phospholipase A activity
Dotaz
Zobrazit nápovědu
Úvod. Značná časť neurónov počas ischemickej cievnej mozgovej príhody podlieha apoptóze. Sú údaje o zvýšených koncentráciách tumor nekrotizujúceho faktora-α (TNF-α) a iných cytokínov v periférnej krvi počas ischemickej cievnej mozgovej príhody (CMP). TNF-α je induktorom apoptózy a existujú tiež údaje o účasti sekrečnej fosfolipázy A2 (SFLA2) pri apoptóze. V predkladanej práci sme sa zamerali na štúdium vzťahu medzi apoptózou periférnych lymfocytov a aktivitou SFLA2 u pacientov s ischemickou cievnou mozgovou. Materiál a metodika. V súbore 21 pacientov s dokázanou ischemickou cievnou mozgovou príhodou sme porovnali aktivitu sekrečnej fosfolipázy A2 s hodnotami apoptózy periférnych lymfocytov na začiatku ochorenia (pred liečbou) a po liečbe. Výsledky. V súbore zdravých pacientov bola aktivita SFLA2 3,2 ± 0,9 nmol/mg proteínov/min. U pacientov s ischemickou CMP pred liečbou boli koncentrácie SFLA2 7,2 ± 1,1 nmol/mg proteínov/min. Po liečbe boli priemerné koncentrácie SFLA2 6,1 ± 0,8 nmol/mg proteínov/min. U zdravých boh hodnoty apoptózy lymfocytov v periférnej krvi 12,1 % ± 3,1. Pri ischemickej CMP pred liečbou boU priemerné hodnoty apoptózy periférnych lymfocytov 21,49 % ± 7,73, kým po ukončení Hečby dosahovah hodnoty 21,01 % ± 7,29. Záver. Zistili sme signifikantně vyššie hodnoty sérovej aktivity SFLA2 ako aj apoptózy periférnych lymfocytov v porovnaní so zdravými jedincami. Liečba významne neovplyvnila uveděné hodnoty.
Introduction. A significant proportion of neurons in the course of ischemic stroke undergoes apoptosis. There are data regarding elevated concentrations of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and of other cytokines in the peripheral blood during ischemic stroke. TNF-α is an inductor of apoptosis and there are also data on the participation of secretory phospholipase A2 (SFLA2) in apoptosis. In the presented work, we have focused on studying the relationship between apoptosis of peripheral lymphocytes and SFLA2 activity in patients with ischemic stroke. Material and Methods. In a group of 21 patients with documented ischemic stroke, we compared the activity of secretory phospholipase A2 with values of apoptosis of peripheral lymphocytes at disease onset (before treatment) and after treatment. Results. In a group of healthy controls, the mean activity of SFLA2 was 3.2 ± 0.9 nmol/mg of proteins/min. In patients with ischemic stroke before treatment, the SFLA2 concentration was 7.2 ± 1.1 nmol/mg of proteins/min. After treatment, the mean SFLA2 concentration was 6.1 ± 0.8 nmol/mg of proteins/min. In normals, the values of apoptosis of lymphocytes in the peripheral blood were 12.1 ± 3.1 %. In ischemic stroke prior to treatment, the average value of apoptosis of peripheral lymphocytes were 21.49 ± 7.73 %, whereas after therapy they reached 21.01 ± 7.29 %. Conclusion. We found significantly higher levels of serum SFLA2 activity as well as higher apoptosis of peripheral lymphocytes in ischemic stroke patients when compared to healthy individuals. These values were not significantly influenced by treatment.
- MeSH
- apoptóza genetika MeSH
- fosfolipasy A fyziologie krev MeSH
- interferon alfa fyziologie krev MeSH
- ischemie mozku diagnóza farmakoterapie patologie MeSH
- klinické laboratorní techniky MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- lymfocyty metabolismus MeSH
- senioři MeSH
- Check Tag
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
- srovnávací studie MeSH
Plant nonspecific phospholipase C (NPC) is a recently described enzyme which plays a role in membrane rearrangement during phosphate starvation. It is also involved in responses of plants to brassinolide, abscisic acid (ABA), elicitors, and salt. The NPC activity is decreased in cells treated with aluminum. In the case of salt stress, the molecular mechanism of NPC action is based on accumulation of diacylglycerol (DAG) by hydrolysis of phospholipids and conversion of DAG, the product of NPC activity, to phosphatidic acid (PA) that participates in ABA signaling pathways. Here we describe a step-by-step protocol, which can be used to determine in situ or in vitro NPC activity. Determination is based on quantification of fluorescently labeled DAG as a product of cleavage of the fluorescently labeled substrate lipid, phosphatidylcholine. High-performance thin-layer chromatography is used for separation of fluorescent DAG. The spot is visualized with a laser scanner and the relative amounts of fluorescent DAG are quantified using imaging software.
- MeSH
- chromatografie na tenké vrstvě MeSH
- diglyceridy metabolismus MeSH
- enzymatické testy metody MeSH
- fluorescenční barviva metabolismus MeSH
- fosfolipasy typu C metabolismus MeSH
- referenční standardy MeSH
- rostliny enzymologie MeSH
- substrátová specifita MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Fosfolipáza D (PLD) bola póvodne objavená v rastlinných organizmoch. Plní dóležitú úlohu v regulácii bunkových funkcií, a to nielen u rastlín, ale aj u živočíchov. Je zaujímaná z hladiska dominantného postavenu v signálne transdukčných procesoch. Reguluje využitie fosfolipidov bunkových membrán na špecifické účely - produkty katalytického účinku sú zapojené do vnútrobunkových komunikačných procesov. Štúdium systému bunkovej regulácie preukázalo, že PLD je zakomponovaná do lipidovej signalizácie oktadekánovej cesty vedúcej k produktu kyseliny jasmónovej, ktorá je základnou signálnou molekulou v rastlinách. Fosfolipázou D riadená hydrolýza membránových fosfolipidov tak stavu tento enzým do roviny účastníka transmembránovej a bunkovej signalizácie. Táto oblast je zaujímaná i z hladiska tvorby biologicky aktívnych látok v rastlinách. Kedže signálne regulovaná syntéza niektorých sekundárnych metabolitov prostredníctvom lipidovej signálne] cesty bola už preukázaná (indukcia expresie génov kódujúcich enzýmy biosyntézy flavonoidov a terpénov), oblast štúdia PLD sa javí ako perspektívna. Tento článok je orientovaný na rastlinnú PLD a podána základný prehlad o jej biochemických a molekulárno-biologických vlastnostiach (enzymológia, molekulárna štruktúra, subcelulárna lokalizácia, izoenzýmové formy) a fyziologických fiznkciách na bunkovej úrovni (lipidová signálna cesta, degradácia fosfolipidov, fytohormóny a bunková signalizácia, rast, vývin a starnutie bunky, membránová remodelácia).
Phospholipase D (PLD) was hrst discovered in planu. It plays an important role in the regulation of cell functions not only in planu, but also in animal systems. It is interesting from the aspect of its dominant position in the signalling transduction processes. It controls the utilization of the membrane phospholipids for specific intentions - products of its catalytic activity are involved in intracellular communication processes. The study of the cell-regulation-system shows tkat PLD is a part of lipid-based signalling via octadecanoid pathway, which leads to the production of jasmonic acid, the basic signalling molecule in planu. PLD-mediated hydrolysis of the membrane phospholipids posed this enzyme finto the level of the transmembrane and cell signalling participant. This area is interesting in the aspect of the production of biologically active compounds in planu. Because the signal-regulated synthesis of some secondary metabolites by the lipid signalling pathway has been already shown (induction of the gene expression coding the biosynthetic enzymes of flavonoids and terpenoids), the area of PLD study is perspective. This article is orientated on plant PLD and gives a basic review of its biochemical and molecular-biologccky properties (enzymology, molecular structure, subcellular localization, isoenzymes) and its physiological functions on the cell level (lipid signalling pathway, phospholipid degradation, phytohormones and cell signalling, growth, development and cell ageing, membrane remodeling).
- MeSH
- fosfolipasa D chemie metabolismus MeSH
- fosfolipidy MeSH
- molekulární biologie MeSH
- stárnutí buněk MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
Fosfolipáza A2 asociovaná s lipoproteiny (Lp-PLA2) je vaskulárně specifický zánětlivý enzym, který hraje roli v tvorbě vulnerabilních, k ruptuře náchylných aterosklerotických plátů. Předpokládá se, že tvoří pojítko mezi oxidativní modifi kací LDL a zánětlivou odpovědí arteriální intimy. Na rozdíl od hsCRP a dalších zánětlivých ukazatelů produkovaných játry není asociována s BMI, vykazuje podstatně menší intraindividuální variabilitu a má vyšší vaskulární specificitu. Prospektivní primárně i sekundárně preventivní studie ukazují schopnost Lp-PLA2 nezávisle predikovat koronární i ischemické cévní mozkové příhody, a to i po adjustaci na tradiční rizikové faktory a hsCRP. Z výše uvedených důvodů by se mohl tento nový zánětlivý marker stát cenným pomocným ukazatelem zvýšeného kardiovaskulárního rizika, a to zejména u osob spadajících do oblasti intermediárního rizika, které dle současných doporučení nejsou indikovány k dostatečně intenzivnímu ovlivnění klasických rizikových faktorů, zejména pak hyperlipidemie. Jak režimová opatření, tak většina hypolipidemik snižují koncentrace Lp-PLA2. Selektivní inhibitor aktivity Lp-PLA2 – darapladib – je v současné době testován ve velké morbiditní a mortalitní studii STABILITY (Stabilization of Atherosclerotic Plaque by Initiation of Darapladib Therapy), která by mohla prokázat kauzální roli tohoto nového rizikového faktoru v procesu aterogeneze.
Lipoprotein-associated phospholipase A2 (Lp-PLA2) is a vessel-specific inflammatory enzyme playing a role in the formation of vulnerable, rupture-prone atherosclerotic plaques. Lp-PLA2 is believed to be a link between oxidative LDL modifi cation and the infl ammatory response by the arterial intima. Unlike high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) and other infl ammatory markers produced by the liver, Lp-PLA2 is not associated with BMI, shows substantially lower intra-individual variability and is more vessel-specific. Prospective primary and secondary prevention studies have shown Lp-PLA2 potential to predict coronary events and ischemic stroke even after adjustment to conventional risk factors and hs-CRP. It is for these reasons that this novel marker of infl ammation could become an invaluable surrogate marker of increased cardiovascular risk, in particular in individuals at intermediate risk not indicated (by current guidelines) for adequate modifi cation of conventional risk factors, in particular hyperlipidemia. Lp-PLA2 levels are decreased both by lifestyle modifi cations and most lipid-lowering agents. Darapladib, a selective Lp-PLA2 activity inhibitor, is currently being tested in a large morbi dity and mortality study STABILITY (Stabilization of Atherosclerotic Plaque by Initiation of Darapladib Therapy) which could potentially document the causative role of this novel risk factor in the process of atherosclerosis.
- Klíčová slova
- Kardiovaskulární riziko–, Darapladib,
- MeSH
- 1-alkyl-2-acetylglycerofosfocholinesterasa antagonisté a inhibitory diagnostické užití krev MeSH
- ateroskleróza diagnóza farmakoterapie krev MeSH
- biologické markery krev MeSH
- C-reaktivní protein diagnostické užití MeSH
- fosfolipasy A2 fyziologie metabolismus MeSH
- kardiovaskulární nemoci MeSH
- klinické zkoušky jako téma MeSH
- lidé MeSH
- prospektivní studie MeSH
- riziko MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Type I plant nucleases play an important role in apoptotic processes and cell senescence. Recently, they have also been indicated to be potent anticancer agents in in vivo studies. The first structure of tomato nuclease I (TBN1) has been determined, its oligomerization and activity profiles have been analyzed and its unexpected activity towards phospholipids has been discovered, and conclusions are drawn regarding its catalytic mechanism. The structure-solution process required X-ray diffraction data from two crystal forms. The first form was used for phase determination; the second form was used for model building and refinement. TBN1 is mainly α-helical and is stabilized by four disulfide bridges. Three observed oligosaccharides are crucial for its stability and solubility. The active site is localized at the bottom of the positively charged groove and contains a zinc cluster that is essential for enzymatic activity. An equilibrium between monomers, dimers and higher oligomers of TBN1 was observed in solution. Principles of the reaction mechanism of the phosphodiesterase activity are suggested, with central roles for the zinc cluster, the nucleobase-binding pocket (Phe-site) and Asp70, Arg73 and Asn167. Based on the distribution of surface residues, possible binding sites for dsDNA and other nucleic acids with secondary structure were identified. The phospholipase activity of TBN1, which is reported for the first time for a nuclease, significantly broadens the substrate promiscuity of the enzyme, and the resulting release of diacylglycerol, which is an important second messenger, can be related to the role of TBN1 in apoptosis.
- MeSH
- deoxyribonukleasy chemie metabolismus MeSH
- fosfolipasy chemie metabolismus MeSH
- katalytická doména MeSH
- krystalizace MeSH
- krystalografie rentgenová MeSH
- lidé MeSH
- multienzymové komplexy chemie metabolismus MeSH
- myši MeSH
- rostlinné proteiny chemie metabolismus MeSH
- Solanum lycopersicum enzymologie MeSH
- vztahy mezi strukturou a aktivitou MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Selective inhibitors of secretory phospholipase A2 and lipoprotein-associated phospholipase A2 are potential candidates for reducing recurrent cardiovascular events in patients with established coronary heart disease (CHD). With the active enrollment of CHD patients into phase III clinical trials with both classes of inhibitors, this article reviews the available experimental animal and human trial evidence that provides the rationale for the development of the phospholipase A2 inhibitors varespladib methyl and darapladib as preventive therapy. RECENT FINDINGS: Recently completed experimental animal studies, human biomarker data, and vascular imaging studies provide support for proceeding with clinical outcome trials secretory phospholipase A2 and lipoprotein-associated phospholipase A2 inhibition. SUMMARY: Both secretory phospholipase A2 and lipoprotein-associated phospholipase A2 inhibitors hold promise for the reduction of recurrent cardiovascular events in patients treated with current standards of care. The completion of the ongoing clinical event trials has the potential to provide a new dimension to secondary preventive therapy.
- MeSH
- 1-alkyl-2-acetylglycerofosfocholinesterasa antagonisté a inhibitory MeSH
- acetáty aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- ateroskleróza enzymologie epidemiologie farmakoterapie patofyziologie MeSH
- benzaldehydy aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- biologické markery analýza MeSH
- cílená molekulární terapie metody MeSH
- indoly aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- klinické zkoušky kontrolované jako téma MeSH
- lékové formy MeSH
- lidé MeSH
- modely nemocí na zvířatech MeSH
- myši transgenní MeSH
- myši MeSH
- oximy aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- rizikové faktory MeSH
- sekreční fosfolipasy A2 antagonisté a inhibitory MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
