Spontánní potraty postihují značnou část žen v reprodukčním věku. Etiologie je multifaktoriální.Část těchto ztrát je pravděpodobně způsobena vrozenými metabolickými poruchami. Cílem naší studie je zjistit jaký je výskyt dědičně podmíněných metabolickýchporuch u spontánních potratů.; The aetiology of early spontaneous abortions is multifactorial. It can be expected that part of early pregnancy losses can be caused by enzyme dificiency. The aim of our study is to investigate metabolic defects as a potential cause of abortions.

• MeSH
• genetické nemoci vrozené epidemiologie   metabolismus   MeSH
• samovolný potrat etiologie   MeSH
• vrozené poruchy metabolismu epidemiologie   MeSH

• Konspekt
• Gynekologie. Porodnictví
• NLK Obory
• gynekologie a porodnictví
• reprodukční lékařství
• vnitřní lékařství
• genetika, lékařská genetika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Purine and pyrimidine nucleotides influence many metabolic pathways and their analogs have been widely used in medicine. A capillary electrophoretic method was developed for measuring intracellular nucleotides. The final BGE consisted of 40 mM citric acid with addition of 0.8 mM CTAB titrated by gamma-aminobutyric acid to pH 4.4. The electrophoretic separations were carried out in an uncoated silica capillary (id/od - 75/375 microm; effective/total length - 90/97 cm). The method allows a complete separation of 21 nucleotides and deoxynucleotides within 15 min with separation efficiencies up to 400,000 theoretical plates per meter. Due to the use of an acidic separation medium, the method offers a high selectivity toward the studied analytes versus possible interferences from matrices. Sample preparation was optimized in order to shorten work-time and prevent analyte degradation. The method was applied for analyzing nucleotides in human erythrocytes and Chinese hamster ovary cells. Diagnostic potential for inherited metabolic disorders of nucleotide metabolism is presented.

• MeSH
• cetrimoniové sloučeniny chemie   MeSH
• CHO buňky MeSH
• Cricetulus MeSH
• elektroforéza kapilární metody   MeSH
• erytrocyty chemie   MeSH
• financování organizované MeSH
• GABA chemie   MeSH
• koncentrace vodíkových iontů MeSH
• křečci praví MeSH
• kyselina citronová chemie   MeSH
• lidé MeSH
• purinové nukleotidy analýza   MeSH
• pyrimidinové nukleotidy analýza   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• křečci praví MeSH
• lidé MeSH
• zvířata MeSH

Cíl studie: Přehled současných poznatků o dědičných metabolických poruchách u těhotných a u plodů. Typ studie: Literární přehled. Název a sídlo pracoviště: Laboratoř dědičných metabolických poruch, Oddělení klinické biochemie a Dětská klinika, Fakultní nemocnice a Univerzita Palackého, Olomouc. Metodika: Rešerše studií a publikací za pomoci medicínských databází. Závěr: K metabolickému vyšetření matky nebo dítěte je vhodné přistoupit, kdykoli se vyskytnou klinické problémy během nebo těsně po těhotenství. Většinu dědičných metabolických poruch dnes lze prenatálně diagnostikovat v prvním nebo druhém trimestru.

Objective: Review of contemporary knowledge about inherited metabolic disorders in pregnant women and fetuses. Design: A review of literature. Setting: Laboratory for inherited metabolic disorders, Departament of Clinical Biochemistry and Childern's Clinic, University Hospital and Palacky University, Olomouc. Method: Review of literature and publications using medical databases. Conclusion: Metabolic examination of mother or child is recommended if any clinical problems during or immediately after pregnancy occur. Nowadays most of inherited errors of metabolism can be diagnosed prenataly in first or second trimester of pregnancy.

• MeSH
• fenylketonurie v těhotenství MeSH
• financování organizované MeSH
• galaktosemie komplikace   MeSH
• glykogenóza typu I komplikace   MeSH
• HELLP syndrom diagnóza   MeSH
• infertilita etiologie   genetika   MeSH
• komplikace těhotenství genetika   klasifikace   MeSH
• lidé MeSH
• prenatální diagnóza využití   MeSH
• těhotenství MeSH
• vrozené poruchy metabolismu genetika   komplikace   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• těhotenství MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

BACKGROUND: Only three inherited metabolic defects have been identified in purine de novo synthesis (PDNS). We present here CE methods for diagnosing defects in the second half of PDNS (from sixth to tenth enzymatic conversion) based on analysis of aminoimidazole ribosides - dephosphorylated intermediates - in urine. METHODS: Assays were performed in an uncoated fused-silica capillary using two electrophoretic separation systems: 60 mmol/l borate - 2-amino-2-methyl-1-propanol-80 mmol/l sodium dodecylsulfate (pH 9.6) and 200 mmol/l phosphate - sodium (pH 1.8). RESULTS: The reported conditions allowed separation of all metabolites from major urinary constituents with analysis time less than 10 min and separation efficiency of 220 and 350 thousands theoretical plates per meter for borate and phosphate system, respectively. The intra- and interday imprecisions were less than 4.4% and 9.9% CV. Potential usefulness of the methods was demonstrated on samples from a patient with adenylosuccinate lyase deficiency and Chinese hamster ovary cell lines defective in PDNS. CONCLUSIONS: CE is a useful and effective tool in the analysis of aminoimidazole ribosides which enables diagnosis of known as well as not so far identified inherited defects of PDNS pathway.

• MeSH
• adenylsukcinátlyasa nedostatek   MeSH
• biosyntetické dráhy MeSH
• buněčné linie MeSH
• časové faktory MeSH
• CHO buňky MeSH
• Cricetulus MeSH
• dítě MeSH
• elektroforéza kapilární metody   MeSH
• financování organizované MeSH
• imidazoly moč   MeSH
• kojenec MeSH
• křečci praví MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• molekulární struktura MeSH
• předškolní dítě MeSH
• purinové nukleosidy biosyntéza   MeSH
• referenční hodnoty MeSH
• vrozené poruchy metabolismu aminokyselin diagnóza   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• kojenec MeSH
• křečci praví MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• předškolní dítě MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH

Cíl: V současné době byly identifikovány tři defekty v purinové de novo syntéze (PDNS). V případě deficitních enzymů jsou v tělních tekutinách pacientů akumulovány abnormální defosforylované substráty (aminoimidazolové ribosidy). Cílem této práce bylo studovat hmotově-spektrometrické vlastnosti aminoimidazolových ribosidů spojených s druhou polovinou PDNS. Metody: Aminoimidazolové ribosidy byly syntetizovány a chemicky charakterizovány. Technika kapalinová chromatografie s hmotnostní spektrometrií byla aplikována pro strukturní identifikaci. MS analýza byla provedena na LCQ hmotnostním spektrometru s iontovou pastí (Finnigan MAT, San Jose, USA). Pro ionizaci byla zvolena chemická ionizace za atmosferického tlaku. Výsledky: Účinnost syntézy ribosidů byla více než 90% a obdržená fragmentační spektra potvrdila jejich identitu. Při fragmentaci ztrácí imidazolový kruh substituenty ve formě malých molekul (NH3, CO2 nebo CO). Sukcinylaminoimidazol karboxamid ribosidu (SAICAr) odštěpuje buď N-sukcinokarboxamid jako celek, nebo se z něj pouze odštěpují skupiny vody z karboxylových skupin. Otevření imidazolového kruhu nebylo sledováno u žádné látky. Závěr: Výše popsaná charakteristika může být užitečná pro vývoj nových metod pro diagnostiku známých či zatím neodhalených defektů druhé poloviny PDNS.

Objectives: Three defects have been identified in purine de novo synthesis (PDNS). Dephosphorylated substrates (imidazole ribosides) of the deficient enzymes are accumulated in body fluids in affected patients. The aim of this work was to investigate mass spectrometric properties of aminoimidazole ribosides related to the second half of PDNS. Methods: These aminoimidazole ribosides were synthesised and chemically characterised. Liquid chromatography- -mass spectrometry technique was applied for structural identification. MS analysis was carried out using an LCQ ion trap mass spectrometer (Finnigan MAT, San Jose, USA). Atmospheric pressure chemical ionization source was employed. Results: Synthesis yielded ribosides with more than 90% purity and obtained fragmentation spectra confirmed their identity. The imidazole ring loses its substituents in the form of small molecules (NH3, CO2 or CO) in mass spectrometry fragmentation. The N-succinocarboxamide group of succinylaminoimidazole carboxamide riboside (SAICAr) either loses water from the free carboxyl groups or breaks away as a whole. Opening of the imidazole ring was not observed for any compound. Conclusions: Characteristics described above can be useful for development of new methods for diagnosing of known as well as unrevealed defects of second part of PDNS.

• MeSH
• aminoimidazolkarboxamid diagnostické užití   chemie   MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• plynová chromatografie s hmotnostně spektrometrickou detekcí metody   MeSH
• poruchy metabolismu purinů a pyrimidinů diagnóza   enzymologie   MeSH
• ribonukleosidy diagnostické užití   chemická syntéza   chemie   MeSH

A pilot study using capillary electrophoresis with mass spectrometry for the analysis of nucleotides in human erythrocytes is presented. Erythrocytes were incubated with 5-amino-4-imidazolecarboxamide riboside in order to mimic situation in defect of purine metabolism--AICA-ribosiduria. Characteristic AICA-ribotides together with normal nucleotides were separated by capillary electrophoresis in acetate buffer (20 mmol/L, pH 4.4) and identified on line by mass spectrometry.

• MeSH
• aminoimidazolkarboxamid analogy a deriváty   farmakologie   chemie   MeSH
• elektroforéza kapilární metody   přístrojové vybavení   MeSH
• erytrocyty * cytologie   metabolismus   MeSH
• hmotnostní spektrometrie * metody   MeSH
• koncentrace vodíkových iontů MeSH
• lidé MeSH
• nukleotidy analýza   chemie   izolace a purifikace   MeSH
• puriny chemie   MeSH
• ribonukleosidy farmakologie   chemie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH