Feochromocytóm (FEO) a paraganglióm (PGL) sú zriedkavé katecholamíny produkujúce neuroendokrinné tumory vychádzajúce z drene nadobličky alebo z extraadrenálnych sympatikových a parasympatikových ganglií. Vo väčšine prípadov FEO/PGL ide o benígne tumory, avšak metastatické ochorenie nie je výnimkou, predovšetkým u pacientov so špecifickým genetickým pozadím. Aj keď FEO/PGL boli popísané už pred viac ako storočím, diagnostika a liečba metastatického ochorenia sú stále problematické. Pokrok v porozumení molekulárnym a metabolickým zmenám asociovaným s tumorigenézou nás vedie bližšie k identifikácii podstaty týchto tumorov. Nové poznatky umožnili vyvinúť presnejšie diagnostické metódy a identifikovať molekulárne terapeutické ciele, ktoré by mali prispieť k zlepšeniu starostlivosti o pacientov s metastatickým FEO/PGL.
Pheochromocytoma (PHEO) and paraganglioma (PGL) are rare catecholamine-producing neuroendocrine tumors arising from adrenal medulla or extra-adrenal sympathetic and parasympathetic ganglia. Most of the PHEOs/PGLs are benign tumors, but metastatic disease is common, especially in patients with particular genetic background. Although PHEOs/PGLs were described more than a century ago, diagnosis and therapy of metastatic disease are still challenging. Advances in understanding molecular and metabolic changes associated with tumorigenesis lead us to identification of the background of these tumors. Novel information allowed for development of more precise diagnostic methods and molecular therapeutic targets identification, which will improve care of patients with metastatic PHEO/PGL.
- MeSH
- chromogranin A analýza fyziologie MeSH
- cílená molekulární terapie MeSH
- diferenciální diagnóza MeSH
- dopamin analýza MeSH
- feochromocytom * diagnóza terapie MeSH
- lidé MeSH
- metastázy nádorů MeSH
- mutace genetika MeSH
- neuroendokrinní nádory MeSH
- paragangliom * diagnóza terapie MeSH
- radioterapie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
The carbon fiber and silver microwire were used as working and pseudoreference electrode, respectively, and inserted into the ending of capillary to prepare monolithic capillary column with an integrated electrochemical detector. Prepared capillary devices offered stable and robust results with relative standard deviations of retention, resolution, and detection signal lower than 1.5, 5.5, and 5.0%, respectively. To further increase sensitivity of developed electrochemical microdetector, multiple pulse amperometry detection mode has been used. Optimized integrated device provided reliable chromatographic separation of mixture of neurotransmitters with calibration curve for dopamine linear from 0.5 to 20.0mgL-1 and an instrumental limit of detection as low as 24pg of injected dopamine. Finally, developed capillary column was applied to successful determination of dopamine in a human urine. By using both calibration curve and standard addition method, the dopamine level was determined to be 0.74±0.03mgL-1 and 0.71±0.02mgL-1, respectively. Triplicates of dopamine analysis provided relative standard deviations lower than 2.7% for intraday analyses, while interday relative standard deviations were lower than 3.6% for five consecutive days.
- MeSH
- dopamin analýza MeSH
- elektrochemické techniky přístrojové vybavení metody MeSH
- elektrody MeSH
- lidé MeSH
- neurotransmiterové látky analýza MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- hodnotící studie MeSH
Závěrečná zpráva o řešení grantu Interní grantové agentury MZ ČR
1 svazek : ilustrace, tabulky ; 30 cm
The project is based on a translational approach combining two animal models of early and later immune stimulation and longitudinal volumometric study in schizophrenia patients. The animal part includes i) model of early immune stimulation by lipopolysacharide applied at 5-9 postnatal day (PD), and ii) model of latent toxoplasmosis. In both models Th1/TH2 cytokines, behavioral tests, volumometry, enzymes and metabolites of kyunurenine pathway, glutamatergic and dopaminergic activity, neurodegeneration and microglia activation will be evaluated at PD 90. The human part is represented by prospective morphological, Th1/Th2 cytokines and T. gondii seropositivity evaluation in a group of 80 schizophrenia patients and 80 controls. The influence of immune activation on gray matter volume and its reduction will be evaluated by voxel-based morphometry at the baseline and after one year.
Projekt je založený na translačním přístupu, který kombinuje dva animální modely časné a pozdní imunitní aktivace a longitudinální volumometrickou analýzu mozku u nemocných schizofrenií. Animální část zahrnuje i) model časné imunitní stimulace podáním lipopolysacharidu (LPS) 5-9 postnatální den (PD) a ii) model latentní toxoplazmozy. V obou modelech budou PD 90 stanoveny cytokiny Th1/Th2 a bude provedeno behaviorální testování následované hodnocením volumometrie, stanovením enzymů a metabolitů kynureninové dráhy, dopaminergní a glutamatergní aktivity a hodnocením neurodegenerace a aktivace mikroglie. Humánní část představuje prospektivní hodnocení morfometrie mozku a na stanovení plazmatických hladin cytokinů Th1/Th2 a serologie T. gondii v souboru 80 pacientů se schizofrenií v časných stádiích nemoci a u 80 kontrolních osob. Při vstupu do sledování a po jednom roce bude pomocí voxel-based morfometrie hodnocen vliv imunitních parametrů na objem šedé hmoty a progresi její redukce.
- MeSH
- chemické techniky analytické metody využití MeSH
- dopamin analýza MeSH
- funkční zobrazování neurálních procesů MeSH
- kynurenin analýza MeSH
- lidé MeSH
- lipopolysacharidy MeSH
- metabolomika MeSH
- modely u zvířat MeSH
- mozková toxoplazmóza MeSH
- potkani Wistar MeSH
- rovnováha Th1-Th2 MeSH
- schizofrenie imunologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Konspekt
- Patologie. Klinická medicína
- NLK Obory
- psychiatrie
- NLK Publikační typ
- závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR
A novel method was developed for a parallel, rapid and precise tracking of dopamine and its metabolites (homovanillic acid, 3-methoxytyramine and 3,4-di¬hydroxyphenylacetic acid) in the brain. The method consists of a sample collection using microdialysis from specific brain region, a lyophilization step to concentrate analytes from the microdialysates, and a quantification step exploiting high performance liquid chromatography combined with electrospray ionization tandem mass spectrometry (HPLC-ESI-MS/MS). This was employed in an experimental study investigating the effect of a prenatal exposure to methamphetamine on development of mesolimbic dopaminergic system. It was determined that abusing methamphetamine during pregnancy induces permanent changes in the nucleus accumbens of adult rats. Namely, the basal levels of dopamine and its metabolites are higher and a response to acute dose of methamphetamine is stronger in prenatally exposed rats compared to control rats. Furthermore, the developed methodology can be optimized for use in different brain regions and for analysis of diverse chemical substances. This highly applicable technique could thus be a source of valuable information about brain physiology as well as pathophysiology on the molecular level.
- MeSH
- dopamin * analýza MeSH
- hmotnostní spektrometrie využití MeSH
- lidé MeSH
- methamfetamin analýza MeSH
- mikrodialýza využití MeSH
- modely nemocí na zvířatech MeSH
- poruchy spojené s užíváním amfetaminu * metabolismus patofyziologie MeSH
- poruchy spojené s užíváním opiátů metabolismus patofyziologie MeSH
- potkani Wistar MeSH
- vysokoúčinná kapalinová chromatografie využití MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- zvířata MeSH
- Klíčová slova
- séropozitivita,
- MeSH
- antagonisté dopaminu terapeutické užití MeSH
- dítě MeSH
- dopamin analýza MeSH
- elektroencefalografie MeSH
- ELISA MeSH
- koktavost * etiologie imunologie patologie MeSH
- lebka diagnostické zobrazování MeSH
- lidé MeSH
- magnetická rezonanční tomografie MeSH
- mladiství MeSH
- předškolní dítě MeSH
- protilátky imunologie MeSH
- sérum imunologie MeSH
- statistika jako téma MeSH
- Toxoplasma * imunologie patogenita MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- předškolní dítě MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
A sensitive assay method was developed for a parallel, rapid and precise determination of dopamine and its metabolites, homovanillic acid, 3-methoxytyramine and 3,4-dihydroxyphenylacetic acid, from brain microdialysates. The method consisted of a pre-treatment step, freeze-drying (lyophilization), to concentrate dopamine and its metabolites from the microdialysates, and a detection step using liquid chromatography combined with electrospray ionization tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS). In particular, the reaction monitoring mode was selected for its extremely high degree of selectivity and the stable-isotope-dilution assay for its high precision of quantification. The developed method was characterized by the following parameters: the precision of the developed method was determined as ≥88.6% for dopamine, ≥89.9% for homovanillic acid, ≥86.1% for 3-methoxytyramine and ≥88.1% for 3,4-dihydroxyphenylacetic acid; the mean accuracy was determined as ≥88.2% for dopamine, ≥88.3% for homovanillic acid, ≥85.9% for 3-methoxytyramine and ≥88.6% for 3,4-dihydroxyphenylacetic acid. The developed method was compared to (1) other combinations of pre-treatment methods (solid phase extraction and nitrogen stripping) with LC-MS and (2) another detection method, liquid chromatography, with electrochemical detection. The novel developed method using combination of lyophilization with LC-ESI-MS/MS was tested on real samples obtained from the nucleus accumbens of rat pups after an acute methamphetamine administration. It was proven that the developed assay could be applied to both a simultaneous analysis of all four substrates (dopamine, homovanillic acid, 3-methoxytyramine and 3,4-dihydroxyphenylacetic acid) in microdialysis samples acquired from the rat brain and the monitoring of their slight concentration changes on a picogram level over time following methamphetamine stimulus.
- MeSH
- chromatografie kapalinová metody MeSH
- dopamin analogy a deriváty analýza metabolismus MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kyselina 3,4-dihydroxyfenyloctová analýza metabolismus MeSH
- kyselina homovanilová analýza metabolismus MeSH
- lineární modely MeSH
- lyofilizace MeSH
- methamfetamin aplikace a dávkování MeSH
- mikrodialýza MeSH
- nucleus accumbens chemie metabolismus MeSH
- potkani Wistar MeSH
- reprodukovatelnost výsledků MeSH
- senzitivita a specificita MeSH
- stabilita léku MeSH
- tandemová hmotnostní spektrometrie metody MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Závěrečná zpráva o řešení grantu Interní grantové agentury MZ ČR
9 l., 146 l. : il., tab. ; 30 cm
The study of the role of serotonin in APDs treatment will be based on a pharmacological animal model of schizophrenia. Explanation of the effect of serotonergic system in the treatment of schiz. - like behavior can clarify the function of atypical APD. The role of serotonin activity in atypical APDs will be tested by means of 5-HT2A antagonists and 5HT1A agonists administration alone or combined with D2 antagonist (haloperidol). The results will be compared with atypical APDs ( quetiapin risperid). Theeffect od serotonin modulation in atypical APDs will be evaluated by the testing of c-fos expression ( immunocytochemistry) in the prefrontal cortex and the striatum. The results will be compared with the effect of atypical APDs. The effect of serotoninmodulation on dopamine levels in the prefrontal cortex and striatum will be evaluated using the microdialysis and the chromatography ( HPLC) The results will be compared with the effect of atypical APDs ( quetiapin, risperidon).
Navržené testování účinku serotonergní neurotransmise v animálním modelu schizofrenie na modelované positivní a negativní symptomy a kognitivní deficit přispějě k objasnění mechanismu Vlev serotoninu v účinku atypických antipsychotik v animálním modelu schizofrenie se bude řešit pomocí antagonisty 5-HT2A a agonisty 5-HT1A receptoru jednotlivě podaných nebo v kombinaci s D2 antagonistou ( haloperidolem). Vliv serotonergní modulace v účincích antipsychotik v animálním modelu schizofrenie bude řešen i hodnocením výskytu proteinu FOS ve vybraných oblastech mozku a výsledky budou porovnány s vybranými atypickými a typickými antipsychotiky. Vlev serotoninu v účincích APDs v animálním modelu schizofrenie bude řešen také pomocí stanovení změn hladin dopaminu ve vybraných oblastech mozku. Tyto změny budou porovnány s výsledky získanými po podání antipsychotik.
- MeSH
- antipsychotika farmakologie MeSH
- dopamin analýza MeSH
- mikrodialýza MeSH
- modely nemocí na zvířatech MeSH
- schizofrenie MeSH
- serotonin farmakologie MeSH
- Konspekt
- Farmacie. Farmakologie
- NLK Obory
- psychiatrie
- farmacie a farmakologie
- NLK Publikační typ
- závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR
Neurovývojové modely schizofrenie vycházejí z předpokladu, že schizofrenie vzniká v důsledku chybného vývoje mozku. K příčinám vedoucím k abnormálnímu vývoji mozku patří i excitotoxické poškození. V našem experimentálním modelu jsme testovali úlohu N-acetylaspartylglutamátu (NAAG) v etiologii schizofrenie, na základě nálezu prokazujícího zvýšené hladiny NAAG v hipokampu a prefrontální kůře u pacientů se schizofrenií. Použili jsme intracerebroventrikulární aplikaci (ICV) NAAG u potkana 12. postnatální den (12. PD). Po aplikaci NAAG byl sledován rozsah navozené léze a její lokalizace, deficit v sociálním chování v prepubertálním období a změna exploračního chování po podání inhibitoru pro transport dopaminu (GBR 12909) postpubertálně. Neonatální aplikace NAAG vedla k časnému poškození především dorzálního hipokampu, dorzální části rostrálního talamu, retrospleniální a cingulární kůry. Přes rozsáhlé poškození, nebyl pozorován deficit v sociálním chování 10. den po aplikaci NAAG. Podání GBR 12909 vedlo ke zvýšení explorační aktivity potkana. Tyto výsledky ukazují spíše na vedlejší úlohu NAAG v patofyziologii schizofrenie.
Neurodevelopmental models of schizophrenia are based on assumption that schizophrenia arises from abnormal brain development. Primary factors which can produce abnormal brain development are excitotoxic lesions. In our experimental model we tested a role of N-acetylaspartylglutamate (NAAG) in etiology of schizophrenia. We chose the dipeptide because of the evidence of increased NAAG levels in hippocampus and prefrontal cortex of patients with schizophrenia. We applied NAAG intracerebroventricularly (ICV) on postnatal day (PD) 12. Following the NAAG infusion, the extent and localization of lesions was observed. Furthermore, a deficit in social behavior and changes in exploratory behavior were observed after the application of dopamine uptake inhibitor (GBR 12909) postpubertally. Neonatal infusion of NAAG produced acute neurodegeneration in dorsal hippocampus, dorsal parts of rostral thalamus and in retrosplenial and cingular cortex. Despite of large neurodegeneration, deficit in social behavior were not observed (10 days after NAAG infusion). Administration of GBR 12909 resulted in increased exploratory behavior of rats in open field test. Our results indicate that NAAG may have a secondary role in the patophysiology of schizophrenia.
