This project is intent on assesment of molecular biology markers useful in prediction of therapeutic response in ovarian cancer patients by:1)Determination of ABCB1, ABCC1, GST polymorphisms, resistance proteins Pgp, MRP1, in vitro drug resistance/sensitivity and evaluation of their correlation with medical outcome (PFS, OS, side effects). 2) Assay of polymorphisms of the Interleukin-8 gene, endoglin, FGF, angiopoetin gene expression, pro-angiogenesis markers (VEGF,TGF?,TGFß,bFGF) and their correlation with kind of primary farmacotherapy and medical outcome (PFS, OS).3) Analysis of cardiotoxicity of standard primary chemotherapy (Paclitaxel + Carboplatin) versus primary therapy (Paclitaxel + Carboplatin + Bevacizumab) by ECG, blood pressure, ECHO, markers of cardiotoxicity (NT-proBNP,cTnT,cTnI,CKMB,MYO,h-FABP,GPBB) and their correlation with genetic polymophisms and drug resistance. This project support molecular biology prediction of the therapeutic response in ovarian cancer patients.

Projekt řeší molekulární biologii ovariálních karcinomů ve vztahu k odpovědi na léčbu. 1)Zhodnocení genových polymorfismů ABCB1,ABCC1,GST, proteinů Pgp, MRP1-kódovaných těmito geny, chemorezistence/chemosensitivity in vitro (MTT test) u pacientek diagnostikovaných 2013-2015 a retrospektivně u pacientek s již stanoveným Pgp, MRP1, MTT testem 2006-2009 ve vztahu k PFS a OS. 2) Stanovení genových polymorfismů interleukinu 8, genové exprese endoglinu,FGF,angiopoetinu a proangiogenních faktorů(VEGF,TGF?,TGFß,bFGF) v závislosti na odpovědi a typu primární léčby u pacientek diagnostikovaných 2013-2015 a retrospektivně z ovariální nádorové tkáně zamražené 2006-2009. 3) Zhodnocení kardiotoxicity paklitaxel+karboplatina versus paklitaxel+karboplatina+bevacizumab (EKG,TK,ECHOsrdce,markery kardiotoxicity NTproBNP,cTnT,cTnI,CKMB,MYO,hFABP,GPBB) a její vztah k chemorezistenci a genovým polymorfismům. Projekt umožní molekulárně biologickou predikci odpovědi na léčbu u pacientek s karcinomem ovaria.

• MeSH
• ABC transportéry analýza   MeSH
• analýza přežití MeSH
• bevacizumab škodlivé účinky   MeSH
• chemorezistence MeSH
• cytotoxické testy imunologické MeSH
• echokardiografie MeSH
• ELISA metody   využití   MeSH
• fibroblastový růstový faktor 2 analýza   MeSH
• glutathion-S-transferasa fí analýza   MeSH
• kalgranulin B analýza   MeSH
• karboplatina škodlivé účinky   MeSH
• karcinom farmakoterapie   MeSH
• kardiotoxicita MeSH
• molekulární biologie MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• nádory vaječníků farmakoterapie   MeSH
• nežádoucí účinky léčiv MeSH
• P-glykoproteiny analýza   MeSH
• paclitaxel škodlivé účinky   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   využití   MeSH
• polymorfismus genetický MeSH
• proteiny spojené s mnohočetnou rezistencí k lékům analýza   MeSH
• protokoly protinádorové kombinované chemoterapie MeSH
• receptory vaskulárního endoteliálního růstového faktoru analýza   MeSH
• transformující růstový faktor alfa analýza   MeSH
• transformující růstový faktor beta analýza   MeSH
• výsledek terapie MeSH
• ženy MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• gynekologie a porodnictví
• onkologie
• biologie
• genetika, lékařská genetika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH

OBJECTIVE: This study aimed to evaluate the correlation between the expressions of lung resistance protein (LRP), P-glycoprotein (Pgp), multidrug resistance-associated protein (MRP)-1, MRP3, and MRP5 and histopathological parameters and clinical outcome, and to determine the predictive and prognostic value of these transport proteins in patients with ovarian cancer. METHODS: Tumor samples from 111 chemonaive patients with epithelial ovarian cancer who underwent primary surgery from 2006 to 2010 were immunohistochemically stained for LRP, Pgp, MRP1, MRP3, and MRP5 expressions. RESULTS: MRP1 expression was greater among patients with late disease than among patients with early stage ovarian cancer [International Federation of Gynecology and Obstetrics (FIGO) I + II, 71.6% (confidence interval, 60-100); FIGO III + IV, 83.6% (confidence interval, 100-100); P = 0.03]. The histological subtype correlated with the expressions of LRP, Pgp, MRP1, and MRP3. Relapse of disease during the next 24 months occurred more often among patients with higher Pgp and MRP1 than among patients with lower Pgp and MRP1 expressions. FIGO stage, histological type, debulking efficiency, strong Pgp expression, and strong MRP1 expression correlated significantly with shorter progression-free survival (log-rank test, P = 0.001, P = 0.004, P = 0.001, P = 0.051, and P = 0.046, respectively). FIGO stage, histological type, debulking efficiency, and strong MRP1 expression correlated with poor patient survival (log-rank test, P = 0.001, P = 0.042, P = 0.005, and P = 0.018, respectively). CONCLUSIONS: Pgp and MRP1 expressions were clinically significant in patients with ovarian cancer. Pgp and MRP1 may be reliable, independent predictive and prognostic factors regarding the clinical outcome of ovarian cancer. MRP3 is less important as a predictive and prognostic factor than MRP1 expression. MRP5 and LRP expressions were not applicable prognostic parameters regarding ovarian cancer.

• MeSH
• analýza přežití MeSH
• chemorezistence * MeSH
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• nádorové biomarkery metabolismus   MeSH
• nádory glandulární a epitelové farmakoterapie   metabolismus   mortalita   patologie   MeSH
• nádory vaječníků farmakoterapie   metabolismus   mortalita   patologie   MeSH
• P-glykoprotein metabolismus   MeSH
• prognóza MeSH
• proteiny spojené s mnohočetnou rezistencí k lékům metabolismus   MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• vault ribonucleoprotein particles metabolismus   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Východiska: Cílem této práce je stanovení proteinů rezistence LRP (Lung Resistance Protein), Pgp (P-glykoprotein), MRP (Multidrug Resistance-Associated Protein), MRP3 a MRP5 a zjištění jejich závislosti na stadiu, stupni diferenciace a histologickém typu ovariálního karcinomu a zhodnocení vztahu proteinů rezistence s chemorezistencí/chemosenzitivitou in vitro stanovenou MTT testem. Soubor pacientek a metodika: Stanovení proteinů rezistence (LRP, Pgp, MRP, MRP3, MRP5) jsme provedli u 64 vzorků ovariálních karcinomů u pacientek operovaných na Porodnické a gynekologické klinice FN HK v letech 2006–2010. Proteiny rezistence jsme stanovili metodou dvoustupňové imunohistochemie. Chemorezistenci/chemosenzitivitu in vitro jsme zhodnotili MTT testem. Výsledky: Prokázali jsme vyšší hodnoty Pgp, MRP, MRP3 a MRP5 u pacientek s pokročilým karcinomem ovaria (st. III + IV) v porovnání s pacientkami s časným stadiem onemocnění (st. I + II). Nejnižší hodnoty LRP, Pgp, MRP jsme zjistili u endometroidního ovariálního karcinomu. Vztah proteinů rezistence se stupněm diferenciace jsme neprokázali. Zaznamenali jsme vyšší hodnoty Pgp, MRP, MRP3 a MRP5 u pacientek s recidivou onemocnění. Prokázali jsme vyšší hodnoty Pgp a MRP u pacientek chemorezistentních in vitro dle MTT testu. Závěr: Ze stanovených proteinů rezistence se nejperspektivněji u karcinomu ovaria jeví Pgp a MRP. Stanovení Pgp a MRP by mohlo přispět k predikci léčebné odpovědi na primární chemoterapii u pacientek s karcinomem ovaria.

Background: To evaluate the correlation of resistance proteins LRP (Lung Resistance Protein), Pgp (P-glycoprotein), MRP (Multidrug Resistance-Associated Protein), MRP3 a MRP5 with stage, grade and histological type. To asses correlation of these resistance proteins with drug resistance/drug sensitivity in vitro by means of the MTT assay in ovarian cancer patients. To find the clinical outcome of these data. Patients and Methods: 64 women with epithelial ovarian cancer who underwent primary surgery in 2006–2010 had specimens stained with imunohistochemistry for LRP, MRP, MRP3, MRP5 and Pgp and MTT assay (MTT-(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide). Results: Patients with late ovarian cancer had a higher Pgp, MRP, MRP3 and MRP5 level compared to ovarian cancer patients with early stage ovarian cancer. No correlation of resistance proteins with grading was found. Patients with high Pgp and MRP expression had significantly shorter progression-free survival. Patients with drug resistance in vitro by means of the MTT assay had higher Pgp and MRP expression. Conclusion: P-glycoprotein and MRP may be useful predictor for outcome of primary chemotherapy in patients with ovarian cancer.

• Klíčová slova
• p170, MTT test, MRP, LRP,
• MeSH
• adjuvantní chemoterapie MeSH
• chemorezistence * účinky léků   MeSH
• cytostatické látky aplikace a dávkování   farmakologie   MeSH
• geny MDR MeSH
• histologické techniky MeSH
• imunohistochemie MeSH
• lidé MeSH
• mnohočetná léková rezistence účinky léků   MeSH
• nádorové biomarkery analýza   MeSH
• nádorové buňky kultivované účinky léků   MeSH
• nádory vaječníků * farmakoterapie   chirurgie   patologie   MeSH
• neúspěšná terapie MeSH
• P-glykoprotein analýza   MeSH
• přežití bez známek nemoci MeSH
• proteiny spojené s mnohočetnou rezistencí k lékům * analýza   MeSH
• protokoly protinádorové kombinované chemoterapie terapeutické užití   MeSH
• reprodukovatelnost výsledků MeSH
• screeningové testy protinádorových léčiv metody   statistika a číselné údaje   MeSH
• staging nádorů MeSH
• statistika jako téma MeSH
• stupeň nádoru MeSH
• techniky in vitro MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

The aim of our study was to determine the effect of selected cytostatics on a human ovarian cancer cell line A2780 as a model system for ovarian cancer treatment. This cell line is considered cisplatin-sensitive. Panel of tested cytostatics included cisplatin, paclitaxel, carboplatin, gemcitabine, topotecan and etoposide. These cytostatics have a different mechanism of action. To evaluate cytotoxic potential of the tested compounds, the methods measuring various toxicological endpoints were employed including morphological studies, MTT assay, dynamic monitoring of cell proliferation with xCELLigence, cell cycle analysis, caspase 3 activity and expression of proteins involved in cell cycle regulation and cell death. The A270 cell line showed different sensitivity towards the selected cytostatics, the highest cytotoxic effect was associated with paclitaxel and topotecan.

• MeSH
• buněčný cyklus MeSH
• čas MeSH
• cisplatina MeSH
• cytostatické látky * aplikace a dávkování   terapeutické užití   MeSH
• deoxycytidin MeSH
• etoposid MeSH
• fyziologie buňky MeSH
• incidence MeSH
• karboplatina MeSH
• kombinovaná farmakoterapie MeSH
• lidé MeSH
• nádorové buněčné linie * MeSH
• nádory vaječníků farmakoterapie   MeSH
• paclitaxel MeSH
• proliferace buněk * účinky léků   MeSH
• protinádorové látky klasifikace   MeSH
• protokoly protinádorové kombinované chemoterapie MeSH
• statistika jako téma MeSH
• topotekan MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

Cíl studie: Zhodnocení vztahu primární rezistence/senzitivity in vitro ze solidního nádoru a ascitu s klinickým průběhem onemocnění u pacientek s karcinomem ovaria. Typ studie: Prospektivní klinická studie. Název a sídlo pracoviště: Gynekologicko-porodnická klinika, LF UK a FN Hradec Králové. Metodika: Pomocí tetrazoliového (MTT) testu jsme stanovili rezistenci/senzitivitu in vitro u 45 vzorků ovariální nádorové tkáně a 26 vzorků ascitu pacientek s karcinomem ovaria. Testovali jsme paklitaxel, cisplatinu, karboplatinu, topotekan, gemcitabin a etoposid. Výsledky: Nejvyšší zastoupení primární rezistence in vitro jsme zjistili u gemcitabinu a karboplatiny. Nejnižší výskyt primární rezistence in vitro jsme zaznamenali u cisplatiny a topotekanu. Primární rezistence in vitro se vyskytla častěji u cisplatiny než u karboplatiny. Primární rezistence/senzitivita in vitro nekorelovala se stadiem onemocnění a stupněm diferenciace, ale byla ovlivněna histologickým typem ovariálního karcinomu. Pacientky rezistentní in vitro na paklitaxel a karboplatinu měly v průběhu chemoterapie první linie častěji trombocytopenii a recidivu základního onemocnění. Závěr: Nejnižší primární rezistenci jsme prokázali u cisplatiny. Primární rezistence in vitro korelovala s horším klinickým průběhem onemocnění u pacientek s karcinomem ovaria. Testování primární rezistence/senzitivity by mělo přispět k individualizaci současné standardní primární chemoterapie a následně ke zlepšení prognózy pacientek s karcinomem ovaria.

Objective: To assay correlation between primary resistance/sensitivity in vitro by MTT test in solid tumor and ascitic fluid and clininical outcome in ovarian cancer patients. Design: Prospective study. Setting: Department of Gynecology and Obstetrics, Medical Faculty Charles University, Prague and University Hospital, Hradec Králové. Methods: MTT – (3-(4,5 – Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) chemosensitivity assay was performed in 45 samples of ovarian cancer tissue and 26 samples of ascitic fluid in ovarian cancer patients. We studied the in vitro drug resistance profiles of ovarian cancer specimens exposed to cisplatin, carboplatin, paclitaxel, topotecan, gemcitabin, etoposid. Results: The highest incidence of primary drug resistance in vitro had gemcitabin and carboplatin and the lowest incidence of primary drug resistance had cisplatin and topotecan. Cisplatin had lower incidence of primary drug resistance in vitro than carboplatin. Grade and stage of epithelial ovarian cancer did not correlate to the primary drug resistance/sensitivity in vitro in ovarian cancer patients. The histological subtype of epithelial ovarian cancer correlated to the resistance and sensitivity to chemotherapeutic agents in vitro. Ovarian cancer patients with primary drug resistance to paclitaxel and carboplatin in vitro had more complications during primary chemotherapy, shorter progression free interval and worse prognosis of the disease. Conclusion: The lowest incidence of primary drug resistance in vitro had cisplatin. Ovarian cancer patients with in vitro resistance to paclitaxel and carboplatin had significantly higher risk for progression of disease when treated with standard platinum-paclitaxel based regimens. The primary resistance/sensitivity assay would contribute to the targeted treatment and better prognosis of ovarian cancer patients.

• Klíčová slova
• cílená léčba, MTT test, cytostatika,
• MeSH
• chemorezistence MeSH
• fertilizace in vitro MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• nádory vaječníků farmakoterapie   patologie   MeSH
• protinádorové látky terapeutické užití   MeSH
• screeningové testy protinádorových léčiv MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Cíl studie: Zhodnocení rezistence/sensitivity ovariálních nádorových buněk ze solidního nádoru a ascitu in vitro u pacientek s karcinomem ovaria. Název a sídlo pracoviště: Gynekologicko-porodnická klinika, LFUK a FN Hradec Králové. Metodika: Pomocí tetrazoliového (MTT) testu jsme stanovili rezistenci/sensitivitu in vitro u vzorků ovariální nádorové tkáně a vzorků ascitu pacientek s karcinomem ovaria. Testovali jsme paklitaxel, cisplatinu, karboplatinu, topotekan, gemcitabin a etoposid. Výsledky: Rezistenci in vitro jsme nejčastěji prokázali u etoposidu, gemcitabinu a karboplatiny. Nejvyšší sensitivitu in vitro jsme zjistili u cisplatiny a topotekanu. Zaznamenali jsme rozdíly v rezistenci/sensitivitě in vitro u cisplatiny a karboplatiny. Závěr: Testování rezistence/sensitivity ovariálních nádorových buněk by mělo přispět k individualizaci léčby pacientek s karcinomem ovaria.

Objective: To assay resistance/sensitivity by MTT test in solid tumor or ascitic fluid in ovarian cancer patients. Setting: Department of Gynecology and Obstetrics, Medical Faculty Charles University, Prague and University Hospital, Hradec Králové. Methods: MTT – (3-(4,5 – Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) chemosensitivity assay was performed in samples of ovarian cancer tissue and samples of ascitic fluid in ovarian cancer patients. We studied the in vitro drug resistance profiles of ovarian cancer specimens exposed to cisplatin, carboplatin, paclitaxel, topotecan, gemcitabin, etoposid. Results: The highest frequency of resistance in vitro occured for etoposid, gemcitabin and paclitaxel and the most effective chemotherapeutical agents in vitro were cisplatinum and topotecan. Cisplatin had the lowest incidence of drug resistance in vitro than carboplatin. Conclusion: Resistance/sensitivity assay would contribute for targeted treatment in ovarian cancer patients.

• Klíčová slova
• ovariální karcinom, rezistence, sensitivita, cytostatika, MTT test,
• MeSH
• chemorezistence účinky léků   MeSH
• dospělí MeSH
• financování organizované MeSH
• lidé MeSH
• nádory vaječníků farmakoterapie   MeSH
• protinádorové látky farmakologie   klasifikace   MeSH
• screeningové testy protinádorových léčiv metody   využití   MeSH
• techniky in vitro MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH