Transplantation of the whole pancreas or isolated Langerhans islets are currently the only available therapeutic options that allow to cure insulin-dependent diabetes. However, both of these options are significantly limited due to the lack of available organ donors. Insulin-producing cells (IPCs) derived from non-endocrine pancreatic cells (NEPCs) represent very promising alternative source that could be available for the treatment of all diabetic patients. Published data have confirmed that IPCs derived from NEPCs are able to cure diabetes. However, only a small percentage of pancreatic cells is able to transdifferentiate into IPCs under the standard conditions. Therefore a more efficient but also unsafe method that uses viral vectors has to be applied in order to improve efficiency of that process. New approach of cell reprogramming that is based on the application of synthetic modified mRNA could solve all these issues. Therefore we propose to use synthetic modified mRNAs encoding key transcription factors of beta-cell differentiation for transdifferentiation of NEPCs into IPCs.

Transplantace inzulín produkující tkáně představuje optimální možnost léčby diabetu závislého na inzulínu. Vzhledem k nedostatku lidských orgánových dárců je však tento způsob léčby málo dostupný. Alternativním zdrojem dostupným pro všechny pacienty by mohly být inzulín produkující buňky získané řízenou přeměnou neendokrinních buněk pankreatu. Doposud publikované práce potvrdily, že je možné neendokrinní pankreatické buňky transdiferencovat na inzulín produkující buňky, které jsou po transplantaci schopny vyléčit diabetes. Zásadním problémem dosavadních postupů je však nízká efektivita přeměny na inzulín produkující buňky, nebo nutnost využít postupy genové terapie, které sebou nesou rizika nádorového zvratu. Nedostatky těchto postupů hodláme vyřešit s pomocí nové metody založené na použití modifikovaných molekul mRNA. V předkládaném projektu hodláme ke stimulaci transdiferenciace pankreatických neendokrinních buněk na inzulín produkující beta-buňky využít modifikované molekuly mRNA, které umožní expresi klíčových transkripčních faktorů stimulujících diferenciaci beta-buněk.

• MeSH
• beta-buňky transplantace   MeSH
• diabetes mellitus chirurgie   MeSH
• inzulin terapeutické užití   MeSH
• messenger RNA terapeutické užití   MeSH
• přeprogramování buněk MeSH
• transdiferenciace buněk MeSH
• transkripční faktory MeSH
• transplantace buněk metody   veterinární   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diabetologie
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

Standardní léčbou diabetu vyvolaného ztrátou endogenní produkce inzulinu je dnes tzv. intenzifikovaná inzulinová léčba. Zavedení nových technologických metod aplikace inzulinu a monitorování koncentrací krevního cukru v podkoží posunulo možnosti dobré metabolické kontroly, ale problematiku rozvoje pozdních komplikací diabetu ani riziko problematických hypoglykemií neodstranilo. Cílem transplantace inzulin produkující tkáně, v současné době pomocí transplantace celého pankreatu či izolovaných Langerhansových ostrůvků, je obnova glukózou regulované inzulinové sekrece, zastavení progrese diabetických komplikací a zlepšení kvality života. Transplantace je většinou indikována u pacientů s již rozvinutými progresivními komplikacemi, kterým každodenní výkyvy glykemií výrazně narušují kvalitu života. Základním předpokladem je, že riziko transplantačního výkonu a trvalé imunosuprese bude vyváženo metabolickou stabilizací, kterou endogenní sekrece zajistí. Institut klinické a experimentální medicíny v Praze nabízí několik modalit, jejichž výběr závisí na stupni orgánového postižení, nebezpečí hypoglykemií a také na pacientově rozhodnutí.

Intensified insulin therapy represents currently the standard of care for diabetic subjects with loss of endogenous insulin production. Implementation of novel technological was of insulin Administration and glucose monitoring improved the level of metabolic control, however has not still prevented the develomment of organ compcilations and the risk of problematic hypoglycemias. The aims pancreas or pancreatic islet transplantaton are to restore glucose‑regulated insulin production, halt the progression of microangiopatic complication and to improve the patient´s qualiti of live. Transplantation is usually performed only in subjects with advanced aibetes complication, in thome the day to day glycemic excursions significantly impair the quality of life. Principal presumption is, that the risk of the transplant procedure and life‑long immunosupression will be compensated by stable metabolic controle due to restored endogenous insulin production. The Institute for Clinical and Experimental Medicine in Prague now offers several transplant modalities. Their selection depends ant he character of organ impairments, risk of hypoglycemia on standard insulin therapy and also on the patient´s decision.

• MeSH
• beta-buňky patologie   transplantace   účinky léků   MeSH
• biomedicínské technologie * metody   přístrojové vybavení   trendy   MeSH
• diabetes mellitus * prevence a kontrola   terapie   MeSH
• hypoglykemie prevence a kontrola   terapie   MeSH
• imunosupresivní léčba metody   trendy   využití   MeSH
• inzulinová rezistence fyziologie   imunologie   MeSH
• komplikace diabetu prevence a kontrola   terapie   MeSH
• Langerhansovy buňky imunologie   transplantace   MeSH
• Langerhansovy ostrůvky imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• statistika jako téma MeSH
• transplantace buněk metody   využití   MeSH
• transplantace Langerhansových ostrůvků * metody   trendy   využití   MeSH
• transplantace tkání metody   trendy   využití   MeSH
• transplantační imunologie genetika   imunologie   účinky léků   MeSH
• výsledky a postupy - zhodnocení (zdravotní péče) MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Kritická končetinová ischemie (CLI) limituje úspěšnost léčby defektů u pacientů se syndromem diabetické nohy (SDN). Až u 50 % těchto pacientů není možné provést standardní revaskularizaci (perkutánní transluminální angioplastikou (PTA) nebo bypassem), jedná se o tzv. no-option CLI (NOCLI), která může být indikací k autologní buněčné terapii (ABT). Cílem sdělení je demonstrovat bezpečnost a dlouhodobý efekt ABT u pacientky s NOCLI. Pacientka byla léčena ABT jako jedna z prvních v našem centru v roce 2008. 42 měsíců po ABT došlo k trvalému zhojení vícečetných defektů postižené končetiny. K významnému zlepšení parametrů ischemie došlo 3 měsíce po ABT a přetrvává nyní víc než 8 let.

Critical limb ischemia (CLI) is a main factor limiting wound healing in patients with diabetic foot disease (DFD). Up to 50% of these patients are not eligible for standard revascularization procedures (percutaneous transluminal angioplasty or bypass) thereby defined as "no-option" CLI (NOCLI). Autologous cell therapy (ACT) has emerged as a perspective alternative treatment of NOCLI. The aim of this case report is to demonstrate safety and long-term effect of ACT in a patient with NOCLI. The patient received ACT among the first in our centre in 2008. Multiple ulcers of the impaired foot healed 42 months later with persistent effect. Significant ischemia improvement was recorded 3 months after ACT and has been lasting so far for more than 8 years.

• MeSH
• autologní transplantace metody   MeSH
• diabetes mellitus 1. typu komplikace   MeSH
• diabetická noha * terapie   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• onemocnění periferních arterií etiologie   chirurgie   MeSH
• transplantace buněk metody   MeSH
• výsledek terapie MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

• MeSH
• beta-buňky transplantace   MeSH
• buněčná a tkáňová terapie MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• diabetes mellitus 1. typu terapie   MeSH
• indukované pluripotentní kmenové buňky MeSH
• techniky in vitro MeSH
• transplantace buněk metody   MeSH
• Publikační typ
• novinové články MeSH

Acute liver failure (ALF) is a clinical syndrome resulting from widespread damage of hepatocytes, with extremely high mortality rate. Urgent orthotopic liver transplantation was shown to be the most effective therapy for ALF but this treatment option is limited by scarcity of donor organs. Therefore, hepatocyte transplantation (Tx) has emerged as a new therapeutical measure for ALF, however, the first clinical applications proved unsatisfactory. Apparently, extensive preclinical studies are needed. Our aim was to examine if hepatocytes isolated from transgenic "firefly luciferase" Lewis rats into the recipient liver would attenuate the course of thioacetamide (TAA)-induced ALF in Lewis rats. Untreated Lewis rats after TAA administration showed a profound decrease in survival rate; no animal survived 54 h. The rats showed marked increases in plasma alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) activities, in plasma level of bilirubin and ammonia (NH(3)), and in a significant decrease in plasma albumin. Hepatocyte Tx attenuated the course of TAA-induced ALF Lewis rats which was reflected by improved survival rate and reduced degree of liver injury showing as lowering of elevated plasma ALT, AST, NH(3) and bilirubin levels and increasing plasma albumin. In addition, bioluminescence imaging analyses have shown that in the TAA-damaged livers the transplanted hepatocyte were fully viable throughout the experiment. In conclusion, the results show that hepatocyte Tx into the liver can attenuate the course of TAA-induced ALF in Lewis rats. This information should be considered in attempts to develop new therapeutic approaches to the treatment of ALF.

• MeSH
• akutní selhání jater chemicky indukované   mortalita   terapie   MeSH
• hepatocyty transplantace   MeSH
• krysa rodu rattus MeSH
• míra přežití trendy   MeSH
• potkani inbrední LEW MeSH
• thioacetamid toxicita   MeSH
• transplantace buněk metody   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• krysa rodu rattus MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Our study compares the histological and immunohistochemical cellular composition of two different chondrocyte-seeded biomaterials and the results of their transplantation. Our study cohort included 21 patients, comprising 19 men and two women with a mean age of 32 years, who were affected by single chondral lesions of the femoral condyles. These patients were enrolled in our study and treated with arthroscopic implantation of the tissue Hyalograft C and/or Brno culture. Brno culture bioengineered with a fibrin-based scaffold contains round cells showing features of differentiated chondrocytes expressing S-100 protein and α-smooth muscle actin. In contrast, in the case of Hyalograft C, the scaffold was made up of a fibrillar network composed of biomaterial fibres of the esters of hyaluronic acid and cells resembling fibroblasts and myofibroblasts and expressing only α-smooth muscle actin. The average size of the defects was 2.5 cm2. Patients were evaluated using the standardized guidelines of the International Knee Documentation Committee. During the comparison of bioptic samples obtained from both patient cohorts, we did not observe any important differences in the histological makeup of the newly formed cartilage. The histological analysis of these two groups of homogeneous patients shows that this bioengineered approach, under proper indications, may offer favourable and stable clinical results over time, in spite of the different matrix and cellular composition of the two transplants used.

• MeSH
• aktiny metabolismus   MeSH
• artroskopie MeSH
• biokompatibilní materiály chemie   MeSH
• biopsie MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• chondrocyty cytologie   transplantace   MeSH
• chrupavka patologie   MeSH
• dospělí MeSH
• femur patologie   MeSH
• fibroblasty cytologie   MeSH
• kohortové studie MeSH
• koleno patologie   MeSH
• kyselina hyaluronová analogy a deriváty   chemie   MeSH
• lidé MeSH
• proteiny S100 metabolismus   MeSH
• tkáňové inženýrství metody   MeSH
• transplantace buněk metody   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• srovnávací studie MeSH

• Klíčová slova
• alloreaktivita, periferní krev,
• MeSH
• fetální krev imunologie   MeSH
• imunosupresivní léčba MeSH
• isoantigeny MeSH
• klinická studie jako téma MeSH
• lidé MeSH
• modely u zvířat MeSH
• myši MeSH
• regulační T-lymfocyty * imunologie   transplantace   účinky léků   MeSH
• rejekce štěpu imunologie   MeSH
• transplantace buněk dějiny   metody   MeSH
• transplantace orgánů MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• myši MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

Kmenové bu ň ky se stávají nad ě jným nástrojem bun ěč né terapie pro lé č bu ř ady doposud nelé č itelných defekt ů a onemocn ě ní. Aby bu ň ka mohla být ozna č ena jako kmenová, musí spl ň ovat dv ě základní kritéria – musí mít schopnost sebeobnovy a schopnost diferenciace do jiných typ ů bun ě k. Tyto požadavky spl ň ují embryonální kmenové bu ň ky, kmenové bu ň ky z pupe č níkové krve, kmenové bu ň ky získané z dosp ě lého orga- nisnu a um ě le p ř ipravené, tzv. indukované pluripotentní kmenové bu ň ky. Další významnou vlastností kmenových bun ě k je schopnost regulovat imunitní reakce. Bylo prokázáno, že r ů zné typy kmenových bun ě k inhibují aktivitu bun ě k p ř irozené i adaptivní imunity, potla č ují proliferaci aktivovaných leukocyt ů , inhibují produkci cytokin ů a potla č ují vývoj cytotoxických T a NK bun ě k. V preklinických modelech in vivo bylo prokázáno, že podávání mesenchymálních kmenových bun ě k prodlužuje p ř ežívání alotransplantát ů , inhibuje rozvoj a projevy autoimunitních onemocn ě ní a potla č uje zán ě tlivé reakce. Tyto poznatky vedly k zahájení klinických studií využívajících kmenové bu ň ky. Kmenové bu ň ky lze podávat lokáln ě nebo systémov ě a jejich efekt je spojen s produkcí ř ady r ů stových a trofických faktor ů , diferencia č ním potenciálem a imuno- supresivním p ů sobením, kdy potla č ují nežádoucí imunologické reakce. A č koliv z ů stává mnoho nezodpov ě zených otázek spojených s užitím terapie založené na kmenových bu ň kách, tyto bu ň ky mají nepochybn ě velký potenciál v regenerativní a reparativní medicín ě .

Stem cells become a perspective and promising tool for cellular therapy to treat a number of so far uncurable defects and disea ses. To be cell recognized as stem cell, it must fulfil two basic criteria – the ability of self-renewal and the capability to differentiate in to other cell types. These characteristics have embryonic stem cells, the cells from umbilical cord, stem cells isolated from tissues of adult organ ism and arteficially prepared so called induced pluripotent stem cells. Another important property of stem cells is their ability to modulate immune response. It has been shown in vitro , that various types of stem cells inhibit the activity of cells of both natural and adaptive immunity, suppress proliferation of activated leukocytes, attenuate production of cytokines and suppress development of cytotoxic T and NK cells. In preclinical models it has been shown that administration of mesenchymal stem cells prolongs survival of allografts, attenuates development and manifestat ion of auto- immune diseases and inhibits inflammatory reactions. These observations iniciated numerous clinical studies utilizing stem cell s for cell-based therapy. Stem cells are applied locally or systemically and their therapeutic potential is mediated by differentiation into oth er cell types, by production of numerous growth and trophic factors and by their ability to suppress harmful immune reactions. Although there is a number of unanswered questions associated with the use of stem cell-based therapy, stem cells have undoubtedly enormous potential in rege nerative and reparative medicine.

• MeSH
• buněčná a tkáňová terapie * metody   MeSH
• imunologická tolerance MeSH
• kmenové buňky * fyziologie   imunologie   klasifikace   MeSH
• lidé MeSH
• lymfocyty imunologie   MeSH
• transplantace buněk metody   MeSH
• transplantace mezenchymálních kmenových buněk metody   MeSH
• transplantační tolerance MeSH
• výzkum kmenových buněk MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• klinické zkoušky MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

• MeSH
• autologní transplantace metody   MeSH
• kloubní chrupavka * patofyziologie   růst a vývoj   zranění   MeSH
• kultivované buňky transplantace   MeSH
• lidé MeSH
• ortopedické výkony metody   ošetřování   MeSH
• osteoartróza diagnóza   etiologie   terapie   MeSH
• tkáňové inženýrství MeSH
• transplantace buněk * metody   využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

U rozsáhle popálených pacientů je základem chirurgického přístupu v léčbě co nejrychlejší uzávěr ranné plochy. Pro pokrytí co největší plochy lůžka rány je autotransplantát před aplikací široce síťován (mesh grafting). Cílem této studie bylo podpořit epitelizaci prostorů mezi můstky široce síťovaného autotransplantátu pomocí aplikace epidermálních buněk pacienta a biologického krytu Xe-Derma (XD). Buněčná suspenze byla získána peroperačně z tenkého dermo-epidermálního štěpu (1–4 cm2) kůže pacienta ReCell systémem nebo standardní trypsinizací. U 14 pacientů s hlubokými popáleninami nad 30 % povrchu těla byla část ranné plochy o rozsahu 2–4 % tělesného povrchu po excizi kryta autotransplantátem široce meshovaným v poměru 1:3 (8 pacientů) nebo 1:6 (6 pacientů). Na třetinu vymezené autotransplantované plochy byly nakapány buňky do ok autotransplantátu a kryty XD (skupina buňky+XD). Druhá třetina ranné plochy byla kryta pouze XD bez buněčné suspenze (skupina XD) a třetí část plochy byla standardně kryta mastným tylem Grassolind (kontrola). Rány kryté autoštěpem síťovaným v poměru 1:3 se pod všemi testovanými kryty zahojily do 9 dnů, rozdíly v epitelizaci byly obtížně hodnotitelné. Při poměru síťování 1:6 byla epitelizace ok autotransplantátu ve skupině buňky+XD rychlejší (9–14 dní) než ve skupině XD (12–17 dní), kvalita zhojené kůže byla v obou případech velmi dobrá. Kontrolní plocha krytá tylem Grassolind se hojila protrahovaně, za 20 dnů bylo zhojeno 30–50 % plochy mezer, epidermis se rozpadala. Studie prokázala výrazný přínos sendvičového krytí (kombinace autoštěpu, autologních kožních buněk a XD) pro hojení široce síťovaných autotransplantátů. Také krytí samotnou XD vykázalo pozitivní hojivý efekt.

In extensively burned patients the major step in complex therapy is the fastest possible closure of the wound. To cover the highest possible extent of the wound bed, the autograft is largely meshed prior to application. This work aimed to stimulate the epidermal regeneration of spaces (windows) surrounded by bridges of a largely expanded dermo-epidermal graft using autologous epidermal cells and acellular pig dermis Xe-Derma (XD). Cells were obtained from the patient’s skin (1–4 cm2) by the Re- Cell system or by standard trypsinization. In 14 patients with deep burns a part of the burn area was covered with the autograft meshed 1:3 (8 patients) or 1:6 (6 patients). On one part of the burned area the cells were dropped into the windows of the graft and covered with XD (cells+XD group). The second part was covered with XD alone (XD group). The third part was covered with Grassolind tulle gras (control). The wounds covered with the autograft meshed 1:3 had all healed completely in the course of nine days and differences in the healing time were difficult to distinguish. In wounds autografted with 1:6 mesh, epithelization of windows was faster in the areas treated with cells+XD (9–14 days) then with XD alone (12–17 days); the quality of the healed skin was good in both cases. Healing of the control area covered with Grassolind was prolonged: in 20 days 30–50 % of the grafted area had healed, and the epidermis was fragile and disintegrated. The study showed a positive effect of three sandwiched biological covers (largely expanded autograft, autologous skin cells, XD) on healing of widely meshed autografts. XD without cells also showed a positive healing effect.

• Klíčová slova
• ReCell systém, izolace buněk,
• MeSH
• autologní transplantace MeSH
• biologické krytí MeSH
• dospělí MeSH
• epidermis transplantace   MeSH
• financování organizované MeSH
• hojení ran MeSH
• keratinocyty transplantace   MeSH
• kohortové studie MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• melanocyty transplantace   MeSH
• mladiství MeSH
• popálení chirurgie   terapie   MeSH
• povrch těla MeSH
• transplantace buněk metody   MeSH
• transplantace kůže metody   MeSH
• transplantáty MeSH
• výsledky a postupy - zhodnocení (zdravotní péče) statistika a číselné údaje   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH
• srovnávací studie MeSH