Funkční hyposplenizmus je stav provázející řadu chorob, vč. autoimunitních onemocnění a lymfomů. Hyposplenizmus se běžně vyskytuje také u celiakie (až ve 20 % nekomplikované a 80 % komplikované nemoci). Hyposplenizmus je spojen se zvýšeným rizikem závažných infekcí (Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis and Haemophilus influenzae). Cílem této prospektivní pilotní studie bylo vyšetřit paměťové B lymfocyty coby nepřímý biomarker funkčního hyposplenizmu. Bylo vyšetřeno 42 pacientů s celiakií (11 mužů, 31 žen, průměrný věk 49 ± 14 let) a 10 kontrolních osob, dárců krve (2 muži, 8 žen, průměrný věk 39 ± 7 let). Pomocí panelu DuraClone IM byly průtokovou cytometrií (Navios, Beckman Coulter) vyšetřeny jednotlivé subpopulace B lymfocytů v periferní krvi. Imunoglobulin (Ig) M a IgD paměťové B lymfocyty byly u nemocných s celiakií signifikantně nižší ve srovnání s kontrolními osobami. Dysfunkce paměťových B lymfocytů může být zodpovědná za zvýšené riziko bakteriálních infekcí u celiakie. Pacienti s celiakií s prokázanou dysfunkcí paměťových B lymfocytů jsou indikováni k pneumokokové vakcinaci.

Functional hyposplenism is a condition accompanying many diseases including autoimmune disorders and lymphomas. Hyposplenism is also commonly found in adult coeliac disease (up to 20% of non-complicated and up to 80% of complicated disease). Hyposplenism is associated with an increased risk of severe infections (Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis and Haemophilus influenzae). The aim of this prospective study was to investigate memory B lymphocytes as an indirect biomarker of functional hyposplenism. A total of 42 patients with coeliac disease (11 men, 31 women; mean age 49 ± 14 years) and 10 healthy controls, blood donors (2 men, 8 women; mean age 39 ± 7 years) were enrolled into the study. None of the patients had a history of splenectomy and none of them suffered. from immunodeficiency. The DuraClone IM panel was used to identify B lymphocytes subpopulations in peripheral blood samples by flow cytometry Navios (Beckman Coulter) with software analysis using Kaluza version 1.2. Patients with coeliac disease and controls did not differ in basic parameters of leukocyte and total lymphocyte blood count. Switched memory B lymphocytes (CD19+CD27+IgD-), non-switched memory/marginal-zone-like B lymphocytes (CD19+CD27+IgD+) and immunoglobulin (Ig) M memory B lymphocytes (CD19+CD27+IgM++) were significantly lower in patients with coeliac compared to controls. Follicular (naïve) B lymphocytes were not significantly different between coeliac disease and controls. In conclusion, dysfunction of memory B lymphocytes can be responsible for an increased risk of severe bacterial infections in coeliac disease. Patients with coeliac disease with dysfunction of memory B lymphocytes are clearly indicated for pneumococcal vaccination.

• Klíčová slova
• funkční hyposplenizmus, paměťové B lymfocyty,
• MeSH
• B-lymfocyty * MeSH
• celiakie komplikace   krev   MeSH
• lidé MeSH
• pilotní projekty MeSH
• pneumokokové vakcíny MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• slezina * imunologie   patofyziologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• Klíčová slova
• axikabtagen ciloleucel,
• MeSH
• antitumorózní látky terapeutické užití   MeSH
• difúzní velkobuněčný B-lymfom farmakoterapie   komplikace   MeSH
• lidé MeSH
• neurotoxické syndromy * diagnóza   etiologie   MeSH
• paměťové T-buňky MeSH
• retrospektivní studie MeSH
• věkové faktory MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• dopisy MeSH

Virus SARS‑CoV‑2 představuje pro imunitní systém komplexní podnět, který indukuje komplexní protivirovou obranu. Ta zahrnuje epitelové bariéry, vrozenou a specifickou imunitu. T lymfocyty reagují specificky na antigenní peptidy odvozené od všech imunodominantních složek SARS‑CoV‑2. B lymfocyty reagují tvorbou protilátek především na glykoproteiny S a proteiny N viru SARS‑CoV‑2. Expozice přirozené infekci SARS‑CoV‑2 nebo aktivní imunizace indukuje imunitní paměť T a B lymfocytů a také zvyšuje obranný potenciál vrozené imunity. Přítomnost specifických protilátek proti antigenům S a N SARS‑CoV‑2, které se rutinně stanovují, vypovídá pouze o předchozí expozici viru.

Virus SARS‑CoV‑2 means the complex challenge for the immune system that induces a complex antiviral defense. This comprises epithelial interfaces and both innate and specific immunity. T cells can response specifically to antigenic peptides derived from all immunodominant components of SARS‑CoV‑2. B cells are forming specific antibodies reacting especially with immunogenic determinants of S glycoprotein and N nucleocapsid protein of SARS‑CoV‑2. The natural exposure to either infection or active immunisation with SARS‑CoV‑2 are inducing immune memory in T and B cells and are enhancing the protective potential of innate immunity. The presence of specific antibodies reacting with S and N antigens of SARS‑CoV‑2 which are routinely determined can testify the previous exposure to SARS‑CoV‑2 only.

• MeSH
• B-lymfocyty fyziologie   MeSH
• Betacoronavirus patogenita   MeSH
• COVID-19 * diagnóza   imunologie   patofyziologie   MeSH
• imunoglobuliny krev   MeSH
• lidé MeSH
• T-lymfocyty fyziologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

1. Examination, quantification and more precise immunophenotypization of transitional and immature (CD21-) B cells in patients with CVID and comparison of the found proportions with the control group. 2. Evaluation of SHM frequency in rearranged Ig genes, respectively in produced Ig mRNA with respect to its isotype, in peripheral blood transitional and immature (CD21-)B cells of CVID patients and controls. Correlation between the level of SHM and clinical parameters and the course of the disease. 3. Examination of the number of naive, effector and memory CD4+ and CD8+ T cells and its correlation with the above stated B cell subpopulations. 4. Correlation of these data with relevant clinical parameters.

1. Vyšetření, kvantifikace a přesnější imunofenotypizace přechodových a nezralých (CD21-)B lymfocytů u nemocných s CVID a srovnání tohoto zastoupení s hodnotami zjištěnými u kontrolní skupiny. 2. Zjištění výskytu SHM v přestavěných Ig genech, respektiveprodukované Ig mRNA ve vztahu k jejímu izotypu, u transitorních a nezralých (CD21-)B buněk periferní krve pacientů s CVID a kontrol. Korelace stupně HSM ke klinickým parametrům a průběhu onemocnění. 3. Vyšetření zastoupení naivních, efektorových, efektorových paměťových a paměťových CD4+ a CD8+ T lymfocytů a jejich korelace s výše uvedenými B lymfocytárními subpopulacemi. 4. Korelace těchto údajů s relevantními klinickými parametry

• MeSH
• B-lymfocyty MeSH
• běžná variabilní imunodeficience MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• somatická hypermutace imunoglobulinových genů MeSH
• T-lymfocyty MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Achieving fast immunosuppression blood exposure after kidney transplantation is key to abrogating both preformed and de novo anti-donor humoral and cellular alloresponses. However, while tacrolimus (TAC) is the cornerstone immunosuppressant inhibiting adaptive alloimmunity, its blood exposure is directly impacted by different single-nucleotide polymorphisms (SNPs) in CYP3A TAC-metabolizing enzymes. Here, we investigated how functional TAC-CYP3A genetic variants (CYP3A4*22/CYP3A5*3) influence the main baseline clinical and immunological risk factors of biopsy-proven acute rejection (BPAR) by means of preformed donor-specific antibodies (DSAs) and donor-specific alloreactive T cells (DSTs) in a large European cohort of 447 kidney transplants receiving TAC-based immunosuppression. A total of 70 (15.7%) patients developed BPAR. Preformed DSAs and DSTs were observed in 12 (2.7%) and 227 (50.8%) patients, respectively. According to the different CYP3A4*22 and CYP3A5*3 functional allele variants, we found 4 differential new clusters impacting fasting TAC exposure after transplantation; 7 (1.6%) were classified as high metabolizers 1 (HM1), 71 (15.9%) as HM2, 324 (72.5%) as intermediate (IM), and 45 (10.1%) as poor metabolizers (PM1). HM1/2 showed significantly lower TAC trough levels and higher dose requirements than IM and PM (p < 0.001) and more frequently showed TAC underexposure (<5 ng/ml). Multivariate Cox regression analyses revealed that CYP3A HM1 and IM pharmacogenetic phenotypes (hazard ratio (HR) 12.566, 95% CI 1.99-79.36, p = 0.007, and HR 4.532, 95% CI 1.10-18.60, p = 0.036, respectively), preformed DSTs (HR 3.482, 95% CI 1.99-6.08, p < 0.001), DSAs (HR 4.421, 95% CI 1.63-11.98, p = 0.003), and delayed graft function (DGF) (HR 2.023, 95% CI 1.22-3.36, p = 0.006) independently predicted BPAR. Notably, a significant interaction between T-cell depletion and TAC underexposure was observed, showing a reduction of the BPAR risk (HR 0.264, 95% CI 0.08-0.92, p = 0.037). Such variables except for DSAs displayed a higher predictive risk for the development of T cell-mediated rejection (TCMR). Refinement of pretransplant monitoring by incorporating TAC CYP3A SNPs with preformed DSAs as well as DSTs may improve current rejection-risk stratification and help induction treatment decision-making.

• MeSH
• cytochrom P-450 CYP3A * genetika   imunologie   metabolismus   MeSH
• hodnocení rizik MeSH
• jednonukleotidový polymorfismus MeSH
• lidé MeSH
• paměťové B-buňky * imunologie   MeSH
• T-lymfocyty * imunologie   MeSH
• takrolimus * farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• transplantace ledvin * MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Mezi nejčastější orgánově specifická autoimunitní onemocnění patří autoimunitní tyreopatie. Zaměřili jsme se na význam stanovení Th1, Th2 a Th17 lymfocytů u autoimunitních tyroiditid (AT). Soubor tvořilo 136 léčených pacientů v plném klinickém rozvoji AT (24 mužů, prům. věk 41,0 ± 16,8 let a 112 žen, prům. věk 44,6 ± 17,6 let). Kontrolní soubor tvořilo 17 zdravých mužů (prům. věk 44,0 ± 5,0 let). Ke statistickým výpočtům jsme použili Box‐Coxovu transformaci dat, t‐testy a Pearsonovu korelační analýzu. Subpopulace lymfocytů jsme stanovili průtokovou cytometrií. Zjistili jsme statisticky významné korelace mezi Th a Tc lymfocyty (r = -0,5605, p = 0,0000), celkovými T a B lymfocyty (r = -0,4877, p = 0,0000), Th1 a Th17 lymfocyty (r = 0,4346, p = 0,0000), Tc a Th1 lymfocyty (r = 0,4124, p = 0,0000), IRI a Th1 lymfocyty (r = -0,4076, p = 0,0000), celk. T lymfocyty a NK buňkami (r = -0,8175, p = 0,0000), paměťovými Th a Th1 lymfocyty (r = 0,7982, p = 0,0000), naivními Th a Th1 lymfocyty (r = -0,7995, p = 0,0000), Tc lymfocyty a NK buňkami (r = -0,4014, p = 0,0000), Tc a celk. T lymfocyty (r = 0,4551, p = 0,0000), Th a celk. T lymfocyty (r = 0,4135, p = 0,0000). Stanovení subpopulací lymfocytů je pomůckou při diagnostice a léčbě autoimunitních chorob, pomáhá objasnit klinické projevy onemocnění a může doplnit interpretaci běžně stanovovaných autoprotilátek. Může pomoci určit, zda jde o fázi destrukční (Th1, Th17, Tc lymfocyty), nebo protektivní (Th2 lymfocyty, protilátky).

Among the most common organ-specific autoimmune diseases are autoimmune thyreopathies. We have focused on the importance of Th1, Th2 and Th17 lymphocytes in autoimmune thyroiditis (AT). The cohort consisted of 136 treated patients in the full clinical course of AT (24 men, mean age 41.0±16.8 years and 112 women, mean age 44.6±17.6 years). The control group consisted of 17 healthy men (mean age 44.0±5.0 years). Box-Cox transformation of the data, t-tests and Pearson correlation analysis were used for statistical calculations. Lymphocyte subpopulations were determined by flow cytometry. We found statistically significant correlations between Th and Tc lymphocytes (r = -0.5605, p = 0.0000), total T and B lymphocytes (r = -0.4877, p = 0.0000), Th1 and Th17 lymphocytes (r = 0.4346, p = 0.0000), Tc and Th1 lymphocytes (r = 0.4124, p = 0.0000), IRI and Th1 lymphocytes (r = -0.4076, p = 0.0000), total T lymphocytes and NK cells (r = -0.8175, p = 0.0000), memory Th and Th1 lymphocytes (r = 0.7982, p = 0.0000), naive Th and Th1 lymphocytes (r = -0.7995, p = 0.0000), Tc lymphocytes and NK cells (r = -0.4014, p = 0.0000), Tc and total T lymphocytes (r = 0.4551, p = 0.0000), Th and total T lymphocytes (r = 0.4135, p = 0.0000). The determination of lymphocyte subpopulations is an aid in the diagnosis and treatment of autoimmune diseases, helps to clarify the clinical manifestations of the disease and can complement the interpretation of commonly determined autoantibodies. It can help determine whether the phase is destructive (Th1, Th17, Tc lymphocytes) or protective (Th2 lymphocytes, antibodies).

• MeSH
• autoimunitní tyreoiditida * etiologie   MeSH
• autoprotilátky MeSH
• buňky Th17 patologie   MeSH
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• průtoková cytometrie metody   MeSH
• regulační T-lymfocyty patologie   MeSH
• Th1 buňky patologie   MeSH
• Th2 buňky patologie   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• Publikační typ
• klinická studie MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Invazivní mykotická onemocnění patří k závažným život ohrožujícím stavům imunokompromitovaných pacientů. Zavedení antimykotika Amphotericinu B (AmB), respektive jeho různých lékových forem, do klinické praxe vedlo k výraznému zlepšení léčebných výsledků a ke snížení mortality imunokompromitovaných pacientů s prokázanou nebo předpokládanou invazivní mykózou (1). Limitací zůstává jeho toxicita – akutní a opožděná nefrotoxicita a akutní s infuzí spojená nežádoucí reakce (Infusion – related reaction – IRR). Nefrotoxicita je nyní ovlivnitelná volbou vhodné lékové formy AmB a adekvátní podpůrnou péčí, především hyperhydratací (2). IRR v podobě pyrexie, třesavky, zimnice však zatím zcela odstranitelná není a ani zavedení premedikace s výjimkou kortikoidů příliš neovlivnilo incidenci IRR (3). Vzhledem k nejasné patogenezi IRR a jen ojedinělým systematickým prospektivním studiím, vedly snahy o minimalizaci IRR k prospektivní studii u pediatrických onkologických pacientů s indikovaným podáním AmB. Flowcytometrické stanovení subpopulací lymfocytů a stanovení hladin interleukinů v korelaci s plazmatickými hladinami AmB, s klinickou incidencí IRR, lékovou formou AmB a s typem premedikace svědčí pro intimní vztah změny v množství paměťových efektorových Th lymfocytů a v interleukinovém spektru a incidencí IRR.

The invasive mycotic infections belong to serious life- threatening diseases. The therapy using different forms of Amphotericin B (AmB) improved treatment outcomes for immunocompromised patients with invasive mycosis (1). Recently the mortality for invasive mycosis is lower then it was before AmB introduction (1), however the acute and even the late nephrotoxicity of AmB as well as the Infusion- related reaction (IRR) limit its use in clinical practice. The choice of AmB´s form and the adequate supportive care (hyperhydratation) can minimize the AmB´s nephrotoxicity (2). There was an endeavor to pre-medicate patients to minimize fevers, chills and rigor as IRR´s most common symptoms. But there were almost no successful results except steroids. Only corticosteroids are known to be able to decrease IRR´s incidence (3). Because of just limited knowledge of IRR´s pathogenesis and almost no prospective studies there is a need of more clinical data. The prospective study in pediatric oncology patients treated with AmB was initiated in order to improve our understanding of IRRs. Flowcytometric measurement of lymphocytes´ subpopulations and plasma cytokines´ levels in comparison with plasmatic AmB levels, clinical incidence of IRRs, type of AmB and type of premedication point out the causal nexus among the changes of a count of Th-memory effectors, cytokine levels and the incidence of IRR.

• MeSH
• amfotericin B aplikace a dávkování   farmakokinetika   škodlivé účinky   MeSH
• dítě MeSH
• intravenózní infuze škodlivé účinky   MeSH
• lékové formy MeSH
• lidé MeSH
• mykózy farmakoterapie   MeSH
• oportunní infekce farmakoterapie   MeSH
• pilotní projekty MeSH
• premedikace využití   MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• lidé MeSH

• MeSH
• lidé MeSH
• paměťové B-buňky MeSH
• paměťové T-buňky MeSH
• protilátky virové MeSH
• SARS-CoV-2 MeSH
• vakcíny proti COVID-19 * MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

T-cell receptor (TR) diversity of the variable domains is generated by recombination of both the alpha (TRA) and beta (TRB) chains. The textbook process of TRB chain production starts with TRBD and TRBJ gene rearrangement, followed by the rearrangement of a TRBV gene to the partially rearranged D-J gene. Unsuccessful V-D-J TRB rearrangements lead to apoptosis of the cell. Here, we performed deep sequencing of the poorly explored pool of partial TRBD1-TRBD2 rearrangements in T-cell genomic DNA. We reconstructed full repertoires of human partial TRBD1-TRBD2 rearrangements using novel sequencing and validated them by detecting V-D-J recombination-specific byproducts: excision circles containing the recombination signal (RS) joint 5'D2-RS - 3'D1-RS. Identified rearrangements were in compliance with the classical 12/23 rule, common for humans, rats, and mice and contained typical V-D-J recombination footprints. Interestingly, we detected a bimodal distribution of D-D junctions indicating two active recombination sites producing long and short D-D rearrangements. Long TRB D-D rearrangements with two D-regions are coding joints D1-D2 remaining classically on the chromosome. The short TRB D-D rearrangements with no D-region are signal joints, the coding joint D1-D2 being excised from the chromosome. They both contribute to the TRB V-(D)-J combinatorial diversity. Indeed, short D-D rearrangements may be followed by direct V-J2 recombination. Long D-D rearrangements may recombine further with J2 and V genes forming partial D1-D2-J2 and then complete V-D1-D2-J2 rearrangement. Productive TRB V-D1-D2-J2 chains are present and expressed in thousands of clones of human antigen-experienced memory T cells proving their capacity for antigen recognition and actual participation in the immune response.

• MeSH
• apoptóza * MeSH
• buněčné klony MeSH
• chromozomální aberace MeSH
• geny TcR beta * MeSH
• krysa rodu rattus MeSH
• lidé MeSH
• myši MeSH
• paměťové T-buňky MeSH
• V(D)J rekombinace * MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• krysa rodu rattus MeSH
• lidé MeSH
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH