Makrofágy představují stěžejní bod vzájemné interakce mezi patogenem a hostitelským organismem. Jsou nejen častou bránou vstupu invadujícího infekčního agens, zejména nitrobuněčných parazitů, ale zárověň i kompartmentem jejich pomnožení a další diseminace infekce. Francisella tularensis je modelovým nitrobuněčným patogenem způsobujícím granulomatózní procesy, jejichž klinická manifestace závisí na bráně vstupu. Osud F. tularensis uvnitř makrofágů a patogeneze vzniku onemocnění nejsou bezezbytku popsány. Našim cílem bylo vytvoření funkčního modelu infekce makrofágů myší monocyto-makrofágové linie J774.2 vakcinačním kmenem F. tularensis LVA za přesně definovaných podmínek jejich stimulace LPS a IFNy in vitro s ohledem na definici faktorů vzájemné interakce a přispění k popisu imunopatogeneze infekce. Infikované buňky byly amalyzovány mikroskopicky a průtokovou cytometrií, byla měřena produkce NO a vybraných cytokinů v supernatantu. Přežívání bakterie bylo hodnoceno pomocí CFU (Colony Forming Units). V pravidelných časových intervalech byly průtokovou cytometríí hodnoceny povrchové denzity molekul CD16/32 (FcyIII/IIR), CD54 (ICAM-1) a CD86 (B7.2) vyjádřené intenzitou fluorescence a hodnocené indexem MFI (Mean Fluorescence Index). Výsledky naší práce podporují hypotézu, že klíčovým faktorem imunopatogeneze infekce F. tularensis je inhibice stimulace infikované buňky. Vytvořený model aktivace makrofágů je univerzální a využitelný pro studium vlivu dalších nox na makrofágy, a to nejen infekčních.

Macrophages represent a key point of host-pathogen mutual interaction. They are not only a frequent gate for invading microbes especially intra- cellular parasites, but compartment of their replication as well. Francisella tularensis is a prototypical intracellular parasite causing granulomatous diseases. Their clinical significance is dependent on the course of invasion. The fate of F. tularensis inside the host cell, and the pathogenesis of the disease remain unclear. Our aim was to create a functional model of mouse monocyte-macrophage cell line J774.2 infected by F. tularensis LVS strain in defined conditions of lipopolysaccharide (LPS) and interferon gamma (IFNγ) in vitro stimulation with respect to mutual factors of interaction definition, to add new informations to current paradigma of F. tularensis infection. Infected cells were harvested and analysed by microscopy and by flow cytometry and likewise the NO and cytokines production was measured in cell supernatant. A survival of b acteria was assessed by colony forming units (CFU) count. The changes in the surface density of selected molecules (CD16/32 (FcγIII/IIR), C D54 (ICAM-1) and CD86 (B7.2)) expressed by changes in mean fluorescence index (MFI) in regular intervals were measured. Results of our work support the hypothesis, that F. tularensis infection can manipulate with signaling pathways of macr ophage to escape the immunosurveillance and to exploite intracellular compartment for hidden multiplic ation. Functional model of macrophages in vitro infection and stimulation seems to be universal and usefull tool for study of influence of various noxious factors on macrophages.

• MeSH
• aktivace makrofágů MeSH
• buněčné linie MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• Francisella tularensis patogenita   růst a vývoj   MeSH
• interleukin-18 analýza   MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• techniky in vitro MeSH

• MeSH
• granulom terapie   MeSH
• kalcitonin terapeutické užití   MeSH
• krysa rodu rattus MeSH
• techniky in vitro MeSH
• Check Tag
• krysa rodu rattus MeSH

• MeSH
• biologický transport MeSH
• chlor sekrece   MeSH
• epitel MeSH
• sodík MeSH
• techniky in vitro MeSH
• teoretické modely MeSH
• trachea MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH

• MeSH
• experimentální nádory MeSH
• glukosa MeSH
• hypoxie MeSH
• ionizující záření MeSH
• myši MeSH
• techniky in vitro MeSH
• teoretické modely MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• zvířata MeSH

• MeSH
• ekotoxikologie MeSH
• infertilita MeSH
• rozmnožování MeSH
• techniky in vitro MeSH
• testy toxicity MeSH
• vystavení vlivu životního prostředí MeSH
• Publikační typ
• kongresy MeSH
• sborníky MeSH
• zprávy MeSH

• Konspekt
• Farmacie. Farmakologie
• NLK Obory
• toxikologie
• reprodukční lékařství

• MeSH
• diagnostické služby normy   MeSH
• diagnóza MeSH
• mezinárodní spolupráce MeSH
• techniky in vitro klasifikace   metody   normy   MeSH
• Publikační typ
• technické zprávy MeSH

• Konspekt
• Lékařské vědy. Lékařství
• NLK Obory
• diagnostika
• NLK Publikační typ
• publikace WHO

• MeSH
• směrnice pro lékařskou praxi jako téma MeSH
• techniky in vitro MeSH
• Publikační typ
• kongresy MeSH
• technické zprávy MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• diagnostika
• NLK Publikační typ
• publikace WHO

• MeSH
• dítě MeSH
• homologní transplantace MeSH
• lidé MeSH
• reakce štěpu proti hostiteli MeSH
• techniky in vitro MeSH
• transplantace hematopoetických kmenových buněk metody   MeSH
• transplantace kostní dřeně MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• lidé MeSH

• MeSH
• chondrocyty transplantace   MeSH
• homologní transplantace MeSH
• kloubní chrupavka transplantace   MeSH
• kolenní kloub chirurgie   MeSH
• kultivované buňky transplantace   MeSH
• modely nemocí na zvířatech MeSH
• techniky in vitro MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH

• MeSH
• diabetes mellitus metabolismus   MeSH
• epidermis metabolismus   MeSH
• glykosylace MeSH
• keratiny metabolismus   MeSH
• lidé MeSH
• techniky in vitro MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH