and mostly have one of five recurrent IgH translocations: 11q13 (CCND1), 6p21 (CCND3), 16q23 (MAF), 20q12 (MAFB), and 4p16 (FGFR3 and MMSET). The development and expanded use of new technologies, such as genome-wide array-based comparative genomic hybridization (aCGH) has accelerated genomic research in MM. This technique is a powerful tool to globally analyze recurrent copy number changes in tumor genome in a single reaction and to study cancer biology and clinical behaviors. It widely overcame routinely used cytogenetic techniques (G-banding, FISH) both in minimal resolution of chromosomal changes and amount of obtained genomic data important for further analyses and clinical applications. Array CGH technique is now used to better understanding of molecular phenotypes, sensitivity to particular chemotherapeutic agents, and prognosis of these diseases. This paper brings brief literature and methodic overview of oligonucleotide-based array-CGH technique in MM diagnosis.

• Klíčová slova
• array-CGH,
• MeSH
• chromozomální aberace MeSH
• cytogenetické vyšetření MeSH
• cytogenetika MeSH
• financování organizované MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   genetika   MeSH
• sekvenční analýza hybridizací s uspořádaným souborem oligonukleotidů MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Nestin, marker multipotentních prekurzorových buněk, představuje významnou dynamickou strukturu, jejíž polymerizace/depolymerizace ovlivňuje intracelulární signalizaci a podílí se na řadě klíčových buněčných procesů, jako je proliferace, migrace a přežívání buněk. Předpokládá se, že nestin hraje centrální roli v procesu karcinogeneze. Nestin je považován za možný diagnostický a prediktivní indikátor malignity solidních nádorů a potenciální marker nádorových kmenových buněk. Překvapivě byl identifikován i ve zralých CD138+38+ plazmatických buňkách (PC) mnohočetného myelomu (MM). Exprese markeru kmenových/progenitorových buněk v maligních PC, které jsou považovány za terminálně diferencované, indikuje, že nestin by mohl hrát významnou roli v patologii MM.

Nestin, a marker of multipotent precursor cells, is an important dynamic structure; its polymerization/ depolymerization influences intracellular signaling and participates in key cell processes such as proliferation, migration and cell survival. It is presumed that nestin plays a central role in carcinogenesis. It is suggested that nestin might be a suitable diagnostic and prognostic indicator of malignancy and a potential marker of cancer stem cells. Unexpectedly, nestin has been identified in mature CD138+CD38+ plasma cells (PC) of multiple myeloma patients (MM). Expression of nestin, a marker of stem/progenitor cells, in malignant PC, that are considered to be terminally differentiated, indicates that nestin might play a unique role in pathology of MM.

• Klíčová slova
• flowcytometrie, iniciující buňky, myelomové kmenové buňky,
• MeSH
• financování organizované MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetný myelom diagnóza   metabolismus   patofyziologie   MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• plazmatické buňky MeSH
• proteiny intermediálních filament analýza   fyziologie   MeSH
• proteiny nervové tkáně analýza   fyziologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH