Vývoj vakcíny proti HIV-1 infekci je brzděn enormní variabilitou obalového glykoproteinu (Env), cíle neutralizačních protilátek. Identifikace sady monoklonálních protilátek neutralizujících široké spektrum variant HIV-1 (bn-mAb), reagujících s Env glykany, jako součástí jejich epitopu, nabízí novou cestu vývoje vakcíny. Jelikož kompozitní epitopy obsahující glykany jsou méně efektivní imunogeny než proteinové epitopy navrhujeme vyvinout sadu peptidů napodobujících epitopy rozlišované výše popsanými bn-mAb pomocí metody vysoce afinitních ligandů (binderů) vyvinutých spolunavrhovatelem projektu. Bindery budou selektovány na základě jejich specifické vazby na jednotlivé bn-mAb, budou fúzovány s albuminem a kotvami a ve formě proteoliposomů nebo DNA vakcín užity k imunizaci experimentálních zvířat. Poté bude charakterizována specificita, afinita a neutralizační aktivita sérových protilátek. Přístup skýtá možnost identifikovat kandidátní antigen pro vakcínu proti HIV-1 a představuje platformu pro vývoj vakcín napodobujících glykanové epitopy navozujících dobrou imunologickou paměť.; Development of vaccine preventing HIV-1 infection is hindered by high variability of envelope glycoprotein (Env), known target for neutralizing antibodies. Identification of several monoclonal antibodies neutralizing broad range of HIV-1 variants (bn-mAbs) recognizing Env glycans as a part of their epitopes provides the new opportunity for vaccine design. As the composite glycans-containing epitopes are less effective immunogens than protein epitopes, we propose to develop a set of peptides mimicking epitopes recognized by above bn-mAbs using high-affinity binders approach developed by the co-applicant. Binders will be selected based on specific interaction with respective bn-mAbs, fused to albumin, and used for immunization of animals in form of proteoliposomes or DNA vaccines. Sera will be characterized concerning to their specificity, affinity, and neutralization activity. This approach provides the possibility to identify the candidate antigen for future HIV-1 vaccine and provide a platform for development of glycan-mimicking vaccines eliciting good immunological memory.

• MeSH
• epitopy terapeutické užití   MeSH
• experimenty na zvířatech MeSH
• HIV infekce terapie   MeSH
• HIV obalový protein gp120 MeSH
• HIV-1 MeSH
• imunizace MeSH
• látky proti HIV MeSH
• ligandy MeSH
• neutralizující protilátky MeSH
• rekombinantní proteiny terapeutické užití   MeSH
• vakcíny proti AIDS MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• dermatovenerologie
• infekční lékařství
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Imunoglobulin A nefropatie (IgAN) je autoimunitní onemocnění bez známého spouštěcího mechanismu přispívajícího ke klinickému propuknutí choroby. V projektu navrhujeme, že infekce virem Epsteina a Barrové může být do spouštěčem IgAN, neboť B lymfocyty infikované EBV mají potenciál diferencovat do populace plasmatických buněk produkujících IgA1 molekuly s galaktózovou deficiencí, které mohou sloužit jako cíl přirozeně se vyskytujících protilátek reagujících s molekulami nesoucími oligosacharidy se sníženým množstvím galaktózy. Pro potvrzení této hypotézy navrhujeme studovat asociaci mezi sérologickými markery latentní, akutní a reaktivované EBV infekce s klinickou aktivitou IgAN. Dále navrhujeme testovat, zda EBV infekce IgA1 sekretujících plasmatických buněk vede k produkci IgA1 se sníženým obsahem galaktózy. Za třetí navrhujeme testovat zda EBV neobsahuje antigeny rozlišované specifickými protilátkami, které mohou zkříženě reagovat s galaktózově deficientním IgA1 charakteristickým pro IgAN, jež by tak mohly přispívat k tvorbě imunitních komplexů typických pro IgAN.; Immunoglobulin A nephropathy (IgAN) is autoimmune disease without known triggers contributing to clinical manifestation. In this application we propose that Epstein-Barr virus infection could be involved in initiation of IgAN - EBV-infected B cells with a potential to differentiate into IgA-producing plasma cells secrete galactose-deficient IgA1 molecules which serve as an antigen recognized by ubiquitous antibodies specific galactose-deficient molecule. To examine this we propose to investigate association of serological marker of latent, acute and reactivated EBV infection with markers of clinical activity of IgAN. Second we propose to prove the possibility that EBV infection of B cells induces production of galactose-deficient IgA1 in vitro, and third, we propose to prove whether EBV could serve as a target for recognition by glycan-specific antibodies and whether these antibodies could cross-react with galactose-deficient IgA1 and stimulate formation of nephritogenic immune complexes.

• MeSH
• B-lymfocyty MeSH
• galaktosa MeSH
• IgA nefropatie etiologie   MeSH
• imunoglobulin A MeSH
• infekce virem Epsteina-Barrové MeSH
• kauzalita MeSH
• sérologické testy MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• infekční lékařství
• nefrologie
• alergologie a imunologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

V projektu budou studovány vlastnosti velkých imunitních komplexů (IK) izolovaných ze sér pacientů s IgA nefropatií (IgAN) a nefritídou u Henoch-Schoenleinovy purpury (HSPN), které jsou etiopatologickým faktorem obou chorob. Tyto IK jsou tvořeny polymerním IgA1 na jehož pantovou oblast jsou navázány abnormální oligosacharidy, které vážou přirozené, cukerně specifické protilátky (nejčastěji IgG). Navrhujeme připravit několik monovalentních rekombinantních proteinů a syntetických peptidů obsahujících pantovou oblast lidského IgA1 obdobně glykosylovanou jako u IgAN, které budou testovány in vitro jako kompetitory tvorby výše zmíněných patologických IK. IK budou po izolaci charakterizovány, rozpuštěny (snížením pH) a v přítomnosti jednotlivých kompetitorůbudou po zvýšení pH7,4 opět reformovány. Nově vzniklé IK budou fyzikálně-chemicky charakterizovány a bude sledována jejich schopnost aktivovat lidské mesangiální buňky in vitro.; In this grant proposal the properties of high molecular weight immune complexes isolated from IgA nephropathy (IgAN) and Henoch-Schoenlein purpura nephritis (HSPN) patients? sera will be analyzed. They are main etiopathological factor of both diseases. These IC consist of polymeric IgA1 with aberrantly glycosylated hinge region, which is recognized by glycan-specific natural antibodies, predominantly of the IgG isotype. We propose do prepare several recombinant proteins and synthetic peptides containinghinge region with similar glycosylation aberrancy as in IgAN and test them as the competitors during above IC formation. IC from IgAN and HSPN patients? sera will be isolated, dissociated under low pH, and after pH normalization and competitor additionthe re-formatted IC will be physico-chemically characterized and their ability to stimulate proliferation of mesangial cells will be determined.

• MeSH
• blokátory receptorů AT1 pro angiotensin II MeSH
• glykosylace MeSH
• glykosyltransferasy MeSH
• hormony kůry nadledvin terapeutické užití   MeSH
• IgA nefropatie imunologie   MeSH
• IgA vaskulitida imunologie   MeSH
• imunokomplex MeSH
• imunosupresiva terapeutické užití   MeSH
• nízkoproteinová dieta MeSH
• oligosacharidy s větvenými řetězci MeSH
• renin antagonisté a inhibitory   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• nefrologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Text shrnuje dosavadní poznatky o DNA vakcinaci - metodě, do které se vkládají naděje na využití v prevenci a terapii především infekčních, ale i nádorových chorob. Popisuje vliv DNA vakcín na indukci buněčné, humorální i regulační imunitní odpovědi. Publikace je určena jak pregraduálním, tak hlavně postgraduálním studentům a zájemcům z řad pracovníků v biologických oborech přírodních věd a medicíně. U čtenářů se předpokládá základní znalost molekulární biologie a imunologie. Pro snadnější orientaci v textu je publikace doplněna terminologickým slovníkem.

• MeSH
• aktivace lymfocytů MeSH
• antigen prezentující buňky MeSH
• CD4-pozitivní T-lymfocyty MeSH
• CD8-pozitivní T-lymfocyty MeSH
• dendritické buňky MeSH
• DNA vakcíny MeSH
• imunologická odpověď na dávku MeSH
• specificita protilátek MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• Učební osnovy. Vyučovací předměty. Učebnice
• NLK Obory
• biologie
• NLK Publikační typ
• učebnice vysokých škol

Protein hsp90 Candida albicans patří mezi imunodominantní potenciálně protektivní antigeny schopné indukovat specifické T lymfocyty a imunoglobulíny jež mohou přispět ke kontrole mukózní ale i systémové kandidózy. Vznik autoimunity po imunizaci hsp90 nebyl jednoznačně potvrzen a spíše se ukazuje možný protektivní efekt při kontrole autoimunitních procesů. Hsp90 vakcinační strategie je tedy slibnou alternativou k současné terapii antifungálními látkami. Nalezení optimální formy hsp90 vakcinace zajišťující ochranu vakcinovaných zvířat během modelové kandidózy je prvním krokem při vývoji hsp90 vakcíny pro prevenci a terapii mukózní či systémové kandidózy u člověka.; Candida albicans hsp90 protein is considered as an immunodominant potentially protective antigen suitable to induce specific T cells and specific antibodies protective against mucosal and disseminated candidiasis. Induction of autoimmunity after immunisation with hsp90 was not yet described unambiguously. Conversely they are some evidences that the anti-hsp response is protective. Consequently hsp90 vaccination is promising alternative to antifungal drug therapy.

• MeSH
• autoimunita MeSH
• Candida albicans imunologie   MeSH
• DNA vakcíny imunologie   MeSH
• fungální vakcíny MeSH
• kandidóza vulvovaginální imunologie   prevence a kontrola   terapie   MeSH
• modely nemocí na zvířatech MeSH
• myši MeSH
• proteiny tepelného šoku HSP90 imunologie   terapeutické užití   MeSH
• vakcinace MeSH
• Check Tag
• myši MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• mikrobiologie, lékařská mikrobiologie
• alergologie a imunologie
• gynekologie a porodnictví
• dermatovenerologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The Turkevich method was optimized to prepare gold nanoparticles (AuNP) stabilized by polyethyleneglycol (PEG) for μCT. Using various independent modalities, we thoroughly characterized the optimized PEG-AuNPs. Here, we show that PEG-AuNPs are retained in the blood and provide a high contrast in the high-resolution μCT imaging of blood vessels and inner organs. The biodistribution is characterized by prolonged circulation in the blood and accumulation in the liver, spleen and skin. The accumulation of AuNP in the skin resulted in the blue discoloration of eyes and the whole skin. In vitro experiments using a leukemic monocyte THP-1 cell line model expressing high levels of NLRP3 demonstrated that the NLRP3inflammasome was not activated by PEG AuNP. Over 9 months, the mice were scanned by μCT and were in good health. Scans in mice using PEG-stabilized AuNPs in this study were sharper, with a higher contrast, when compared to a commercial contrasting agent at the same dose. The PEG-AuNPs were morphologically and chemically stable for at least two years when stored in the refrigerator.

• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

SARS-CoV-2 je virus, který infikuje respirační trakt a může způsobit závažné, někdy až život ohrožující onemocnění COVID-19. U více než 5 % symptomatických pacientů je infekce spojena s výskytem postakutních následků. První kontakt viru s imunitním systémem nazofaryngu a orofaryngu vyvolává slizniční imunitní odpověď spojenou s lokální produkcí sekrečních protilátek třídy imunoglobulinů A (sIgA), což může přispět k lokalizaci viru na horní cesty dýchací a asymptomatické či pouze klinicky mírné infekci. Během pandemie rychle vyvinuté systémově působící vakcíny úspěšně chrání před závažnou formou onemocnění a jeho postakutními následky, nicméně neindukují protilátky ve slizničních sekretech u dosud SARS-CoV-2-naivních jedinců. U těch, kteří již infekci prodělali, mohou přesto systémové vakcíny posílit tvorbu protilátek sIgA. Je třeba zdůraznit, že klinická prospěšnost systémové imunizace vakcínami proti COVID-19 přesvědčivě dokumentovaná u desítek milionů jedinců zastiňuje vzácné, mnohdy sporně dokumentované komplikace očkování. Neschopnost současných vakcín navodit slizniční imunitní odpověď a zabránit šíření viru sekrety infikovaných jedinců poukazuje na vzájemnou nezávislost slizniční a systémové imunity. To podtrhuje potřebu vývoje vakcín, které vyvolají patřičné odpovědi v obou kompartmentech imunitního systému.

SARS-CoV-2 is a virus which infects the respiratory tract and may cause severe, occasionally life-threatening disease COVID-19. In more than 5% of symptomatic patients the infection is associated with post-acute symptoms. The initial contact of the virus with the immune system of the nasopharynx and oropharynx induces a mucosal immune response manifested by the production of secretory IgA (sIgA) antibodies which may contribute to the restriction of the infection to the upper respiratory tract and an asymptomatic or clinically mild disease. The current systemically administered vaccines protected against the severe COVID-19 infection and its post-acute sequelae. However, they do not induce antibodies in mucosal secretions in SARS-CoV-2-naive individuals. In contrast, in those who previously experienced mucosal infection, systemically administered vaccines may stimulate sIgA production. The clinical benefit of systemic vaccination convincingly documented in tens of millions of individuals overshadows the rare, sometimes controversial reports of complications encountered after vaccination. The inability of current SARS-CoV-2 vaccines to induce mucosal immune responses and to prevent the spreading of the virus by external secretions demonstrates the mutual independence of mucosal and systemic compartments of the immune system, and thus emphasizes need for the development of vaccines inducing protective immune responses in both compartments.

• MeSH
• COVID-19 imunologie   prevence a kontrola   MeSH
• lidé MeSH
• slizniční imunita imunologie   účinky léků   MeSH
• vakcinace MeSH
• vakcíny proti COVID-19 * MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

Lyme disease (LD) spirochetes are well known to be able to disseminate into the tissues of infected hosts, including humans. The diverse strategies used by spirochetes to avoid the host immune system and persist in the host include active immune suppression, induction of immune tolerance, phase and antigenic variation, intracellular seclusion, changing of morphological and physiological state in varying environments, formation of biofilms and persistent forms, and, importantly, incursion into immune-privileged sites such as the brain. Invasion of immune-privileged sites allows the spirochetes to not only escape from the host immune system but can also reduce the efficacy of antibiotic therapy. Here we present a case of the detection of spirochetal DNA in multiple loci in a LD patient's post-mortem brain. The presence of co-infection with Borrelia burgdorferi sensu stricto and Borrelia garinii in this LD patient's brain was confirmed by PCR. Even though both spirochete species were simultaneously present in human brain tissue, the brain regions where the two species were detected were different and non-overlapping. The presence of atypical spirochete morphology was noted by immunohistochemistry of the brain samples. Atypical morphology was also found in the tissues of experimentally infected mice, which were used as a control.

• MeSH
• Borrelia burgdorferi komplex * genetika   MeSH
• Borrelia burgdorferi * genetika   MeSH
• Borrelia * genetika   MeSH
• lidé MeSH
• lymeská nemoc * MeSH
• mozek MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• kazuistiky MeSH

Most patients suffering from Lyme disease are effectively treated with antibiotics. In some patients, however, problems persist for a long time despite appropriate therapy. The term post-treatment Lyme disease syndrome (PTLDS) is currently used for this condition in scientific literature. The pathogenesis is still not precisely known, but the involvement of immunopathological mechanisms is assumed. In our study, we analyzed the presence of autoantibodies including myositis-specific (MSA) and myositis-associated autoantibodies (MAA) in patients with laboratory proven history of Lyme disease and with clinical symptoms of PTLDS. A total of 59 patients meeting the criteria for PTLDS were enrolled in this study. The control group consisted of 40 patients undergoing differential diagnosis of neurological disorders without clinical and/or laboratory-proven history of Lyme disease. The presence of autoantibodies was determined by immunoblot methods and positive samples were further tested for serum creatine kinase (CK) and myoglobin levels. The presence of myositis autoantibodies was detected in 18 subjects with suspected PTLDS (30.5%), but only in 5% of control subjects exhibiting no evidence of Lyme disease history. The difference was statistically significant (p = 0.002). The subsequent biochemical analysis of muscle-damage markers in positive subjects found a mild elevation in six MSA/MAA-positive PTLDS patients. The study detected raised MSA/MAA autoantibodies formation in the group of PTLDS patients raising the question about their involvement in the pathogenesis of this syndrome.

• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

• Publikační typ
• abstrakt z konference MeSH